ANALIZA Y FRACCIONA SANGRE CON FINES TRANSFUSIONALES
5ºB
PRACTICA: COOMBS DIRECTO E INDIRECTO
EQUIPO :5
CABRERA NUÑEZ ANGEL JOAN (2)
DIAZ GARCIA ERIK EDUARDO (8)
HERNANDEZ HERNÁNDEZ JAZMIN GPE. (14)
PEREZ PEREZ JOSE MIGUEL (25)
RAMOS CORDOVA DANIEL ALEJANDRO (28)
TOLEDO GOMEZ JOSE MIGUEL (30)
Tuxtla Gtz. Chiapas 15/10/2019
OBJETIVO GENERAL: Determinar la existencia de glóbulos rojos recubiertos con inmunoglubinas y/o
complemento in vivo, en particular IgG y C3d (Coombs directo)
OBJETIVO ESPECÍFICO: Aprender la metodología y realización de Coombs directo.
JUSTIFICACIÓN: La prueba de Coombs directa se utiliza para detectar anticuerpos que ya se han fijado a la
superficie de los glóbulos rojos. Muchas enfermedades y fármacos pueden provocar que esto suceda. Este
estudio es importante para poder determinar una posible anemia, ya que estos anticuerpos algunas veces
destruyen los glóbulos rojos y suelen provocar la anemia.
GENERALIDADES: La prueba de Coombs fue descrita por primera vez por los científicos Rob Rase, Arthur
Morant, y Robin Coombs (por quien la prueba era llamada) en 1945 , esta prueba conociste para buscar
anticuerpos que puedan fijarse a los glóbulos rojos.
FUNDAMENTO: El agregado de suero anti-humano (poliespecifico) a glóbulos rojos cubiertos de
inmunoglobulinas y/o fragmentos de complemento produce una aglutinación de los glóbulos rojos visibles
microscópicamente.
PRESENTACIÓN: A continuación, veremos los materiales necesarios para realizar la práctica, así como la técnica
y todo el desarrollo de este método de Coombs.
Materiales, Equipó y Reactivos:
-Centrifuga
-Tubos de ensayo
-Gradilla
-Materiales para toma de muestra
-Aplicadores de madrea
-Anticoagulante EDTA o Heparina
-Alcohol al 70%
-Suero Coombs poli especifico
-suero de Coombs mono específico (anti Ig6 y C3d)
-Solución Salina
-Microscopio
Procedimiento:
1.- Tomar la muestra de sangre venosa.
2.- Lavar 3 veces los hematíes (Grupo A+ o B+) en solución salina fisiológica de la sig. manera:
Colocar 7 gotas de sangre del paciente en un tubo de ensayo, llenarlo con solución salina tibia 37°C. Mezclar y
Centrifugar por 1 minuto a 1500 RPM.
3.- Decantar completamente la solución salina, después del último lavado.
4.- Preparar una suspensión de hematíes al 5% y colocar 2 gotas de dicha suspensión en un tubo de ensayo.
5.-Agregue 2 gotas de suero anti globulina humana y mezcle bien.
6.- Deje en reposo por 5 minutos.
7.- Centrifugar por 1 minuto a 3000 RPM y busque aglutinación a simple vista, observando el tubo ante la luz, al
mismo tiempo que se agita suavemente el tubo para que se desprendan los eritrocitos empacados.
Anotar en que tubo observas Aglutinación.
Diagrama:
Lavar los hematíes
Tomar la muestra Decantar el
3 veces con
de sangre venosa. sobrenadante
solución salina.
Agregar 2 gotas Agregar 2 gotas a Hacer una
de anti globulina- un tubo de la suspensión al 5%
humana. suspensión.
Reposar 5 Centrifugar por 1
Buscar
minutos. minuto a 3000
aglutinación.
RPM.
Anotar los
resultados.
Observaciones:
En la práctica como nos confundimos a la hora en vez de poner reactivos de Coombs pusimos albumino bovina
por lo cual la prueba nos salió positivo
RESULTADOS:
Paciente: mariana gordillo Hernández
Edad:17 años sexo: F
Aglutinación: positiva +
Paciente: mariana gordillo Hernández
Edad:17 sexo: F
Aglutinación: negativa –
Paciente: Grisel amparo maza Figueroa
Edad:17
Aglutinación: negativa
Análisis:
La prueba de Coombs consiste en buscar la presencia de estos anticuerpos. Diferentes anticuerpos se colocan en
presencia de la sangre del paciente y dan como resultado la aglutinación de los glóbulos rojos en presencia de
autoanticuerpos.
Podemos deducir que la no aglutinación de la muestra es por ausencia de IgG o complemento C3 en las células
rojas.
Cuando la muestra presenta la aglutinación es por presencia.
La prueba directa de Coombs o la prueba directa de antiglobulina corresponde a la demostración de la
presencia, en la superficie de los glóbulos rojos del paciente, de antígenos particulares.
Coombs indirecta:
OBJETIVO GENERAL: Determinar la presencia de anticuerpos irregulares en el suero del receptor a transfundir
(Coombs indirecto)
OBJETIVO ESPECÍFICO: Aprender la metodología y realización de la prueba Coombs indirecto.
JUSTIFICACIÓN: El Test de Coombs indirecto es una prueba que se realiza con carácter preventivo a todas las
mujeres embarazadas que tengan un RH negativo. Esta prueba es muy importante ya que se utiliza para detectar
anticuerpos que podrían atravesar la placenta y atacar las células del feto, causando la enfermedad hemolítica
del recién nacido.
GENERALIDADES: Las pruebas de Coombs se hacen para detectar ciertos anticuerpos que atacan a los glóbulos
rojos. Los anticuerpos son proteínas producidas por el sistema inmunitario. Normalmente, los anticuerpos se
adhieren a sustancias extrañas, como bacterias y virus, y hacen que sean destruidas.
FUNDAMENTO: La prueba indirecta busca anticuerpos contra los glóbulos rojos que fluyen libremente en el
suero sanguíneo, que corresponde al líquido claro y amarillento que queda después de remover los glóbulos
rojos y los materiales coagulantes.
PRESENTACIÓN: A continuación, veremos los materiales necesarios para realizar la práctica, así como la técnica y
todo el desarrollo de este método de Coombs indirecta.
Materiales y reactivos:
Suero de coombs
Albumina bouina
Solución salina isotónica
Equipo de extracción de sangre
Tubo de ensaye
Pipeta graduada de 1ml
Pipeta graduada de 5ml
Gradilla metálica
Pipetas Pasteur
Termómetro
Baño maría
Sangre tipo “o”RH positivo
METODO:
-preparar una suspensión de GR”o” positivo al 5% en ssi
-preparar por centrifugación el suero de nuestra muestra problema
-agregar 2 gotas de la suspensión de eritrocitos al 5% en un tubo de ensaye
-lavar 3 veces con ssl (llenar el tubo con ssl centrifugar y decantar lo mas posible, lo ultimo lavado.
-agregar 2 gotas del suero problema (paso2) al tubo de ensaye que contiene los gr.
-agregar 2 gotas de albumina al 22% incubar en un baño maría a 37°c durante 15min.
-centrifugar 1min a 1000rpm
-Lavar 3 veces con SSl, decante lo más posible
-agregue dos gotas de suero de Coombs y centrifugar 1min. A 1000 rpm
-agite suavemente y examine si se presenta aglutinación o no.
Desarrollo 1
Observaciones:
La prueba indirecta de antiglobulinas detecta anticuerpos circulantes dirigidos contra los hematíes el motivo
principal por el que una persona puede tener anticuerpos dirigidos contra sus hematíes es haber estado
expuesta, a través de una transfusión de sangre o por el embarazo, a hematíes de otra persona
Desarrollo °1
En el tubo se tuvieron aglutinaciones, estuvo la media hora en baño maría y debido a que no había reactivo
tuvimos que utilizar otro
Desarrollo °2
No pusimos reactivo de Coombs al meter a baño maría, por lo que nos retrasamos en cuanto al tiempo
Resultados:
Paciente: JoSe miguel Pérez Pérez
Edad:17 años
Aglutinación: positiva
Paciente: Daniel Alejandro ramos Córdova
Edad:17 años
Aglutinación: sin diluir -positivo
Aglutinación diluida – negativo
Paciente: mesa 5
Guadalupe del Carmen morales cansino
Edad:17 años
Aglutinación: negativo
Análisis:
La prueba indirecta de Coombs se realiza cuando la prueba de Coombs directa es positiva. Esta prueba consiste
en determinar la especificidad del autoanticuerpo para el antígeno de los glóbulos rojos, poniendo en presencia
de glóbulos rojos del paciente con glóbulos rojos de prueba.
Los autoanticuerpos libres en la sangre (no se fijan en el antígeno de los glóbulos rojos, es decir, no muy
específicos) se dosifican.
Los autoanticuerpos fijados sobre el antígeno de los glóbulos rojos (altamente específicos) se analizan después
de romper su unión con el antígeno.
AUTOEVALUACIÓN
Asignatura: ANALIZA Y FRACCIONA SANGRE CON FINES TRANSFUSIONALES
Grupo:
Alumno: HERNANDEZ HERNANDEZ JAZMIN GPE. Parcial: 2do
Practicas:
Indicadores criterios
3 siempre, 2 frecuente, 1 pocas veces, 0 nunca
fecha
1 Asistencia puntual y Permanezco 100% en clase 3
2 Sigo con atención las indicaciones del maestro 3
3 Analizo los conceptos hasta comprenderlos totalmente 2
4 Tengo una actitud respetuosa 3
5 Trabajo las actividades (Participación activa en clase) 3
6 Busco apoyo bibliográfico en las dudas que tengo 2
7 Manifiesto mis dudas al maestro 2
8 Cumplo la regla de no platicar en clase 3
9 Cumplo la regla de no celular en clase 3
10 Mantengo limpio mi zona de trabajo 3
Suma 27
