AMINOÁCIDOS
Agar Lisina-Hierro (LIA)
FUNDAMENTO
Diferenciación de bacilos Gram negativos
entéricos con capacidad de fermentación de
lactosa, sobre la base de la producción de
H2S y la actividad de los microorganismos
son capaces de provocar la descarboxilación
de los aminoácidos por inducción de enzimas
específica como la enzima Lisina
descarboxilasa.
Caldo Triptona
FUNDAMENTO
Determinar la capacidad de un organismo de
desdoblar el indol de la molécula triptófano.
Bacterias pueden oxidar el triptófano y formar
metabolitos, indol, escatol e indolacético.
Sulfuro Indol Movilidad (SIM)
FUNDAMENTO
Determinar si un organismo es móvil o inmóvil,
si es capaz de liberar ácido sulfhídrico por acción
enzimática de los aminoácidos que contienen
azufre produciendo una reacción visible de color
negro y por último la capacidad de desdoblar el
indol de la molécula triptófano, además que la
consistencia del medio permite la observación
de la movilidad de algunas bacterias.
IDENTIFICADOR/ REVELADOR
Púrpura de Bromocresol como
indicador
Citrato de amonio férrico y
tiosulfato de sodio marcadores de la
producción de H2S
IDENTIFICADOR/ REVELADOR
Reactivo de Kovacs o Erlich,
contienen aldehído el cual se une al
indol dando color rojo
IDENTIFICADOR/ REVELADOR
Tiosulfato de sodio para H2S
Reactivo de Kovac o de Erlrich para
Indol
CARBOHIDRATOS Y ÁCIDOS ORGÁNICOS
RESULTADO
Producción de H2S
Positivo: coloración negra en el medio de cultivo en
todo el tubo
Negativo: ausencia de coloración negra.
Lisina descarboxilasa
Positivo: alcalinización (K) del medio de cultivo, color
púrpura en todo el tubo
Negativo: se observa acidificación (A) color amarillo en
la columna del tubo, y alcalinización (color púrpura) en
la zona inclinada.
Lisina deaminasa
Positivo: producción de color rojo granate en la
superficie inclinada. Negativo: ausencia de color rojo
granate
RESULTADO
Positiva: Formación de un anillo rojo en la
superficie del medio
Negativa: No color, toma el color del reactivo de
Kovacs o Erlich
Variable: Color anaranjado por la formación de
escatol
RESULTADO
Ácido sulfhídrico
Positivo: Ennegrecimiento del medio
Negativo: Sin ennegrecimiento
Indol
Positivo: Anillo rojo en la superficie del medio.
Negativa: No se produce color
Negativa: Color naranja en la superficie del
medio.
Movilidad
Positiva. Los organismos móviles migran de la
línea de siembra y se difunden en el medio
provocando turbidez.
Negativa. Crecimiento bacteriano acentuado
siguiendo la línea de siembra
 Glucosa, Sacarosa, Manitol

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Determinar la capacidad de un microorganismo para Rojo de Fenol Positivo: Color amarillo (ácido)
degradar o fermentar un carbohidrato incorporado a Negativa: Color rosa - rojizo (alcalina)
un medio básico produciendo ácido o ácido con gas Ácido: amarillo (pH = 6.8) Positivo gas: Burbujas en campana de
visible. Durham
Alcalino: rojo ( pH = 8.4)

Medio no inoculado: Rojo (pH = 7.4)

RM/VP (Caldo glucosado)

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Determina la capacidad de un organismo de RM: Rojo de metilo RM positivo: Cultivo ácido de color rojo.
producir y mantener estables los productos pH (6): Amarillo pH: 4.4
terminales ácidos de la fermentación de la glucosa y pH (5-5.8): Naranja RM negativa: Color amarillo pH: 6
vencer la capacidad amortiguadora del sistema. pH (4.4): Rojo
También es una prueba cualitativa de la producción PV positiva: coloración rosa-rojo
de ácido (iones H+) presentes cuando un PV: Reactivo A de Voges-Proskauer(alfa- PV negativa: color amarillo (reactivo)
microorganismo fermenta glucosa naftol) y
Reactivo B: (KOH al 40%)
PV: Determinar la capacidad de organismos de
producir acetoína a partir de glucosa (glucólisis)
Caldo Malonato

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Determina la capacidad de un organismo de Azul de bromotimol
utilizar malonato de sodio como única fuente de pH: 6 color amarillo
carbono pH: 7.6 color prusia intenso
pH: 6.7 verde, medio no inoculado
Positiva: Azul claro a azul de prusia intenso en
todo el medio
Negativa: color verde o amarillo por la
fermentación de la glucosa

Citrato de Simmons

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Determinar si un organismo es capaz de utilizar citrato como Azul de bromotimol Positivo si existe un cambio a color
única fuente de carbono para el metabolismo provocando pH= 6 azul en el pico de flauta
alcalinidad. El metabolismo del citrato comprende una
condensación de acetilo con la coenzima A y el oxalacetato para Alcalino Negativo color verde sin
entrar al ciclo de Krebs. En las bacterias el desdoblamiento del crecimiento
citrato no depende de la coenzima A. Esta enzima se conoce
como citrasa y los productos obtenidos de este metabolismo Color azul de Prusia intenso (pH =
dependen del pH del medio. pH alcalino producción de lactato y 7.6)
CO2, por encima de pH 7 los productos son ácido acético, ácido
fórmico y CO2, a pH ácido se genera lactato y acetoína. Medio no inoculado
Color verde (pH = 6.9)
 Kligler

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ RESULTADO

REVELADOR

Determinar la capacidad de un microorganismo de atacar a Rojo de fenol Fermentación de glucosa y lactosa

un carbohidrato específico en un medio básico, con la Alcalino: rojo Positiva: Capa profunda color amarillo
producción o no de gases, junto con la determinación de Ácido: amarillo Negativa: Crecimiento y no cambio de color
posible producción de H2S. Contiene dos carbohidratos Medio no inoculado:
lactosa y glucosa, los cuales se fermentan aeróbicamente Naranja Producción de gas: burbujas
en el pico de flauta y anaeróbicamente en la capa inferior Producción de H2S: Precipitado, anillo o color
del cultivo por el ciclo de Embden-Meyerhof Tiosulfato de sodio y negro distribuido en toda la capa profunda
sulfato ferroso

MACROMOLÉCULAS
Agar Gelatina

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Medio diferencial Positivo: Halo de aclaraciòn alrededor de las

Constituido de polisacáridos. colonias
Pone en manifiesto organismos productores de A pH= 7.0 Amarillo transparente: negativo a la prueba.
proteasas y glicosidasas. +indicador

Agar leche descremada

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Reconoce microorganismos aerobios Medio incoloro y formaciòn de halos

productores de proteasas (caseìnasa, proteìna No requiere transparentes alrededor de las colonias: prueba
que le confiere el color a la leche). positiva
Cuando èsta se hidroliza, desaparece el color Color blanco: prueba negativa
blanco.

Agar yema de huevo (Baird- Parker)

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Constituido por proteìnas, por lo que determina la
capacidad de los microorganismos para hacer
proteolisis.
Este medio de cultivo contiene cloruro de litio y
telurito para la inhibición de la flora acompañante.
Para la hidròlisis de fosfolípidos dada por la
capacidad para producir lecitinasas.
Cloruro de Litio y Telurito
Presencia de halos y anillos caracterìsticos debido
a la reducciòn de Telurito a Teluro.
Positivo: zona opalescente alrededor de las
colonias .
Color amarillo= negativo
 Agar Gelosa sangre

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ RESULTADO

REVELADOR

Medio enriquecido y diferencial para Hemólisis alfa: coloraciòn verde

microorganismos aerobios y anaerobios
nutricionalmente exigentes.
Para pruebas de producciòn de hemòlisis
causada por enzimas hemolisinas.
Lisis parcial debido a la liberación de un producto de
degradación de la hemoglobina llamado biliverdina
Hemòlisis β :zona de hemólisis incolora, clara y bien definida
No requiere que rodea a ciertas colonias bacterianas que se desarrollan
sobre el agar. Esta hemólisis es causada por hemolisinas que
destruyen al glóbulo rojo y la hemoglobina se convierte en
sustancia incolora.
Hemòlisis gamma: no hemolìticos.

Agar almidón

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Constituido por amilosa y amilopectina, que
deben ser hidrolizadas por amilasas, (enzimas
que son detectadas en èsta prueba), para
finalmente formar maltosa.
Revelador: Yodo presente en el
Lugol que se une al almidòn
Hidròlisis positiva: Cuando se agrega el Lugol y
habrà halos transparentes que rodean las
colonias. (incolora)
Hidròlisi negativa: el color azul-negro que
presenta entre la uniòn el yodo con el almidòn

Leche Tornasol

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Medio diferencial. Rojo en condiciones àcidas (pH=4.5)

Determina las funciones metabólicas del
organismo como;
*Acidificaciòn= Fermentaciòn de la
lactosa
*Caseòlisis
*Coagulaciòn de la caseìna=
Conversión de la caseína en paracaseína
por la renina, pepsina o quimotripsina
*Peptonizaciòn=
Formaciòn de un coágulo acido,
resultado de la precipitaciòn de la
caseína
*Reducciòn del tornasol
*Digestión; se a ingerido la proteína de la
leche por enzimas proteolíticas.
Identificador= Tornasol
Puede actuar como aceptor de electrones .
Indicador de pH y de reacciòn òxido-
reducciòn.
*La reducciòn de las reductasas elimina el
oxìgeno para formar compuestos
leucotornasolados incoloros
fermentaciòn de la lactosa, coagulaciòn àcida.
Azul en condiciones alcalinas (pH=8.3) sin
fermentacòn de lactosa.
Actividad sobre lactoalbùmina
(producciòn de amonìaco)
Azul pùrpura (pH=6.8) sin fermentaciòn de
lactosa, sin cambios en el indicador
Blanco (reducciòn)
Reducciòn del tornasol a leucobase blanca,
cuando actúa como aceptor de receptores
 Gelatina

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Constituìda de polisacàridos.
Determina la capacidad de un organismo de
producir enzimas tipo proteolítico que licuan la
gelatina. (gelatinasas)
Hidrolasas hidrolizan la gelatina y destruyen el
gel.
No requiere o puede Líquido (+) se hidrolizò la gelatina por presencia
emplearse el carbón activado en de gelatinasa
polvo. Sòlido (-) no hidrolizò gelatina.
Hay aparición de halos de aclaración alrededor
de las colonias que licuan la gelatina

RESPIRACIÓN
Reducción de azul de metileno

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ RESULTADO

REVELADOR

Permite diferencias microorganismos por su capacidad de reducir el Reducción de azul de metileno cuando el
azul de metileno en un medio con leche. El citocromo-oxidasa activa la tubo vira a color blanco completamente, se
oxidación del citocromo reducido por el oxígeno molecular, que a su mide el tiempo en que esto sucede.
vez actúa como un aceptor de electrones en el periodo terminal del Azul de metileno Oxidado: permanece el color azul
sistema de transferencia de electrones. El azul de metileno, puede
sustituir a los aceptores de electrones naturales en cualquier lugar de
la cadena de transporte de electrones, donde actúan como reductores
del sistema citocromo-c-citocromo-oxidasa.

Reducción de nitratos a nitritos

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Bacterias quimioorganoheterotróficas utilizan el Se requiere la adición de Prueba positiva color rojo

nitrato como aceptador final de electrones durante ácido sulfanílico y
respiración anaeróbica dimetil‐α‐naftilamina

Pruebas de citocromo oxidasa

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Prueba representativa de los procesos aeróbicos

propios de bacterias oxidativas. Bacterias NNN'N',tetrametil,1-4,fenilendiamina La reacción positiva la indica un color
oxidativas energí a apartir de compuestos azul-violeta intenso antes de 10
orgánicos utilizando oxígeno y liberando CO 2 y segundos
agua

Pruebas de catalasa

FUNDAMENTO IDENTIFICADOR/ REVELADOR RESULTADO

Detecta presencia de catalasa o peroxidasa que El desprendimiento de burbujas procedentes

rompe el peróxido en agua y O2 Agua oxigenada del oxígeno indica que la prueba es positiva.