PREPARACIÓN DE CALDO BRILLA

El Brilla Broth o Caldo Brilla es un medio de cultivo líquido empleado para

determinación de microorganismos del grupo de Coliformes Totales y
Fecales. Este medio tiene la capacidad de inhibir el crecimiento de Bacterias
Gram (+) y Gram (-) distintos del grupo de los Coliformes y facilita el
crecimiento de este grupo gracias a la concentración de Bilis de buey y Verde
brillante que tienen en su composición (8).

Casa Comercial: Merck.

Contenido Neto: 500 g.

Composición: Peptona de Carne (10,0 g/L), Lactosa (10,0 g/L), Bilis de Buey
desecada (20,0 g/L), Verde Brillante (0,0133 g/L); pH final de 7,2 ± 0,2.

Conservación: El medio de cultivo deshidratado debe conservarse bien

sellado, en un lugar seco y a una Temperatura de 25°C para evitar su
hidratación y conservar la calidad del producto. Luego de su preparación
tiene una vida útil de 7 días y debe mantenerse en refrigeración a 4°C ± 2.

Preparación del medio de cultivo: Para la preparación del medio de cultivo

es necesario tener un frasco shot del volumen a preparar, probeta graduada,
espátula, agitador magnético, papel metálico, plancha magnética y balanza
digital.

Reconstitución:

 Medir con la probeta graduada 250 ml de Agua destilada.

 Adicionarlos al frasco shot.
 Insertar el agitador magnético.
 Colocar el frasco shot en la Plancha magnética.
 Prender la Balanza digital.
 Colocar el papel metálico y llevar a cero.
 Con la espátula tomar porciones del medio de cultivo.
 Pesar 10,0 g de Medio de Cultivo Brilla.
 Adicionar el medio al frasco shot y tapar.
 Encender la Plancha magnética.
 Dejar en agitación y calentamiento hasta que se disuelva por completo el
medio de cultivo.
 Coger tubos de ensayo e introducirles la campana de Durham.
 Adicionar 10 ml de medio preparado a cada tubo de ensayo.
 Tapar los tubos de ensayo y verificar que no queden burbujas en el interior
de la campana.
 Esterilizar en el Autoclave durante 15 minutos a 121°C.
 Luego del proceso de esterilización dejar enfriar.
 Guardar en nevera a 4 °C ± 2 para su conservación.