UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA EDUCACIÓN

PROGRAMA DE LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES
Y EDUCACIÓN AMBIENTAL
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

PRÁCTICA N° 3
DESCRIPCIÓN MACRO DE COLONIAS BACTERIANAS Y CULTIVO AXÉNICO

Docente: Marleny Salazar Salazar

Auxiliar: Carlos Andrés Hurtado Montaño

INTRODUCCIÓN
Los microorganismos cuando se encuentran en hábitat naturales crecen en poblaciones complejas y
mixtas, que a su vez están constituidas por varias especies. Sin embargo, al momento de realizar
estudios acerca de un único microorganismo que se encuentra en un medio mixto representa una gran
dificultad, razón por la cual se necesita un cultivo puro. En este tipo de cultivo, la población de células
proviene de una sola célula que permita definir una especie particular. Además, existen diversas
maneras de preparar cultivos puros (Prescott, Harley, & Klein, 2004).

Una colonia independiente se forma cuando sobre una superficie de agar se extiende una mezcla de
células, de manera que cada célula aislada se multiplicará y se define como una “agrupación o
formación macroscópicamente visible de microorganismos sobre un medio sólido”. Un cultivo puro
es representado por cada colonia (Prescott, Harley, & Klein, 2004).

Para obtener colonias aisladas se puede emplear el método de siembra en estrías o siembra por
extensión, no obstante para conseguir un buen aislamiento se necesita la separación respectiva de las
células (Tortora, Funke, & Case, 2013). También, se pueden emplear las colonias que crecen en la
superficie del agar para preparar cultivos puros y para inocular un medio fresco (Prescott, Harley, &
Klein, 2004).

El método de siembra en estriado fue fundado por el bacteriólogo alemán Robert Koch (Prescott,
Harley, & Klein, 2004) y es más beneficioso cuando el microorganismo que se desea aislar se
encuentra en grandes cantidades en relación a la población total. No obstante en casos contrarios, su
cantidad debe incrementarse mediante enriquecimiento selectivo antes de que sea posible su
aislamiento (Tortora, Funke, & Case, 2013).

Además en el método de siembra en estriado, la muestra es colocada en un medio sólido de

crecimiento y es dibujada algunas veces sobre la superficie; existen algunas formas de realizar el
estriado. Cada estriado representa un proceso de dilución progresiva y se obtienen células
individuales a lo largo del estriado (Sharma, 2007).
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PROPOSITOS

Describe la morfología colonial representativa de cada cultivo microbiano de acuerdo con los
criterios indicados.

Aísla microorganismos por la técnica de siembra por estría en caja Petri con agar MacConkey
y obtiene un cultivo axénico o puro.

MATERIALES
 Caja de Petri
 Asa bacteriológica
 Alcohol al 96%
 Mecheros
 Agar macConkey
 Estereoscopios
 Candela
 Guantes
 Cinta de papel
 Marcador indeleble

PROCEDIMIENTOS
Descripción macro de colonias

Figura 1. Morfología Colonial. Forma.

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Figura 2. Morfología Colonial. Elevación.

Figura 3. Morfología Colonial. Borde.

Color: superficie y base.

Superficie: lisa o rugosa.
Aspecto de colonia: húmeda (brillante) o seca (mate).
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Preparación de cultivo axénico

1. Esterilizar el campo de trabajo limpiando el mesón con alcohol, luego ubique los mecheros
en forma de triángulo (campo de trabajo).
2. Coloque todos sus elementos (asa bacteriológica, medios con crecimiento y medios nuevos)
dentro del campo previamente esterilizado.
3. Encienda los mecheros.
4. Inoculación: tomar el asa bacteriológica y flamear hasta quedar roja, después destape
cuidadosamente la caja de Petri que contiene el crecimiento de colonias y enfrié el asa
tocando superficie donde no haya crecimiento de colonias, luego frote suavemente el asa
sobre la colonia seleccionada, posteriormente destape la caja de Petri con medio nuevo y frote
el asa en forma de estría por agotamiento (fig.1-2), tape la caja de Petri y flamee el asa
nuevamente.
5. Finalmente coloque las cajas de Petri invertida en la incubadora a 37°C.

Figura 4. Procedimiento para inoculación

Figura 5. Siembra en estría por agotamiento

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REPORTE (citas bibliográficas)

1. A continuación encontrará un cuadro en donde indagará para cada medio de cultivo que
material o dispositivo de usa y su técnica de siembra.
TIPO DE MEDIO DE MATERIALES TÉCNICA DE SIEMBRA
CULTIVO
Caldo en tubo
Caldo en matraz
Medio sólido (fundido)
Medio sólido en tubo
inclinado
Medio sólido en tubo vertical
Placas de Agar nutritivo

2. Los medios de cultivo proporcionan condiciones para el crecimiento de microorganismos

específicos. Indague cuales microorganismos se pueden aislar y cuales se pueden inhibir en
los siguientes medios:
 Agar cetrimida
 Agar Eosina azul de metileno (EMB)
 Agar Mc Conkey
 Agar Lipman libre de nitrógeno
 Agar sal manitol
 Agar Sabourau-Rosa de Bengala-Estreptomicina
 Agar Vogel Johnson

3. ¿Cuál es la utilidad de los medios de cultivos puros o axénicos? ¿Cuáles pueden ser de uso
regular en las prácticas de microbiología y cuáles no? Pregunte por los tipos de agares que se
manejan en el almacén de biología de la Universidad del Quindío e identifique cuales son
axénicos.
4. Que funciones presentan las bacterias facultativas y bacterias estrictas. ¿De estas bacterias
cuales son las más comunes? Mencione al menos 3 de cada una.
5. Para la siembra de un inoculo bacteriano se usa la técnica por estría. ¿Por qué se usa está
técnica y que beneficios tiene? ¿Cuáles otros tipos de siembra podemos encontrar?

BIBLIOGRAFÍA

Microbiología aplicada. Manual de laboratorio. Sf.

Prescott, L. M., Harley, J. P., y Klein, D. A. (2004). Microbiología. Quinta edición. McGraw Hill
Interamericana. Madrid, España.
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Tortora, G., Funke, B., y Case, C. (2013). Microbiología: una introducción (Undecima edición.
Pearson Education. New York.

Sharma, P. (2007). Microbiología. . Meerut, IND: Rastogi Publications. ISBN: 9789350437872.