MTODO DE CONCENTRACIN POR FLOTACIN WILLIS

OBJETIVO: Realizar mtodo de concentracin por flotacin simple.

GENERALIDADES: En 1921 Willis, basndose en mtodos de flotacin simple

anteriores describi el mtodo que lleva su nombre, el cual dada su sencillez, se
puede utilizar en trabajos de campo, ya que para realizarlo nicamente se requiere
microscopio y laminillas. Este mtodo se basa en un principio de flotacin simple,
utilizando una solucin de cloruro de sodio de una densidad entre 1.200 y 1.250,
en la cual los quistes, huevos y larvas flotan perfectamente.

FUNDAMENTO:

Este mtodo est recomendado especialmente para la investigacin de

protozoarios y helmintos. Consiste en preparar la materia fecal con solucin
saturada de cloruro de sodio (NaCl).

Los huevos y los quistes de peso especfico menor que la solucin saturada de
cloruro de sodio tienden a subir y adherirse a un cubreobjetos colocado en
contacto con la superficie del lquido.

MATERIAL Y EQUIPO:

Vasos de precipitado de 50 ml

Tubos de ensayo de 13 X 100 mm

Gradilla

Bajalenguas de madera

Portaobjetos de 26 X 76 mm

Cubreobjetos de 22 X 22 mm

Microscopio

Solucin saturada de cloruro de sodio

Lugol

METODO

1.- Se colocan en el vaso de precipitado de 2 a 3 gr de materia fecal, se aade

una pequea cantidad de solucin saturada de cloruro de sodio, se homogeniza.

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2.- Se vierte en un tubo de ensaye hasta el borde, se coloca el cubreobjetos de tal
manera que quede en contacto con la suspensin y se deja reposar durante 15
minutos.

3.- Transcurridos los 15 minutos se toma el cubreobjetos y se coloca sobre un

portaobjetos al cual se le ha puesto previamente una gota de lugol.

4.- Se observa al microscopio con objetivos de 10X y 40 X.

5.- Anotar resultados de observacin y hacer dibujos.

METODO POR CONCENTRACIN POR FORMALINA - ACETATO DE ETILO

PROPSITO:

Concentrar huevos y larvas de helmintos y quistes de protozoos de las heces. Se

recurre a este mtodo cuando el examen directo es negativo, cuando la excrecin
de quistes es baja e intermitente o para descartar infecciones leves en general,
sobre todo si otros mtodos (sulfato de zinc por Ej.) no han ofrecido resultados
esperados.

El mtodo original utilizaba ter, pero esta sustancia se ha sustituido por acetato
de etilo por ser menos inflamable y explosiva que el ter. Algunos sugieren
centrifugar por 10 minutos en vez de dos minutos para recobrar quistes de
apicomplexa, pero encontramos que se forma demasiado sedimento que impide
realizar el examen

MUESTRA A EXAMINAR:

Heces frescas recolectadas en frasco limpio y seco, de boca ancha, identificado

correctamente.

PREPARACIN DE REACTIVOS:

Formalina al 10%

Formaldehdo 10 mL

Solucin salina 0.85% 90 mL (Puede usar agua destilada en vez de solucin

salina).

MATERIALES:

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-Vasitos de plstico o cartn (30 m!_ de capacidad)

-Tubos de centrfuga de ensayo 13 X 100 mm

-Aplicadores

- Marcadores

- Embudos de 5 cm de dimetro

-Gasa quirrgica en rectngulos de 16 X 16 cm en 2 dobleces

-Parafilm o tapones de hule

-Solucin de formalina al 10%

-Acetato de etilo

-Aplicadores con algodn en un extremo

-Porta-objetos de 7.5 X 2.5 cm (3 X 1 pulgada) o de 7.5 X 5 cm (3 X 2 pulgadas)

-Cubre-objetos

-Gradilla para tubos

-Pipeta graduada de 5 mL

-Balanza de 2 platos para equilibrar tubos

-Solucin de Lugol

-Acetato de etilo

-Frascos con desinfectante para descartar material

PROCEDIMIENTO:

-Identificar frascos, tubos y lminas con la muestra a examinar.

-Transferir 1-2 g de heces a un vaso de plstico o cartn y agregar 10 mL de

formalina.

-Desmenuzar y suspender completamente las heces con ayuda de aplicadores.

-Descartar aplicadores. Dejar fijar mnimo 30 minutos.

-Filtrar por 2 dobleces de gasa a un tubo cnico o de ensayo ayudado por

embudo.

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Descartar gasa. Tapar tubos

-Equilibrar los tubos en balanza de 2 platos junto con los tapones.

-Centrifugara 1,500 rpm por 2 minutos; destapar.

-Descartar el sobrenadante.

-Agregar ms formalina al sedimento, agitando ste con un aplicador, hasta la

mitad del tubo.

-Agregar 2-3 mL de acetato de etilo.

-Tapar el tubo con parafilm o tapn de hule y agitar vigorosamente 15 segundos.

-Centrifugara 1,500 rpm por 2 minutos.

-Al final de la centrifugacin se obtienen 4 capas (Figura 7 a, pg.124): sedimento,

formalina, tapn de detritus y acetato de etilo. Destapar con cuidado y con un
aplicador desprender el tapn de detritus todo alrededor y decantar el
sobrenadante de un solo movimiento.

HUEVOS Y LARVAS DE HELMINTOS; QUISTES DE PROTOZOOS

En el fondo quedar el sedimento a estudiar

Con un aplicador con algodn limpiar las paredes interiores del tubo

Transferir el sedimento a un porta-objetos cubrir con un cubre-objetos y examinar

toda preparacin con objetivo 10X. Pasar a mayores magnificaciones cuando sea
necesario.

Para colorear quistes, agregar una gota de solucin de Lugol.

Descartar material utilizado en desinfectante.

ANTECEDENTES TERICOS

TTULO: "FACTORES EPIDEMIOLGICOS ASOCIADOS A GIARDIASIS EN

PERROS Y NIOS DE LA I.E.I. REPUBLICA DE MALTA - CAYMA "

AUTOR: GABRIELA RUTH AMANQUI SUCAPUCA

INSTITUCIN: UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTN FACULTAD DE

CIENCIAS BIOLGICAS ESCUELA PROFESIONAL Y ACADMICA DE
BIOLOGA.

AO: 2015.
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RESUMEN: La Giardiasis producida por el protozoo flagelado Giardia /amblia ha
logrado permanecer a travs del tiempo debido a su resistencia a los cambios
climticos. Sin embargo, se conoce poco la prevalencia de esta enfermedad y su
potencial zoontico.

La estrecha relacin hombre-mascota crea poblaciones en riesgo en las cuales los

nios se presentan como un grupo de mayor vulnerabilidad. Es por ello que se
realiz el presente estudio sobre los factores epidemiolgicos asociados a la
prevalencia de Giardia en perros y nios de la I.E.I. Republica de Malta, Distrito de
Cayma, Provincia de Arequipa, Departamento de Arequipa, durante los meses de
Diciembre 2014 - Abril 2015, adems determinar las prcticas riesgosas asociadas
a la Giardiasis entre el perro y el nio( a).

Se realiz un estudio prospectivo para lo cual se recolectaron 50 muestras de

heces de perros y 50 muestras de heces de nios preservadas en formol salino,
las cuales fueron procesadas mediante el mtodo de Teleman modificado en el
Laboratorio de Biologa de la Escuela Profesional de Biologa - UNSA.

Adems se realiz una encuesta a los padres de familia haciendo uso de una ficha
epidemiolgica para recolectar datos de los nios y de sus perros tales como
edad, sexo, hbitos higinicos, hbitos alimenticios, aspectos de sanidad
ambiental, raza del perro, vacunacin y desparasitacin del perro, costumbres de
crianza del perro; as mismo las prcticas riesgosas en la relacin nio- perro.

Se obtuvo una prevalencia de Giardiasis en los nios de 8.0% y en los perros de

6.0%. Los factores epidemiolgicos asociados a Giardiasis en nios fue la forma y
frecuencia de consumo de verduras de tallo corto, mientras que en los perros
fueron la edad, raza, adquisicin y tiempo de convivencia, vacunacin,
desparasitacin y visitas al veterinario, recojo y eliminacin de excretas, el aseo
del perro, lavado de recipientes y el cambio de agua para beber; adems de la
prctica riesgosa de dejarse lamer o besar al perro.

TTULO: " PREVALENCIA DE INFECCIN POR Giardia lamblia

Y ALGUNOS FACTORES DE RIESGO ASOCIADOS EN

PREESCOLARES Y ESCOLARES DEL DISTRITO DE LOS

BAOS DEL INCA - CAJAMARCA, 2011-2012"

AUTOR: CLAUDIA CAROLINA RODRGUEZ ULLOA

INSTITUCIN: UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ESCUELA DE

POSTGRADO PROGRAMA DOCTORAL EN CIENCIAS BIOMDICAS

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AO: 2013.

RESUMEN: El presente estudio fue diseado con la finalidad de determinar la

prevalencia de la infeccin por Giardia lamblia y algunos factores de riesgo
asociados en preescolares y escolares de instituciones educativas estatales del
distrito Los Baos del Inca de la regin de Cajamarca; durante octubre de 2009
hasta junio de 2010 se evaluaron muestras fecales de 371 nios de ambos
gneros entre 3 a 12 aos de edad mediante las tcnicas de examen directo y de
concentracin por sedimentacin espontnea en tubo y sedimentacin rpida;
asimismo, se aplic un cuestionario a fin de recolectar informacin para determinar
los posibles factores de riesgo en los nios; los datos fueron sometidos al anlisis
estadstico, mediante el programa SPSS versin 17. Se encontr una prevalencia
general de infeccin por G. lamblia de 26.9% y se identific como factores de
riesgo: la convivencia con dos nios a ms en la vivienda (OR= 2.10; IC 95% 1.28-
3.45) y la eliminacin inadecuada de residuos domsticos (OR= 3.72; IC 95%
1.51-9.20).

Se concluye que la prevalencia de infeccin por G. lamblia en la poblacin

estudiada es relativamente alta, adems, la convivencia con varios nios y la
inadecuada eliminacin de los residuos domsticos son factores importantes
relacionados con el riesgo de adquirir la parasitosis.
.

TTULO: " PARASITOSIS INTESTINAL Y ESTADO NUTRICIONAL EN NIOS

DE3ASAOSATENDIDOS EN EL PUESTO DE SALUD DE SAN GERNIMO,
HUANCAVELICA- 2015

AUTOR: Bach. CCANTO QUISPE, Josein

Bach. DE LA CRUZ GOMEZ, Yenny

INSTITUCIN: UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD DE

ENFERMERA ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE ENFERMERA.

AO: 2015.

RESUMEN: Objetivo. Determinar la relacin que existe entre la parasitosis

intestinal y el estado nutricional en nios de 3 a 5 aos atendidos en el Puesto de
Salud de San Gernimo, Huancavelica- 2015. Materiales y mtodos. Tipo de
investigacin del estudio fue Transversal. Nivel de investigacin Correlacional

Diseo no experimental, transversal, correlaciona!. La poblacin estuvo

conformada por 46 nios y la muestra fue la poblacin total siendo 46 nios
evaluados. El diagnstico parasitolgico fue realizado mediante el mtodo de

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filtracin cuyo reactivo usado fue el cloruro de sodio al 0.9% con su posterior
lectura microscpica y a cada nio se le hizo la medicin antropomtrica
correspondiente para determinar el estado nutricional. Resultados. Existe relacin
entre la parasitosis intestinal y el estado nutricional de los nios de 3-5 aos
atendidos en el Puesto de Salud de San Gernimo es significativa puesto que
presenta un p valor de 0,036 el cual es menor al nivel de significancia estadstica
de 5% (0.05) . De los cuales 27 (58.7%) presenta Giardia lamblia seguido de 19
(41.3%) con Entamoeba Endolimax ambos tipos de parsitos son Protozoos. En
tanto los nios con giardiasis 1 O (21.7%) presentan desnutricin segn la relacin
Peso/Edad; en tanto en la relacin Peso/Talla 7 (15.2%) presentan desnutricin
aguda y en la relacin Talla/Edad 22 (47.8%) presentan talla baja. Por otra parte
de los nios con Entamoeba Endolimax nana, 13 (28.3%) presentan desnutricin
en la relacin Peso/Talla; 11 (23.9%) presentan desnutricin aguda en relacin al
Peso/Talla y 1 O 21.7%) presentan talla baja Ms de la mitad de nios pertenecen
al sexo femenino. 28 nios tienen 3 aos, 1 O con 4 aos y finalmente 08 con 5
aos de edad. Conclusin. Existe relacin entre la parasitosis y el estado
nutricional en los nios de 3 a 5 aos atendidos en el Puesto de Salud de San
Gernimo de los cuales los parsitos ms frecuentes fueron Giardia lamblia y
Entamoeba Endolimax Nana y hubo mayor presencia de desnutricin aguda y,
talla baja.