Misión del programa: “La formación de profesionales químicos que lideren el desarrollo, potencien la

investigación y apoyen el aprovechamiento de los recursos naturales del entorno mediante procesos científicos
y tecnológicos”.

UNIVERSIDAD PEDAGÓGICA Y TECNOLÓGICA DE COLOMBIA

FACULTAD DE CIENCIAS, Escuela de Ciencias Químicas

Laboratorio de Bioquímica I

Compilador: Angélica María García T.

5. PROPIEDADES QUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS

Material a traer por parte del estudiante: guantes, gafas de protección, y tapabocas, cinta o
marcador para rotular, toalla (2, una para uso personal y otra para el trabajo práctico), jabón personal
y jabón para lavado de material de vidrio, gotero.

MATERIALES Y REACTIVOS
Materiales: 12 tubos de ensayo, pipetas de 1, 5 y 10 mL, estufa, gradilla. Probeta de 10 y 50 mL,
espátula, pinzas de madera, varilla de agitación, vaso de precipitados de 100 mL (1) y 400 mL (3),
calefactor, baño de agua.
Reactivos: Ninhidrina, aminoácido al 0.5% (prolina, tirosina, a. aspártico, albúmina de huevo 10 mg/mL,
fenilalanina, arginina, triptófano, cisteína), solución desconocida, hidróxido de sodio 2M, hipoclorito de
sodio al 10%, solución de nitrito de sodio, sacarosa al 2%, reactivo de Millon, ácido nítrico concentrado,
acetato de plomo al 10%, hidróxido de potasio al 40%, α-naftol, urea al 0,1%, ácido sulfúrico
concentrado, caseína, formaldehido.

CONSULTA NECESARIA PREVIA A LA PRÁCTICA

a). Fundamento químico de las diferentes pruebas para el reconocimiento de aminoácidos (ninhidrina,
Millon, xantoproteica, Sakaguchi, Adamkiewics, de grupos específicos, etc), b). Tabla de los aminoácidos
la cual indique: estructura química, clasificación y Pka.

PROCEDIMIENTO

1. Ensayo de la Ninhidrina:
Preparar el siguiente set de tubos:

Tubos 1 2 3 4 5
Reactivos (mL) (mL) (mL) (mL) (mL)
Acido Aspártico 3 - - - -
Tirosina - 3 - - -
Sacarosa - - 3 - -
Albúmina de huevo - - - 3 -
Muestra problema - - - - 3
Ninhidrina 1 1 1 1 1
Homogenizar cada tubo y calentar a baño maría durante 10 minutos. Realizar el respectivo análisis
cualitativo para cada tubo sustentando lo ocurrido; para los casos en que ocurra una reacción química
describir la respectiva ecuación y donde no ocurrió dicha reacción, justificar conceptualmente.

1. Reacción de Millon
Preparar el siguiente set de tubos:
Tubos 1 2 3 4 5 6
Reactivos (mL) (mL) (mL) (mL) (mL) (mL)
Acido Aspártico 2 - - - - -
Tirosina - 2 - - - -
Sacarosa - - 2 - - -
Fenilalanina - - - 2 - -
Albúmina de huevo - - - - 2 -
Muestra problema - - - - - 2
Reactivo de Millon (gotas) 3 3 3 3 3 3
 Homogenizar cada tubo y calentar a baño maría durante 2 minutos. Las proteínas se decantan
formando un precipitado debido a la acción de los ácidos minerales del reactivo. El sólido formado
tiene una coloración blanca que se vuelve roja por acción del calentamiento. Si no se forma color,
añada 3 gotas adicionales del reactivo y caliente nuevamente. Evitar la formación de un precipitado
amarillo (por exceso de reactivo), ya que esto no es un indicador positivo de la prueba.
 Un método alternativo es, una vez las soluciones se encuentran a temperatura ambiente, adicionar 5
gotas de solución de nitrito de sodio.
 Realizar el respectivo análisis cualitativo para cada tubo sustentando lo ocurrido; para los casos en
que ocurra una reacción química describir la respectiva ecuación y donde no ocurrió dicha reacción,
justificar conceptualmente.

2. Reacción Xantoproteica
 Preparar el siguiente set de tubos:
Tubos 1 2 3 4 5 6 7
Reactivos (mL) (mL) (mL) (mL) (mL) (mL) (mL)
Acido Aspártico 2 - - - - - -
Tirosina - 2 - - - - -
Sacarosa - - 2 - - - -
Fenilalanina - - - 2 - - -
Triptófano - - - - 2 - -
Albúmina de huevo - - - - - 2 -
Muestra problema - - - - - - 2
HNO3 concentrado 1 1 1 1 1 1 1
Homogenizar cada tubo y calentar a baño maría durante 1 minuto y observe. Enfríe y añada
cuidadosamente y gota a gota una disolución de hidróxido de potasio al 40%. Realizar el respectivo
análisis cualitativo para cada tubo sustentando lo ocurrido; para los casos en que ocurra una reacción
química describir la respectiva ecuación y donde no ocurrió dicha reacción, justificar conceptualmente.

3. Prueba de Tiogrupos (-SH)

 Preparar el siguiente set de tubos:
Tubos 1 2 3
Reactivos (mL) (mL) (mL)
Cisteína 2 - -
Albúmina de huevo - 2 -
Muestra problema - - 2
KOH al 40% 1 1 1
Acetato de plomo al 10% (gotas) 3 3 3
Homogenizar cada tubo y calentar a baño maría durante 7 minutos. Realizar el respectivo análisis
cualitativo para cada tubo sustentando lo ocurrido; para los casos en que ocurra una reacción química
describir la respectiva ecuación y donde no ocurrió dicha reacción, justificar conceptualmente.

4. Prueba de Sakaguchi
 Preparar el siguiente set de tubos:
Tubos 1 2 3
Reactivos (mL) (mL) (mL)
Arginina 2 - -
Albúmina de huevo - 2 -
Muestra problema - - 2
NaOH 2M (gotas) 5 5 5
α-naftol (gotas) 8 8 8
Enfriar en hielo
Hipoclorito de sodio al 10% (gotas) 10 10 10
 Homogenizar cada tubo. Si no se observan cambios agregar a cada tubo 1 mL de disolución de úrea al
0,1%, para estabilizar el color.
 Realizar el respectivo análisis cualitativo para cada tubo sustentando lo ocurrido; para los casos en
que ocurra una reacción química describir la respectiva ecuación y donde no ocurrió dicha reacción,
justificar conceptualmente.

5. Prueba de Adamkiewics
Preparar el siguiente set de tubos:
Tubos 1 2 3
Reactivos (mL) (mL) (mL)
Caseína 2 - -
Triptofano - 2 -
Muestra problema - - 2
Formaldehido (gotas) 5 5 5
Ácido sulfúrico concentrado 1 1 1
 Tenga la debida precaución al adicionar el formaldehido a cada tubo ya que la reacción es exotérmica.
Por las paredes del tubo, adicione posteriormente el ácido sulfúrico concentrado.
 Homogenizar cada tubo y calentar a baño maría durante 7 minutos. Realizar el respectivo análisis
cualitativo para cada tubo sustentando lo ocurrido; para los casos en que ocurra una reacción química
describir la respectiva ecuación y donde no ocurrió dicha reacción, justificar conceptualmente.

BIBLIOGRAFÍA
La presente práctica fue diseñada tomando como pauta base:
VARIOS AUTORES. 2010. Prácticas de Laboratorio de Bioquímica para Ingeniería Agronómica.
Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia, Facultad de Ciencias, escuela de Química, Tunja,
Colombia.
CANO, H. 2008. Manual de Laboratorio de Bioquímica. Universidad Industrial de Santander, Facultad de
Ciencias, Escuela de Química, Bucaramanga, Colombia.
MIGUEZ, J.B.1997. Prácticas de bioquímica. Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia,
Facultad de Ciencias, escuela de Química, Tunja, Colombia.

Textos de apoyo:
LEHNINGER, A., NELSON; D.; COX, M. 2004. Lehninger Principles of Biochemistry. Macmillan Higher
Education, 4a ed.
VOET, D., VOET, J. 2002. Biochemistry. Wiley & Sons. 2ª ed. Canada.
BOHINSKI, R.C. 1991. Bioquímica. Addison-Wesley-Longman, 5ª ed. México D.F. México.
GARZON, G. 2000. Fundamentos de Química General. Editorial McGraw Hil.
CAMPBELL, M. y FARREL, S. 2004. Bioquímica. Editorial Thomson. México.
PACHECO, D. 2005. Bioquímica Medica. Editorial Limusa. México.

Visión del programa: “El programa de química de la UPTC para el año 2019 se proyecta en el ámbito nacional
como uno de los líderes en la gestión y desarrollo de procesos de investigación, apropiación, adaptación e
innovación de ciencia y tecnología en química”.
UNIVERSIDAD PEDAGÓGICA Y TECNOLÓGICA DE COLOMBIA
PROGRAMA DE QUÍMICA
LABORATORIO BIOQUÍMICA I
HOJA DE RESULTADOS

5. PROPIEDADES QUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS

Nombres:_________________________________________________________

Sección/grupo: ________________

1. Ensayos ninhidrina, millón y xantoproteica

Observaciones
Ninhidrina Millon Xantoproteica
Ácido aspártico
Tirosina
Sacarosa o glucosa
Albúmina de huevo
Fenilalanina
Triptófano
Muestra problema

2. Prueba de Tiogrupos 3. Prueba Sakaguchi

Observaciones Observaciones
Cisteína Arginina
Albúmina de huevo Albúmina de huevo
Muestra problema Muestra problema

4. Prueba Adamkiewics

Observaciones
Caseina
Triptofano
Muestra problema

5. Observaciones Adicionales: