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COMPONENTES DE UN MICROTOMO

Aunque pueden variar de unos modelos a otros, los componentes fundamentales de un


microtomo son:

• Portabloques: en el que apoyamos el casete con la muestra. Avanza de forma discontinua


sobre una cuchilla gracias a un mecanismo regulable de cremallera. Propiamente se denomina
portabloques al dispositivo donde colocamos el material tisular sumergido en algún medio de
inclusión, generalmente parafina. Los actuales portabloques llevan un sistema de pinzas que se
adaptan a cualquier tipo de base o molde. A su vez, el portabloques lleva un sistema de
orientación que permite conseguir la posición en paralelo entre el bloque y la cuchilla.

• Portacuchillas: consiste en un dispositivo de fijación basado en una pinza que sujeta y


orienta adecuadamente la cuchilla. Esta pinza permite variar el ángulo de inclinación de la
cuchilla, así como su grado de aproximación al portabloques.

• Mecanismo de avance del portabloques sobre la cuchilla: sistema mecánico o electrónico


que proporciona cortes sucesivos de tejido a partir del bloque. Actualmente se consiguen
cortes de hasta 1 µ. • Base: sirve para sustentar el microtomo a la mesa.

• Caja: también llamada carcasa, aloja el mecanismo de engranajes de precisión y el


mecanismo para seleccionar el espesor de la sección.

• Manivela: está situada a la derecha del aparato; consiste en un volante con una manilla y un
freno. En el volante hay una flecha pintada que indica la dirección en la que se debe mover la
manivela. • Freno: es un tornillo que, accionándolo hacia afuera y/o girándolo sobre sí mismo
un cuarto de vuelta, libera la manivela.

• Manivela de recuperación: está situada a la izquierda del microtomo. Una vez utilizado el
microtomo es conveniente hacerle volver a la posición de inicio. Para ello se acciona la
manivela en sentido antihorario hasta que la base del brazo portabloques esté cercano a la
caja de engranajes.

TIPOS DE MICROTOMO MICROTOMO

DE OSCILACIÓN, BALANCEO O DE CUCHILLA VIBRANTE Es un tipo de microtomo que hoy día se


utiliza específicamente para el control de calidad de materiales en industria y en determinados
tipos de estudios histológicos. Es el equipo ideal para aplicaciones de alta precisión en
neurofisiología, neuropatología y patología experimental, ya sea para la realización con gran
precisión de cortes de tejido previamente fijados a fin de realizar exámenes neuropatológicos,
o para cortar tejidos en fresco, aunque también puede formar parte del sistema de corte del
criostato. Posee un mecanismo de avance de tornillo y las secciones se obtienen por un
sistema oscilatorio de palanca que realiza el portabloques sobre la cuchilla al bascular sobre
ella apoyándose en un pivote intermedio, de tal forma que no permite obtener secciones
seriadas. Es un sistema barato y simple.

MICROTOMO DE DESLIZAMIENTO
Se basa en el deslizamiento, bien de la cuchilla, bien del portabloques, sobre unas guías
metálicas, produciendo el corte al avanzar y retroceder. Existen tres tipos:

1. Microtomo Leitz o de portabloques deslizante: El portabloques se desliza sobre la cuchilla, la


cual es estable. Es más inalterable y proporciona mejor calidad ya que, al estar fija la cuchilla,
ésta no vibra.

REALIZACIÓN DE LOS CORTES


Una vez desbastado el bloque se cambia la cuchilla para iniciar un movimiento rítmico que se
transmite al brazo del microtomo y genera una cinta continua de cortes. Este ritmo, así como
la velocidad de corte, va a depender de la naturaleza del bloque y de la del tejido (la velocidad
es inversamente proporcional a la dureza del tejido). Para evitar el fraccionamiento de las
cintas del corte es conveniente sujetarlas con un pincel, el cual sirve a su vez para colocarlas
sobre el portaobjetos.
A continuación se pasa el corte de tejido hasta un baño con agua a una temperatura de entre
45 y 50ºC donde, gracias a las fuerzas de tensión superficial que se generan en la lámina de
parafina y tejido al hacerla flotar sobre el líquido, se eliminan posibles pliegues. Hay que tener
cuidado de que no se formen burbujas bajo la lámina, ya que son difíciles de eliminar. Un
método adicional de estiramiento consiste en aplicar alcohol a 70º sobre el porta que
utilizamos para trasladar el corte al baño de flotación, con lo que conseguimos que este corte
ya esté prácticamente estirado al meterlo en el baño

El procedimiento para recuperar los mejores cortes del baño se denomina coloquialmente
“pesca” y consiste en introducir un portaobjetos en el baño hasta tocar la sección en uno de
los lados del corte. Cuando empieza la adherencia de la sección sobre el cristal se extrae poco
a poco el portaobjetos del baño, dejando drenar el agua por gravedad. Si la orientación o la
disposición del corte no es la adecuada, éste se puede volver a reflotar y orientar. Al terminar
el montaje de las preparaciones vaciamos el baño y eliminamos cualquier vestigio de
contaminación con papel de filtro.
Una
vez montados los cortes sobre el porta, y antes de la tinción, las preparaciones deben ser
secadas meticulosamente para evitar su desprendimiento. Esto se hace metiendo la
preparación en la estufa a 60ºC durante 10/20 minutos, o a 37ºC durante 24 horas. Una
temperatura elevada (valores próximos a 100ºC, como suelen hacer algunos técnicos de mayor
edad) puede deteriorar de forma irreversible la mayor parte de los componentes bioquímicos
y antígenos tisulares.

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