EXTRACCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS

Lisday Andrea Viracacha Murcia​1

Natalia Mora Fernández​2
1​ 1-2​
Código: 20162180129. Estudiantes en Formación de Ingeniería
Email: ​lizdayavm@hotmail.com Ambiental. Universidad Distrital Francisco
José de Caldas (UD), Facultad de Medio
2​
Código: 20162180133. Ambiente y Recursos Naturales, Bogotá
Email: ​nmf923@gmail.com D.C., Colombia, (2018).

INFO ARTÍCULO Resumen

Entregado: En esta práctica de laboratorio se realiza una

10 de Marzo de 2018 extracción e identificación de lípidos. Los
Lípidos son sustancias naturales, que se
solubilizan en disolventes grasos no polares
Palabras Clave: Aceite Vegetal, Aceite Animal, pero, no en agua. Éstos, realizan un conjunto
Colesterol, Fosfolípidos, Miscibilidad, extraordinario de funciones en los seres vivos.
Saponificación. El objetivo principal de la práctica, es
demostrar dicha solubilidad (tanto en aceites
vegetales, como animales) e identificar
algunos lípidos importantes, como el
colesterol y los fosfolípidos. Por medio del
uso de distintos solventes orgánicos, se
determina que los aceites vegetales son
miscibles en acetona, cloroformo y éter, y, los
animales, son miscibles en cloroformo.
Además, gracias al uso de etanol, y
posteriormente acetona y agua destilada, se
logran observar las lecitinas en la yema de
huevo, formando mayor turbidez con el agua
que, con acetona. Por último, se evidencia la
presencia de colesterol en el cerebro, gracias a
los reactivos de Schiff, Salkovsky y
Liebermann-Burchard.
 Introducción
Los lípidos son un grupo heterogéneo de
biomoléculas. Se consideran lípidos
moléculas como los fosfolípidos, los
esteroides, los carotenoides, las grasas y
los aceites, que se diferencian mucho en
cuanto a estructura y función. A causa de
su diversidad, el término lípido tiene una
definición más operativa que estructural.
Los lípidos se definen como aquellas
sustancias de los seres vivos que se
disuelven en solventes no polares, como el
éter, el cloroformo y la acetona, y que no
lo hacen de manera perceptible en el agua.
Las funciones de los lípidos también son
variadas. Diversas clases de moléculas
lipídicas (por ejemplo, los fosfolípidos y
los esfingolípidos) son componentes
estructurales importantes de las
membranas celulares. Otro tipo, las grasas
y los aceites (ambos son triacilgliceroles),
almacenan energía de modo eficaz. Otras
clases de moléculas lipídicas son señales
químicas, vitaminas o pigmentos. Por
último, algunas moléculas lipídicas que se
encuentran en las cubiertas externas de
varios organismos tienen funciones
protectoras o impermeabilizantes. [1]
Clases De Lípidos
Los lípidos pueden clasificarse de muchas
formas diferentes. En esta exposición, los
lípidos pueden subdividirse en las
siguientes clases:
-​Lípidos Saponificables
Son aquellos que reaccionan con álcalis
formando jabones.
1. Ácidos grasos: Los ácidos grasos son
ácidos monocarboxílicos que contienen en
general cadenas hidrocarbonadas de
longitudes variables.
Los ácidos grasos son componentes
importantes de cuantiosas clases de
moléculas lipídicas. Se encuentran en
primera instancia en los triacilgliceroles y
en numerosas clases de moléculas lipídicas
unidas a las membranas. La mayor parte
de los ácidos grasos naturales posee un
número par de átomos de carbono que
forman una cadena sin ramificaciones. [1]
2. Triacilgliceroles: Los triacilgliceroles
son ésteres de glicerol con tres moléculas
de ácidos grasos. Los glicéridos con uno o
dos grupos ácido graso, que se denominan
monoacilglicerol es y diacilgliceroles,
respectivamente, son intermediarios
metabólicos. Se encuentran presentes en
general en cantidades pequeñas.
La mayoría de las moléculas de
triacilgliceroles contienen ácidos grasos de
diversas longitudes, que pueden ser
insaturados, saturados o una combinación
de ambos. Dependiendo de sus
composiciones de ácidos grasos, las
mezclas de triacilgliceroles se denominan
grasas o aceites. Las grasas, que son
sólidas a temperatura ambiente, contienen
una gran proporción de ácidos grasos
saturados. Los aceites son líquidos a
temperatura ambiente debido a su
contenido relativamente elevado de ácidos
grasos insaturados. [1]
3. Ésteres de ceras: Las ceras son mezclas
complejas de lípidos no polares. Son
cubiertas protectoras de las hojas, de los
tallos y de las frutas de los vegetales y de
la piel de los animales.
Los ésteres formados por ácidos grasos de
cadena larga y alcoholes de cadena larga
son constituyentes destacados de la
mayoría de las ceras. Las ceras contienen
también hidrocarburos, alcoholes, ácidos
grasos, aldehídos y esteroles (alcoholes
esteroides). [1]
4. Fosfolípidos: Los fosfolípidos
desempeñan múltiples funciones en los
seres vivos. Son los primeros y más
importantes componentes estructurales de
las membranas. Además, cuantiosos
fosfolípidos son agentes emulsionantes y
agentes superficiales activos.
Los fosfolípidos son muy adecuados para
estas funciones debido a que, al ser sales
de ácidos grasos, son moléculas
anfipáticas. El dominio hidrófobo está
formado en gran parte por las cadenas
hidrocarbonadas de los ácidos grasos; el
dominio hidrófilo, que se denomina grupo
de cabeza polar, contiene fosfato y otros
grupos cargados o polares. [1]
Uno de los fosfolípidos más
representativos, son las ​lecitinas​. La
fosfatidilcolina o polienilfosfatidilcolina
(también llamada lecitina) es un
fosfolípido que, junto con las sales
biliares, ayuda a la solubilización de los
ácidos biliares en la bilis.
Es el componente más abundante de la
fracción fosfatídica que puede extraerse
tanto de ​yema de huevo​, como de granos
de soja mediante extracción mecánica, o
química usando hexano. La fosfatidilcolina
es uno de los principales constituyentes de
las bicapas lipídicas de las membranas
celulares. [2]
5. Esfingolípidos: Los esfingolípidos son
componentes importantes de las
membranas animales y de las vegetales.
Todas las moléculas de esfingolípidos
contienen un aminoalcohol de cadena
larga. En los animales, este alcohol es
principalmente la esfingosina. La
fitoesfingosina se encuentra en los
esfingolípidos de los vegetales. El núcleo
de cada clase de esfingolípido es una
ceramida, un derivado amida de ácido
graso de la esfingosina. [1]
6. Lípidos Insaponificables:
Son aquellos que no tienen ácidos grasos y
no reaccionan con álcalis, ni forman
jabones.
- Isoprenoides: Los isoprenoides son un
gran grupo de biomoléculas que contienen
unidades estructurales de cinco carbonos
que se repiten y que se denominan
unidades de isopreno. Los isoprenoides no
se sintetizan a partir del isopreno
(metilbutadieno), sino que todas sus vías
de biosíntesis comienzan con la formación
de isopentenilpirofosfato a partir de
acetil-CoA. Los isoprenoides están
formados por terpenos y por esteroides. [1]
- ​Los terpenos son un grupo enorme de
moléculas que se encuentran en gran
medida en los aceites esenciales de las
plantas. Los terpenos, son lípidos
insaponificables, formados por dos o más
unidades de isopreno. [3]
- Los esteroides son derivados del sistema
de anillos hidrocarbonados del colesterol.
Son otro tipo de lípidos no saponificables,
que poseen un núcleo común formado por
cuatro anillos condensados, tres de los
cuales poseen seis átomos de carbono y el
cuarto únicamente cinco.
Aunque los distintos tipos de esteroides se
diferencian en la naturaleza y la posición
de los sustituyentes.
La mayoría de los esteroides se generan
(en los seres vivos) a partir de la ciclación
del escualeno (un triterpeno lineal); así, el
primer esteroide formado en este proceso
es el lanosterol que posteriormente se
transforma en otros muchos esteroides de
interés. Uno de ellos es el ​colesterol. [​3]
El colesterol es el esteroide mejor
conocido y más abundante en el cuerpo
humano. Forma parte de las membranas
biológicas y es precursor de ácidos
biliares, de las hormonas esteroides y de la
Vitamina D.
Es también muy abundante en
lipoproteínas del plasma sanguíneo, entre
ellas la LDL, en las que alrededor del 70%
se encuentra esterificado con ácidos grasos
de cadena larga. [3]
- ​Prostaglandinas: ​Las prostaglandinas
son lípidos insaponificables que poseen
una gran variedad de actividades
biológicas de naturaleza hormonal y
reguladora, así median en: la respuesta
antiinflamatoria, la producción de dolor y
fiebre, la regulación de la presión
sanguínea, la inducción de la coagulación
de la sangre, la inducción al parto, la
regulación del ciclo sueño/vigilia.
La prostaglandinas, se encuentran en
cantidades muy pequeñas en tejidos y
fluidos corporales, entre ellos los fluidos
menstruales y seminales.
Todas las prostaglandinas son derivados
hipotéticos de la ciclación de ácidos grasos
insaturados de 20 carbonos. [3]
Solubilidad
Los grupos principales de lípidos tienen
características de solubilidad diferentes y
esta propiedad se usa en su extracción y
purificación a partir de materiales
biológicos.
Pueden ser separados fácilmente de otras
biomoléculas por extracción con solventes
orgánicos y por técnicas experimentales
como la cromatografía de adsorción,
cromatografía de placa fina y
cromatografía de fase reversa. [4]
Una característica común de los lípidos y
que lo distingue de los demás grupos, es
que son moléculas no polares, sin carga
eléctrica. Por esta razón son insolubles en
agua (polar) y solubles en disolventes
orgánicos y en otros lípidos. [5]
- Reacción Liebermann - Burchard:
Es un reactivo colorimétrico utilizado para
la determinación de colesterol, lo que da
un color verde intenso. Este color
comienza con un color rosa violáceo y
progresa a través de un verde claro y luego
un color verde muy oscuro. El color es
debido al grupo hidroxilo (-OH) del
colesterol reacciona con los reactivos lo
que genera una aumento en la conjugación
de la instauración del anillo fusiona
adyacente.
La reacción consiste en que el colesterol
sufre una oxidación gradual, formándose
una molécula de colestapolieno que posee
un doble enlace adicional al colesterol, la
etapa inicial consiste en la protonación del
oh del colesterol, desprendiéndose agua,
obteniéndose el ion carbonio
3,5-colestadieno que constituye el primer
paso de la reacción de color.
La oxidación del ion carbonio por el so2
produce un ácido colesta-hexano-sulfónico
cromóforo, produciendo la tonalidad
verdosa. Se utilizan reactivos específicos
para la coloración de los derivados del
colesterol. se usa un ácido fuerte para que
el colesterol actúe como un alcohol y así
pueda ocurrir la deshidratación con la
formación de un conjugado pi. El medio
debe ser anhídrido al fin de evitar que las
moléculas de agua no interfieran en la
reacción de colesterol a colesterileno. [6]
- ​Tinción de PAS (ácido peryódico-de
Schiff): Método de PAS modificado
Los grupos aminos son convertidos a
carbonilos (​para incrementar el número de
éstos, ya sea, aldehído o cetona) mediante
la cloramina T. Luego, el ácido
perfórmico, oxida las uniones lípido
etileno a aldehídos. Posteriormente hay un
bloqueo con dinitrofenil-hidrazina, junto
con los aldehídos existentes. Así, la
Reacción de PAS se usa para teñir
hexosas; los tejidos son incubados en
ácido peryódico para oxidar las hexosas
(1,2 glicol) a aldehídos, y estos son
finalmente revelados por condensación
con el reactivo de Schiff. Los resultados se
comparan con una sección delipidizada
(glicolípidos-hexosas no lipidas). [7]
- La prueba de Salkowski:
La reacción de colesterol con este reactivo
produce una condensación de biesteroides.
La formación de un anillos de color indica
la presencia de colesterol. Su fundamento
es la formación de derivados de los
esteroides, cuando se tratan con ácidos. La
coloración roja o vino tinto característica,
se forma en la capa del disolvente graso no
polar, es decir, en el cloroformo.
Justificación
El estudio de los lípidos se hace necesario
e importante debido a que cumplen
diversas funciones fundamentales en la
naturaleza y sobretodo en los seres vivos.
Algunos lípidos son reservas energéticas
vitales, almacenan dicha energía que el
organismo puede disponer fácilmente si la
necesita (​Los lípidos aportan 3 veces la
energía que aportan los glúcidos)​. Otros
son los componentes estructurales
primarios de las membranas biológicas,
forman las membranas celulares
conjuntamente con proteínas y
polisacáridos.
Así mismo, otras moléculas lipídicas
actúan como hormonas (progesterona,
estradiol, testosterona, hidrocortisona,
aldosterona), antioxidantes, pigmentos
(que están formados algunos por terpenos)
o factores de crecimiento vitales y
vitaminas (constituyen algunas de las
vitaminas A1, E y K son terpenos).
Cuando se ingiere más alimento del
necesario el exceso se transforma en
grasas que se deposita en el tejido adiposo
distribuido en todo el cuerpo.
Protegen diferentes partes del cuerpo de
los seres vivos, el tejido adiposo protege
del frío por ser un buen aislante. Las ceras
recubren algunos órganos vegetales como
las hojas, evitando las pérdida de agua.
Intervienen en diversos procesos químicos
intracelulares.
Es decir, los lípidos no son sólo grasas,
como las personas del común piensan
regularmente, sino que, por el contrario,
abarcan una gran cantidad de grupos que
cumplen funciones muy diversas,
fundamentales y trascendentales.
Es por ello, que en bioquímica se realiza el
estudio más a fondo de éstas biomoléculas.
Además, como ingenieros ambientales, es
fundamental comprender el papel y las
incidencias de los lípidos en nuestro
entorno, para solucionar problemáticas,
como el tratamiento de la acumulación de
grasas en fuentes hídricas o aguas
residuales y la quema de aceites. O, el
metabolismo de estas moléculas en ciertos
organismos, con fines de biorremediación.
U otras aplicaciones que favorezcan el
medio en que vivimos, que finalmente, es
el objetivo que tenemos la mayoría.
En consecuencia, se realiza esta práctica
de laboratorio, que nos permite diferenciar
una gran cantidad de lípidos que pueden
encontrarse en alimentos y productos
biológicos, y donde es necesario, efectuar
diversas pruebas, reacciones y análisis
físico-químicos. Para ello, es útil conocer
los disolventes y reactivos que propicien
dichos estudios, y conceptuar sus
fundamentos.
Metodología
➔ Solubilidad de lípidos
Para iniciar, se utilizaron 5 tubos de
ensayo, que previamente fueron rotulados
del 1 al 5. Con ayuda de una pipeta, se le
agregó a cada uno, 2 ml de aceite vegetal
(aceite de oliva). Posterior a ello, se
agregaron 2 ml de agua destilada al primer
tubo, 2 ml de acetona al tubo Nº 2, 2 ml de
alcohol al tercer tubo, 2 ml de cloroformo
al cuarto tubo, y 2 ml de éter al tubo
restante. Por último, se agitó
vigorosamente cada tubo, y se esperó de ​2
a 3 minutos hasta obtener una solubilidad
positiva, en alguno de los tubos.
Éste procedimiento se repitió nuevamente,
utilizando un aceite de origen animal; en
éste caso, se trabajó con el aceite de
hígado de bacalao.
➔ Aislamiento de fosfolípidos
Para empezar, se adicionaron 20 ml de
alcohol en un Erlenmeyer, que luego se
llevaron a calentar en una estufa eléctrica.
Pasados unos minutos, se depositó media
yema de huevo en un Beaker, junto con los
20 ml de alcohol caliente; los cuales se
mezclaron con un agitador y
posteriormente se dejaron enfriar. La
mezcla obtenida fue filtrada en tres
repeticiones; dos veces con ayuda de una
gasa, y una última vez, con papel filtro.
A partir del filtrado obtenido, se realizaron
dos procedimientos. En el primero, se
mezclaron 0,5 ml del filtrado, junto con 5
ml de acetona; en un tubo de ensayo. En el
segundo, se utilizaron 3 ml de la mezcla,
junto con 1 ml de agua destilada en otro
tubo de ensayo.
Finalmente, se esperaron unos minutos
hasta que el primer tubo presentara
turbidez, y el segundo, obtuviera una
emulsión estable.
➔ Aislamiento de colesterol
Como primer paso, se pesaron 3g de
cerebro y 10g de yeso, los cuales fueron
mezclados y macerados en un mortero,
hasta que se obtuvo una masa espesa. Con
ayuda de una espátula, se depositó la masa
en una cápsula de porcelana, esparciéndola
de forma muy fina. Luego, se llevó a
calentamiento en una estufa eléctrica,
hasta que la masa se secara totalmente.
Posteriormente, se dejó enfriar la masa, se
depositó en un mortero, y se maceró
nuevamente hasta que quedó en polvo.
Éste último, se agregó en un Erlenmeyer,
al cual se le adicionaron 10 ml de
cloroformo. La boca del Erlenmeyer se
tapó con el corcho, para poderlo agitar
cuidadosamente, durante 5 minutos. Luego
de ello, se filtró la mezcla con ayuda de
una gasa, obteniendo extracto de colesterol
en cloroformo.
Con dicho extracto, se realizaron tres
pruebas de reacción:
1. Reacción de Schiff​: en la cual, se
utilizó 1 ml del extracto de colesterol,
agregado a un tubo de ensayo seco. Por
las paredes del tubo, se adiciona
lentamente 1 ml de ácido sulfúrico
concentrado. Se esperó la observación
de una interfase color rojo, que
indicara la presencia de colesterol.
2. Reacción de Salkowsky​, donde se
tomó 1 ml del extracto, el cual, se
mezcló con 1 ml de ácido sulfúrico
concentrado. La mezcla se dejó en
reposo, hasta que se presentó la
separación de la misma, en dos capas
(una superior de color rojo, y una capa
inferior de color amarillo). Finalmente
se procedió a separar la última capa, y
se le añadió 1 ml de ácido acético
glacial, apareciendo una coloración
rosada.
3. ​Reacción de Liebermann - Burchard​,
para la que se utilizó 2 ml del extracto
de colesterol en un tubo de ensayo,
mezclado con 0,1 ml de ácido
sulfúrico. Se esperó que el líquido
resultante, pasara por coloración roja,
luego violeta, después azul y
finalmente, color verde.
Resultados
PARTE A
➔ Solubilidad de los Lípidos:
● Aceite Vegetal (Aceite de Oliva):
Figura 1. ​Miscibilidad del Aceite de Oliva.
Fuente:​ Natalia Mora, 2018.
Según los resultados obtenidos, se
determina que, el aceite de Oliva es
soluble en Acetona, Cloroformo y Éter.
Tabla 1. ​Resultados de la Solubilidad del PARTE B
Aceite Vegetal.
➔ Aislamiento de Fosfolípidos:

ACEITE DE OLIVA Las partículas blancas suspendidas que se

Disolventes Miscibilidad logran observar en la solución, son los
fosfolípidos conocidos como lecitinas,
Agua Destilada No Miscible presentes en la yema de huevo.
Además, se determina que presenta una
Acetona Miscible
mayor turbidez con el agua destilada que
Alcohol (Etanol) No Miscible con la acetona.

Cloroformo Miscible

Éter Miscible
Fuente: ​Autoras.

● Aceite de Origen Animal (Aceite

de Hígado de Bacalao):

En este caso, no obtuvimos fotografías,

pero, según los resultados obtenidos, se
logra determinar que, el aceite de Hígado
de Bacalao es soluble únicamente en
Cloroformo. (a) (b)
Figuras 2. ​Resultados del aislamiento de
Tabla 2. ​Resultados de la Solubilidad del Fosfolípidos (Lecitinas).
Aceite de Origen Animal. (a) Filtrado de Yema de huevo + Acetona.
(b) Filtrado de Yema de Huevo + Agua.
Fuente:​ Natalia Mora, 2018.
ACEITE DE HÍGADO DE BACALAO
➔ Aislamiento de Colesterol:
Disolventes Miscibilidad

Agua Destilada No Miscible ● Reacción de Schiff:

Acetona No Miscible
La reacción de Schiff tuvo un resultado
Alcohol (Etanol) Levemente Miscible positivo para la presencia de colesterol, en
el cerebro de una res. En la parte superior,
Cloroformo Miscible
se observa el color característico (rojo -
Éter No Miscible vino tinto) que se forma en la capa
Fuente: ​Autoras. clorofórmica; en la parte inferior, se
observa un rojo amarillento con
fluorescencia verde.
 Pero, puede establecerse que ésta, tendía a
ser positiva, pues en el último momento de
observación, estaba empezando a tomar un
color rojo, que luego, se tornó violeta en la
parte inferior. Es decir, estaba pasando por
el proceso que indica la guía: ​“El líquido
resultante adquiere inicialmente un color
rojo, luego violeta, azul y por último
verde”.

Por lo tanto, se concluye que la prueba si

es positiva para colesterol, aunque la
misma, no haya terminado la reacción.

Figura 3. ​Resultado de la reacción de Schiff.

(Positiva)
Fuente: ​Natalia Mora, 2018.

● Reacción de Salkowsky:

Luego de realizar la prueba de Schiff, se

usa la misma solución que ya obtuvo
resultados positivos, y simplemente, se le
agrega el ácido acético glacial. En la nueva
solución resultante, se observan tres capas,
en la parte inferior, se encuentra la capa
Figura 4.​ Resultado (inicial) de la reacción de
amarillenta con fluorescencia verde, en el
Liebermann - Burchard (Levemente Positiva).
centro, un pequeña capa de color rosáceo,
Fuente:​ Natalia Mora, 2018.
y en la parte superior, la coloración
característica, es decir, el color rojo, que
Análisis de Resultados
arroja que la reacción es positiva para
colesterol.
➔ Solubilidad

(No se logran obtener fotografías de la

Se tuvo que el aceite vegetal se solubilizó
reacción).
únicamente en acetona, cloroformo y éter;
debido principalmente, a que los tres
● Reacción Liebermann-Burchard:
solventes son de carácter apolar, al igual
que el aceite de oliva. Al mismo tiempo,
La reacción no obtuvo resultados
los solventes como la acetona, poseen en
determinantes, debido a que, por falta de
su composición: Carbono, Hidrógeno, y
tiempo, no se completó totalmente la
Oxígeno, algunos de estos combinados con
reacción.
un grupo OH; y a su vez, presentan dobles
enlaces entre un Carbono y un oxígeno.
Dichas características (ilustradas en la
figura 5 y 6), son similares a la
composición química que presenta el
aceite de oliva (​C​8​H​8​O​3​) (figura 7); por lo
tanto, la fase en que se presentaron las
reacciones entre ambos compuestos
mezclados, fue la misma; lo que permitió,
la interacción facilitada entre las moléculas
del disolvente y el soluto (solvatación).
Figura 5. ​ Propanona
(Acetona)
Fuente:​ Imágenes Wikipedia
Figura 6. ​Triclorometano
(Cloroformo)
Fuente:​ Imágenes Wikipedia
​ cido 4-hidroxifenilacético
Figura 7. Á
(Aceite de oliva)
Fuente:​ Imágenes Wikipedia
Esto también determinó, la razón por la
cual el aceite no fue miscible en agua, ni
en etanol, debido a que ambos compuestos
son de carácter apolar; y juntos, presentan
una densidad distinta a la del aceite
(Agua : 1g/cm 3 ; Etanol : 0, 789g/cm 3 ;
Aceite : 0.918g/cm 3 ) , lo que generó
distinción en las fases, quedando el aceite
por encima del agua, y el etanol por debajo
del aceite.
Para el caso del aceite de hígado de
bacalao (compuesto por Omega 3), sólo se
obtuvo una miscibilidad en el cloroformo;
pues éste tuvo la capacidad de polarizar
sus enlaces C - Cl, realizando una síntesis
orgánica con el compuesto del aceite; lo
cual arrojó que se obtuvieron los
resultados acordes, pues según García M.,
(2011): “El aceite de hígado de bacalao es
ligeramente soluble en alcohol; y muy
soluble en cloroformo”.
➔ Aislamiento de fosfolípidos
El aislamiento de las lecitinas presentes en
la yema del huevo, se dio de forma
correcta, pues en la muestra que se utilizó
la acetona, se observó el precipitado
esperado de partículas blanquecinas. Esto
se logró, debido a que la lecitina sólo es
soluble en éter, etanol o cloroformo, pero
incapaz de solubilizarse en cetonas, por lo
tanto, en contacto con la acetona
(compuesto apolar), no generó enlaces
químicos; permitiendo la precipitación de
éstas.
Para el caso de la mezcla del filtrado con
agua, se obtuvo una emulsión mucho más
turbia y estable; ésto se debió, a que el
agua destilada no generó ninguna reacción
específica, por lo cual, se tomó como
muestra control para comparar el resultado
de la muestra mezclada con acetona.
 ➔ Aislamiento de colesterol
Prueba de Schiff
El resultado para la prueba de Schiff fue
de color rojo (positivo), debido a la acción
deshidratante del ácido sulfúrico, sobre el
colesterol presente en el cerebro de res;
formó un doble enlace en la posición 3
(como lo indica la figura 8).
Este resultado fue acertado, pues se
corroboró con teoría que enuncia que “El
reactivo de schiff, permite reconocer
lípidos que contengan materiales con
radicales -OH- contiguos, como es el caso
de los fosfatidilinositoles,
fosfatidilglicéridos y ​cerebrósidos​.”
(Cuaran B., s.f) sabiendo que los
cerebrósidos, se encontraban en la muestra
de membrana celular del músculo
nervioso y las moléculas del sistema
nervioso, del cerebro utilizado.
Figura 8. ​Reacción del colesterol
Fuente:
https://profesoramaribelarnes.files.wordpress.com/
2009/11/lab-5-colesterol-tec-2010.pdf
Prueba de Salkowski
La prueba de Salkowski tuvo un resultado
positivo, pues se apreciaron las tonalidades
características, de un colesterol en el
medio. Según Casanova, (2011) esto se
debe a, que cuando a las soluciones
clorofórmicas de colesterol se les adiciona
un volumen igual de ácido sulfúrico
concentrado y se mezclan suavemente, se
desarrolla un color rojo característico en la
capa clorofórmica. Los componentes del
reactivo se separan en dos capas, la de
cloroformo de color rojo y la de Ácido
sulfúrico de color blancuzco.
Esta coloración, fue el resultado de la
formación de dobles enlaces adicionales
que se generaron, o bien, a partir de la
condensación de 2 moléculas de colesterol
que posteriormente formaron biesfenoides.
Prueba de Liebermann-Burchard
El color esperado al finalizar la reacción,
tuvo que deberse a que el grupo hidroxilo
(-OH) del colesterol, reaccionaría con los
reactivos, lo que generaría una aumento en
la conjugación de la instauración del anillo
adyacente. (Sandoval, 2013)
La reacción consistió en que el colesterol
(presente en el cerebro de res) sufrió una
oxidación gradual, formándose una
molécula de colestapolieno, presentando
un doble enlace adicional al colesterol. La
etapa inicial, consistió en la adición de un
protón del OH del colesterol, la cual, hizo
desprender agua, obteniéndose el ion
carbonio 3,5-colestadieno que constituyó
la primera reacción de color. La oxidación
del ion carbonio por el SO2 produjo un
ácido colesta-hexano-sulfónico cromóforo,
el cual formó la tonalidad final verdosa.
(Cruz, 2014)
Conclusiones

1. Se logra entender que para llegar a
generar mezclas que presenten una
misma fase, es decir, que se puedan
solubilizar, se requiere que ambas
tengan el mismo carácter polar. En
caso de que la mezcla presente una
fase heterogénea, se recurrirá a
trabajar con una tercera sustancia
de carácter anfipático ( polar y
apolar), para obtener una
solubilización de los compuestos
utilizados.
2. La solubilidad de los lípidos en
compuestos orgánicos, se puede
aprovechar de manera sencilla para
la extracción de los mismos; como
en el caso de los lípidos extraídos
del cerebro de res. Se comprendió,
que esto se puede llevar a cabo,
utilizando solventes que al
calentarse reaccionen disolviendo
el ácido graso, y luego de que se
evapore el disolvente, podrá quedar
el lípido requerido.
3. Gracias a las propiedades físicas y
químicas que presentaron las
biomoléculas trabajadas, se pudo
conocer los comportamientos y las
incidencias, que éstas tienen al
juntarse con agua y otras
sustancias. Esto es de suma
importancia, pues como Ingenieras
Ambientales, adquirimos el
conocimiento de base para llegar a
solucionar problemáticas de
acumulación de grasas en fuentes
hídricas, o buscar alternativas para
los tratamiento de residuos grasos,
provenientes de hogares, industrias
etc.
Referencias Bibliográficas
1. McKee T., McKee J., 2013.
Biochemistry: The Molecular Basis
of Life. ​Sexta Edición, Capítulo 11
‘Lípidos y Membranas’​, Pág. 371,
Editores: Oxford University Press
asociado con Sapling Learning.
Obtenido de:
http://biblio3.url.edu.gt/Publi/Libro
s/2013/Bioquimica/12-O.pdf
2. Sin autor, s.f. ​Fosfatidilcolina​,
UAZ, México. Obtenido de:
http://www.uaz.edu.mx/histo/Biolo
gia/Wiki/FosfatidilColina.pdf
3. Sin autor, 2005. ​Tema 3. Lípidos,
Bioquímica. Obtenido de:
http://www.uhu.es/08007/documen
tos%20de%20texto/apuntes/2005/p
df/tema_03_lipidos.pdf
4. Vázquez E., 2003. ​Tipos de
Lípidos​, Bioquímica y Biología
Molecular en Línea, Instituto de
Química, UNAM. Obtenido de:
http://laguna.fmedic.unam.mx/~eva
zquez/0403/tipos%20lipidos.html
5. Sin autor, s.f. ​Lípidos:
Reconocimiento, Solubilidad y
Reacciones, Recursos TIC,
Educación. Obtenido de:
http://recursostic.educacion.es/cien
cias/biosfera/web/profesor/practica
s/Lipidos.pdf
6. Cruz Y.V., Suárez J.W. y Pan A.F.,
2014. ​Extracción de Lípidos del
Cerebro, Academia Edu. Obtenido
de:​https://www.academia.edu/9479
404/EXTRACCI%C3%93N_DE_L
 %C3%8DPIDOS_DE_CEREBRO
_BRAIN_LIPID_EXTRACTION

7. Sin autor, 2008. ​Identificación

Plasmalógenos​, T​ecnología médica
mención morfofisiopatología y
citodiagnóstico. Obtenido de:
http://morfoudec.blogspot.com.co/
2008/

8. García M., 2011.

Propuesta de un método de
incorporación de vitaminas
líquidas lipofílicas en polvos
absorbentes de alta porosidad y su
integración en cápsulas de gelatina
dura. Universidad de El Salvador.
Obtenido de:
http://ri.ues.edu.sv/503/1/10136859
.pdf

9. Casanova, 2011. ​Determinación

cuantitativa y cualitativa de
colesterol. ​Obtenido de:
http://bioquimica.obolog.es/determ
inacion-cuantitativa-cualitativa-col
esterol-1290017
10. Sandoval, 2013. ​Reconocimiento
del colesterol. ​Obtenido de:
http://es.slideshare.net/Milisanm/re
conocimiento-del-colesterol-quimi
ca

11. Cuaran B. s.f. ​Reconocimiento de

lípidos modificados. ​Obtenido de:
https://es.scribd.com/doc/14314906
2/reconocimiento-lipidos-modifica
dos