28/03/2019

METABOLISMO DE HIDRATOS DE
CARBONO

• Cátedra de Bioquímica.
• Facultad de Ciencias Médicas.
• Universidad Nacional del Comahue.

METABOLISMO DE HIDRATOS DE
CARBONO II

1
 28/03/2019

CATABOLISMO AERÓBICO
DEL PIRUVATO

Descarboxilación oxidativa del

piruvato

Ciclo
de los ácidos tricarboxílicos o
de Krebs

Cadena mitocondrial de transporte

de e- y fosforilación oxidativa

Mitocondria

2
 28/03/2019

Reacciones redox
• Reducción:
– Ganancia de electrones
– Ganancia de átomos de H2
– Disminución de enlaces con el O2

• Oxidación:
– Pérdida de electrones
– Perdida de átomos de H2
– Aumento de enlaces con el O2

Transferencia de electrones de una

molécula a otra
• Directamente como e-
• En forma de átomos de H2
• En forma de ión hidruro :H-
• A través de combinación directa con el O2

Equivalente de reducción: equivalente de e- que

participa en reacción redox.

3
 28/03/2019

• Las enzimas que catalizan reacciones de oxido-

reducción en el organismo se denominan

DESHIDROGENASAS

Se asocian a
coenzimas de oxidoreducción

Coenzimas de oxidorreducción

NAD+ / NADH + H+

En el NADP+ este OH es NADP+ / NAPDH + H+

esterificado con fosfato

4
 28/03/2019

Coenzimas de oxidorreducción

Ribitol

Adenina

FAD /FADH2
Ribosa FMN / FMNH2

Decarboxilación oxidativa
del piruvato

Complejo Piruvato
deshidrogenasa (E1, E2, E3)
Piruvato
(3 carbonos) Acetil (2 C)

5
 28/03/2019

El piruvato entra a la mitocondria por

un transportador

Complejo piruvato deshidrogenasa

Formado por varias copias de 3 enzimas:
E1: piruvato descarboxilasa E2: dihidrolipoil
transacetilasa E3: dihidrolipoil deshidrogenasa

Con 5 coenzimas

Pirofosfato de tiamina
Ácido lipoico
Coenzima A
FAD
NAD+

6
 28/03/2019

Coenzima A

Coenzima A:
Es un transportador de grupos acilo
Se une por un enlace Tioéster

El acetil CoA es un grupo acetilo activado

Etapas de la reacción

Ac lipoico
oxidado

Ac lipoico
oxidado
Ac lipoico
reducido

7
 28/03/2019

Regulación del complejo

Piruvato Deshidrogenasa
• Alostérica o por competencia
– Inhibida por:
ATP, NADH, AcetilCoA
+ Activada por
ADP, AMP
• Covalente: fosfo/desfosforilación
– PDH quinasa: la fosforila y la inhibe
+ PDH fosfatasa: la activa

• Insulina activa fosfatasa =>

activa al complejo PDH

Lo que activa a la fosfatasa

activa a la PDH

• La fosfatasa se activa por

– Calcio
– Insulina

8
 28/03/2019

Inactiva

Activa

9
 28/03/2019

El AcetilCoA es una encrucijada metabólica

Piruvato Ácidos grasos Aminoácidos

AcetilCoA

Ác. grasos y
Ciclo de Krebs Cuerpos esteroles
cetónicos

Oxidación del acetato activo

10
 28/03/2019

Ciclo de Krebs
AcetilCoA

Citrato, isocitrato

Oxalacetato

Malato

Fumarato
α-cetoglutarato

Succinato

Succinil CoA

Citrato
sintasa

Malato Aconitasa
deshidrogenasa

Fumarasa Aconitasa

Succinato Isocitrato
deshidrogenasa
deshidrogenasa

SuccinilCoA
sintetasa

Alfa cetoglutarato
deshidrogenasa

11
 28/03/2019

Regulación del Ciclo de Krebs

Por disponibilidad de sustratos

Inhibición por los productos acumulados

Inhibición
alostérica de las primeras
deshidrogenasas del ciclo (por ATP y NADH)

Enzimas regulatorias

12
 28/03/2019

Reacción catalizada por la

Citrato sintasa

Citrato
sintasa

4C 6C
2C

Reacción catalizada por la

Isocitrato deshidrogenasa

Isocitrato
deshidrogenasa

6C 5C

13
 28/03/2019

Reacción catalizada por la

Isocitrato deshidrogenasa (pasos)

Primero se oxida el OH a C=O

Luego se decarboxila el COO- del C 3

Reacción catalizada por la

α Cetoglutarato Deshidrogenasa

Complejo
α-cetoglutarato
deshidrogenasa

4C
5C

Complejo de tres enzimas.

Cinco co-enzimas: TPP, CoA, lipoato, FAD y NAD+

14
 28/03/2019

Regulación Citrato sintasa

del Ciclo de NADH

Krebs
Isocitrato
deshidrogenasa

ATP
α- cetoglutarato
deshidrogenasa

El ciclo de Krebs es anfibólico

Otros
aminoácidos,
purinas y
pirimidinas

Ácidos grasos,
esteroles

Otros
Porfirinas, aminoácidos
grupo hemo

15
 28/03/2019

Reacciones anapleróticas del

ciclo de Krebs
⊕ AcetilCoA

Piruvato carboxilasa
Piruvato +CO2 +ATP oxalacetato + ADP + Pi
Biotina

PEP carboxiquinasa
Fosfoenolpiruvato +CO2 + GDP oxalacetato + GTP

enzima málica
Piruvato + CO2 + NADH + H+ malato + NAD+

Balance energético de la oxidación del

acetato en el ciclo de Krebs

• 1 ATP por fosforilación a nivel de

sustrato
• 9 ATP por oxidación de 3 NADH en la
cadena respiratoria
• 2 ATP por oxidación de 1 FADH2 en la
cadena respiratoria
TOTAL 12 ATP por Acetato

16
 28/03/2019

Balance energético de la Glucólisis en

condiciones aeróbicas

• 2 ATP por fosforilación a nivel del

sustrato
• 2 NADH que rinden 4 o 6 ATP en la cadena
transportadora de e- y fosforilación oxidativa

CADENA RESPIRATORIA
El transporte electrónico y la fosforilación oxidativa están acoplados.

En la primera mitad del siglo veinte se observó que los compuestos

como el dinitrofenol producían aumento de la tasa metabólica y
pérdida de peso.

Un grupo de médicos empezaron a administrar este compuesto a sus

pacientes obesos y muchos de ellos murieron.

17
 28/03/2019

Cadena transportadora de electrones

• Transfiere e- desde NADH y FADH2 al O2
• Constituida por transportadores de e- unidos a la
membrana interna de la mitocondria
• Son: Flavoproteínas, Ubiquinona (hidrofóbica),
proteínas ferrosulfuradas y citocromos
• Están ordenados de acuerdo al potencial de
reducción creciente
• Forman complejos multienzimáticos

Reacciones redox
• Reducción:
– Ganancia de electrones
– Ganancia de átomos de H2
– Disminución de enlaces con el O2

• Oxidación:
– Pérdida de electrones
– Perdida de átomos de H2
– Aumento de enlaces con el O2

18
 28/03/2019

Coenzimas de oxidorreducción

NAD+ / NADH + H+

En el NADP+ este OH es NADP+ / NAPDH + H+

esterificado con fosfato

Coenzimas de oxidorreducción

Ribitol

Adenina

FAD /FADH2
Ribosa FMN / FMNH2

19
 28/03/2019

Componentes de la cadena

Flavoproteínas
– Tienen como grupo prostético: FMN o
FAD

Proteínas Ferrosulfuradas:
– Tienen centros ferrosulfurados
– El Fe toma y cede e-: Fe3+ ↔ Fe2+

Ubiquinona o coenzima Q:
– Hidrofóbica,
Hidrofóbica, es una benzoquinona (R:50C)

– No unido a proteínas, móvil.

20
 28/03/2019

Citocromos (a, b , c):

– Son hemoproteínas.
hemoproteínas. El Fe del hemo
capta y cede e-
e-

– El potencial de cada citocromo

depende del entorno proteico.

– Los citocromos a tienen ión Cu cerca

del hemo A

21
 28/03/2019

GRUPOS HEMO de los CITOCROMOS a, b y c

Flujo de e- y H+ por los cuatro

complejos de la cadena respiratoria

Ubiquinona

Complejo I: Complejo II: Complejo III: Complejo IV:

NADH ubiquinona Succinato ubiquinona- Citocromo
oxidorreductasa deshidrogenasa citocromo c oxidasa
oxidorreductasa

22
 28/03/2019

Componentes proteicos de la cadena de transporte de electrones

Potencial de reducción
• Potencial de reducción (Eº) es la capacidad de
un compuesto, elemento o ión de ganar e-
frente a otros.
• Es una medida (en voltios) de la afinidad por
los electrones
• Si la tendencia a aceptar e- es fuerte el E° es
positivo

23
 28/03/2019

La variación de Energía libre es

proporcional al delta de potencial de
reducción

• ∆G’º = -n F ∆E’º
∆G’ = -n F ∆E’

n=nº de e- transferidos
F: constante de Faraday (96,49 kJ)

Potenciales de reducción estándar para transportadores de electrones

24
 28/03/2019

Complejo I
y
Complejo II

25
 28/03/2019

Orden de los transportadores

de la cadena mitocondrial

¿Cómo pasa el poder reductor

generado en glucólisis
del citosol
a la mitocondria?

26
 28/03/2019

Lanzadera del Glicerol P

Lanzadera del malato-aspartato

Citosol
Citosol Matriz

Matriz

27
 28/03/2019

Inhibidores de la Complejo I

cadena
Bloqueado
por rotenona
y amital
transportadora Complejo III

de e- Bloqueado por
antimicina A

Complejo IV
Bloqueado por
cianuro, azidas,
CO

Estructura de inhibidores de cadena

respiratoria

28
 28/03/2019

Fosforilación oxidativa
Síntesis de ATP
a partir de ADP y Pi
por la ATP sintasa mitocondrial

Modelo Quimiosmótico

29
 28/03/2019

ATP sintasa
Matriz

F1:
subunidades
α, β , δ, ε, γ

Fo:
subunidades
a, b, c

Espacio
intermembrana

Modelo de unión y cambio para la ATP sintasa

30
 28/03/2019

Relación P/O

ATP producido por O2 consumido.

Mayor para el NADH (3 o 2,5)
que para FADH2 (2 o 1,5)

Translocasas de nucleótido de adenina y de fosfato

Fosfato
inorgánico

31
 28/03/2019

El transporte de e- y la fosforilación oxidativa

están acopladas

Acción de los desacoplantes

32
 28/03/2019

Acción de la
termogenina en la
grasa parda

33
 28/03/2019

Efecto del inhibidor de la ATP sintasa (oligomicina

oligomicina))
y de un desacoplante

Regulación
del
catabolismo
aeróbico

34