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APOYO DIAGNOSTICO

PROTOCOLO QUÍMICA CLÍNICA


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CONTROL DE REVISIÓN Y APROBACIÓN


IDENTIFICACIÓN INSTITUCIONAL
Representante Legal: EDGAR BURBANO MARTINEZ
NIT: 814.003.182 – 9
Dirección: Barrio La Unión / POTOSÍ - NARIÑO
Teléfono: #293 / 7263046 – 7263099
E-mail: ese.potosi@gmail.com

ELABORADO POR REVISADO POR APROBADO POR


Heberth Jimenez EDGAR BURBANO
Nombre: MARCELA CADENA
Lorena Garrido MARTINEZ
Cargo: Bacteriólogo Coordinadora asistencial Gerente

Heberth Jimenez
Firma:

Lorena Garrido

CONTROL DE CAMBIOS

A.
A M DESCRIPCIÓN DEL ACTUALIZADO
No FECHA S
CAMBIO Y POR
.
ACTUALIZACIONES
x  Microalbuminuria ZULLY CAUSIL
01 Mayo/2017  Potasio

x 1.2 Alcance: se complementa Heberth Jimenez


02 OCTUBRE/2017
con la interfas de INFOSALUD. Lorena Garrido
X 2.7.3 Se añade media hora a la Heberth Jimenez
02 OCTUBRE/2017
curva. Lorena Garrido
X 2.13 Depuracion de creatinina Heberth Jimenez
02 OCTUBRE/2017
en orina de 24 horas Lorena Garrido

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2.13.1 Fundamento del Metodo


2.13.2 Principio
02 OCTUBRE/2017
X 2.13.3 Procedimiento Heberth Jimenez
2.13.4 Calculos Lorena Garrido
X 2.14 Proteinuria 24 horas.
2.14.1 fundamento del metodo
2.14.2 Principio Heberth Jimenez
02 OCTUBRE/2017
2.14.3 Procedmimiento Lorena Garrido
2.14.4 Calculos

X 2.15 Hemoglobina Glicosilada Heberth Jimenez


02 OCTUBRE 2.15.1 Clover 1Ac-prinicpip de Lorena Garrido
la prueba

S= supresión
A= adición
M= modificación

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TABLA DE CONTENIDO
1.1 OBJETIVO: .............................................................................................. 5
1.2 ALCANCE ................................................................................................. 5
1.3 MATERIALES Y EQUIPOS ........................................................................ 5
Materiales 5
1.3.1. Equipos ...................................................................................................... 5
2.1 ACIDO URICO ......................................................................................... 6
Hiperuricemia ............................................................................................................ 6
2.3.1. Niveles disminuidos ..................................................................................... 6
2.3.2. Factores que interfieren ............................................................................... 6
2.3.3. Control de calidad tolerable .......................................................................... 7
2.3.4. Valores de referencia en suero o plasma ....................................................... 7
2.3.5. Relación Ácido Úrico / Creatinina: ................................................................. 7
2.3.6. Determinación Ácido Úrico ........................................................................... 8
URICASA/PEROXIDASA .............................................................................................. 8
BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA ............................................................................... 9
2.3.7. Factores que interfieren ............................................................................... 9
2.3.8. Niveles aumentados .................................................................................. 10
2.3.9. Control de calidad tolerable ........................................................................ 10
2.3.10. Valores normales ...................................................................................... 10
2.3.11. Determinación Bilirrubinas: ........................................................................ 10
COLESTEROL TOTAL ............................................................................................ 12
3.1.1. Factores que interfieren:............................................................................ 12
3.1.2. Valores normales ...................................................................................... 13
3.1.3. Determinación Colesterol total:................................................................... 13
COLESTEROL OXIDASA/PEROXIDASA ........................................................................ 13
COLESTEROL HDL (LIPOPROTEÍNAS)................................................................. 14
3.1.4. Factores que interfieren ............................................................................. 14
3.1.5. Resultados anormales................................................................................ 14
3.1.6. Determinación Colesterol HDL: ................................................................... 15
FOSFOTUNGSTATO/MG-COLESTEROL OXIDASA/PEROXIDASA ......................... 15
3.5. ML O 500 UL ........................................................................................... 15
3.6. CREATININA ......................................................................................... 16
3.6.1. Factores que interfieren ............................................................................. 16
3.6.2. Valores normales ...................................................................................... 17
3.6.3. Determinación Creatinina:.......................................................................... 17
GLUCOSA ............................................................................................................. 17
3.6.4. Intervalos de referencia ............................................................................. 18
3.6.5. Factores que interfieren:........................................................................... 18
3.6.6. Resultados anormales................................................................................ 18

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3.6.7. Valores normales ...................................................................................... 19


3.6.8. Posibles valores criticos ............................................................................. 19
3.6.9. Determinación Glucosa: ............................................................................. 19
GLICEMIA PRE Y POST ........................................................................................ 20
3.6.10. La glicemia post prandial es una prueba de fácil realización:.......................... 20
3.6.11. TEST DE TAMIZAJE DE O’ SULLIVAN ......................................................... 20
3.6.12. CURVA DE GLICEMIA ................................................................................ 20
TRIGLICÉRIDOS.................................................................................................. 20
3.6.13. Factores que interfieren ............................................................................ 21
3.6.14. Niveles aumentados .................................................................................. 21
3.6.15. Niveles disminuidos ................................................................................... 21
3.6.16. Valores normales ...................................................................................... 21
3.6.17. Determinación Triglicéridos: ....................................................................... 22
NITRÓGENO UREICO /UREA ............................................................................... 22
3.6.18. Factores que interfieren ............................................................................. 23
3.6.19. Niveles aumentados .................................................................................. 23
3.6.20. Niveles disminuidos ................................................................................... 24
3.6.21. Valores normales ...................................................................................... 24
3.6.22. Determinación BUN / Urea: ........................................................................ 24
4. VALORES DE REFERENCIA ................................................................... 25
4.1 MICROALBUMINURIA- TURBIDIMETRIA ............................................................... 25
4.1.1 Clover A1c – Principio de la prueba ................................................................... 33
5. BIBLIOGRAFÍA-----------------------------------------------------------------------------------26

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1.1 OBJETIVO:

Analizar las muestras, obtener los resultados de las diferentes pruebas químicas con el fin
de apoyo diagnóstico.

1.2 ALCANCE

El procedimiento inicia con la separación de la muestra, procesamiento del suero y termina


con la validacion de los resultados, subir a la plataforma de INFOSALUD y entregar el
resultado al departamento de archivo.

1.3 MATERIALES Y EQUIPOS

Materiales

 Tubos tapa amarilla


 Puntas amarillas y azules
 Reactivos
 Gradillas
 Tubos de vidrio
 Agua destilada
 Papel absorbente o servilletas

1.3.1. Equipos

 Microscopio
 Centrifuga
 Pipeta automática
 Fotómetro
 Baño Serologico
 Nevera

2. PROCESO

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2.1 ACIDO URICO

El ácido úrico es el principal producto del catabolismo de las bases puricas, las cuales se
obtienen en parte de la dieta y en parte de la síntesis in vivo.
Concentraciones elevadas de ácido úrico en suero y orina pueden ser atribuibles a
sobreproducción de uratos (síntesis incrementada de purinas) o a una eliminación
defectuosa de urato.
La hiperuricemia se asocia generalmente con la gota, disminución de la función renal,
deshidratación, alteraciones mieloproliferativas y otras condiciones en las que no se
conoce bien la causa.

Hiperuricemia

Entre las demás causas de hiperuricemia se incluyen alcoholismo, leucemias, cáncer


metastásico, mieloma múltiple, hiperproteinemia, diabetes mellitus, insuficiencia renal,
estrés, intoxicación por plomo y deshidratación por tratamiento diurético, quimioterapia
antineoplasica, shock, toxemia del embarazo, artritis, ejercicio extenuantes, ayuno. Los
cetoacidos en los casos de cetoacidosis diabética o alcohólica pueden competir con el
ácido úrico por la excreción tubular y reducir así su eliminación.

2.3.1. Niveles disminuidos

Enfermedad de Wilson, Síndrome de Fanconi y Atrofia amarilla del Hígado, entre otras.

2.3.2. Factores que interfieren

 El estrés puede aumentar los niveles de ácido úrico.


 El uso reciente de contrastes radiológico puede disminuir los niveles
 Entre los productos que pueden aumentar los niveles se incluyen:
 Alcohol
 Cisplatino
 Ácido ascórbico
 Diazoxido
 Aspirina(dosis bajas)
 Diurético
 Cafeína
 Adrenalina
 Etambutol
 Levodopa

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 Metildopa
 Ácido Nicotínico
 Fenotiacinas
 Teofilinas

 Entre los que pueden reducir los niveles se encuentran.


 Allopurinol.
 Aspirina (dosis altas).
 Azatriopina (imuran).
 Clofibrato.
 Corticosteroides.
 Estrógenos.
 Infusiones de glucosa.
 Guaifenesina.
 Manitol.
 Probenecid.
 Warfarina.

2.3.3. Control de calidad tolerable

 Blanco < 0.05


 Sensibilidad 0.180-0220 mg/dl
 Linealidad Hasta 25 mg/dl
 Exactitud 0.94-1.06

2.3.4. Valores de referencia en suero o plasma

 Hombres 3.5- 7.2 mg/dl


 Mujeres 2.6- 6.0 mg/dl
 Orina 250-750 Mg./ 24 horas

2.3.5. Relación Ácido Úrico / Creatinina:

Para pacientes con artritis no gotosa la relación es de 0.21 a 0 .57

Los pacientes con gota presentan valores de más de 0.73

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Pacientes con uricemia asociados a otro desorden como leucemia, enfermedad por
depósito de glucógeno tienen una relación de 1.77 o más. Los individuos con deficiencia
total de hipo xantina guaninafosforribosiltransferasa tienen una relación ácido úrico /
creatinina 1.98 a 5.35.

Se ha observado una relación ácido úrico creatinina de 1.00 en muestras de orina


tomadas al azar en pacientes con insuficiencia renal aguda secundaria a una nefropatia
aguda por ácido úrico pero menor de 1 en pacientes con insuficiencia renal aguda debida
a otras causas.

2.3.6. Determinación Ácido Úrico

URICASA/PEROXIDASA

FUNDAMENTO

El ácido úrico presente en la muestra origina, según las reacciones un complejo coloreado
que se cuantifica por espectrofotometría

Ácido úrico + O2 + 2H20 uricasa Alantoína + CO2 + H2O2

2H202 + 4 – aminoantipirina + DCFS peroxidasa quinoaimina + 4H2O

PROCEDIMIENTO

 A temperar el reactivo a temperatura ambiente


 Pipetear:

Blanco Patron Muestra


Agua destilada 25 ul ------ -----
Patrón ácido úrico ------ 25 ul -----
Muestra ------ ------- 25 ul
Reactivo 1000 ul 1000 ul 1000 ul

 Agitar bien e incubar por 5 minutos a 37 grados o 10 minutos a temperatura


ambiente

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 Leer la absorbancia del patrón y de la muestra a 520 nm frente al blanco. Color


estable hasta 30 minutos

BILIRRUBINA total y directa

La bilirrubina, compuesto de degradación de la hemoglobina es captada por el hígado para


su conjugación y excreción en la bilis. Las alteraciones hepatocelulares u obstrucciones
biliares pueden provocar hiperbilirrubinemias.

La eritroblastosis fetal o anemia hemolítica del recién nacido es una patología provocada
por incompatibilidad materno-fetal en la que se produce una destrucción excesiva de
glóbulos rojos. Esto resulta en un severo aumento de la bilirrubina sérica con el
consecuente riesgo de difusión del pigmento al sistema nervioso central, por lo que la
determinación de la bilirrubina en estos niños recién nacidos resulta sumamente
importante. (Elevada NO CONJUGADA)

2.3.7. Factores que interfieren

 La hemólisis de la sangre y la lipemia pueden producir resultados erróneos.


 Fármacos que pueden aumentar los niveles de bilirrubina total:
 Allopurinol
 Adrenalina
 Esteroides anabólicos
 Meperidina
 Antibióticos
 Metildopa
 Antipalúdicos
 Morfina
 Ácido ascórbico
 Ácido nicotínico
 Clorpropamida
 Quinidina
 Colinergigos
 Anticonceptivos orales
 Diuréticos
 Sulfamidas
 Dextranos
 Vitamina A

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2.3.8. Niveles aumentados

 Síndrome de Dubin –Jhonson


 Eritroblastosis fetal
 Cirrosis
 Reacciones a fármacos
 Ictericia hemolítica
 Transfusión de un gran volumen de sangre
 Resolución de hematomas grandes
 Infiltración tumoral extensa del hígado
 Obstrucción del conducto biliar por tumor
 Inflamación, calculo biliar, traumatismo quirúrgico
 Anemia perniciosa
 Anemia drepanocitica
 Reacción transfusional
 Síndrome de Crigler-Najiar
 Anemia Hemolítica.

2.3.9. Control de calidad tolerable


 Linealidad Hasta 15 mg/dl

2.3.10. Valores normales

ADULTOS / ANCIANOS / NIÑOS


 Bilirrubina total hasta1.0 mg/dl
 Bilirrubina directa 0.1-0.25 mg/dl
 Bilirrubina indirecta 0.2-0.7 mg/d
 Bilirrubina total en el recién nacido 1-12 mg/dl
 Lactantes 1.5-3.0 mg/dl

2.3.11. Determinación Bilirrubinas:


Prueba fotométrica, Método modificado Jendrassik/Grof

3. FUNDAMENTO

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La bilirrubina reacciona con el ácido sulfanilico diazotado (DSA) formando un color rojo. La
absorbancia de este color a 546 nm es directamente proporcional a la concentración de la
bilirrubina en la muestra. Los gucoronidos de la bilirrubina solubles en agua reaccionan
directamente con DSA mientras la bilirrubina “indirecta” conjugada con albumina reacciona
solo en la presencia de un acelerador:

Bilirrubina total= bilirrubina directa + bilirrubina indirecta

Ácido sulfanilico + nitrito de sodio DSA


Bilirrubina + DSA directa Azobilirrubina DIRECTA
Bilirrubina + DSA + Acelerador Azobilirrubina TOTAL

PROCEDIMIENTO

Bilirrubina Total

 Pipetear:

Pipetear Blanco Muestra


TBR 1000 ul 1000 ul
TNR ---------- 1 gota

 Mezclar cuidadosamente, incubar 5 minutos

Muestra 100 ul 100 ul

 Mezclar, incubar a temperatura ambiente de 10 a 30 min a temperatura ambiente


 Leer la absorbancia de la muestra, frente al blanco

Bilirrubina Directa

Pipetear Blanco Muestra


DBR 1000 ul 1000 ul
DNR ----------- 1 gota

 Mezclar cuidadosamente, añadir muestra dentro de 2 minutos

Muestra 100 ul 100 ul

 Mezclar, incubar a temperatura ambiente exactamente 5 min.

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 Leer la absorbancia de la muestra, frente al blanco

COLESTEROL TOTAL

El colesterol es un esteroide de alto peso molecular que contiene una estructura


ciclopentanofenantreno el colesterol de la dieta se absorbe parcialmente y también se
sintetiza en el hígado y otros tejidos. El colesterol se transporta en el plasma en las
lipoproteínas. Se excreta a la bilis como tal o tras su transformación en ácidos biliares.

Las concentraciones elevadas de colesterol se asocian con un riesgo progresivamente


creciente de ateroesclerosis y enfermedad de las arterias coronarias.

3.1.1. Factores que interfieren:

 Durante el embarazo suelen observarse niveles elevados de colesterol.

 Entre los fármacos que pueden elevar los niveles de colesterol se incluyen: hormona
adrenocorticotrofica (ACTH), esteroides anabólicos, bloqueantes, Betaadrenergicos,
corticoesteroides, adrenalina, anticonceptivos orales, sulfamidas, diuréticos tiacidicos
y vitamina D.

 Entre los fármacos que pueden reducir los niveles de colesterol: allopurinol,
andrógenos, copuladores de las sales biliares, captopril, clopropamida, clofibrato,
colchicina, colestipol, eritromicina, isoniacida, lovastatina, neomicina oral, niacina y
nitratos.

NIVELES AUMENTADOS NIVELES DISMINUIDOS


 Hipercolesterolemia
 Mal absorción
 Hiperlipidemias
 Desnutrición Hipertiroidismo
 Hipotiroidismo
 Medicación Hipocolesterolemiante
 Diabetes mellitus descontrolada
 Anemia perniciosa
 Síndrome nefrítico
Enfermedad Hepática
 Embarazo
 Anemia
 Dieta rica en colesterol
 Sepsis
 Hipertensión
 Estrés
 Infarto de miocardio
 Aterosclerosis

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 Cirrosis biliar
 Estrés
 Nefrosis

3.1.2. Valores normales

Varían con la edad y el Laboratorio


 ADULTOS /ANCIANOS 150-200 mg/dl
 NIÑOS 120-200 mg/dl
 LACTANTES 70-175 mg/dl
 RECIEN NACIDOS 53-135 mg/dl

3.1.3. Determinación Colesterol total:

COLESTEROL OXIDASA/PEROXIDASA

FUNDAMENTO

Tanto el colesterol libre como el esterificado presente en la muestra originan, según


las reacciones acopladas, un complejo coloreado que se cuantifica por
espectrofotometría.

Colesterol esterificado + H2O col.esterasa Colesterol + Acido Graso

Colesterol + ½ O2 + H2O col.oxidasa Colestenona + H2O2

2H2O2 + 4 – Aminoantipirina + Fenol peroxidasa Quinonaimina + 4H2O

PROCEDIMIENTO

 Atemperar el reactivo a temperatura ambiente


 Pipetear

Blanco Patron Muestra


Patron --------- 10 ul -----------
Muestra ---------- ----------- 10 ul
Reactivo 1000 ul 1000 ul 1000 ul

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 Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente o 5


minutos a 37 grados C.
 Leer la absorbancia del patrón y de la muestra a 500 nm frente al blanco. El color
es estable durante al menos 2 horas.

COLESTEROL HDL (LIPOPROTEÍNAS)

Las HDL participan en la captación del colesterol de los tejidos y en su transporte hacia el
hígado en donde se elimina en forma de ácidos biliares.
Existe una correlación positiva entre concentraciones bajas de HDL-colesterol en plasma y
la incidencia de arterosclerosis, base del infarto de miocardio y accidentes cerebro
vasculares.

Existen diversos estados patológicos o influencias ambientales asociados con niveles


reducidos de HDL: enfermedades hepatocelulares agudas o crónicas, hiperalimentacion
intravenosa, malnutrición severa, diabetes, anemia crónica, alteraciones
mieloproliferativas, enfermedad de Tangier, analfalipoproteinemia, estrés agudo, algunos
medicamentos y el tabaco.

Las proteínas VLDL suelen expresarse como porcentaje de colesterol total. Las cifras
superiores al 25-50% se asocian con mayor riesgo de enfermedad coronaria. Las LDL se
calculan restando del colesterol total las HDL menos un quinto de los triglicéridos.

VLDL= Triglicéridos/5
LDL= Colesterol total – HDL- VLDL (triglicéridos/ 5)

3.1.4. Factores que interfieren

 El tabaco y la ingesta de alcohol disminuyen los niveles de HDL


 Las excesivas ingestas de alimentos pueden alterar los valores de lipoproteínas.
 El ejercicio puede aumentar los niveles de HDL.
 Entre los fármacos capaces de aumentar los niveles de lipoproteínas se incluyen
aspirina, anticonceptivos orales, fenotiacinas, esteroides, y sulfamidas.

3.1.5. Resultados anormales


 Mal absorción.
 Ingestión aumentada de alimentos grasos y grasas animales.

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 Desnutrición Hiperlipemia LDL Y VLDL LDL Y VLDL.


 Riesgo aumentado de enfermedad cardiaca arteriosclerótica
 Enfermedad Hepática HDL.

3.1.6. Determinación Colesterol HDL:


FOSFOTUNGSTATO/Mg-COLESTEROL OXIDASA/PEROXIDASA

FUNDAMENTO

Las lipoproteínas de baja densidad (VLDL) y de baja densidad (LDL) presentes en la


muestra, precipitan en presencia de fosfotungstato y iones magnesio. El sobrenadante
contiene las lipoproteínas de elevada densidad (HDL), cuyo colesterol se cuantifica
espectrofotometricamente.

Colesterol eterificado + H2O col.esterasa Colesterol + Acido Graso

Colesterol + ½ O2 + H2O col.oxidasa Colestenona + H2O2

2H2O2 + 4 – Aminoantipirina + DCFS peroxidasa Quinonaimina + 4H2O

PROCEDIMIENTO:

Precipitación

 Pipetear en un tubo de centrifuga:

Muestra 0.2 mL o 200 ul


Reactivo 3.5. Ml o 500 ul

 agitar bien y dejar durante 10 minutos a temperatura ambiente.


 Centrifugar durante 10 minutos a un mínimo de 4000 r.p.m.
 Recoger con cuidado el sobrenadante.

Colorimetría

 Atemperar el Reactivo B a temperatura ambiente

 Pipetear en tubos de ensayo:

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Blanco Patrón Muestra


Agua Destilada 50 ul --------- ---------
Patrón de colesterol HDL ----------- 50 ul --------
(S)
Sobrenadante Muestra ----------- --------- 50 ul
Reactivo (B) 1000 ul 1000 ul 1000 ul

 Agitar bien e incubar los tubos durante 30 minutos a temperatura ambiente o


durante 10 minutos a 37 grados C.

 Leer la absorbancia del patrón y de la muestra a 500 nm frente al blanco. El color


es estable durante al menos 30 minutos

3.6. CREATININA

La creatinina es el producto final del catabolismo de la creatina (o fosfo creatina) la


cantidad producida diariamente está relacionada con la masa muscular la creatinina filtra
libremente por el glomérulo (pequeñas cantidades son reabsorbidas y también secretadas
por los túbulos renales).

La medición de creatinina tiene utilidad casi exclusivamente para la evaluación de la


función renal (percusión renal alterada, perdida de la función de las nefronas) y en la
monitorización de la diálisis renal.

3.6.1. Factores que interfieren

La lipemia puede interferir: La bilirrubina la hemoglobina y proteinas no interfieren.


Entre los fármacos que pueden aumentar los niveles de creatinina se incluyen
aminoglucosidos (p.ej Gentamicina), cimetidina, metales pesado ( p.ej. Cisplatino) y
fármacos nefrotoxicos como las cefalosporinas ( p. Ej cefoxitina).

NIVELES AUMENTADOS NIVELES DISMINUIDOS

 Glomerulonefritis  Estados de debilidad

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 Pielonefritis  Disminución de la masa muscular(p ej.


 Necrosis tubular aguda distrofia muscular, miastenia grave)
 Obstrucción del tracto urinario
 Disminución del flujo sanguíneo renal
(shock, deshidratación, insuficiencia
cardiaca congestiva)
 Diabetes
 Nefritis
 Rabdomiolisis
 Acromegalia
 Gigatismo

3.6.2. Valores normales


 MUJERES: 0.6-1.1 mg/dl
 HOMBRE: 0.9-1.3 mg/dl

3.6.3. Determinación Creatinina:

PICRATO ALCALINO

FUNDAMENTO

La creatinina presente en la muestra reacciona con el picrato alcalino originando un


complejo coloreado. Se mide la velocidad de formación de dicho complejo en periodos
iniciales cortos, evitándose así la interferencia de otros compuestos.

PROCEDIMIENTO

 Preparar el reactivo: mezclar en volúmenes iguales A y B.


 Precalentar el reactivo de trabajo y el instrumento a 37 grados C
 Pipetear

Reactivo de trabajo 1000 ul


Patrón o Muestra 100 ul

 Leer la absorbancia a 500 nm

GLUCOSA

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La glucosa es la principal fuente de energía del organismo. La insulina, producida en las


células de los islotes del páncreas, facilita la entrada de glucosa en las células de los
tejidos. Una deficiencia de insulina o una disminución de su actividad ocasionan un
aumento de la glucosa en sangre.

Se encuentran concentraciones elevadas de glucosa en suero o plasma en pacientes con


diabetes mellitus (dependiente de insulina o no dependiente de insulina) y con otras
condiciones o síndromes.

La hipoglucemia puede darse como respuesta al ayuno, o bien puede ser debida a
fármacos, venenos, errores congénitos del metabolismo o gastrectomía previa.

3.6.4. Intervalos de referencia

 En los niños menores de 5 años la glucosa es un 10 a 15 % inferior a la de los


adultos.
 Los recién nacidos pueden presentar concentraciones de glucosa sanguínea que
oscilan entre 20 a 80 mg /dl y los prematuros niveles aun más bajos.

3.6.5. Factores que interfieren:


 Muchas formas de estrés (p. Ej. Traumatismo, anestesia general, accidente cerebro
vascular, infarto de miocardio) pueden incrementar los niveles séricos de glucosa.
 La cafeína también puede elevarlos.
 Entre los fármacos que pueden incrementar los niveles se incluyen antidepresivos
(triciclicos), corticoesteroides ,infusión IV de dextrosa, dextro tiroxina, diuréticos,
adrenalina. Estrógenos, glucagos, isoniacida, litio fenotiacinas, salicilatos.
 Los fármacos que hacen disminuir los niveles son acetaminofeno, alcohol esteroides
anabólicos, clofibrato disopiramida, gemfibrozil, insulina, propanolol, tolazamida y
tolbutamida.

3.6.6. Resultados anormales

NIVELES AUMENTADOS NIVELES DISMINUIDOS


 Diabetes Mellitus  Insulinoma
 Respuesta al estrés agudo  Hipotiroidismo
 Feocromocitoma  Hipopituitariasmo
 Hiperparatiroidismo  Enfermedad de Adisson
 Enfermedad de Cushing  Enfermedad Hepática extensa
 Adenoma del páncreas

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 Pancreatitis
 Tratamiento diurético
 Tratamiento corticoesteroide
 Acromegalia

3.6.7. Valores normales

 Sangre del cordon 45-96 mg/dl


 Lactantes prematuros 20-60 mg/dl
 Recien nacidos 30-60 mg/dl
 Lactantes 40-90 mg/dl
 Niños menores de 2 años 60-100 mg/dl
 Niños mayores de 2 años y adultos 70-105mg/dl
 ANCIANOS Aumento del rango después
de los 50 años

3.6.8. Posibles valores criticos

 Hombres adultos < 50 y > 400 mg/dl


 Mujeres adultas < 40 y > 400 mg/dl
 Lactantes < 40 mg/dl
 Recien nacidos < 30 y >300 mg/dl

3.6.9. Determinación Glucosa:

GLUCOSE OXIDASE/PEROXIDASE

FUNDAMENTO
FUNDAMENTO

La glucosa presente en la muestra origina, según las reacciones acopladas forma un


complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometría.

Glucosa + ½ O2 + H20 glucosa oxidasa gluconico +H202

2H2O2 + 4 – Aminoantipirina + Fenol peroxidasa Quinonaimina + 4H2O

PROCEDIMIENTO

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 Atemperar el reactivo a temperatura ambiente


 Pipetear

Blanco Patron Muestra


Patrón -------- 10 ul ----------
Muestra --------- --------- 10 ul
Reactivo 1000 ul 1000 ul 1000 ul

 Agitar bien e incubar los tubos durante 10 min a temperatura ambiente o 5 min a
37 grados C
 Leer la absorbancia del patrón y muestra a 500 nm frente al blanco

GLICEMIA PRE Y POST

3.6.10. La glicemia post prandial es una prueba de fácil realización:


 Administrar 75 grs de glucosa
 Determinar: Glicemia basal y glucosa post carga a las dos horas

3.6.11. TEST DE TAMIZAJE DE O’ SULLIVAN


 Se realiza durante las semanas 20 – 25 de gestación.
 Administrar 75 grs diluidos en 200 ml de agua
 Determinar la glucosa a la hora
 No se requiere glicemia basal

3.6.12. CURVA DE GLICEMIA


 Administrar 75 grs de glucosa (100 grs. lo solicita el medico)
 Tomar muestras
 Basal
 Media hora
 A la hora
 A las dos horas
 A las tres horas

TRIGLICÉRIDOS

Los triglicéridos son esteres de glicerol y ácidos grasos que provienen de la dieta o son
sintetizados principalmente en el hígado. Los triglicéridos se transportan en el plasma en

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las lipoproteínas y son utilizados por el tejido adiposo, músculo y otros. Su principal
función es suministrar energía a la célula.

Las concentraciones elevadas en suero pueden ser debidas a alteraciones hepatobiliares,


diabetes mellitus, nefrosis, hipotiroidismo, alcoholismo, hiperlipoproteinemia familiar IV y
V y otras.

3.6.13. Factores que interfieren


 La ingestión de alimentos grasos pueden elevarlos valores de triglicéridos.
 La ingestión de alcohol puede incrementar los valores.
 Los niveles pueden estar aumentados durante el embarazo.
 Entre los fármacos que pueden aumentar los niveles de triglicéridos se
incluyen: colestiramina, estrógenos y anticonceptivos orales.
 Entre los fármacos que pueden disminuir los niveles de triglicéridos se incluyen
ácido ascórbico, esparraguinaza, clofibrato y colestipol.

3.6.14. Niveles aumentados


 Enfermedad con almacenamiento de glucógeno
 Hiperlipidemias
 Hipotiroidismo
 Dieta rica en carbohidratos
 Diabetes mal controlada
 Riesgo de enfermedad coronaria y vascular periférica oclusiva arteriosclerótica.
 Síndrome nefrótico
 Hipertensión
 Cirrosis alcohólica
 Embarazo Infarto de miocardio

3.6.15. Niveles disminuidos


 Síndrome de mala absorción
 Hipertiroidismo
 Desnutrición

3.6.16. Valores normales


 ADULTOS /ANCIANOS HOMBRES: 40-160 mg/dl
 MUJERES: 35-135mg/dl

Existen varios valores importantes para la toma de decisiones que deben ser recordados
por razones médicas específicas.

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 Entre 250- 500 mg/dl riesgo elevado de enfermedad coronaria


 Más de 500 mg/dl riesgo elevado de pancreatitis.
 5.000mg/dl riesgo elevado de xantomas eruptivos, hepatomegalia,
esplenomegalia y lipemia retiniana.

3.6.17. Determinación Triglicéridos:

GLICEROL FOSFATO OXIDASA/PEROXIDASA

FUNDAMENTO

Los triglicéridos presentes en la muestra originan, según las reacciones acopladas


descritas a continuación, un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometría.

Triglicéridos + H2O lipase Glicerol + Ácidos adiposos

Glicerol + ATP Glicerol Kinase Glicerol – 3 – p + ADP

Glicerol – 3 – P + O2 G-3-P-oxidase Dihidroxi acetona – P + H2O2

2 H2O2 + 4 – Aminoantipirina+4 – clorofenol peroxidase quinonaimina + 4H2O

PROCEDIMIENTO

 Atemperar el reactivo a temperatura ambiente


 Pipetear

Blanco Patrón Muestra


Patrón --------- 10 ul --------
Muestra --------- --------- 10 ul
Reactivo 1000 ul 1000 ul 1000 ul

 Agitar bien e incubar los tubos durante 15 min a temperatura ambiente o 5 min a
37 grados C.
 Leer la absorbancia del patrón y muestra a 500 nm frente al blanco

NITRÓGENO UREICO /UREA

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La urea constituye la fracción de nitrógeno no proteico más importante en la mayoría de


los líquidos biológicos. En el hombre es el principal producto final del metabolismo
proteico. Se produce en el hígado y es excretada por la orina a través de los riñones.

Una elevación de la concentración sérica de urea, se interpreta generalmente como una


posible disfunción renal. Sin embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los valores
séricos de urea se encuentran íntimamente relacionados con la dieta y el metabolismo
proteico. Por lo que cualquier alteración en estas variables se traducirá en un cambio de la
concentración de urea en suero.

3.6.18. Factores que interfieren

 Cambios en la ingesta de proteínas pueden afectar los niveles NUS.


 La cifra de NUS puede aumentar al final del embarazo.
 La hiperhidratacion y la deshidratación afectaran los niveles.
 Entre los fármacos que pueden aumentar los niveles de NUS se incluyen:
Alluprinol, amino glucósidos, cefalosporinas, hidrato de cloral, cisplatino,
furosemida, guanetidina, indometacina, metotrexato, metildopa, fármacos
nefrotoxicos, anfotericina , aspirina, bacitracina, gentamicima.
 Entre los fármacos que pueden disminuir el NUS están: Cloramfenicol y la
estreptomicina.

3.6.19. Niveles aumentados

 Enfermedad renal (glomérulo nefritis, píelo nefritis, necrosis tubular aguda)


 Obstrucción urinaria
 Hipovolemia
 Shock
 Insuficiencia cardiaca congestiva
 Quemaduras
 Catabolismo proteico excesivo
 Hemorragia gastrointestinal
 Infarto de miocardio
 Insuficiencia renal
 Fármacos Nefrotoxicos
 Ingestión excesiva de proteínas
 Deshidratación
 Ayuno

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3.6.20. Niveles disminuidos


 Insuficiencia Hepática
 Hiperhidratacion
 Balance de nitrógeno negativo
 Embarazo

3.6.21. Valores normales


 Adultos 10-20mg/dl
 Niños 5-18 mg/dl
 Recién nacidos 3-12 mg/dl
 Sangre del cordón 21-40 mg/dl
 Valores críticos > 100 mg/dl (GRAVE AFECCIÓN DE LA
FUNCION RENAL)

3.6.22. Determinación BUN / Urea:

UREASA/SALICILATO

FUNDAMENTO

La urea presente en la muestra origina, según las reacciones descritas a continuación, un


indofenol coloreado que se cuantifica por espectrofotometría

Urea + H2O ureasa 2NH4 + CO2

NH4 + Salicilato + NaCIO nitroprusiato Indofenol

PROCEDIMIENTO

 Atemperar los reactivos a temperatura ambiente


 Pipetear

Blanco Patron Muestra


Patron --------- 10 ul ----------
Muestra --------- -------- 10 ul
Reactivo (A) 1000 ul 1000 ul 1000 ul

 Agitar bien e incubar 10 min a temperatura ambiente 0 5 minutos a 37 grados C

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 Pipetear

Reactivo (B) 1000 ul 1000 ul 1000 ul

 Agitar bien, incubar 10 min a temperatura ambiente o 5 min a 37 grados C


 Leer la absorbancia del patrón y muestra a 600 nm frente al blanco, el color es
estable durante al menos 2 horas

4. VALORES DE REFERENCIA

EXAMEN HOMBRES MUJERES

 Acido úrico 3.5 – 7.2 mg/dl 2.6 – 6.0 mg/dl


 Bilirrubina Total Hasta 1.0 mg/dl Hasta 1.0 mg/dl
 Bilirrubina Directa Hasta 0.2 mg/dl Hasta 0.2 mg/dl
 Bilirrubina Indirecta Hasta 0.8 mg/dl Hasta 0.8 mg/dl
 Colesterol Total Hasta 200 mg/dl Hasta 200 mg/dl
 Colesterol HDL Mayor a 35 mg/dl Mayor a 35 mg/dl
 Colesterol LDL Menor de 150 mg/dl Menor de 150 mg/dl
 Colesterol VLDL Hasta 30 mg/dl Hasta 30 mg/dl
 Creatinina 0.9 – 1.3 mg/dl 0.6 – 1.1 mg/dl
 Glucosa 70 – 105 mg/dl 70 – 105 mg/dl
 Nitrógeno Ureico (BUN) 7 – 18 mg/dl 7 – 18 mg/dl
 Triglicéridos Hasta 250 mg/dl Hasta 250 mg/dl
 Urea 15 – 39 mg/dl 4. – 39 mg/dl

4.1 MICROALBUMINURIA- TURBIDIMETRIA

4.1.1 FISIOPATOLOGÍA

La microalbuminuria es marcadora de una enfermedad renal incipiente, aunque todavía no


de manifestaciones clínicas, ya que en todos los casos el riñón sano no excreta proteínas.
Las dos enfermedades que originan microalbuminuria más frecuentemente son la Diabetes
Mellitus y la hipertensión arterial

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4.1.2 FUNDAMENTO

Las partículas de látex sensibilizadas con anti-albúmina humana, son aglutinadas cuando
reaccionan con la albúmina presente en la muestra. La aglutinación de las partículas de
látex es proporcional a la concentración de albúmina en la muestra y puede ser medida
por turbidimetría.

4.1.3 COMPOSICION DE LOS REACTIVOS

R1 Diluyente. Tampón glicina, 100 mmol/L; pH 10,0.


R2 Látex. Suspensión de partículas de látex sensibilizadas con IgG de cabra anti-
albúmina humana, pH 8,2.
CAL Calibrador. Albúmina humana. La concentración de albúmina está indicada en la
etiqueta del vial y es trazable al Material de Referencia Certificado BCR 470 (IRMN).

Precauciones: Los reactivos del kit contienen azida sódica 0,95 g/L. Evitar contacto con
piel y mucosas.
Los componentes del kit de origen humano han dado resultado negativo frente a
anticuerpos de HIV 1/2, HBsAg y anti-HCV. Sin embargo se recomienda tomar
precauciones durante su uso.

4.1.4 PREPARACION DE LOS REACTIVOS

R1 Listo para su uso.


R2 Listo para su uso. Mezclar suavemente antes de usar.
CAL Listo para su uso.
Reactivo de trabajo. Mezclar el reactivo de látex y el diluyente en una proporción 1:5
(p. e. 2 mL de látex + 8 mL de diluyente) antes de usar.

4.1.5 ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD

1. Todos estos reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta
del vial, cuando se mantienen bien cerrados a 2-8ºC y se evita la contaminación durante
su uso. No usar los reactivos una vez caducados.
2. El reactivo de trabajo es estable 7 días a 2-8ºC. Agitar suavemente antes de usar. .
3. Indicadores de deterioro de los reactivos: Presencia de partículas y turbidez.

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4.1.6 MUESTRAS

Orina fresca. Se recomienda ajustar el pH a 7,0 con NaOH 1 mol/L . Estable 7 días a 2-8ºC
cuando se le añade azida sódica 1 g/L para evitar contaminaciones. Centrifugar las
muestras de orina antes de usar.

4.1.7 EQUIPO ADICIONAL

- Baño Serologico a 37ºC.


- Espectrofotómetro o fotómetro con cubeta termostatizable a 37ºC para lecturas a 540 ±
20 nm.

4.1.8 TECNICA

Procedimiento preliminar Precalentar el reactivo de trabajo y el fotómetro (portacubetas) a


37 ºC.

4.1.9 PROCEDIMIENTO ANALÍTICO

1. Ajustar el cero del instrumento a 540 nm con agua destilada.


2. Pipetear en una cubeta: Muestra/ Calibrador 7 µL Reactivo de Trabajo 1,0 mL
3. Mezclar e insertar la cubeta en el fótometro. Leer la absorbancia inmediatamente (A1) y
a los 2 minutos (A2) de la adición de la muestra.

Calculos

(A2-A1) muestra
———————- x conc.CAL = mg/L albúmina
(A2-A1) calibrador

CONTROL DE CALIDAD

Se recomienda utilizar el control de orina MicroalbuminTurbidimetric Control (ref:


3945010) de Linear para controlar los ensayos tanto en procedimiento manual como en
automático. Cada laboratorio debería establecer su propio Control de Calidad y establecer
correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias exigidas.

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2.12 POTASIO

2.12.1 Papel biologico

El potasio es el catión mayor del líquido intracelular del organismo humano. Está
involucrado en el mantenimiento del equilibrio normal del agua, el equilibrio
osmótico entre las células y el fluido intersticial y el equilibrio ácido-base, determinado por
el pH del organismo. El potasio también está involucrado en la contracción muscular y la
regulación de laactividad neuromuscular, al participar en la transmisión del impulso
nervioso a través de los potenciales de acción del organismo humano. Debido a la
naturaleza de sus propiedades electrostáticas y químicas, los iones de potasio son más
pequeños que los iones de sodio, por lo que los canales iónicos y las bombas de las
membranas celulares pueden distinguir entre los dos tipos de iones; bombear activamente
o pasivamente permitiendo que uno de estos iones pase, mientras que bloquea al otro. El
potasio promueve el desarrollo celular y en parte es almacenado a nivel muscular, por lo
tanto, si el músculo está siendo formado (periodos de crecimiento y desarrollo) un
adecuado abastecimiento de potasio es esencial. Una disminución importante en los
niveles de potasio sérico (inferior 3,5 meq/L) puede causar condiciones potencialmente
fatales conocida como hipokalemia, con resultado a menudo de situaciones
como diarrea, diuresis incrementada, vómitos y deshidratación.
La hiperkalemia, o aumento de los niveles de potasio por encima de 5,5 meq/L, es uno de
los trastornos electrolíticos más graves y puede ser causado por aumento del aporte (oral
o parenteral: vía sanguínea), redistribución (del líquido intracelular al extracelular) o
disminución de la excreción renal. Por lo general, las manifestaciones clínicas aparecen
con niveles mayores a 6,5 meq/L, siendo las principales: cardiovasculares: con cambios en
el electrocardiograma, arritmias ventriculares y asístole (paro cardíaco), a nivel
neuromuscular: parestesias, debilidad, falla respiratoria y a nivel gastrointestinal náuseas y
vómitos.

2.12.2 linealidad y sensibilidad

La linealidad del método liquirapid POTASSIUM se controló mediante el empleo de un


suero de piscina alta concentración y diluciones con Phys. Salina. Las concentraciones
analizadas se calcularon vs la línea de regresión. La desviación de la línea de regresión se
expresan en valores absolutos y relativos.

Sensibilidad

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A partir de la desviación estándar media de la sección 1.2. (0,179 mmol / l) una


sensibilidad se puede calcular a:
Sensibilidad: 3 * SD = 0,537 [mmol / l]

2.12.3 Interferencias
Las interferencias debidas a ictérico, hemolítica, las muestras lipémicas, y muestras con
ascorbato se han estudiado mediante la adición bilirrubina, hemoglobina, triglicéridos y
ascorbato a un pool de suero normal. Los resultados se resumen en la siguiente tabla.
Las recuperaciones se han analizado según el método de Glick et al. (Clin.Cem. 1986, 32
470-5).

3.12.4 Estabilidad
La estabilidad del examen de potasio liquirapid ha sido confirmado por estudios de
estabilidad en tiempo real en 4 independientes lotes de producción. Los resultados se
resumen a continuación.

3.12.5 Trazabilidad
La prueba liquirapid potasio tiene que ser calibrado con un estándar. La concentración de
potasio se ha verificadocon el material de referencia SRM 909 B. El POTASIO liquirapid
reveló recuperación de pozos dentro de la reproducibilidad límites del método.

2.13 DEPURACION DE CREATININA

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2.13.1 FUNDAMENTO DEL METODO


La creatinina en solucion alcalina forma un complejo coloreado rojo-naranja con acido
picrico. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la concentracion
de cretinina en la muestra.
2.13.2 PRINCIPIO
Creatinina + acido Picrico complejo creatinina –picrato
2.13.3 PROCEDIMIENTO

El paciente recolecta una muestra de orina de 24 horas,( DIA 1: se descarta la primera


orina de lamañana y se empieza a recolectar en el frsco desde la segunda orina, el
trancurso del dia tarde y noche. Dia 2 se recoge hasta la primera orina de la mañana) se
le facilita un recipiente de boca ancha plastico de 2 o 3 L, se le da las indicaciones del
caso como lo de la refrigeracion, no exponerla a la luz y traerla al laboratorio lo mas
pronto posible. Una vez en el laboratorio , el personal auxiliar, mide el volumen de
muestra y saca una porcion para ser procesada en el equipo BTS 350.

 Preparar el reactivo: mezclar en volúmenes iguales A y B.


 Precalentar el reactivo de trabajo y el instrumento a 37 grados C
 Pipetear

Reactivo de trabajo 1000 ul


Patrón o Muestra Orina 100 ul
2.13.4 CALCULOS

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2.14 PROTEINURIA 24 HORAS.


2.14.1 FUNDAMENTO DEL METODO
el metodo mide el desplazamiento del pico maximo, de absorcion de 460 a 600nm del
complejo formado a ph acido entre el rojo pirogalol-molibdato(RPM) y los grupo amino
basicos de las proteinas de la orina y del liquido cefaloraquideo . la intensidad del
complejo coloreado formado es proporcional a la oncentracion de proteina en la muestra.
2.14.2 PRINCIPIO

RPM + Proteina Orina/LCR Complejo RPM-proteina

2.14.3 PROCEDIMIENTO

2.14.4 CALCULOS

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2.15 HEMOGLOBINA GLICOSILADA


La prueba de hemoglobina glicosilada (HbA1c) es un examen de sangre para
la diabetes tipo 2 y prediabetes. Mide el nivel promedio de glucosa o azúcar en la
sangre durante los últimos tres meses. Los médicos pueden usar la prueba HbA1c
sola o en combinación con otras pruebas de diabetes para hacer un diagnóstico.
También utilizan la HbA1c para ver lo bien que está manejando su diabetes. Esta
prueba es diferente a los controles de azúcar en la sangre que las personas con
diabetes se hacen todos los días.

El resultado de su prueba HbA1c se entrega en porcentajes. Mientras más alto sea el


porcentaje, mayor es su nivel de azúcar en la sangre:

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 Un nivel de HbA1c normal es menor al 5,7 por ciento


 La prediabetes se ubica entre 5,7 a 6,4 por ciento. Tener prediabetes es un factor
de riesgo para desarrollar diabetes tipo 2. Las personas con prediabetes pueden
necesitar repetir las pruebas cada año
 La diabetes tipo 2 se ubica por encima del 6,5 por ciento.

4.1.1 Clover A1c – Principio de la prueba

El cartucho de prueba Clover A1c incluye un cartucho y un paquete de reactivo que


contiene los reactivos necesarios para la determinación de la hemoglobina A1c, con una
pierna de recogida para la recogida de muestras de sangre.

El paquete de reactivos se pre-llena con una solución de reacción y una solución de


lavado. La solución de reacción contiene agentes que lisan los eritrocitos y se unen
hemoglobina específicamente, así como una resina de boronato que se une cis-dioles de la
hemoglobina glucosilada.

Una muestra de sangre de 4μl se obtiene en la pierna colección del paquete de reactivo. El
paquete de reactivo se inserta en el cartucho donde la sangre se lisa de inmediato la
liberación la hemoglobina y la resina de boronato de unión a la hemoglobina glucosilada..

El cartucho se inserta en el Clover A1c Analyzer. La mezcla de muestra de sangre se hace


girar a la zona de medición del cartucho, donde la cantidad de total de
la hemoglobina es la muestra de sangre se mide la reflectancia del LED fotosensor (Diodo
emisor de luz) y PD (foto Diode).

A continuación, el cartucho montado se gira de manera que la solución de lavado se lava a


cabo hemoglobina no glicada de la muestra de sangre, así la cantidad de glucosilada La
hemoglobina se puede medir fotométricamente.

La relación de la hemoglobina glicada con respecto a hemoglobina total en la muestra de


sangre se calcula.

5. BIBLIOGRAFIA

 OMS-1992, Normas sobre Bioseguridad.

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 INSTITUTO NACIONAL DE SALUD-1986 , Manual de procedimientos Química


Clínica y Orinas.

 INSTITUTO NACIONAL DE SALUD-1991 , Manual de Garantía de Calidad.

 ORGANIZACION PARAMERICANA DE LA SALUD-1983, Manual de Técnicas básicas


para un laboratorio de salud

 http://hospitalroviratolima.gov.co/Descargas/Microsoft%20Word%20%20protocolo
s%20de%20laboratorio.pdf

 http://asp.salud.gob.sv/regulacion/pdf/manual/Manual_procedimientos_lab_clinico.
pdf

 http://www.linear.es/ficheros/archivos/196_3150005MAcas.pdf

 https://es.wikipedia.org/wiki/Potasio#Papel_biol.C3.B3gico

 https://translate.google.com.co/translate?hl=es-
419&sl=en&u=http://www.human.de/data/gb/vr/ey-k.pdf&prev=search

OBSERVACIONES

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