GUÍA No.

1 EXTRACCIÓN DE ADN

OBJETIVOS
Extracció n de DNA celular vegetal.
Analizar el fundamento de las sustancias utilizadas.
Conocer su aplicació n en la biotecnología y desarrollo de la ciencia.

INTRODUCCÓN

ADN (Á cido Desoxirribonucleico) es el nombre químico de la molécula que contiene la

informació n genética en todos los seres vivos. La molécula de ADN consiste en dos cadenas
que se enrollan entre ellas para formar una estructura de doble hélice. Cada cadena tiene
una parte central formada por azú cares (desoxirribosa) y grupos fosfato. Enganchado a
cada azú car hay una de de las siguientes 4 bases: adenina (A), citosina (C), guanina (G), y
timina (T). Las dos cadenas se mantienen unidas por enlaces entre las bases; la adenina se
enlaza con la timina, y la citosina con la guanina. La secuencia de estas bases a lo largo de
la cadena es lo que codifica las instrucciones para formar proteínas y moléculas de ARN
(National Human Genome Research Institute).

MATERIALES

 Muestra vegetal: Puede tratarse de cebolla, tomate, plá tano, germen de trigo o un
puñ ado de guisantes.
 Agua destilada o mineral (permite crear una interfase con el alcohol)
 Sal de mesa (evita la unió n de las proteínas)
 Detergente lavavajillas (lisis de membranas celulares)
 Alcohol de 96 º muy frío (precipita DNA en la interfase con el agua)
 Varilla de vidrio
 Tubo de ensayo
 Batidora y un cuchillo (separa las células)
 Vaso de precipitado
 Probeta o pipeta

METODOLOGÍA
1. En el vaso de precipitado pequeñ o echa 3 cucharaditas de detergente lavavajillas.
2. Añ ade una cucharada de sal.
3. Añ ade 25 mililitros de agua destilada. Es necesario utilizar la pipeta para extraer la
cantidad de agua adecuada.
4. Mantener en un bañ o de hielo esta disolució n.
5. Corta la zona central del vegetal elegido en cuadrados.
6. Tritura los trozos del vegetal (en el vaso de precipitado grande) con un poco de agua
en la batidora (la mezcla de células y agua debe ser opaca), accionando 2 veces las
cuchillas a impulsos de 10 segundos. Así se romperá n muchas células.
7. Mezcla en el recipiente grande el triturado celular con la disolució n inicial del vaso.
8. Agita vigorosamente la mezcla durante al menos 5 minutos, sin formar espuma.
9. Haz pasar el líquido obtenido por un colador.
10. Retira 5 ml. de la mezcla a un tubo de ensayo y añ ade con la pipeta 5 mililitros de
alcohol enfriado a 0º C. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara
interna del tubo de ensayo, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando sobre
la mezcla.
11. Deja reposar durante 5 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las 2 capas.
(Mientras esperas este tiempo, puedes ir recogiendo y limpiando todos los recipientes
empleados anteriormente).
12. Introduce una varilla justo debajo del alcohol (la zona turbia que queda entre las 2
capas). Remueve la varilla hacia delante y hacia atrá s y poco a poco se irá n enrollando
los fragmentos de mayor tamañ o de ADN.
13. Pasado un minuto, retira la varilla atravesando la capa de alcohol, con lo cual el ADN
quedará adherido a su extremo, con el aspecto de un copo de algodó n mojado.

BIBLIOGRAFÍA
National Human Genome Research Institute. Extraído de
https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/ADN-acido-Desoxirribonucleico