Práctica N°11.

Determinación de ácido ascórbico en una muestra

(Contenido de Vitamina C)

Fundamento
La vitamina C, o ácido ascórbico, es un compuesto hidrosoluble su papel
biológico principal parece ser el de actuar como cofactor en diversas reacciones
enzimáticas que tienen lugar en el organismo. En su condición de agente
reductor, el ácido ascórbico posee propiedades importantes, por ejemplo,
ayuda a la absorción del hierro al reducirlo a su estado ferroso en el estómago;
protege la vitamina A, vitamina E y algunas vitaminas B de la oxidación;
también favorece la utilización del ácido fólico. Finalmente, la vitamina C es un
antioxidante biológico que protege al organismo del estrés oxidativo provocado
por las especies oxigeno reactivas.

La vitamina C se encuentra principalmente en alimentos de origen

vegetal y puede presentarse en dos formas químicas interconvertibles: ácido
ascórbico (forma reducida) y ácido dehidroascórbico (forma oxidada), siendo
ambas formas funcionales biológicamente y manteniéndose en equilibrio
fisiológico. Si el ácido dehidroascórbico es hidratado se transforma en ácido
dicetogulónico, no activo biológicamente, siendo esta transformación
irreversible. Esta hidratación ocurre espontáneamente en disolución neutra o
alcalina.

O OH
C
OH OH
HO 4 O HO 4 O O C
5
1
O 5
1 O
3 2 3 2 O C
HO OH O O H C OH
Ácido dehidroascórbico
HO C H
CH2 OH

Ácido dicetogulónico

Parte experimental

Material y equipo de laboratorio

 Balanza analítica  3 Matraces Erlenmeyer de

 Soporte universal 125 mL con tapon
 Pinzas para bureta (Matraz para índice de
 1 Buretas de 25 mL yodo)
  Barra de agitación
magnética
 Parrilla con agitación Reactivos
magnética  Tiosulfato de sodio
 Pizeta pentahidratado
 Pipeta volumétrica de 10  Yodato de Potasio
mL  Yoduro de Potasio
 Pipeta volumétrica de 5  Ácido sulfúrico
mL concentrado
 2 Vasos de precipitado de  Indicador de almidón
100 mL
 Agitador de vidrio

Procedimiento

A. Preparación de la muestra:

Se sugiere adquirir una tableta efervescente de vitamina C de 500 mg. Pero se puede
trabajar con tabletas masticables, jugos de fruta (Limón, naranja, guayaba, fresa)

1. Para tabletas efervescentes:

Pesar y disolver 1 tableta en 100 mL de agua esperar a que se disuelva completamente

trasvasar a un matraz volumétrico de 500 mL. Tapar y resguardar en la obscuridad hasta
análisis

2. Para tabletas masticables

Pesar y triturar una tableta con un mortero añadir 10 mL de agua y filtrar la mezcla y
colectarla en un vaso de precipitado, añadir 10 mL de agua al mortero y enjuagar, filtrar
nuevamente la solución. Añadir nuevamente 10 ml al papel filtro y colectar todo en
filtrado. Trasferir cuantitativamente a un matraz volumétrico apropiado (tabletas de 100
mg/ matraz de 100 mL, tabletas de 300 mg/ matraz de 250, tabletas de 500/ matraz de
500 mL) y aforar.

3. Para frutas:

Pesar la fruta de elección y registrar el valor. Exprimir y colectar en el momento el jugo de

la fruta elegida, colar para separar el bagazo de la fruta, se recomienda emplear las
cantidades sugeridas mostradas a continuación para cada prueba de la fruta elegida.

15 g de jugo de fresa

20 g de Jugo de naranja
20 g de jugo de limón

5 g de jugo de guayaba

B. Valoración de la muestra

1. Limpiar, llenar y ajustar la bureta a 0 mL con la solución de tiosulfato

2. Tomar una alícuota de 20 mL de la solución de Yodato de potasio y transferirla a
un matraz Erlenmeyer
3. Añadir aproximadamente 4 mL de la solución de ácido sulfúrico.
4. Pesar 0.1 g de yoduro de potasio y agregarlos al matraz Erlenmeyer
5. Tapar rápidamente el matraz y agitar fuertemente en forma circular, evitando el
contacto con el tapón y la boca del matraz
6. Resguardar en un espacio obscuro el matraz tapado por espacio de 3 minutos
7. Añadir la cantidad adecuada dependiendo de la muestra [10 mL de alícuota
(tabletas efervescentes y masticables) ó la cantidad de jugo de fruta elegida] al
matraz que contiene yodo, agitar con movimientos circulares por 1 minuto
8. Comenzar la valoración agregando la solución de tiosulfato al matraz con yodo
9. Cerrar la bureta cuando la solución cambie de color ámbar a amarillo claro
10.Añadir 2 o 3 gotas del indicador de almidón agitar y observar la coloración (negro-
Azul)
11.Continuar agregando la solución de tiosulfato hasta que la solución sea del color de
la muestra original
12.Registrar el volumen de tiosulfato gastado en la valoración
13.Realizar el proceso 4 veces mínimo

Resultados
 Reportar el valor de la concentración de vitamina C en mg por unidad (tableta ó
fruta)
 Reportar el valor de concentración de vitamina C por cada 100 g de muestra.
 Realizar una tabla comparativa para conocer la muestra con mayor contenido de
vitamina C