PREPARACIÓN DE SABOURAUD DEXTROSE AGAR

Sabouraud Dextrose Agar, es un medio de cultivo sólido selectivo utilizado

para el crecimiento de mohos y levaduras, por su alto contenido de Dextrosa
y pH ácido facilita el crecimiento de hongos; además viene enriquecido con
Chloranfenicol el cual es un antibiótico capaz de inhibir el crecimiento de
Bacterias (3,4).

Casa Comercial: Scharlau.

Contenido Neto: 500 g.

Composición: Peptona Caseína (5,0 g/L), Peptona de Carne (5,0 g/L),

Glucosa D (+) (40 g/L), Chloramphenicol (0,5 g/L), Agar (15 g/L), pH final 5,6
± 0,2.

Conservación: El medio de cultivo deshidratado debe conservarse bien

sellado, en un lugar seco y a una Temperatura de 25°C para evitar su
hidratación y conservar la calidad del producto. Luego de su preparación tiene
una vida útil de 7 días y debe mantenerse en refrigeración a 4°C ± 2.

Preparación del medio de cultivo: Para la preparación del medio de cultivo

es necesario tener un frasco shot del volumen a preparar, probeta graduada,
espátula, agitador magnético, papel metálico, plancha magnética y balanza
digital.

Reconstitución:

 Medir con la probeta graduada 250 ml de Agua destilada.

 Adicionarlos al frasco shot.
 Insertar el agitador magnético.
 Colocar el frasco shot en la Plancha magnética.
 Prender la Balanza digital.
 Colocar el papel metálico y llevar a cero (Tarar).
 Con la espátula tomar porciones del medio de cultivo.
 Pesar 16,37 g de medio Sabouraud Dextrose Agar.
 Adicionar el medio al frasco shot y tapar.
 Encender la Plancha magnética.
 Dejar en agitación y calentamiento hasta que se disuelva por completo el
medio de cultivo.
 Esterilizar en la autoclave durante 15 minutos a 121°C.
 Luego del proceso de esterilización dejar reposar y servir en la Cabina de
Flujo Laminar 10 ml en Cajas de Petri pequeñas o 15 ml en Cajas de Petri
 grandes estériles previamente marcadas (las Cajas de Petri se marcan en la
tapa con la inicial del medio “SDA”).
 Dejar solidificar y tapar las Cajas de Petri.
 Empacar en bolsas o papel plástico.
 Marcar la bolsa con el nombre del medio y la fecha de preparación.
 Guardar en nevera a 4°C ± 2 para su conservación.