Tema 3:

División y Crecimiento de las Bacterias

Prof: Dra. Cristina Maria Villa

Bacterióloga. U.Metropolitana
Docente universidad Francisco de Paula Santander

DIVISION CELULAR:
Las bacterias se reproducen por fisión binaria transversa, proceso por el cual la célula progenitora
se divide para formar dos células hijas. Ver figura No.1. Debido a que una célula da origen a dos,
se dice que las bacterias experimentan un crecimiento exponencial (crecimiento logarítmico). Este
crecimiento puede ilustrarse con la relación siguiente:

Número de células 1 2 4 8 16
Exponencial 20 21 22 23 24

El lapso de tiempo que requiere una bacteriana para poder dividirse y formar dos células hijas se
denomina tiempo de generación. Por término medio y para ciertas especies, el tiempo de
generación en la fase activa de multiplicación es de 12 a 15 minutos, para la mayoría de las
bacterias oscila entre los 20 y 60 minutos y en algunas bacterias pertenecientes al género
Mycobacterium (M. tuberculosis), en las condiciones mas favorables, la división no se produce
antes de 20 horas. En consecuencia, una sola bacteria, por ejemplo, E. coli, en un medio de cultivo
apropiado, sin factores inhibidores, puede dar lugar en 24 horas a miles de millones de
microorganismos. La velocidad de reproducción depende tanto de la especie bacteriana como de
las condiciones ambientales.

No obstante, el crecimiento de los microorganismos no implica necesariamente la escisión. Muchas

especies bacilares crecen fácilmente en sentido longitudinal y la influencia de factores muy
diversos puede impedir la división de la célula, aunque continúen la escisión del núcleo y el
crecimiento de la pared, de la membrana y de los contenidos celulares. En consecuencia, se
forman largos filamentos no tabicados, en lugar de células individuales.

El crecimiento bacteriano es un concepto macroscópico donde el incremento del número de

microorganismos se hace más evidente que el aumento del tamaño, si bien estos dos fenómenos
se suceden tan rápidamente que no son disociables.

Una alternativa para evidenciar el crecimiento bacteriano es el cultivo, proceso donde se propagan
los microorganismos, proporcionándoles las condiciones ambientales adecuadas.

Los microorganismos en fase de crecimiento realizan réplicas de sí mismos y requieren de los

elementos que se encuentran en su composición química. Se le deben brindar los elementos
nutritivos en una forma accesible desde el punto de vista metabólico. Además, los microorganismos
requieren energía metabólica con el objetivo de sintetizar macromoléculas y conservar los
gradientes químicos esenciales a través de sus membranas.
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Fig.No. 3.1. Ciclo celular del desarrollo de una bacterias

Durante el crecimiento se deben regular los factores nutricionales (carbono, nitrógeno, azufre y
fósforo, elementos trazas y vitaminas) y los factores físicos (pH, temperatura, oxíge¬no, humedad,
presión hidrostática, presión osmótica y radiación).

3.2. REQUERIMIENTOS PARA EL CRECIMIENTO:

El peso seco de los microorganismos consiste en materia orgánica que contiene carbono,
hidrógeno, nitrógeno, oxígeno, fósforo y azufre. Se requieren, además, iones inorgánicos como
potasio, sodio, hierro, magnesio, calcio y cloruro para facilitar la catálisis enzimática y conservar los
gradientes químicos a través de la membrana celular.
La materia orgánica se encuentra en macromoléculas formadas por enlaces anhídridos entre los
bloques estructurales. Para la síntesis de los enlaces anhídridos se requiere la energía química
proporcionada por los enlaces del ATP (trifosfato de adenosina).

Para conservar una composición citoplásmica relativamente constante, se necesita una energía
adicional derivada de la fuerza motriz protónica que es la energía potencial que se puede liberar al
pasar un protón a través de una membrana. En los organismos eucariotas la membrana puede ser
parte de la mitocondria o del cloroplasto; mientras que en los organismos procariotas la membrana
es la membrana citoplásmica de la célula.

Durante el crecimiento, un microorganismo requiere todos los elementos de su materia orgánica y

el complemento total de iones necesarios para la energética y la catálisis. Además, debe haber una
fuente de energía que establezca la fuerza motriz protónica y que permita la síntesis
macromolecular. Los microorganismos varían ampliamente en cuanto a sus demandas
nutricionales y sus fuentes de energía metabólica.

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3.2.1. FUENTES DE ENERGÍA METABÓLICA

Los tres modos principales de generar energía metabólica son: fermentación, respiración y
fotosíntesis. Los microorganismos, para poder crecer, deben utilizar, por lo menos, uno de estos
mecanismos.

3.2.2. FACTORES NUTRICIONALES

La nutrición es la provisión de nutrientes para el crecimiento de un organismo. Los nutrientes de los
medios de cultivo deben contener todos los elementos necesarios para la síntesis biológica de los
microorganismos e incluyen carbono, nitrógeno, azufre, fósforo, elementos trazas y vitaminas.

• Fuente de carbono: La mayoría de las bacterias utilizan compuestos de carbono como

fuente de energía y otras, para la síntesis de elementos celulares. Los organismos
fotosintéticos reducen el dióxido de carbono (CO2) a glucosa y otras moléculas orgánicas.
Los organismos autótrofos emplean nutrientes completamente inorgánicos; mientras que los
heterótrofos requieren nutrientes orgánicos. Ambos organismos, autótrofos y heterótrofos,
obtienen la energía a partir de la glucosa por glicólisis, fermentación y el ciclo de Krebs.
Ellos, además, sintetizan algunos componentes celulares a partir de intermediarios formados
por medio de estas vías.

• Fuente de nitrógeno: Todos los organismos, incluyendo los microorganismos, necesitan

nitrógeno para sintetizar enzimas, proteínas y ácidos nucleicos. Algunos microorganismos
obtienen el nitrógeno a partir de fuentes inorgánicas y otros adquieren la energía mediante el
metabolismo de sustancias que contienen nitrógeno inorgánico. Los procesos por los cuales
las proteínas y los ácidos nucleicos son sintetizados, están directamente relacionados con la
información genética contenida en la célula. El producto final de todas las vías de asimilación
del nitrógeno es la forma más reducida del elemento, el ion amonio (NH4+).

Muchos microorganismos poseen capacidad para asimilar el nitrato (NO3~) y el nitrito

(NO2~) de manera reductiva al convertir a estos iones en amoníaco (NH3). Estas vías de
asimilación difieren de las vías empleadas para la desasimilación de nitrato y nitrito.
Emplean las vías desasimilatorias los microorganismos que recurren a los iones como
aceptares finales de electrones en la respiración; este proceso se llama desnitrificación y su
producto es el gas nitrógeno (N2) que vuelve a la atmósfera.

• Fuente de azufre y fosforo: Los microorganismos necesitan un suministro de ciertos

minerales, especialmente azufre y fósforo, los cuales son componentes celulares
importantes. Ellos obtienen el azufre a partir de las sales inorgánicas de sulfato y de los
aminoácidos que contienen azufre, y lo utilizan en la elaboración de proteínas, coenzimas y
otros componentes celulares. El fósforo es adquirido, principalmente, mediante iones fosfato
inorgánico (PO3~) y lo emplean para sintetizar ATP, fosfolípidos y ácidos nucleicos.

• Elementos Trazas: Muchos microorganismos requieren una variedad de elementos trazas,

usualmente en la forma de iones. Todos los organismos necesitan cierta cantidad de sodio y
cloro, y los halófilos lo requieren en grandes cantidades.
El potasio, zinc y manganeso son usados para activar ciertas enzimas. El cobalto es
necesario a los organismos que sintetizan vitamina B12. El hierro es importante para la
síntesis de compuestos que contienen el núcleo heme y para ciertas enzimas. Las bacterias

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grampositivas requieren calcio para la síntesis de las paredes celulares y los organismos
formadores de esporas, para la síntesis de las paredes de la espora.

• Las Vitaminas: Las vitaminas necesarias para algunos microorganismos incluyen inositol,
ácido fólico, vitamina B12 y vitamina K. Los microorganismos patógenos humanos requieren
a menudo una variedad de vitaminas y por esta razón son capaces de crecer solamente
cuando pueden obtener esas sustancias a partir del organismo hospedero. El desarrollo de
tales organismos en el laboratorio necesita un medio complejo el cual contenga todos los
nutrientes que normalmente obtiene de sus hospederos.

3.2.3. FACTORES FÍSICOS

• Concentración de iones hidrógeno (pH): La acidez o alcalinidad de un medio es

expresada en términos de pH. Los microorganismos tienen un pH óptimo en el cual se
obtiene el mejor crecimiento. Comúnmente, el pH óptimo es neutro (pH 7), y la mayoría de
los microorganismos no se desarrollan a una unidad de pH por encima o por debajo de su
pH óptimo.

Las bacterias son clasificadas como acidófilas, neutrófilas y alcalinófilas de acuerdo con las
condiciones de acidez o alcalinidad que ellas puedan tolerar. Las bacterias acidófilas se
desarrollan en un rango que va desde pH 0,0 hasta 5,4. Las bacterias neutrófilas crecen en
un rango de pH 5,4 hasta 8,5; incluyéndose en este grupo a la mayoría de las bacterias que
causan enfermedades en el hombre. Las bacterias alcalinófilas se desarrollan entre un pH
7,0 hasta 11,5. Vibrio cholerae, agente causal del cólera, se desarrolla mejor aun pH
cercano a 9.

• Temperatura: La mayoría de las bacterias se desarrollan a un rango de temperatura por

encima de 30 °C, pero las temperaturas mínimas y máximas varían considerablemente para
las diferentes especies. Las bacterias pueden ser clasificadas, de acuerdo con el rango de
temperatura al cual se desarrollan, en psicrófilas, mesófilas y termófilas; y a su vez
subclasificadas como obligadas o facultativas. Obligada significa que el organismo debe
tener las condiciones ambientales específicas, y facultativa que el organismo es capaz de
tolerar las condiciones ambientales, pero puede desarrollarse, además, en otro ambiente.

Las bacterias psicrófilas se desarrollan mejor entre 15 y 20 °C, y pueden ser subdividi-das
en psicrófilas obligadas cuando no crecen por encima de 20 °C y psicrófilas facultativas
cuando son capaces de crecer por debajo y por encima de 20 °C.

Las bacterias mesófilas incluyen a la mayoría de las bacterias y se desarrollan en un rango

de temperatura entre 30 y 37 °C. Las bacterias patógenas al hombre están incluidas en esta
categoría y la mayoría de ellas crecen mejor a una temperatura cercana al cuerpo humano
(37 °C).

Las bacterias termófilas se desarrollan mejor a temperaturas entre 50 y 60 °C.

• Concentración de oxígeno: Las bacterias, especialmente las heterótrofas, pueden ser

divididas en oxigenicas (aerobias), que requieren oxígeno para crecer, y anoxigenicas
(anaerobias), las cuales no lo requieren. Los microorganismos aerobios obligados, tales

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como pseudomonas, que causa muchas infecciones adquiridas en el hospital, se desarrollan

en presencia de oxígeno libre; mientras que los anaerobios obligados, tales como
Bacteroides, mueren en presencia de oxígeno libre.

Entre estos extremos se encuentran los microorganismos microaerofílicos que se

desarrollan mejor en presencia de una pequeña cantidad de oxígeno libre. Los
microorganismos anaerobios facultativos son capaces de desarrollarse en ausencia y en
presencia de oxígeno. Los bacillus y staphylococcus son anaerobios facultativos y se
encuentran en el tracto intestinal y urinario donde sólo está disponible una pequeña cantidad
de oxígeno.

• Humedad: Generalmente todas las células con un metabolismo activo requieren agua del
ambiente. A diferencia de los organismos superiores, los organismos unicelulares están
expuestos directamente a su ambiente. La mayoría de las células vegetativas sólo pueden
vivir pocas horas sin humedad; sólo las esporas y los organismos formadores de esporas
pueden existir en un ambiente seco.

• Presión osmótica: La mayoría de las bacterias pueden tolerar un rango amplio de

concentraciones de sustancias disueltas. Su membrana celular contiene un sistema
enzimático llamado permeasas que regulan el movimiento de las sustancias disueltas a
través de las membranas. Si la concentración fuera de la célula se torna demasiado alta, la
pérdida de agua puede inhibir o detener el crecimiento celular.

Ciertas bacterias llamadas halofílicas requieren de una moderada a gran cantidad de sal y se
hallan en el océano donde la concentración de sal (3,5 %) es óptima para su crecimiento.

3.3. CICLO DE CRECIMIENTO NORMAL

Entendemos por crecimiento microbiano el aumento del número de microorganismos a lo largo del
tiempo. Por tanto, no se referiere al crecimiento de un único microorganismo (ciclo celular) sino al
demográfico de una población. En este tema nos centraremos en el crecimiento de bacterias, el
estudio que se hace puede servir también para entender el crecimiento de levaduras y de otros
hongos.

Se denomina ciclo celular al proceso de desarrollo de una bacteria considerada de forma aislada. A
lo largo del ciclo celular, tiene lugar la replicación del material de la bacteria, la síntesis de sus
componentes celulares, el crecimiento para alcanzar un tamaño doble del inicial y su división por
bipartición de la bacteria para dar lugar a dos células hijas. La duración del ciclo celular coincide
con el tiempo de generación y depende, en general, de los mismos factores de los que depende
este.

El crecimiento de una población resulta de la suma de los ciclos celulares de todos sus individuos.
Este crecimiento suele ser asincrónico puesto que cada microorganismo se encuentra en un punto
diferente del ciclo celular. Por consiguiente, en un momento determinado en una población se
encuentran células que acaban de dividirse, otras que están replicando su ADN y elongándose,
otras que están iniciando la división celular, etc.

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En un crecimiento sincrónico todas las células se encuentran simultáneamente en la misma fase

del crecimiento celular. Los cultivos sincrónicos son muy difíciles de mantener por lo que su
importancia está principalmente ligada a los estudios básicos de biología microbiana.

Las poblaciones de bacterias pueden crecer de una forma explosiva acumulando grandes números
en un periodo de tiempo muy reducido. Puesto que el efecto nocivo (infecciones o intoxicaciones)
de los microorganismos depende de su número en la mayoría de los casos, entender cómo se
produce el crecimiento microbiano es importante para poder evitar o reducir dichos efectos nocivos.

Se denomina crecimiento equilibrado a aquél en el que toda la biomasa, número de células,

cantidad de proteínas, de ADN, etc., evolucionan en paralelo. El crecimiento equilibrado
probablemente ocurra en muy contadas ocasiones en condiciones naturales.

Si la bacteria crece en un medio líquido, las células que se producen en cada división continúan su
vida independientemente en la mayoría de los casos formando una suspensión de células libres.

Cuando una célula aislada comienza a crecer sobre un substrato sólido, el resultado del
crecimiento al cabo del tiempo es una colonia. Se denomina unidad formadora de colonia (UFC) a
una célula viva y aislada que se encuentra en un substrato y en condiciones ambientales
adecuadas y produce una colonia en un breve lapso de tiempo. Una UFC también puede
corresponder a más de una célula cuando éstas forman parte de grupos unidos fuertemente
(estreptococos o diplococos, por ejemplo) ya que cada grupo formará una sola colonia.

Por otra parte, hay que considerar que la capacidad de multiplicación (crecimiento) de un
microorganismo puede verse transitoriamente afectada por lesiones o por las condiciones físicas o
químicas del entorno. En estos casos, podríamos considerar como muertos microorganismos que
pueden reanudar su crecimiento si las condiciones son de nuevo favorables.

El crecimiento de las bacterias sobre un medio de cultivo líquido es claramente exponencial, y la

determinación de este crecimiento cuantitativo se puede representar mediante una curva en la que
se distinguen los siguientes periodos:

• Fase de retardo ó adaptación: Es el tiempo necesario para la adaptación de las bacterias

al nuevo medio donde se siembran. Durante este periodo los microorganismos en estado
latente aumentan su actividad metabólica por la formación de enzimas y metabolitos
intermediarios necesarios para la reanimación del crecimiento, se embeben en agua, se
incrementa la tasa de ARN, principalmente ribosómico y se producen posiblemente enzimas
para utilizar las nuevas sustancias que se le ofrecen. En definitiva hay un aumento de
volumen, pero no división, dado que no hay replicación de ADN cuyos niveles permanecen
constantes durante toda la fase.

• Fase de crecimiento exponencial: Una vez iniciado el desarrollo, se manifiesta pronto por
la ascendente inflexión de la curva, llamada fase de crecimiento acelerado. Inicialmente
durante este periodo, la división es lenta, el tamaño de las células es grande; casi el máximo
alcanzable por las respectivas especies. Este hecho es debido, probablemente, a la
imbibición de agua con la hinchazón consiguiente y al comienzo de la actividad metabólica.
Durante la fase de crecimiento acelerado, el tiempo requerido para que cada célula se divida

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va disminuyendo, gradualmente y la velocidad de división alcanza un máximo, determinado

por la especie del microorganismo y las condiciones de crecimiento.

Fig.No.3.2 Curva típica de desarrollo de una población bacteriana.

Cuando las bacterias se multiplican a velocidad constante y exponencial, se alcanza la

auténtica fase de desarrollo. Esta fase de desarrollo logarítmico está mediatizada por una
serie de factores limitantes intrínsecos diversos, como la concentración del sustrato,
presencia del oxigeno, etc.

Durante esta fase se alcanza el valor más alto en el número de generaciones por hora.
Además, el recuento de células viables es prácticamente idéntico al de células totales, al
tratarse de una población joven, en que el número de bacterias muertas es mínimo.

Por otro lado. La actividad metabólica es máxima. El tamaño medio bacteriano se reduce,
las estructuras (pared, membrana, etc.) presentan, además, un espesor mínimo, la
sensibilidad a los agentes físicos, químicos y antimicrobianos y fagos es optima en esta fase,
y las características bioquímicas y fisiológicas son más evidentes.

Si el crecimiento exponencial siguiese ininterrumpidamente. En poco tiempo se llegaría a

constituir una masa sólida de bacterias. Lo que no sucede al aparecer numerosos factores
que interfieren en dicha multiplicación.

Al cabo de pocas horas (o días) del inicio de la fase logarítmica. Los microorganismos
encuentran dificultades para continuar la multiplicación. Los nutrientes se agotan. Las
materias residuales toxicas se acumulan, el pH se modifica, los aceptores de hidrogeno
desaparecen, las transferencias de energía disminuyen y las células se obstaculizan
mutuamente. La tasa de división celular comienza a declinar y hay microorganismos que
mueren en número creciente, de tal modo que el progreso numérico de las células vivas se

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retarda considerablemente. Este proceso se designa como fase de aceleración negativa del
crecimiento.

• Fase estacionaria: Hay un crecimiento desequilibrado debido a los componentes

bacterianos (ADN, ARN, proteínas, etc.) se sintetizan a tasas diferentes. Se produce una
estabilización, de modo que el número de células que se reproducen equivalen a las que
mueren. Puede ser debido a la disminución de factores esenciales para la respiración o a
falta de elementos nutritivos de sustrato. El acumulo de productos finales del metabolismo,
ácidos orgánicos o alcoholes obtenidos a partir de la degradación de los carbohidratos, y
enzimas autocataliticas del tipo de las proteasas y de las nucleasas son factores dignos de
tenerse en cuenta al actuar como inhibidores.

• Fase de declinación o muerte: Al volverse las condiciones del medio más adversas cada
vez, las bacterias se reproducen mas lentamente y predominan las células muertas.
Aparece una fase de declinación exponencial similar, pero en sentido contrario, a lo que
sucede en la fase logarítmica.

En la mayor parte de las bacterias, el proceso se desarrolla en 72 horas, de forma que al final de
estas el número de células variables es muy pequeño, si bien la esterilidad total del cultivo puede
no lograrse hasta transcurridas varias semanas o meses y depende, entre otros factores, del tipo
de microorganismo, PH, presencia o ausencia de determinados iones, etc.

Desde el punto de vista microbiológico, un microorganismo muere cuando pierde de forma

irreversible la capacidad de dividirse. Por consiguiente no podrá formar una colonia sobre un medio
de cultivo y no será posible detectar su presencia por los métodos microbiológicos tradicionales.

BIBLIOGRAFIA.

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BROCK, T.D. Microbiología. Prentice Hall. New York. 1990
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http://pathmicro.med.sc.edu/fox/growth_c.jpg
http://docencia.udea.edu.co/bacteriologia/MicrobiologiaAmbiental/microbiologia_2.pdf

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