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LICEO POLITECNICO ANDES

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS

GUA DE TRABAJO EXPERIMENTAL


ADN EN LOS ORGANISMOS

INTRODUCCION
El ADN se encuentra en el interior del ncleo de todas las clulas, disperso y muy replegado, unido a
protenas para formar la cromatina. Por lo tanto, podremos extraerlo a partir de prcticamente
cualquier material de origen biolgico. Para ello es necesario homogeneizar el tejido disgregndolo y
separando sus clulas y dems componentes, luego romper las clulas para separar el ncleo y
romper ste para liberar la hebra de cromatina y observarlo en una solucin acuosa.
El material gentico (y tambin algo de ARN) aparecer entonces como un agregado de fibras
blanquecinas de aspecto mucoso que se adhieren a una varilla de vidrio o a la pipeta. Podemos
aadir unas gotas de azul de metileno o verde de metilo al tubo para teirlo. Por ltimo, se puede
situar sobre un portaobjeto, teirlo de la misma manera y observarlo al microscopio. Tambin se
puede conservar dejndolo secar sobre papel de filtro o suspendido en alcohol al 50% o 70%.
EXPERIMENTO: ADN de pltano(a la forma de cromatina)
En esta prctica realizaremos la extraccin del ADN de las clulas de pulpa de pltano poniendo de
manifiesto su estructura fibrilar y el extraordinario grado de compactacin, que permite el
empaquetamiento en el ncleo celular de largusimas cadenas de esta molcula. Tras la extraccin
se realizar una tincin especfica del ADN obtenido.
Materiales
- Un pltano, Batidora de mano, papel filtro o tela para filtrar, Embudo para filtrar, Alcohol 96, Tubo
de ensayo, Gradilla,
Vaso para batir, Agua destilada, varilla de vidrio, Vaso de precipitado,
Detergente tipo lavavajillas, Un poco de sal comn.
Procedimiento
1. La profesora te entregar una muestra de la siguiente preparacin: batido de un pltano en 250
ml de agua destilada (o mineral en su defecto, pero no del grifo) durante 15 a 20 segundos hasta
obtener una papilla homognea.
2. En un vaso de precitado pequeo Aadir 50 ml de agua se mezcla una cucharada de lavavajillas
lquido con dos pizcas de sal de mesa.
3. Aadir ahora la muestra del pur de pltano a lo anterior y mezclar con esptula/palito de helado
durante 5 10 minutos evitando formar espuma.
4. Con los pasos anteriores se consigue liberar el ADN en la disolucin acuosa, la cual contendr
tambin diversos restos celulares. Para eliminar esos restos dejamos filtrar la solucin (papel
filtro y embudo) durante varios minutos en papel de filtro, hasta obtener unos 5 ml de filtrado.
5. Colocar en un tubo de ensayo unos 5 ml de alcohol. Para precipitar el ADN separndolo de la
disolucin, se toma una parte del filtrado y se aade suavemente al tubo de ensayo que contiene
el alcohol. El filtrado, ms denso que el alcohol y algo turbio, se deposita en el fondo del tubo.
Dejar reposar durante 2 3 minutos sin moverlo en absoluto.
6. Ahora agita suavemente el tubo.
7. El ADN precipita en forma de grumos algodonosos y asciende hacia la parte superior del tubo.
8. Extrae el ADN del tubo recogindolo cuidadosamente con una varilla o un instrumento similar
que se hace girar lentamente.
9. Ahora se pone un poco de ese ADN sobre un portaobjetos y se tie con azul de metileno durante
3 minutos. Se limpia el porta y se lleva al microscopio para su observacin.
10. Describe y dibuja tus observaciones en el informe.