TÉCNICAS DE TINCIÓN HISTOLÓGICAS DE

TEJIDO
Universidad de Guadalajara
Mayra Nayeli Murillo Arias

La histología es el estudio de los tejidos. Los tejidos corresponden a un plano intermedio de organización
del cuerpo y se prestan particularmente bien para el estudio con el microscopio. Los tejidos son
“asociaciones de células con diferenciación semejante y sus derivados, las sustancias intercelulares” (W.
Bargmann, 1957), que pueden clasificarse según determinados criterios. [8]
Los pasos para realizar preparados histológicos son los siguientes:
1. Fijación
2. Inclusión
3. Realización de los cortes
4. Coloración.
Coloración
Un colorante se define como una sustancia capaz de dar color a células, tejidos, fibras, etcétera. De
acuerdo con su origen, se pueden dividir en colorantes naturales, los cuales son extraídos de plantas o
animales, y colorantes artificiales, que son aquellos de minerales procesados y manipulados en el
laboratorio. Los colorantes tienen las siguientes funciones: [5]
 Permiten hacer visibles a los objetos microscópicos y transparentes.
 Revelan su forma y tamaño.
 Muestran la presencia de estructuras internas y externas
 Producen reacciones químicas específicas.

TINCIONES

Azul de Coomasie Azul de metileno

Tinción supravital metacromática.
Se utiliza cuando la cantidad de proteínas es
alta. Se utiliza para teñir células animales, para
hacer más visibles sus núcleos. Es también
A través de un medio ácido se genera entre las
utilizado en citología y como colorante vital en el
moléculas del tinte azul de Coomassie y las
recuento de reticulocitos. Tiñe de azul oscuro
proteínas –gracias a los grupos de amino- una
restos de ácidos nucleicos, y los proteoglicanos
atracción generando un complejo. La unión
ácidos en varios tonos de violeta. [4]
tinte-proteína es reversible. [3]

Ilustración 1. Tinción con Azul de Coomasie Ilustración 2. Tinción con Azul de metileno
 Electrofisiología Molecular I
Hematoxilina
Tinción histológica general junto con eosina.
Tiñe específicamente núcleos, ácidos nucleicos
(azul) y estructuras basofílicas: Retículo
endoplasmático rugoso o ergastoplasma (azul) y
mitocondrias. [2,4]

Ilustración 5. Hematoxilina-Eosina

Tinción HOPS
Los núcleos aparecen en azul (hematoxilina). La
elastina aparece en negro (orcceína), la fibra
Ilustración 3. Hematoxilina
muscular en rojo (filoxina) y tejido conectivo
(colágeno) en amarillo (safranina). [4]

Eosina
Tinción histológica general junto con
hematoxilina.
Tiñe proteínas y estructuras con afinidad por los
ácidos en diferentes tonos de rojo: fibras
elásticas (rosa), fibras reticulares (rosa) [2,4]

Ilustración 4. Eosina

Ilustración 6. Tinción HOPS

Tinción de Hematoxilina-Eosina Tinción HPS

Tinción general histológica. Los núcleos
aparecen en azul (hematoxilina), los ácidos
nucleicos asociados a proteína (ribosomas) en
violeta, fibra muscular en rojo y tejido conectivo
en rosado. [4]
Tinción Policromática.
Los núcleos aparecen en azul (hematoxilina),
fibra muscular en rojo (filoxina) y tejido
conectivo en amarillo (safranina). [4]

1
 Electrofisiología Molecular I
Tinción de Romanowsky
Tinción Pancromática de Romanowsky. Se
utiliza en extendidos sanguíneos [4]

Ilustración 7. Tinción HPS

Tinción de Papanicolaou
Tinción Policromática.
Permite ver la cromatina con mucha claridad. Se Ilustración 9. Tinción de Romanowsky
utiliza para diferenciar células en muestras de
secreciones biológicas (esputo, LCR, orina, etc.)
y en raspados y biopsias. Permite distinguir con
Tinción de Wright
relativa facilidad células con transformaciones
Tinción Policromática.
neoplásicas, levaduras y bacterias.
Se usa con frecuencia para células de la sangre,
Los núcleos aparecen de color entre negro y azul.
tiñe específicamente gránulos de neutrófilos
Células con alto contenido de queratina en
(púrpura/rosa), gránulos de eosinófilos (rojo
amarillo. Glucógeno en amarillo. Células
brillante/anaranjado), gránulos de basófilos
superficiales de naranja a rosado. Células
(púrpura intenso/violeta), gránulos de plaquetas
intermedias y parabasales entre turquesa y
(rojo/púrpura). [2,4,5]
azul. Células metaplásicas muestran
coloraciones mezcladas (entre verde, rosa). [4]

Ilustración 8. Tinción de Papanicolaou

Ilustración 10. Tinción de Wright

2
 Electrofisiología Molecular I
Tinción tricrómica de Masson
Tinción tricrómica.
Se usa con frecuencia para tejido conjuntivo.
Tiñe específicamente cartílago, el colágeno y el
hueso (azul/verde) fibras musculares y keratina
(rojo), y los núcleos aparecen en marrón o negro.
[2,4]

Ilustración 13. PAS (Ácido Peryódico de Schiff)

Tinción de Movat
Tiñe de negro núcleos y fibras elásticas; el
Ilustración 11. Tricrómica de Masson colágeno y fibras reticulares aparecen en tono
amarillo. Sustancia basal y mucina se tiñe de
azul, fibrina de rojo brillante, y músculo de rojo.
[4]
Tinción tricrómica de Gomori
Tinción tricrómica argéntica.
Se usa con frecuencia para tejidos conjuntivo y
muscular, tiñe específicamente fibras
musculares (rojo). [2,4]

Ilustración 14. Tinción de Movat

Tinción de Nissl
Permite diferenciar las áreas cerebrales donde
aparecen distribuidos los somas de las células
Ilustración 12. Tricrómica de Gomori
nerviosas o sus prolongaciones axónicas
mielinizadas.
Se utilizan colorantes acidófilos como el violeta
PAS (Ácido Peryódico de Schiff) de cresilo, el azul de toluidina o el rojo neutro. El
Se usa con frecuencia para membrana basal, colorante utilizado en el método de Nissl se une
detección de carbohidratos. Tiñe al ARN contenido en los ribosomas, por tanto,
específicamente glucógeno y otros carbohidratos tiñe el núcleo, el nucléolo y los ribosomas del
(magenta). [2] retículo endoplasmático rugoso. De las células
gliales únicamente se tiñen los núcleos. Esta
3

tinción proporciona una panorámica general y
exhaustiva de la distribución, tamaño y
morfología de las neuronas en el tejido nervioso,
pero no da información alguna sobre las
ramificaciones de dichas neuronas. [1]
Ilustración 15. Tinción de Nissl
Tinción de Luxol Fast Blue
Tinción para lípidos. Tiñe la mielina de color
azul celeste. Esta técnica es comúnmente usada
para detectar la desmielinización en el sistema
nervioso central, pero no puede discernir
mielinización en el sistema nervioso periférico.
[4,6]
Ilustración 16. Luxol Fast Blue
Tinción de Cristal violeta
La tinción de Gram (uso de colorante Cristal
violeta) se utiliza tanto para poder referirse a la
morfología celular bacteriana, como para poder
realizar una primera aproximación a la
diferenciación bacteriana, considerándose
Electrofisiología Molecular I
bacterias grampositivas a las que se visualizan
de color morado, y bacterias gramnegativas a las
que se visualizan de color rosa, rojo o grosella.
El cristal violeta (colorante catiónico) penetra en
todas las células bacterianas (tanto Gram
positivas como Gram negativas) a través de la
pared bacteriana. [9]
Ilustración 17. Tinción de Gram (Cristal Violeta)
Tinción de Golgi
Tinción Argéntica.
Permite diferenciar claramente, atendiendo a
diversos parámetros, los variados tipos celulares
que presenta el tejido nervioso, así como
diferentes tipos de células gliales.
Se puede diferenciar morfológicamente cada una
de las células nerviosas y se pueden agrupar
según sus características externas. Esta técnica
tiñe selectivamente un porcentaje muy bajo de
células. Además su tinción no se localiza en una
zona determinada de la célula, sino que se
realiza en toda su extensión. [1,4]
Ilustración 18. Tinción de Golgi
4
 Electrofisiología Molecular I
Tinción de Carmín marrón; se utiliza para revelar detalles
Tinción para carbohidratos. Tiñe el glicógeno de extremadamente finos. [4,7]
intenso color rojo [4]

Ilustración 21. Tinción Argéntica

Ilustración 19. Carmín

Tinción Rojo Congo

Tinción Sudán Tinción para proteínas. Se utiliza con
Sudán lipofílica. Diversos tipos de tinción con hematoxilina/eosina en patología cuando se
Sudán: [4] busca amiloide. Tiñe el amiloide de un intenso
color rojo. [4]
 Tinción con Sudan Black B: Tiñe gotas de
lípidos neutros de color negro azulado.
 Tinción con Sudán II.
 Tinción con Sudan III: Tiñe lípidos
neutros de color negro.
 Tinción con Sudán IV.

Ilustración 22. Rojo Congo

Ilustración 20. Sudán Black B
Tinción argéntica
Tinción para proteínas. En función del fijado,
tiñe proteínas y ácidos en tonos de negro y
Fucsina ácida
Puede ser utilizada para colorear colágeno,
músculo liso o mitocondrias. Forma parte de la
coloración tricrómica de Mallory donde se utiliza
para colorear núcleo y citoplasma. En la tinción
de Van Gieson (picrofucsina), la fucsina es la
responsable de dar el color rojo a las fibras de
colágeno. También es una coloración tradicional
para colorear mitocondrias. [4]

5
 Electrofisiología Molecular I
Lugol
Tinción para carbohidratos. Tiñe el almidón de
azul, el glucógeno de amarillo y el resto en tonos
de ocre. [4]

Ilustración 23. Tinción con Fucsina base

Safranina
La safranina (o safranina O) es un colorante
nuclear. Colorea los núcleos celulares de rojo, y
se utiliza principalmente como contracoloración.
También puede ser utilizada para darle una
coloración amarilla al colágeno. [4]
Ilustración 25. Lugol en glucógeno

Tinción de Feulgen
Tinción para ácidos nucleicos. Tiñe el ADN y los
cromosomas de color rojo violeta. [4]

Ilustración 24. Safranina Ilustración 26. Tinción de Feulgen

FLUORESCENTES

DAPI

Tinción para ácidos nucleicos.

El DAPI es un marcador fluorescente que se une
fuertemente a regiones enriquecidas en Adenina
y Timina en secuencias de ADN. Tiñe ADN de
color azul celeste fluorescente. [4]

Ilustración 27. DAPI

6
 Electrofisiología Molecular I
Hoechst 33342
Hoechst es un compuesto derivado bis-
benzimidazol que se une al surco menor del
AND. Se utiliza con frecuencia en microscopía de
fluorescencia para colorear el ADN. Hoechst
tiene un color amarillo cuando se encuentra
disuelto con agua, y emite luz azul cuando recibe
luz ultravioleta. Hay dos tipos principales de
Hoechst: Hoechst 33258 y Hoechst 33342.
El Hoechst 33342 contiene un grupo etilo en
sustitución del grupo hidroxilo en terminal (un
grupo etileter), lo que lo hace más hidrofóbico, y
con menor penetración en la membrana
plasmática. [4]
Ilustración 29. Ioduro de propidio

Naranja de acridina
Tinción para ácidos nucleicos. Tiñe ADN y
cromosomas de color verde fluorescente, ARN y
ribosomas en color rojo fluorescente. [4]

Ilustración 28. Hoechst 33342

Ioduro de propidio
Yoduro de propidio (PI) es ampliamente
utilizado en conjunción con la anexina V para Ilustración 30. Naranja de Acridina
determinar si las células son viables, apoptosis o
necrosis a través de diferencias en la integridad Rodamina
de la membrana de plasma y permeabilidad. Es una tinción fluorescente específica para
proteínas utilizada comúnmente en microscopía
PI se utiliza con más frecuencia que otras fluorescente [4]
manchas nuclear porque es económico, estable y
un buen indicador de la viabilidad celular,
basado en su capacidad para excluir de colorante
en las células vivas. La capacidad de PI para
entrar en una célula depende de la
permeabilidad de la membrana; PI no mancha
las células apoptóticas en vivo o temprano
debido a la presencia de una membrana
plasmática intacta. [10]
Ilustración 31. Rodamina

1
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
[1] Fundamentos de psicobiología libro de prácticas I. (Consultado en:
books.google.com.mx/books?id=yigxY-itcboC&pg=PA54&dq=tincion+de+luxol+fast+blue&hl=es-
419&sa=X&redir_esc=y#v=onepage&q=tincion%20de%20luxol%20fast%20blue&f=false)
[2] Histología, Texto y Atlas color con Biología Celular y Molecular. Ross, Pawlina; 6ª Edición; Médica
Panamericana.
[3] Fundamento de la tinción con Azul de Coomassie y con Plata (Consultado en:
academia.edu/12280062/Fundamento_de_la_tinci%C3%B3n_con_Azul_de_Coomassie_y_con_plata)
[4] Tinción (Consultado en: es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n)
[5] Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología. López Jácome, Hernández Durán, Colín
Catro, Ortega Peña, Cerón González, Franco Cendejas. Investigación en Discapacidad, 2014,
Medigraphic. (Consultado en: medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf)
[6] Luxol Fast Blue Strain. (Consultado en: en.wikipedia.org/wiki/Luxol_fast_blue_stain)
[7] Tinción Argéntica (Consultado en: es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_arg%C3%A9ntica)
[8] Terminología, microscopia y técnica histológica. (Consultado en: media.axon.es/pdf/69022.pdf)
[9] Tinción de Gram (Cosultado en: es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Gram)
[10] Modificado anexina V/Yoduro de propidio ensayo Apoptosis una evaluación precisa de la muerte
celular. (Consultado en: jove.com/video/2597/modificado-anexina-v-yoduro-de-propidio-ensayo-
apoptosis-una?language=Spanish)