MÉTODO DE RITCHIE CONCENTRACIÓN POR

SEDIMENTACIÓN DE LA MUESTRA FECAL

Esta técnica también es conocida como técnica de formol éter este método permite la concentración principalmente de
quiste huevos y larvas de distintas especies parasitarias Es empleada cuando no se observan parásitos en el
método directo y para aumentar la probabilidad de observar parásitos en las muestras estudiadas.

OBJETIVO
 Desarrollar la técnica de Ritchie

FUNDAMENTO
El método de Ritchie o también llamado método de concentración en éter-formalina es una técnica de
sedimentación que se basa en la concentración de huevos de helmintos, larvas y quistes de protozoarios mediante la
centrifugación, con la ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios.

El fundamento de la técnica se basa en el uso de la fuerza centrífuga que obligara a los parásitos a ir al fondo del tubo,
del éter que elimina los detritus orgánicos, mientras que el formol ayuda a mantener la integridad de las formas
parasitarias que se concentran.

MATERIALES:
 1 muestra de heces
 Formol
 Éter (o gasolina)
 Solución salina

TÉCNICA:
Homogenizar 2 ml (1 gramo) de heces con 10 ml de solución salina
con ayuda de una varilla de vidrio o aplicador

13 ml
Filtrar a través de dos capas de gasas sobrepuestas sobre un embudo
que quepa encima del tubo de Ritchie que tenga las graduaciones
10 ml
para 10 ml y 13 ml

Centrifugar a 1 minuto a 3000 rpm y desechar el sobrenadante

Repetir este lavado con solución salina 2 veces mas

Flor mayerly Huampo rodriguez

 Añadir al sedimento 10 ml de formol 10% agitar y dejar
reposar 10 minutos

Añadir 3 ml de éter o gasolina (alcanzando así la segunda

graduación del tubo)

Agitar vigorosamente hasta homogenizar y centrifugar a

1500 rpm durante un minuto

Desechar el sobrenadante (3 capas superiores) y limpiar las paredes del tubo con un hisopo para quitar los detritos
remanenetes

Tomar una gota del sedimento colocar sobre una gota de lugol en un portaobjetos

Cubrir con un cubreobjetos y examinar en el microscopio utilizando los aumentos de 10X (para huevos y larvas de
helmintos) y 40X (para protozoarios)

Para la técnica de Ritchie modificado se debe reemplazar el éter por gasolina

MÉTODO DE WILLIS
Por medio de este método es posible concentrar principalmente Huevos de las distintas especies entero parasitarias
principalmente huevos de helmintos ooquistes, quistes de protozoarios Se basa en el efecto de la diferencia de
densidad existente entre el reactivo y las formas parasitarias estas flotar en la superficie de la solución y son
recuperadas con ayuda de un cubreobjetos

OBJETIVO
 Desarrollar la técnica de Willis

FUNDAMENTO
Es una técnica cualitativa que se fundamenta en la creación de una diferencia de densidades a partir de una solución
salina sobresaturada (sal) para que las formas parasitarias por diferencia de densidades floten y sean recuperadas con
un cubreobjetos posteriormente sean montadas en un cubreobjetos con lugol para darle mejor contraste o sin él y sean
observadasFlor
al microcroscopio
mayerly Huampo rodriguez
MATERIALES:
 Solución saturada de Cloruro de sodio
 Una muestra de heces
 Dos vasos de plástico o recipientes de vidrio
 Un colador
 Una varilla o un palito
 Cubreobjetos
 Portaobjetos
 Una cuchara

TÉCNICA:
El primer paso que vamos a realizar es
que vamos a tomar la muestra y en un
vaso vamos a poner una cantidad de
muestra en el recordemos que al ser
una técnica cualitativa no es necesario
determinar una cantidad específica de
muestra

Seguidamente agregaremos una

pequeña cantidad de solución salina
sobresaturada la suficiente cantidad
para que logremos homogenizar
nuestra muestra

Luego colaremos nuestra muestra

homogénea al siguiente vaso o
recipiente y una vez que tengamos el
vaso con la mescla ya filtrada lo
depositaremos en un tubo de vidrio
cubriéndolo con el cubreobjetos lo
dejaremos reposar por un periodo de
15 min Con el objetivo de que las
estructuras parasitarias que sean
menos densas floten y se adhieran al
cubreobjetos

Flor mayerly Huampo rodriguez

 MÉTODO DE SHEATTER
Métodos de realizado con una solución concentrada de azúcar (sacarosa) que permite la concentración de oquistes de
las especies Criptosporidium mismos que flotan en la superficie de la solución método de preferencia para el
diagnóstico de coccidios como Criptosporidium sp Cyclospora cayetanensis e isospora.

OBJETIVO
 Desarrollar la técnica de Sheatter

FUNDAMENTO
Es una técnica cualitativa que se fundamenta en la creación de una diferencia de densidades a partir de una solución
concentrada de sacarosa (azucar) para que las formas parasitarias por diferencia de densidades floten y sean
recuperadas con un cubreobjetos posteriormente sean montadas en un portaobjetos con lugol para darle mejor
contraste o sin él y sean observadas al microcroscopio

MATERIALES:
 Solución concentrada de sacarosa una cuchara
 Una muestra de heces agua destilada
 Dos vasos de plástico o recipientes de vidrio
 Un colador
 Una varilla o un palito
 Cubreobjetos
 Portaobjetos
 Una cuchara Emulsionar 2 g de heces en agua destilada y
seguidamente filtrar si la muestra fue fijada
directamente filtrarla

Añadir solución concentrada de sheatter al

líquido filtrado hasta casi el borde del tubo
centrifugar a 2500 revoluciones por 5 min

Colocar en el borde del tubo un

cubreobjetos por el lapso de 2 a 5 min
luego retirar y depositar sobre el
portaobjetos para una observación
microscópica con el objetivo de 10X y
posteriormente con 40X
Flor mayerly Huampo rodriguez