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Guía de Tinción de Gram

Este documento describe la tinción de Gram, una técnica que permite diferenciar bacterias en Gram positivas y Gram negativas. Explica que las Gram positivas poseen una gruesa capa de peptidoglucano mientras que las Gram negativas tienen una capa delgada de peptidoglucano unida a una membrana exterior. También resume los pasos de la tinción de Gram y cómo esto permite identificar el tipo de bacteria bajo el microscopio.

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Guía de Tinción de Gram

Este documento describe la tinción de Gram, una técnica que permite diferenciar bacterias en Gram positivas y Gram negativas. Explica que las Gram positivas poseen una gruesa capa de peptidoglucano mientras que las Gram negativas tienen una capa delgada de peptidoglucano unida a una membrana exterior. También resume los pasos de la tinción de Gram y cómo esto permite identificar el tipo de bacteria bajo el microscopio.

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Tinción de

Gram
M. En Ed. Zully Venecia Macías Durón
1 solo Forma
Simples
colorante Agrupaciòn

Gram positivas
Tinción de
y Gram
Gram
Tinciones negativas

Tinción de
Esporas
Shafeer fulton
Compuestas o
Diferenciales
Tinción de Acido alcohol
Zihel-Neelsen resistentes

Tinción
Cápsula
Negativa
Tipos de colorantes
 Colorantes ácidos. Estos ionizan en soluciones acuosas para producir un
núcleo colorante con carga negativa, es decir, el grupo iónico que imparte el
color tiene carga negativa (anión).
 Dichos colorantes se combinan con constituyentes celulares cargados
positivamente (proteínas). Por ejemplo: eosina, rojo Congo, fucsina ácida.
 Colorantes básicos. En los que el ion que lleva el color tiene carga positiva.
Dichos colorantes tienen afinidad por el material nuclear y otros
componentes.
 Estos son los más usados en microbiología, ya que debido a la gran cantidad
de ribosomas que contienen ácido ribonucleico en todo el protoplasma de la
célula bacteriana, éstas se tiñen fácilmente. Por ejemplo: azul de metileno,
fucsina básica, cristal violeta, safranina.
TINCION SIMPLE
Agrupación Bacteriana
Fundamento

 La técnica de la tinción de gram fue ideada y desarrollada


por Christan Gram en el año 1884
 Esta es una técnica que presenta 4 pasos
fundamentales:
 tinción
 fijación con el mordente
 decoloración y
 contratinción.

 Por tanto, esta técnica además de colorear a las


bacterias, también permite diferenciarlas
Gram positivas

 Poseen una gruesa capa de Peptidoglucano de 15-80 nm


 Dos clases de Acidos teicoicos: Anclado en la cara
interna de la pared celular y unido a la membrana
plasmática,
 se encuentra el ácido lipoteicoico, y más en la
superficie, el ácido teicoico que está anclado solamente
en el peptidoglucano (también conocido como mureína
)
Pared celular
Gram Negativas

 la capa de peptidoglucano de las Gram negativas es


delgada 10-15 nm
 se encuentra unida a una segunda membrana plasmática
exterior (de composición distinta a la interna) por
medio de lipoproteínas.
 Tiene una capa delgada de peptidoglucano unida a una
membrana exterior por lipoproteínas. La membrana
exterior está hecha de proteína, fosfolípidos y
lipopolisacáridos
Gram negativa
Tinción de Gram
Colorantes Gram (+) Gram ( - )
Cristal violeta Se tiñen Se tiñen

Yodo lugol CV-IL CV-IL

Alcohol acetona Deshidratan Extraen grasas

Safranina No se tiñen Se tiñen


Metodología Tinción simple
Tinción de Gram
Observaciones al microscopio
Señale Forma y Agrupación y
tipo de Gram
Señale la forma agrupación y
tipo de gram
Señala las formas microbianas y
agrupación que identificas.

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