VALIDACIÓN DE

TÉCNICAS ANALÍTICAS
Q.F. M.B.A. Sergio Nina Coronado
EMAIL: qf.sergionc@gmail.com
1209584@esan.edu.pe
Cel 991020156
 OBJETIVO

 Brindar a los participantes de asuntos regulatorios la capacidad de poder

interpretar un informe de validación de acuerdo a la norma.

 Primera parte: Definición de conceptos y términos en la validación.

 Segunda Parte: Ejemplos, evaluación de protocolos y reportes de validación
de técnicas analíticas

CON..
ANA Y
EQUIPO EST

VAL.
FINALIDAD

SEGURIDAD

EFICACIA

MEDICAMENTOS EN EL
MERCADO
 3. BASE LEGAL

 3.1 Decreto Legislativo Nº 1161, Ley de Organización y Funciones del

Ministerio de Salud y su modificatoria.
 3.2 Ley Nº 29459, Ley de los Productos Farmacéuticos, Dispositivos Médicos y
Productos Sanitarios.
 3.3 Decreto Supremo Nº 016-2011-SA, que aprueba el Reglamento para el
Registro, Control y Vigilancia Sanitaria de Productos Farmacéuticos,
Dispositivos Médicos y Productos Sanitarios, y sus modificatorias.
 3.4 Decreto Supremo Nº 008-2017-SA, que aprueba el Reglamento de
Organización y Funciones del Ministerio de Salud, y sus modificatorias.
PORQUE VALIDAR LAS TÉCNICAS
ANALITICAS
 Demostrar que los métodos son los adecuados para
los análisis propuestos en condiciones
establecidas. Son pruebas documentadas .
 Trabajarcon métodos que ofrezcan confianza y
seguridad en los resultados, reduciendo la
probabilidad de fallo.
 Cumplir con las regulaciones sanitarias.
CONDICIONES PREVIAS PARA LA
VALIDACIÒN DE TÉCNICAS
 Tener caracterizado el analito
 Formulación definida del producto.
 Conocer la técnica analítica y el personal con el
suficiente expertise para realizar la validación.
 Lascondiciones deben estar bien definidas para
asegurar que los resultados serán confiables.
 MÉTODOS SUCEPTIBLES DE SER
VALIDADOS

Productos terminados.
Materias primas.
 Métodos farmacopeicos: precisión especificidad y linealidad.
 Metodos no farmacopeicos: precisión especificidad , estabilidad de la
muestra: fotosensibilidad y termosensibilidad, linealidad, limite de detección
limite y cuantificación, intervalo o rango.
 PROCESO DE CONTROL DE CALIDAD

VERIFICACIÒN
SOLICITUD DE REGISTRO DE REPORTE CON
MUESTREO ANÁLISIS DE
ANÀLISIS LA SOLICITUD RESULTADOS
RESULTADOS
 CONCEPTOS 1
6

 Analito: Componente específico de una

muestra a medir en un análisis.
 Análisis/Prueba/Ensayo: Determinación de
una o más características de una muestra,
de acuerdo con un procedimiento o método
establecido.
 Especificidad/selectividad: Habilidad de
medir inequívocamente el analito designado
en la presencia de componentes tales como
excipientes e impurezas que se espera que
puedan estar presentes.
 Exactitud: Grado de concordancia absoluta
entre el resultado obtenido con el método y
la cantidad verdadera del analito presente
en la muestra a una cantidad fija.
 Intervalo (rango): Rango comprendido entre las
concentraciones superior e inferior del analito
(incluyendo dichas concentraciones) y para el que
se ha demostrado que el analito es cuantificado
con un nivel satisfactorio de precisión, exactitud
y linealidad, cuando se aplica el procedimiento
analítico.
 Límite de cuantificación: La concentración
mínima de un analito en una muestra que puede
ser determinada con precisión y exactitud
aceptable.
 Límite de detección: Cantidad mínima de
analito en una muestra que puede ser detectada,
pero no necesariamente cuantificada, bajo las
condiciones de aplicación del método.
 Parámetros de desempeño analítico: son 7: LD,
LC,Ex,Es, P,L ,I(rango).
 Linealidad: Capacidad de un procedimiento
analítico para generar resultados proporcionales, ya
sea directamente o por medio de una
transformación matemática bien definida, a la
concentración del analito, dentro de un intervalo
determinado
 Materia prima: Cualquier sustancia activa o inactiva
de calidad definida (P.A o excipiente)
 Precisión: Grado de concordancia entre los
resultados individuales cuando el procedimiento se
aplica repetidamente a múltiples muestreos de una
muestra homogénea. La precisión, por lo general
expresada como desviación estándar relativa, puede
ser considerada a tres niveles:
 Repetibilidad (precisión bajo las mismas condiciones 1:El método no es confiable.
operativas durante un corto período de tiempo), un 2:El método puede ser observado en su exactitud
mismo analista, el mismo día.
pero se puede utilizar en estudios R y R.
 Precisión intermedia (dentro de las variaciones del 3:No reproducible (evaluar factores externos que
laboratorio: días diferentes, analistas diferentes o
influyen).
equipos diferentes); y,
4: el método es Robusto.
 Reproducibilidad (precisión entre laboratorios).
 Protocolo de validación (de técnica analítica): Conjunto de
instrucciones por escrito cuyo alcance es mayor que el de un
procedimiento normalizado de operación, y que describe
detalladamente todos los pasos a seguir para validar un
método.
 Repetibilidad: Grado de concordancia entre los resultados de Prot.
mediciones sucesivas de la misma medida y bajo las mismas Transf
condiciones de medición.
 Reproducibilidad: Grado de concordancia relativa entre las
resultantes al aplicar el método analítico bajo diferentes
condiciones analíticas, utilizando muestras homogéneas.
 Revalidación (de técnicas analíticas): Repetición total o
parcial de una validación debido a cambios efectuados que
pueden afectar la técnica analítica.
Lab 1 Lab 2
 Robustez: Capacidad del procedimiento para proveer
resultados analíticos de precisión y exactitud aceptables bajo
una variedad de condiciones.
 Técnica Analítica/Procedimiento Analítico/ Método Para una transferencia analítica se aplica el Like
Analítico: Descripción detallada de los pasos necesarios para For Like, se requiere una calificación del personal
realizar cada prueba analítica. Esto puede incluir, pero no
está limitado a: La muestra, el patrón de referencia y las que recibe la técnica, los equipos deben ser los
preparaciones de reactivos, el uso de equipos, la generación adecuados así como los ambientes y el tipo de
de la curva de calibración, el uso de las fórmulas para el reactivos, etc.
cálculo, entre otros.
FASES DEL DESARROLLO DE LA TÉCNICA
ANALÍTICA
 Definición de practibilidad: : precisión exigible, sensibilidad deseada, grado
de selectividad, tiempo coste tamaño de muestra , calificación del personal
tipo de equipo, condiciones d seguridad etc.
 Estudio de estabilidad de la muestra para el análisis: La muestra debe
mantenerse sus características durante el análisis una vez preparada.
 Puesto a punto:
 Asegurar que el equipo se encuentre en condiciones adecuadas para ser
usado: verificaciones calibraciones, etc de forma periódica.
CARACTERISITCAS DE CONFIABILIDAD
 capacidad de un método para determinar el analítico sin interferencia de impurezas , productos de
degradación excipientes, etc.
 Selectividad: Capacidad del método para medir e identificar simultanea o separadamente los analitos de
interés.
 Proporcionalidad entre concentración del analito y respuesta del instrumento:
 Linealidad: capacidad del método para dar resultados que son proporcionales
 Rango o intervalo: intervalo entre la concentración superior e inferior donde se ha demostrado la precisión,
exactitud y linealidad del método.
 Dispersión de los resultados respecto al valor medio:
 Precisión:
 Repetibilidad
 Precisión intermedia.
 Reproducibilidad.

 Exactitud: factor de corrección.

 Limite de cuantificación y detección.
Ejemplo: tabletas de 500mg
ciprofloxacino
 EL método debe determinar alrededor de 500 mg del p.a.
 Si detecta menos de esta cantidad: 300mg o detecta más 750 mg.---?
 Si en el cromatograma se detectan otros picos que interfieren con la lectura
del p.a. ?

 Para hacer confiable este resultado: se requiere especificidad, linealidad del

método, exactitud, precisión del sistema.
SELECTIVIDAD

 Reducir la aparición de falsos positivos.

 Distorsionar la respuesta del analito en la recta de calibración.
 La selectividad debe ser lo primero que se debe determinar antes
de continuar con el estudio de validación.
 La selectividad en:
 Pruebas de identificación
 Ensayos de pureza
 Cuantificación de impurezas
PRUEBAS ESTADISTICAS PARA
ESPECIFICIDAD (SELECTIVIDAD).
 Preparación de muestras placebo cargado y principio
activo solo
 Se determina porcentaje de discrepancia:
 D1: valor medio con interferencia
 D2: valor medio sin interferencia
 % Discrepancia =((D1-D2)/d2)x100.
 Cuando se tienen tolerancias máximas establecidas.
 PRUEBAS ESTADISTICAS PARA SELECTIVIDAD

 PRUEBA DE NORMALIDAD. KOLMOGOROV ( SE ACEPTA QUE SIGUE LA NORMALIDAD

CUANDO EL VALOR DE P MAYOR O IGUAL A 0.05)
 Si sigue una distribución normal
 PRUEBA DE HOMOGENIDAD DE VARIANZAS F DE SNEDECOR : SE ACEPTA QUE LAS
VARIANZAS SON HOMOGENEAS CUANDO PMAYO O IGUAL A 0.05)
 Determina que los grupos de muestra tienen la misma variación
 PRUEBA DE T DE STUDENT –FISHER: COMPARACION DE DOS MEDIAS CON GRUPOS
INDEPENDIENTES: Para un nivel de alfa: 5% (confiabilidad del 95% ) P mayor o igual
0.05
 Determina si hay diferencia significativa en la determinación de resultados entre el
grupo con placebo y el del principio activo sólo.
 Si el resultado es que si existen diferencias significativas se debe evaluar la magnitud de
desigualdad usando la prueba de T Student para un intervalo de confianza al 95%
 IC: Se lee al 95% de confianza la variación de valoración del principio activo en
presencia de la matriz de placebo varia entre …… y …….
Se compara con las tolerancias previamente establecidas
Ejemplo.
TOLERANCIAS RECOMENDADAS

 Desviación frente a
determinaciones sin
interferencias: < 2% (<4%.)
 Resolución cromatográfica entre
picos cercanos >1.5 (>2%)
 Factor de cola cromatográfico <2
 N.º de platos teóricos
cromatográficos >2000
 Identidad del pico cromatográfico
:pureza de pico ausencia de
coelución.
LINEALIDAD Y RANGO

 APLICA A VALORACIÒN DE CONTENIDO DE PRINCIPIO

ACTIVO: contenido individual en 10 unidades.
(AV<15)
 RANGO DE 80-120%
 UNIFORMIDAD DE CONTENIDO: cantidad de principio
activo por una unidad de producto debe ser similar
 70%-130%
 VELOCIDAD DE DISOLUCIÓN
 Q+/- 20 : Q: es el valor de P.A. disuelto en un
determinado tiempo.
 CUANTIFICACIÓN DE IMPUREZAS
 50%-120%
ESTAADISTICOS APLICADOS
LINEALIDAD Y RANGO
 Ecuación de la regresión
 Coeficiente
de
determinación
 Calculo de varianza
residual
 Calculo de pendiente
 Intersección con el eje Y
(a)
PRECISIÒN:

 Coeficiente de variación
 Intervalo de confianza (usando la T de student).
EXACTITUD

 Porcentaje de recuperación
 Comparación con otro método:
Test de student (evaluar las
diferencias entre las medias ), test
F(varianzas homogéneas)
DETECCIÒN Y CUANTIFICACIÒN

 Método visual basado en determinación del Ld y LC. Con concentraciones

decrecientes.
 Método basado en la señal de ruido basado en un blanco
 desviación estándar de la respuesta del blanco y la pendiente de la recta del
blanco.
 Extrapolación de la recta de calibración a concentración “cero”.
 Método experimental: : muestras decrecientes cuando no se puede tener
placebo CV máximo 10%.
DOCUMENTACIÒN

 PROTOCOLO DE VALIDACIÒN
 RELIZACIÒN DE LA VALIDACIÒN
 EVALUACIÒN DE RESULTADOS
 INFORME DE VALIDACIÒN
 CERTIFICADO DE VALIDACIÒN
 PARTES DE UN PROTOCOLO
 a) Nombre y dirección del laboratorio que realiza la validación, certificado por la ANM o por las Autoridades
competentes de los países de alta vigilancia sanitaria o de los países con los cuales exista reconocimiento mutuo en
BPM o BPL.
 b) Nombre del producto farmacéutico y cantidad del Ingrediente Farmacéutico Activo (IFA) o sustancia activa para el
caso de medicamentos herbarios (expresado en unidad de dosis o concentración), forma farmacéutica o forma física
para el caso de los gases medicinales. En el caso de radiofármacos, la cantidad de IFA expresada en términos de masa
solo se aplica a los componentes para radiofármaco. Para los radiofármacos listos para usar, precursores de
radiofármaco y generadores de radionucleidos, se debe considerar un rango de radioactividad. En el caso de productos
biológicos se debe especificar el nombre de la materia prima (IFA o excipiente) Respecto al nombre del producto En el caso de
farmacéutico:
revalidación debe
 b.1) Se acepta la Denominación Común Internacional (DCI) o, en su defecto, el nombre con el que figura en la
farmacopea, formulario o suplemento de referencia con una adenda del fabricante que indique que se trata del
establecerse los
mismo producto farmacéutico. En el caso de radiofármacos, colocar el número o código del producto, incluyendo casos: periódica o
el nombre o símbolo químico del radionucleido.
por algún cambio:
 b.2) Se acepta un nombre comercial diferente del producto farmacéutico, siempre y cuando esté avalado por el
Certificado de Producto Farmacéutico o Certificado de Libre Comercialización.
equipo, método,
etc, se debe hacer
 c) Título del estudio de validación.
una análisis de
 d) Objetivo y alcance de la validación. Si se trata de una revalidación debe indicarse el o los motivos.
riesgo ante
 e) Materiales, reactivos, materiales de referencia y equipos. cualquier cambio en
 f) Fórmula cuali-cuantitativa, para el caso de productos farmacéuticos. la técnica para
 g) Técnica analítica con código y/o versión u otro sistema de trazabilidad. justificar o no un
 h) Parámetros a evaluar durante la validación. revalidación.
 i) Procedimiento y criterios de aceptación, de cada parámetro de desempeño analítico incluyendo métodos
estadísticos a ser utilizados.
 j) Firma del o los responsable(s) del estudio
PARTES DEL INFORME DE VALIDACIÓN
 Informe de validación, el que debe contener como mínimo:
 a) Nombre y dirección del laboratorio que realiza la validación, certificado por la ANM o por las
Autoridades competentes de los países de alta vigilancia sanitaria o de los países con los cuales
exista reconocimiento mutuo en BPM o BPL.
 b) Nombre del producto farmacéutico y cantidad de IFA o sustancia activa para el caso de
medicamentos herbarios (expresado en unidad de dosis o concentración), forma farmacéutica o
forma física para el caso de los gases medicinales. En el caso de radiofármacos, la cantidad de
IFA expresada en términos de masa solo se aplica a los componentes para radiofármaco. Para
los radiofármacos listos para usar, precursores de radiofármaco y generadores de
radionucleidos, se debe considerar un rango de radioactividad. En el caso de productos
biológicos se debe especificar el nombre de la materia prima (IFA o excipiente). Respecto al
nombre del producto farmacéutico:
 b.1) Se acepta la DCI o, en su defecto, el nombre con el que figura en la farmacopea, formulario o
suplemento de referencia, con una adenda del fabricante que indique que se trata del mismo producto
farmacéutico. En el caso de radiofármacos, colocar el número o código del producto, incluyendo el
nombre o símbolo químico del radionucleido.
 b.2) Se acepta un nombre comercial diferente del producto farmacéutico, siempre y cuando esté
avalado por el Certificado de Producto Farmacéutico o Certificado de Libre Comercialización.
 c) Título del estudio de validación.
 d) Resultados de las determinaciones de cada parámetro de desempeño
analítico: Incluir datos, resultados estadísticos, cromatogramas y/o
espectros (para el parámetro de especificidad), gráficos (por ejemplo:
gráfico de la recta en el parámetro de linealidad) u otros (por ejemplo:
imágenes de los resultados obtenidos en el método de cromatografía en Se debe mostrar evidencias,
capa fina, para el parámetro de especificidad). registros confiables de los
 e) Evaluación o análisis de los resultados. resultados obtenidos para los
parámetros de la validación.
 f) Conclusiones.
 g) Firma del o los responsable(s) del estudio. Se puede presentar protocolo
 h) Fecha de aprobación y/o fecha de emisión. y reporte o un reporte que
tenga la información del
protocolo.
 La técnica analítica usada para el estudio de estabilidad debe demostrar
ser un método indicador de estabilidad en la validación.
No se debe confundir el
 Cuando el contenido del informe de validación contenga la información protocolo con el reporte.
indicada en el subnumeral 5.1.1 de la presente Norma Técnica de Salud,
no será necesario presentar el protocolo de validación.
Información adicional

 La ANM puede solicitar información adicional a la

establecida en el numeral 5.1 de la presente
Norma Técnica de Salud en caso lo considere
necesario para respaldar la validación de la
técnica analítica. La información adicional
depende de la naturaleza del producto
farmacéutico a evaluar, la aplicación de nuevos
métodos, entre otros.

Finalmente la presente no exime al

administrado de presentar más
documentación que sustente su
producto. Y no limita al evaluador
CATEGORIAS DE TÉCNIAS ANALITICAS

 Categoría I: Técnicas analíticas para la cuantificación de

productos farmacéuticos terminados, incluyendo los Ejemplos:
conservantes y de la actividad biológica o potencia de las Categoría 1:
materias primas de productos biológicos. Jarabes, suspensiones orales,
 Categoría II: Técnicas analíticas para la determinación de
impurezas en los productos farmacéuticos terminados y en Categoría 2:
materias primas de productos biológicos. Pueden ser pruebas Determinación de impurezas
cuantitativas o pruebas de límite para determinar si la
de gabapentina 300mg.
impureza está presente en la muestra por encima o por
debajo de un valor límite especificado. Cualquiera de las dos
pretende reflejar las características de pureza de la muestra. Categoría 3:
Los parámetros de validación requeridos por una prueba Tabletas sublinguales.
cuantitativa son diferentes a los de una prueba de Polvo para suspensión oral.
cumplimiento de límite. Tabletas de liberación
 Categoría III: Técnicas analíticas para la determinación de las modificada: retardada y
características de desempeño de un producto farmacéutico, prolongada.
como disolución y liberación de fármaco, entre otros.
 Categoría IV: Técnicas analíticas de identificación de un Categoría 4: Todas.
analito en una muestra.
Parámetros de desempeño analítico

 La evaluación de la robustez puede

realizarse durante la fase de desarrollo del
NO se requiere volver a evaluar
método analítico y no necesariamente
la robustez del método si
durante la validación. Esta información
podemos demostrar con
puede ser presentada en el informe de
información dentro del desarrollo
validación.
de la técnica.
Justificación de procedimientos y
parámetros
 Todos los procedimientos y parámetros usados en el
análisis de los datos de la validación y el uso de las
herramientas estadísticas deben ser proporcionados con
justificación. Si por la naturaleza del producto Se podría justificar con
farmacéutico no se puede cumplir con algún criterio un análisis de riesgos,
establecido en las farmacopeas de referencia o en las mostrando antecedentes
recomendaciones de la Conferencia Internacional de (resultados anteriores),
Armonización (ICH) o de la Organización Mundial de la no disponibilidad en el
Salud (OMS) o de la Agencia Europea de Medicamentos mercado para conseguir
(EMA) o las guías de calidad de las autoridades algún patrón o reactivo.
reguladoras de los países de alta vigilancia sanitaria,
debe justificar dicho aspecto, el que será evaluado por
la ANM.
Validación de técnicas analíticas no
clasificadas
 Para las técnicas analíticas que no están incluidas en las clasificaciones
descritas en el numeral 5.3 de la presente Norma Técnica de Salud, la
validación se realiza, según el propósito y las características del método,
teniendo en cuenta las farmacopeas de referencia, las recomendaciones de la
ICH, de la OMS, de la EMA y/o las guías de calidad de las autoridades
reguladoras de los países de alta vigilancia sanitaria
Productos con múltiples Ingredientes

 En caso de tratarse de un producto farmacéutico con múltiples IFA(s)

o sustancias activas para el caso de medicamentos herbarios, puede
consignarse uno o más técnicas analíticas para los ensayos,
presentando las validaciones correspondientes.
Técnicas analíticas que no requieren
validación
 Las técnicas analíticas de
referencia farmacopeicas básicas
no requieren de validación (pH,
pérdida por secado y métodos de
química húmeda como el índice de El evaluador podría considerar que la
técnica es para evaluar el desempeño
acidez, residuos de incineración, del producto y podría requerir algún
entre otras). tipo de validación . Categoría 3.

Por ejemplo Uso de termobalanza Vs

uso de estufa.
Cambios en el registro sanitario

 Tratándose de cambios en el registro sanitario, el titular de registro sanitario

debe presentar la documentación de validación o de revalidación según
corresponda a los cambios que se realicen, de acuerdo a lo establecido en la
norma que regula los cambios en el registro sanitario de productos
farmacéuticos. La documentación a presentarse debe cumplir con lo
establecido en la presente Norma Técnica de Salud, debiendo demostrar la
equivalencia entre la técnica analítica aprobada en el registro sanitario con el
cambio propuesto en la técnica.
Transferencia de técnicas analíticas

 En los casos de transferencia de técnicas analíticas

validadas, en las solicitudes de inscripción,
reinscripción o cambios en el registro sanitario se
acepta la presentación de los documentos que acreditan
la transferencia de las técnicas analíticas, para lo cual
el administrado o el titular de registro sanitario deben
presentar:
 a) El protocolo e informe de validación de la técnica
analítica de la unidad que transfiere, los que deben
contener la información establecida en el numeral 5.1 de
la presente Norma Técnica de Salud.
 b) El informe en el que se confirme, con los resultados
obtenidos, que la unidad receptora de la técnica analítica
se encuentra calificada para llevar a cabo dicha técnica.
CRITERIOS PARA EVALUAR UN REPORTE
DE VALIDACIÓN

 En el caso de Especificadad: Se deben tener gráficas de corridas del estándar

mínimo 02 y del placebo y solvente o medio utilizado para el análisis.
 Degradación forzada cuando no se conozca los productos de degradación:
hidrolisis, fotolisis, termólisis, oxidación, etc. Para el estándar, producto
terminado y placebo.
Linealidad

 Linealidad del sistema:

 El estándar con concentración conocida.
 5 concertaciones que contengan dentro del rango de trabajo.
 Tres series de 5 concentraciones y analizados por triplicados.
 Análisis estadístico de regresión lineal, cuadrados mínimos.
 Linealidad del método:
 placebo cargado.
 03 concentraciones dentro del rango de trabajo: 90%-100%-110%.
Linealidad

 Valoración de principio activo: 80,0% - 120,0%

 Uniformidad de dosis: 70,0% - 130,0%
 Impurezas: 50% - 120%
 Pruebas de disolución: ±20% del intervalo especificado
Especificidad

 Placebo o blanco
 Solvente de dilución.
 Estándar
 Producto terminado.
 Pruebas de estrés: Luz, calor, hidrolisis , etc.
 Cantidad de muestras 02 de cada condición analizados por duplicado.
 Ausencia de interferencia con el estándar o menor al 2%
Precisión
 Repetibilidad y precisión intermedia (mismo laboratorio) y reproducibilidad (diferente
laboratorio).

 06 muestras al 100% o 03 muestras a 03 concentraciones dentro del rango de trabajo y

analizadas por duplicado.

 Se compara resultados promedio por separado de cada analista.

 DSR: menor al 2%,

Precisión intermedia

 Realizar la prueba-F, los resultados no deben ser estadísticamente distintos.

 Típicamente, alrededor de 2 veces la s o el CV% de la repetibilidad. Sin
embargo, una diferencia estadística puede no ser significativa (consideración
práctica). Necesidad de evaluar la aptitud para la indicación de los métodos
 < 5% Métodos biológicos.
 Valores superiores deben ser justificados
 Se pueden emplear otros métodos estadísticos apropiados que sustenten que
la precisión del método es apropiada.
Exactitud

 Por Comparación con otro método conocido (USP por ejemplo).

 Se requiere placebo cargado con PA.
 03 concentraciones dentro del rango de trabajo.
 Estándar de referencia.
 Adición de estándar (muestra con cantidad agregada conocida).
 80
 100
 100+120.
 Datos por triplicados.
Robustez

 Cambios controlados en la técnica, (ayuda para hacer después riesgos).

 Mínimo 02 muestras.
 CV menor al 3%.

 No es obligatorio.
Limite de detección y de cuantificación.

 La cantidad de muestra es la misma que para la linealidad.

 Para las pruebas de límite de impurezas debe efectuarse límite de detección.
 Para la determinación cuantitativa de impurezas el límite de detección no es
exigido (USP o ICH).
RESUMEN

Norma Técnica de Salud que regula la

información mínima que debe contener el
documento de validación de técnicas analíticas
propias.

RD 234-2019/MINSA
REVIEW

 Siete parámetros de desempeño a analizar

 Especificidad
 Exactitud
 Precisión
 Linealidad y Rango
 Límite detección
 Límite de cuantificación
 CARACTERISITICAS Y
PARÀMETRO ESTADISTICOS A USAR REQUISITOS QUE DEBE CUMPLIR EL PROTOCOLO
PRUEBAS

% discrepancia:
((Dci-Dsi)/Dsi) x100.
Prueba de normalidad, (VALOR DE
Adición de interferencias P>0.05)
SELECTIVIDAD Placebo o blanco prueba de varianzas F de snedecor
Solvente de dilución. (VALOR DE P>0.05)
Estándar prueba T de studen para comparar
Producto terminado. medias de grupos diferentes. De ser
Pruebas de estrés: Luz, necesario determinar el intervalo de
calor, hidrolisis , etc. confianza. (VALOR DE P>0.05)
uDesviación frente a determinaciones sin interferencias: < 2% (<4%.).
Resolución cromatográfica entre picos cercanos >1.5 (>2%)
Factor de cola cromatográfico <2
N.º de platos teóricos cromatográficos >2000Identidad del pico
cromatográfico :pureza de pico ausencia de coelución.Cantidad de
muestras 02 de cada condición analizados por duplicado.

Linealidad del sistema:

El estándar con concentración conocida.
Ecuación de la regresión: y= mx+b
5 concertaciones que contengan dentro del rango de trabajo.
Coeficiente de determinación (VALOR Tres series de 5 concentraciones y analizados por triplicados.
DE r >0.999)
Análisis estadístico de regresión lineal, cuadrados mínimos.
Calculo de varianza residual
Muestras con Linealidad del método:
LINEALIDAD Y Calculo de pendiente: a mayor
concentraciones menores y placebo cargado.
RANGO pendiente mas sensible (m)
mayores al valor medido 03 concentraciones dentro del rango de trabajo: 90%-100%-
Intersección con el eje Y (a): indica el
110%.
error sistémico cuando más pequeño Valoración de principio activo: 80,0% - 120,0%
mejor (b) Uniformidad de dosis: 70,0% - 130,0%
Impurezas: 50% - 120%
Pruebas de disolución: ±20% del intervalo especificado
 PARÀMETRO CARACTERISITICAS Y PRUEBAS
Precisión intermedia: Analistas diferentes c Coeficiente de variación
equipos diferentes, días diferentes.
Repetibilidad: realizadas en las mismas
PRECISIÒN
condiciones.
Reproducibilidad: entre laboratorios (aplica grupos diferentes. De ser necesario determinar el
para transferencia entre laboratorios)
Comparación entre valor verdadero y el
EXACTITUD
porcentaje de recuperación del análisis.
Método visual basado en determinación
del Ld y LC. Con concentraciones
decrecientes.
Método basado en la señal de ruido basado
en un blanco
desviación estándar de la respuesta del
LIMITE DETECCIÒN Y
blanco y la pendiente de la recta del
CUANTIFICACIÒN
blanco.
Extrapolación de la recta de calibración a
concentración “cero”.
Método experimental: : muestras
decrecientes cuando no se puede tener
placebo CV máximo 10%.
ESTADISTICOS A USAR
cPrueba de normalidad,
cprueba de varianzas F de snedecor
cprueba T de studen para comparar medias de
intervalo de confianza.
Porcentaje de recuperación
Comparación con otro método: Test de student (evaluar Estándar de referencia.
las diferencias entre las medias ), test F(varianzas
homogéneas) y prueba de normalidad.
Ecuación de la regresión: y= mx+b
Coeficiente de determinación (VALOR DE r
>0.999)
Calculo de varianza residual
Calculo de pendiente: a mayor pendiente mas
sensible (m)
Intersección con el eje Y (a): indica el error
sistémico cuando más pequeño mejor (b)
REQUISITOS QUE DEBE CUMPLIR EL PROTOCOLO
Repetibilidad y precisión intermedia (mismo laboratorio) y
reproducibilidad (diferente laboratorio).
06 muestras al 100% o 03 muestras a 03 concentraciones dentro del
rango de trabajo y analizadas por duplicado.
Se compara resultados promedio por separado de cada analista.
Para precisión intermedia:
DSR: menor al 2%, Realizar la prueba-F, los resultados no deben ser
estadísticamente distintos.
Típicamente, alrededor de 2 veces la s o el CV% de la repetibilidad. Sin
embargo, una diferencia estadística puede no ser significativa
(consideración práctica). Necesidad de evaluar la aptitud para la
indicación de los métodos
< 5% Métodos biológicos.
Valores superiores deben ser justificados
Por Comparación con otro método conocido (USP por ejemplo).
Se requiere placebo cargado con PA.
03 concentraciones dentro del rango de trabajo.
Adición de estándar (muestra con cantidad agregada conocida).
80
100
100+120.
Datos por triplicados.
La cantidad de muestra es la misma que para la linealidad.
Para las pruebas de límite de impurezas debe efectuarse límite de
detección.
Para la determinación cuantitativa de impurezas el límite de detección
no es exigido (USP o ICH).
Muchas Gracias….