230 Capitulólo Metabolismo: uso de la energía en la biosíntesis
esquema general de la biosíntesis de los aminoácidos. En los
Figura 10.16 Mecanismo de acción de la nitrogenasa. Esquema
del flujo de dos electrones desde la ferredoxina al nitrógeno. Este
proceso se repite tres veces con el fin de reducir el N2 a dos moléculas
de amoníaco. La estequiometn'a mostrada en la parte baja de la figura
incluye la reducción de los protones a H2. Véase el texto para una
explicación más detallada.
milado por la célula de la leguminosa circundante. La ruta
principal de la asimilación de amonio parece ser la síntesis
de glutamina por el sistema glutamina sintetasa-glutamato
sintetasa (Figura 10.11). Sin embargo, también se sintetizan
y utilizan para el transporte de nitrógeno a otras partes de la
planta sustancias tales como la alantoína y el ácido alantoi-
co, derivados de la purina.
10.5 Síntesis de aminoácidos
Los microorganismos varían según el tipo de fuente de nitró-
geno que emplean, pero la mayoría puede asimilar alguna
forma de nitrógeno inorgánico por las vías anteriormente
descritas. La síntesis de aminoácidos también requiere la
construcción de los esqueletos carbonados apropiados, la
cual a menudo es un proceso complejo en el que intervienen
numerosos pasos. Debido a la necesidad de nitrógeno, car-
bono y energía, las rutas de síntesis de aminoácidos suelen
estar fuertemente regladas por mecanismos alostéricos y de
retroalimentación (véase la sección 8.9). Aunque no se des-
criben de forma detallada las rutas biosintéticas de los dis-
tintos aminoácidos, merece la pena hacer una revisión del
libros de texto de introducción a la Bioquímica pueden
encontrarse más datos acerca de la biosíntesis de los amino-
ácidos.
En la Figura 10.17 se muestra la relación entre las
rutas biosintéticas de los aminoácidos y las rutas anfibóli-
cas. Los esqueletos de los aminoácidos proceden de la ace-
til-CoA y de productos intermedios del ciclo de los ATC, la
glucólisis y la ruta de las pentosas fosfato. Para alcanzar la
máxima eficacia y economía, los precursores de la biosínte-
sis de los aminoácidos provienen de unas pocas rutas anfi-
bólicas principales. Las secuencias que conducen a los dis-
tintos aminoácidos se ramifican a partir de estas rutas
centrales. La alanina, el aspartato y el glutamato se produ-
cen por transaminacion directamente a partir del piruvato, el
oxaloacetato y el a-cetoglutarato, respectivamente. La ma-
yoría de las rutas biosintéticas son más complejas, y en la
síntesis de familias de aminoácidos relacionados se utilizan
a menudo productos intermedios comunes con el fin de con-
seguir una mayor economía. Por ejemplo, los aminoácidos
lisina, isoleucina y metionina se sintetizan a partir de oxalo-
acetato mediante vías anabólicas ramificadas (Figura 10.18).
Las rutas biosintéticas para los aminoácidos aromáticos feni-
lalanina, tirosina y triptófano también comparten muchos
productos intermedios (Figura 10.19).
1. ¿Cómo asimilan los microorganismos el azufre y el
fósforo?
2. Describa los papeles de la glutamato deshidrogenasa, la
glutamina sintetasa, la glutamato sintetasa y las
transaminasas en la asimilación del amonio. ¿Cómo se
incorpora el nitrato mediante la reducción asimilatoria de
nitrato?
3. ¿Qué es la fijación de nitrógeno? Describa brevemente la
estructura y el mecanismo de acción de la nitrogenasa.
4. Resuma en términos generales la organización de la
biosíntesis de aminoácidos.
10.6 Reacciones anapieróticas
La Figura 10.17 muestra cómo los productos intermedios
del ciclo de los ATC se utilizan en la síntesis de pirimidinas
y de una amplia variedad de aminoácidos. De hecho, las
funciones biosintéticas de esta vía son tan esenciales que la
mayor parte de ella debe operar de forma anaerobia para
proporcionar precursores biosintéticos, aunque no se requie-
re NADH para el transporte de electrones ni para la fosfori-
lación oxidativa en ausencia de oxígeno. Por tanto, el ciclo
de los ATC está sometido a una gran demanda para suminis-
trar carbono para la biosíntesis, y los productos intermedios
podrían agotarse si no se hiciera nada para mantener sus
niveles. Sin embargo, los microorganismos tienen reaccio-
nes que reponen los productos intermedios del ciclo de
 10.6 Reacciones anapleróticas 231

Figura 10.17 Organización del anabolismo. Los productos biosintéticos (en azul) provienen de productos intermedios de rutas anfibólicas. Dos
importantes reacciones anapleróticas de fijación de CO2 se muestran en rojo.

forma que el ciclo de los ATC puede continuar funcionando
mientras está teniendo lugar una biosíntesis activa. Las reac-
ciones que reponen los productos intermedios del ciclo reci-
ben el nombre de reacciones anapleróticas [del griego ana-
plerotic, que rellena].
La mayoría de los microorganismos puede reponer los
productos intermedios del ciclo de los ATC mediante fijación
de CO2, por el cual el CO2 inorgánico es convertido en carbo-
no orgánico y asimilado. Debe resaltarse que las reacciones
anapleróticas no tienen la misma función que la vía de la fija-
ción de CO2 que suministra el carbono necesario para los auto-
trofos. En éstos, la fijación de CO2 proporciona la mayor parte
o todo el carbono necesario para el crecimiento. Las reaccio-
nes de fijación de CO2 anapleróticas simplemente reponen los
productos intermedios del ciclo de los ATC, manteniendo así
el equilibrio metabólico. Generalmente se añade CO2 a una
molécula aceptora, piruvato o fosfoenolpiruvato, para formar
el producto intermedio del ciclo, oxaloacetato (Figura 10.17).
Algunos microorganismos (p. ej., Arthrobacter globiformis,
levaduras) utilizan la piruvato carboxilasa para esta función.
232 Capitulólo Metabolismo: uso de la energía en la biosíntesis
Figura 10.18 Ruta ramificada de la síntesis de aminoácidos.
Rutas hasta metionina, treonina, isoleucina y Usina. Aunque algunas
flechas representan un paso, la mayoría de las interconversiones
requieren la participación de varias enzimas.
biotina
Piruvato + CO2 + ATP + H2O
----------------------------------------------------
>
oxaloacetato + ADP + P¡
Esta enzima requiere el cofactor biotina y utiliza energía en
forma de ATP para enlazar el CO2 y el piruvato. La biotina a
menudo es el cofactor de enzimas que catalizan reacciones
de carboxilación. Debido a su importancia, la biotina es una
Figura 10.19 Síntesis de aminoácidos aromáticos. Síntesis de los
aminoácidos aromáticos fenilalanina, tirosina y triptófano. La mayoría
de las flechas representa más de una reacción enzimática.
vitamina para muchas especies. Otros microorganismos,
tales como las bacterias Escherichia coli y Salmonella typhi-
muriwn, tienen la enzima fosfoenolpiruvato carboxilasa, que
cataliza la siguiente reacción.
Algunas bacterias, algas, hongos y protozoos pueden
crecer con el acetato como única fuente de carbono utilizán-
dolo para sintetizar productos intermedios del ciclo de los
ATC en el ciclo del glioxilato (Figura 10.20). Este ciclo es
posible gracias a dos enzimas exclusivas, la isocitrato liasa y
la malato sintetasa, que catalizan las siguientes reacciones.
El ciclo del glioxilato es en realidad una modificación del
ciclo de los ATC. Se evitan las dos descarboxilaciones de la
última vía (los pasos de la isocitrato deshidrogenasa y la oc-
cetoglutarato deshidrogenasa), permitiendo la conversión de
acetil-CoA para formar oxaloacetato sin pérdida de carbono
de la acetil-CoA en forma de CO2. De esta forma, el acetato
y cualquier molécula que dé lugar a su formación pueden
suministrar carbono al ciclo, y así favorecer el crecimiento
microbiano. Ciclo de los ATC (pp. 194-196).
1. Defina reacción anaplerótica y proporcione un ejemplo.
2. ¿Cómo convierte el ciclo del glioxilato a la acetil-CoA en
oxaloacetato, y qué enzimas especiales utiliza?
10.7 Síntesis de purinas, pirimidinas
y nucleótidos
La biosíntesis de purinas y pirimidinas es fundamental para
todas las células, ya que estas moléculas se utilizan en la
síntesis de ATP, cofactores, ácido ribonucleico (RNA), ácido
desoxirribonucleico (DNA) y otros componentes celulares
importantes. Prácticamente todos los microorganismos pue-
den sintetizar sus propias purinas y pirimidinas, dado que
éstas son fundamentales para la función celular. Síntesis de
DNA y RNA (pp. 251-256; 280-284).
Las purinas y las pirimidinas son bases nitrogenadas
cíclicas con varios dobles enlaces y destacadas propiedades
aromáticas. Las purinas están formadas por dos anillos,
mientras que las pirimidinas sólo tienen uno (Figura 10.21
y Figura 10.23). Las purinas adenina y guanina, y las piri-
midinas uracilo, citosina y timina, se encuentran presentes
habitualmente en los microorganismos. Una base púrica o
pirimidínica unida a un azúcar pentosa (ribosa o desoxirri-
bosa) forma un nucleósido. Un nucleótido es un nucleósido
con uno o más grupos fosfato unidos al azúcar.

Figura 10.20 Ciclo del glioxilato. Las reacciones y enzimas específicas del ciclo se muestran en color. Las enzimas del ciclo de los ácidos
tricarboxílicos que se evitan se encuentran en la parte inferior.
Biosíntesis de purinas
La ruta biosintética de las purinas es una secuencia compleja
de 11 pasos (véase el Apéndice II) en la que siete moléculas
diferentes aportan parte del esqueleto final de las purinas
(Figura 10.21). Debido a que la ruta comienza con la ribosa
5-fosfato y a que el esqueleto purinico está construido sobre
este azúcar, el primer producto purinico de la ruta es el
nucleótido ácido inosínico, no una base purínica libre. El
cofactor ácido fólico es muy importante en la biosíntesis de
las purinas. Los derivados de este ácido aportan los
carbonos 2 y 8 del esqueleto purinico. De hecho, las sul-
fonamidas inhiben el crecimiento bacteriano mediante el
bloqueo de la síntesis de ácido fólico, interfiriendo con la
10.7 Síntesis de purinas, pirimidinas y nucleótidos 233
biosíntesis de purinas y con otros procesos que requieren
ácido fólico.
Una vez formado el ácido inosínico, dos vías relativa-
mente cortas sintetizan adenosina monofosfato y guanosina
monofosfato (Figura 10.22) y producen nucleósidos difos-
fato y trifosfato por transferencia de grupos fosfato desde el
ATP. El DNA contiene desoxirribonucleótidos (la ribosa
carece de un grupo hidroxilo en el carbono 2) en lugar de los
ribonucleótidos presentes en el RNA. Los desoxirribonucle-
ótidos provienen de la reducción de nucleósidos difosfato o
nucleósidos trifosfato por dos rutas diferentes. Algunos
microorganismos reducen los trifosfatos con un sistema que
requiere vitamina Bi2 como cofactor. Otros, como E. coli,
reducen la ribosa de los nucleósidos difosfato. Ambos siste-