El desarrollo de métodos analíticos juega un papel importante en el descubrimiento,

desarrollo y fabricación de productos farmacéuticos. La cromatografía de alta definición

(HPLC) es probablemente el procedimiento analítico más universal y más sensible, y es
único porque hace frente fácilmente a mezclas de múltiples componentes. Al desarrollar
los métodos analíticos para productos farmacéuticos por HPLC, debe tener una
separación cromatográfica para saber cómo varía con la muestra y con las condiciones
experimentales variables para lograr una separación óptima. Un buen método analítico
debe tener las siguientes características:
Para la preparación de la muestra es necesario establecer si requiere disolución,
filtración, extracción, preconcentración o limpieza. Las muestras dispersas más finas
son más fáciles de disolver o extraer
Según lo que se sabe sobre la muestra, se elige una columna y un detector.
El detector seleccionado debe elegirse dependiendo de alguna propiedad característica
del analito, debe presentar.
- alta sensibilidad, facilitando el - Insensibilidad a los cambios en el
análisis de trazas tipo de solvente, velocidad de flujo y
- Bajo nivel de deriva y ruido temperatura
- Amplio rango dinámico lineal (esto - Simplicidad operacional y
simplifica la cuantificación) confiabilidad
- Bajo volumen muerto (mínimo - Capacidad de ajuste, de modo que
aumento de pico) la detección se puede optimizar para
diferentes compuestos
- No destruya la muestra
Usar columnas cortas (10–15 cm) para reducir el tiempo de desarrollo del
método. Dichas columnas permiten tiempos de retención y equilibrio más cortos.
Encontrar la correcta concentración y composición de fase la móvil, para optimizar la
selectividad, también la temperatura optima y el pH en caso de retener ácidos y bases
débiles.
Asegurar una caída de presión aceptable para diferentes fases móviles.
Determina las condiciones óptimas para retener adecuadamente todos los analitos; es
decir, garantiza que ningún analito tenga un factor de retención (k’) inferior a 0,5 (una
retención deficiente podría dar lugar a la superposición de picos) y que el analito tenga
un factor de retencion superior a 10-15 (la retención excesiva conduce a un tiempo de
análisis prolongado y picos amplios con poca capacidad de detección)
Que tenga un buen gradiente HPLC y así saber la cantidad máxima de picos que se
pueden resolver con una resolución.
Que el método sea robusto para no verse afectado por pequeñas pero deliberadas
variaciones en los parámetros del método.
El método se valida utilizando las pautas de ICH por tal motivo el método y los datos
validados se deben documentar.
Las sustancias de referencia deben prepararse de ser necesario.
Los criterios de precisión para un método de ensayo son que la precisión del instrumento
y la precisión intraensayo será ≤ 2%.
Bibliografía
PHARMATECH. (s.f.). Obtenido de http://www.pharmtech.com/hplc-method-development-
and-validation-pharmaceutical-analysis?id=&sk=&date=&pageID=3