I.

TEMA: Análisis microbiológico de superficies, botellas, aire y manos

OBJETIVOS
Objetivo General
 Evaluar la calidad higiénica-sanitaria de superficies, botellas, aire y manos.

Objetivos Específicos
 Cuantificar los microorganismos presentes en superficies, botellas, aire y
manos.
 Experimentar la técnica de hisopo en superficies.

RESULTADOS
Cálculo demostrativo de UFC/cm2 Superficie:
Cálculo de UFC
NC: número de colonias (15+11=26)
NC Promedio: 26/2 = 13 colonias
Factor de dilución (10-1,)
Volumen de APE utilizado (5 ml)
Área: 50 cm2

UFC NC Promedio∗Factor de dilución∗volumen de APE utilizada

=
cm 2 área utilizada

UFC 13∗1 x 101∗5

=
cm 2 50 cm2
UFC
2
=13 UFC /cm2
cm

Cálculo demostrativo de UFC/botella:

Cálculo de UFC
NC: número de colonias
NC Promedio: Mayor a 300
Factor de dilución (1x100,)
Volumen de APE utilizado (75 ml)
Volumen Total de la Botella (750ml)

UFC NC Promedio∗factor de dilucion∗volumen de APE utilizada

=
ml volumen total d botella
 Cálculo demostrativo de UFC/m3 Aire:
Cálculo de UFC
NC: número de colonias
Tiempo: 5 min, 10 min, 15 min.

UFC NC∗25
3
=
m Tiempo( min)
UFC 4∗25
=
m3 5 min

UFC
3
=20UFC /m 3
m

Cálculo demostrativo de UFC/manos:

Cálculo de UFC
NC: número de colonias
NC Promedio: Mayor a 300
Factor de dilución (1x100,)
Volumen de APE utilizado (100 ml)

UFC
=NC Contadas∗Factor de dilución∗volumen de APE utilizada
mano

UFC
=¿ 300∗1 x 100∗100 ml
mano

TABLA Nº1.- “Análisis microbiológico de superficies, botellas, aire y manos”

UFC

DILUCIONES NÚMERO DE UFC/cm2 GRÁFICO

COLONIAS
Superficie R1 15 30

Superficie R2 11

DILUCIONES NÚMERO DE UFC/mano GRÁFICO

COLONIAS
Manos R1 ¿ 300 ¿ 300

Manos R2 ¿ 300 ¿ 300

DILUCIONES NÚMERO DE UFC/botella GRÁFICO

COLONIAS
Botella R1 ¿ 300 ¿ 300
Botella R2 ¿ 300 ¿ 300

DILUCIONES NÚMERO DE UFC/m3 GRÁFICO

COLONIAS
Aire (5 min) 4 20

Aire (10 min) 8 20

Aire (15 min) 9 15

I. DISCUSIÓN
 II. RECOMENDACIONES
 Verificar con anterioridad los materiales necesarios para no tener
inconvenientes durante la práctica. Organizar el tiempo para que la práctica
se realice en las horas establecidas.
 Se recomienda que el estudiante sea cuidadoso y responsable con la preparación
de disoluciones ya que debe tener un uso correcto de los instrumentos para la
siembra de microorganismos.
 Se recomienda mantener dentro de la cámara de flujo laminar todo el proceso
del cultivo.
 Se recomienda tomar el tiempo con precisión.
 Se recomienda que el hisopo se encuentre en condiciones óptimas para ser
utilizado que no exista ningún cruce microbiano.

III. CONCLUSIONES

 Se determinó la calidad sanitaria de una muestra de superficies, botellas, aire y

manos a través del cultivo en cajas Petri para su desenvolvimiento bacteriano.
 Se cuantifico bacterias presentes en las manos, aire, superficies y botella, y fue
posible realizar cálculos mediante la elaboración de una tabla con los resultados
UFC.
 Se evaluó comparando los resultados de muestras analizando los resultados
obtenidos considerando cada criterio microbiológico conociendo las diferentes
formas en las que se presente en dichas áreas ya antes mencionado.

IV. CUESTIONARIO

1. Explique el método Rodac.

Las superficies son monitoreadas por métodos microbiológicos a través de la técnica por placa
de contacto tipo Rodac. El desarrollo de esta técnica comienza a partir de placas Rodac con
medio Agar ATS y se hace contactar la superficie con el agar para luego incubar en las
condiciones indicadas en la figura 3 y los resultados se expresan como UFC por placa.
Muestreo de superficies por placa de contacto tipo Rodac.
Toma de muestra: Destapar las placas y poner en contacto el agar con el área de la superficie a
muestrear en el estado de reposo y al finalizar la operación.
Superficies a monitorear: Superficies interiores de las cabinas de flujo laminar, piso y paredes
del cuarto de siembra y de la cámara fría.
Medio de cultivo: Agar Triptona Soya (ATS).
Tiempo y temperatura de incubación: Luego del muestreo de las superficies, las placas se
cierran e incuban durante 5 días a 30 ºC.
Frecuencia de realización de los controles: Estado de reposo semanal y en estado de operación,
al finalizar la misma.
Criterio de conformidad: Bajo flujo laminar se establece que para esta técnica sea < 3
UFC/placa, según lo establecido en el anexo 4 de la regulación No. 16-2000. Las superficies del
cuarto de siembra y la cámara fría no son áreas clasificadas.

(No. 16-2000)

2. Explique el método de enjuague total.

Este método se emplea para tomar muestras de objetos pequeños como son cucharas, tenedores,
biberones, etc. o para el muestreo de superficies interiores de envases, botellas y bolsas de
plástico, etc.
(Manual de Prácticas. 1992)

3. ¿Cómo se detecta Staphylococcus en portadores sanos?

Conocer la prevalencia de portadores nasales de S. aureus en portadores sanos en la producción
de parenterales y analizar el espectro de sensibilidad de los aislamientos a diferentes
antimicrobianos, para confirmar la presencia de SARM mediante técnicas de detección rápida.
Se procede a tomar de muestra mediante escobillaje de fosas nasales de acuerdo al
procedimiento descrito por Isenberg y se utilizó el medio Stuart para el transporte de las
muestras al Laboratorio.
(Isenberg 1992)
4. Mencione la importancia del muestreo de superficies en la industria alimentaria.

Los programas de limpieza y desinfección se diseñan con el objetivo de reducir, y en algunos

casos, eliminar la carga bacteriana y restos de materia inorgánica de las superficies alimentarias.
De esta forma, se pretende minimizar el riesgo de contaminación cruzada para garantizar un
producto seguro y de calidad.
(Rodríguez & Hernández. 2006)

V. BIBLIOGRAFÍA

Buenas Prácticas para la Fabricación de Productos Farmacéuticos. (2000) Anexo No. 4,

Regulación No. 16-2000. Centro para el Control Estatal de la Calidad de los
Medicamentos (CECMED). Ministerio de Salud Pública, República de Cuba. [En
Línea] Recuperado el 13 de Diciembre del 2017, de:
http://www.redalyc.org/pdf/2231/223120684002.pdf
Isemberg H. (1992). Clinical microbiology procedure handbook. A.S.M. Washington. [En
Línea] Recuperado el 13 de Diciembre del 2017, de:
http://revistas.uis.edu.co/index.php/revistasaluduis/article/view/2392/3212

Manual de prácticas. (1992). Curso: Toma y manejo de muestras para análisis bacteriológico.
Laboratorio Nacional de Salud Pública. México. [En Línea] Recuperado el 13 de
Diciembre del 2017, de: https://es.slideshare.net/CarlosManuel51/analisisdesuperficies
Rodríguez J. & Hernández M. (2006). Importancia del control higiénico de las superficies
alimentarias mediante técnicas rapidas y tradicionalespara evitar y/o minimizar la
contaminación cruzada. [En Línea] Recuperado el 13 de Diciembre del 2017, de:
http://www.tesisenred.net/bitstream/handle/10803/5683/nfv1de1.pdf