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KARL FISHER APPARATUS AND ITS PERFORMANCE

VERIFICATION
RICK JAIRAM, ROBERT METCALFE, PH.D., AND YU-HONG TSE, PH.D. GlaxoSmithKline Canada, Inc.

La titulación Karl Fisher es uno de los métodos más comunes y

sensibles utilizados en el laboratorio analítico. La determinación
de agua por valor se basa en la reacción cuantitativa del agua con
una solución anhidra de dióxido de azufre y yodo en presencia de
un tampón que reacciona con los iones de hidrógeno. Esta titulación
es un proceso de dos etapas:
SO2 + MeOH + RN → (RNH) SO3Me (14.1) (RNH) SO3Me + I2 + H2O + 2RN
→ (RNH) SO4Me + 2 (RNH) I (14.2)
donde RN es una base, típicamente piridina o imidazol. La reacción
(14.1) alcanza el equilibrio y produce metilsulfito como intermedio
de reacción. Reacción (14.2) El proceso redox, es muy rápido. A
partir de la ecuación (14.2) se puede ver la relación directa entre
el consumo de agua y yodo, que permite determinar la cantidad de
agua. La esterificación completa del dióxido de azufre con el
alcohol, y la capacidad de la base para neutralizar el ácido
metilsulfuroso, son los requisitos clave para que la reacción
anterior sea estequiométrica. La piridina se utilizó al principio
del desarrollo del método. La reacción fue lenta y el punto final
inestable debido a la débil basicidad de la piridina. El sistema
de piridina tampona a aproximadamente pH 4. Se ha usado una base
más fuerte, imidazol, para reemplazar la piridina, ya que brinda
una respuesta más rápida y tiene las ventajas de menor toxicidad y
menor olor. El rango de pH óptimo para el tampón de imidazol de
SO2 es a pH 6. Es importante que el pH de la reacción de Karl
Fisher se mantenga dentro del rango de 5 a 7. Fuera de este rango
de pH recomendado, es posible que no se alcance el punto final.
Hay dos tipos de titulaciones Karl Fisher: volumétricas y
coulométricas. La titulación volumétrica se utiliza para determinar
cantidades relativamente grandes de agua (1 a 100 μg) y se puede
realizar utilizando el sistema de uno o dos componentes. La mayoría
de los tituladores disponibles en el mercado hacen uso del
titulador de un componente, que se puede comprar en dos potencias;
2 mg de agua por mililitro de valorante y los 5 mg de agua por
mililitro de valorante. La elección de la concentración depende de
la cantidad de agua en la muestra y cualquier limitación del tamaño
de la muestra. En ambos casos, la muestra se disuelve típicamente
en una solución de metanol. El yodo / SO2 / piridina (imidazol)
requerido para la reacción se titula en la solución de muestra de
forma manual o automática. El punto final de la reacción
generalmente se detecta bivoltaméricamente. La titulación
coulométrica se utiliza para determinar concentraciones
relativamente bajas de agua (10 μg a 10 mg) y requiere dos
reactivos: un catolito y un anolito (la solución generadora). El
yodo requerido para la reacción se genera in situ por la oxidación
anódica del yoduro. 2I− → I2 + 2e− (14.3)

El yodo reacciona entonces con el agua que está presente. La

cantidad de agua titulada es proporcional a la corriente total
(según la ley de Faraday) utilizada para generar el yodo necesario
para reaccionar con el agua. Un mol de yodo reacciona
cuantitativamente con 1 mol de agua. Como resultado, 1 mg de agua
es equivalente a 10,71 C. Basado en este principio, el contenido
de agua de la muestra se puede determinar por la cantidad de
corriente que fluye durante la electrólisis. Por esta razón, el
método coulométrico se considera una técnica absoluta y no se
requiere una estandarización de los reactivos.

14.2 ALCANCE DEL CAPITULO

La instrumentación Karl Fisher y su verificación de desempeño se
discuten en este capítulo. Se presentan la instrumentación, las
prácticas de calibración y las dificultades comunes que se
encuentran. No se discuten la validación del método ni los
problemas específicos del método.

14.3 INSTRUMENTACIÓN
El aparato Karl Fisher debe diseñarse para excluir la humedad,
administrar el valorante y detectar el punto final. El aire en el
sistema se mantiene seco con un desecante adecuado, y el recipiente
de titulación se puede purgar por medio de una corriente de
nitrógeno seco o aire. Para la detección de puntos finales, la
mayoría de las unidades disponibles en el mercado utilizan un
método bivoltametric para indicar que se ha alcanzado el punto
final. Para este método, se aplica una corriente constante de
aproximadamente 20 μA a través de un par de electrodos de platino
que están separados aproximadamente 2,5 mm. A medida que avanza la
titulación, el agua reacciona con el yodo y se consume. Cuando se
alcanza el punto final y se consume toda el agua, hay una
acumulación de yodo libre en la solución. El yodo libre causa la
conducción iónica en la solución. Como resultado, se debe reducir
la tensión para mantener constante la corriente de polarización
[1,2]. Cuando el voltaje cae por debajo de un valor definido, la
titulación se detiene. La figura 14.1 muestra un diagrama
esquemático de un valorador KF típico. En algunos casos (ver más
abajo) se requiere un horno de secado KF para obtener el agua de
una muestra en el recipiente de titulación. Para estos casos
especiales, una muestra sólida (generalmente) se coloca en un horno
KF especialmente diseñado donde la muestra se calienta y el agua
entra en la fase de vapor. Una corriente de gas portador seco
(generalmente, N2 o aire) barre la humedad liberada en el
recipiente de reacción, donde se titula mediante el método
coulométrico o volumétrico. Es crítico que el gas portador esté
seco y que no haya fugas a lo largo de la ruta hacia el recipiente
de reacción. Pasar el gas portador sobre un tamiz molecular
activado antes de la muestra asegurará que el gas esté seco.

La reacción de KF depende del agua libre disponible para la

titulación. Los instrumentos pueden diseñarse para homogeneizar la
muestra y liberar agua antes de la titulación. En este caso, se
puede usar un mezclador de alta velocidad directamente en el
recipiente de titulación. Este es un accesorio particularmente útil
para la determinación de agua en tabletas o ciertos productos
alimenticios que son difíciles de preparar para el análisis.

14.3.1 Verificación de rendimiento

La verificación del rendimiento del aparato Karl Fisher debe
incluir VERIFICACIONES DE LA PRECISIÓN Y LA PRECISIÓN DEL
INSTRUMENTO. LA LINEALIDAD DEL INSTRUMENTO DEBE DETERMINARSE EN LA
INSTALACIÓN. El primer paso es estandarizar el instrumento (ver
Sección 14.3.2); El agua pura es suficiente para este propósito.
El estándar de dihidrato de tartrato de sodio (contenido de agua
15.66} 0.05%) se puede utilizar para evaluar la precisión, la
precisión y la linealidad del instrumento. Por lo general, uno
medirá el contenido de agua de al menos cinco muestras, en el rango
del usuario del instrumento deseado. Por ejemplo, el contenido de
agua de las muestras de tartrato de sodio deshidratado fue de 65
mg (aprox. 10 mg H2O), 195 mg (aprox. 30 mg H2O), 325 mg (aprox.
50 mg H2O), 455 mg (aprox. 70 mg). H2O), y se pudieron determinar
650 mg (100 mg H2O). Calcule el porcentaje de agua para evaluar la
precisión del instrumento. Los resultados deben estar dentro del
98 al 102% de un 15,66% de agua. Determine el% RSD del porcentaje
de agua encontrado para evaluar la precisión del instrumento. El%
RSD debe ser menor o igual al 1%. Finalmente, trace el contenido
de agua esperado frente al porcentaje de contenido de agua para
evaluar la linealidad de la respuesta del instrumento. Un valor de
coeficiente de correlación (r) de 0.999 o mayor es aceptable.

14.3.2 Estandarización
La estandarización se debe realizar diariamente, ya que el
valorante absorberá la humedad con el tiempo. La estandarización
se realiza normalmente utilizando uno de los tres estándares: (1)
tartrato de disodio dihidratado (15,66% de agua, p / p), (2)
estándares de agua disponibles comercialmente con una concentración
certificada de agua (por lo general, 10 mg de agua por gramo de
estándar), o (3) agua pura. En todos estos casos, se debe usar un
balance adecuado, preferiblemente uno que dé al menos} 0. l mg de
resolución. Cuando se usa dihidrato de tartrato disódico, se
disuelven en metanol muestras que varían de 50 a 120 mg, y se
determina la concentración del reactivo KF. En función del volumen
de titulante utilizado, el peso de la muestra y el porcentaje de
agua en el tartrato disódico dihidrato (15,66% p / p), se puede
calcular el factor de estandarización. Un inconveniente de este
método es la solubilidad del tartrato disódico dihidrato en
metanol. Se recomienda que el dihidrato de tartrato disódico se
divida finamente y que se proporcione un tiempo de extracción
adecuado para que los sólidos se disuelvan. Si se usa un estándar
de agua, se inyectan muestras del estándar de agua de 1,0 a 1,5 g
en el metanol a través de una jeringa. Este método se realiza mejor
abriendo la ampolla que contiene el estándar de agua, enjuagando
una jeringa de 10 ml con aproximadamente 1 ml del estándar y luego
llenando la jeringa con el contenido restante de la ampolla. Luego
se inyectan alícuotas de aproximadamente 1 ml en el recipiente, y
los pesos reales se determinan por diferencia. La estandarización
del valorante de KF con agua purificada es ampliamente aceptada y
una jeringa de vidrio, se puede agregar un volumen conocido de agua
purificada en el recipiente de valoración y se puede determinar el
valor de KF para el valorante. Este método es altamente dependiente
del operador y no se recomienda para mediciones en las que la
precisión de la determinación es crítica. El método preferido sería
agregar una cantidad conocida de agua en peso. En el método
coulométrico, la estandarización no es necesaria, ya que la
corriente consumida se puede medir absolutamente. Sin embargo, debe
verificarse periódicamente un estándar con contenido de agua
conocido para garantizar que el sistema funciona correctamente. En
este caso, generalmente se utiliza un estándar de agua certificado,
y la cantidad de agua se determina y se compara con la cantidad
que está certificada para estar presente. Algunos tituladores
coulométricos están equipados con un horno para liberar la humedad
de las muestras que son insolubles en metanol o que reaccionan con
I2, metanol o uno de los otros reactivos. Los estándares sólidos
(por ejemplo, monohidrato de citrato de potasio) están disponibles
para verificar el horno, y esta verificación se realiza después de
que se haya verificado la función del coulómetro.

14.3.3 Medición de muestras

El manejo de la muestra, su almacenamiento y la cantidad de muestra
utilizada son muy importantes a considerar cuando se realiza una
medición de KF. Al tomar una muestra del material a granel, se debe
tener mucho cuidado para excluir la humedad atmosférica, que es
una de las fuentes de error más comunes. Si la muestra absorbe o
desorbe el agua durante su manejo, ya no se puede determinar el
contenido de humedad real. La muestra también debe contener la
cantidad promedio de agua contenida en el material en su totalidad.
Este es un problema particular cuando se trata de líquidos no
polares tales como grasas o aceites donde el agua flota en la parte
superior o se asienta en el fondo del contenedor. En esta situación,
los líquidos deben mezclarse completamente justo antes de tomar la
muestra para dispersar el agua de manera uniforme. Una vez que se
toma una muestra, es mejor determinar el agua lo más rápido posible.
Si se debe almacenar una muestra, es mejor mantenerla en una botella
de vidrio pequeña y bien cerrada con un tapón de rosca. El vidrio
es mejor que el plástico, ya que el plástico no es hermético al
vapor de agua. El tamaño de la botella debe ser lo más pequeño
posible para minimizar el espacio de gas que se encuentra sobre la
muestra. Un espacio de gas más pequeño significará menos vapor de
humedad. El tamaño de la muestra que se utilizará depende del
contenido de agua esperado y del grado de precisión que se desea.
Si se requiere un alto nivel de precisión, se debe usar un tamaño
de muestra grande para minimizar el efecto de la humedad
atmosférica. Para la KF titrimétrica, la Farmacopea de los Estados
Unidos recomienda usar una muestra que contenga entre 10 y 250 mg
de agua. La cantidad mínima de agua generalmente se acuerda en 10
mg.

14.4 PROBLEMAS Y SOLUCIONES COMUNES

La humedad atmosférica es una de las principales causas de error
en las titulaciones Karl Fischer. La humedad puede entrar en la
muestra, el titulador y el recipiente de titulación. El aparato y
el valorante deben sellarse contra la humedad atmosférica y
ubicarse lejos de las áreas de alta humedad del laboratorio. Se
pueden usar desecantes y gases de purga seca para reducir el ingreso
de humedad. Se requiere un acondicionamiento adecuado del aparato
para eliminar la humedad presente en el aparato antes de la
titulación. Sin embargo, la humedad entrará en el aparato durante
la introducción de la muestra en un entorno de laboratorio normal.
Con la mezcla de alta velocidad, esta introducción de humedad puede
causar sesgos debido a la homogeneización del aire que contiene
agua en la muestra. Para reducir el sesgo cuando se utiliza la
mezcla de alta velocidad, es necesario aplicar una corrección de
fondo o purgar el compartimiento de la muestra para excluir la
humedad. El sistema de entrega de titrantes también puede ser una
fuente de error. El sistema de entrega debe ser preciso en la
cantidad de pasos necesarios para valorar una cantidad fija de
agua. El suministro de titrante se controla normalmente mediante
una bomba peristáltica o una bureta automática. Ambos son métodos
aceptables para la entrega de titrante; sin embargo, la bomba
peristáltica se basa en el contacto entre los rodillos de la bomba
y el tubo de tigre, que se presiona en posición mediante una
platina. Por lo tanto, la calidad de la tubería que se usa es
crítica para la precisión del instrumento, por lo que esta tubería
debe examinarse con frecuencia para asegurarse de que esté en buen
estado de funcionamiento (libre de obstrucciones y no comprimida
hasta el punto de que el flujo esté restringido ). Los rodillos de
la bomba también deben examinarse para asegurarse de que funcionan
bien, y se debe examinar la platina para asegurarse de que sujeta
el tubo firmemente contra los rodillos. La bureta automática es en
realidad una jeringa accionada por un servomotor medido. Para este
tipo de sistema de entrega, la preocupación principal es que el
servomotor esté funcionando correctamente (es decir, suministrando
la cantidad correcta de líquido) y que no haya fugas, bloqueos o
burbujas de aire en las líneas o en la jeringa. Dependiendo de las
muestras que se estén titulando, la contaminación del electrodo
puede ser un problema. Los electrodos pueden recubrirse cuando se
valoran sustancias como los aceites y azúcares.

Esto da como resultado una detección de punto final retrasada y

una sobre valoración. Un color marrón oscuro en los electrodos
indica que deben limpiarse. Los recubrimientos generalmente se
pueden eliminar con solventes orgánicos polares o limpiando el
platino físicamente. Las reacciones secundarias pueden causar
problemas importantes en la determinación del agua [3]. Algunas
especies químicas reaccionan con metanol para producir agua que
conducirá a resultados de agua más altos, algunas reaccionan con
agua (resultados bajos) y algunas reaccionan con yodo (resultado
alto). Los aldehídos y las cetonas reaccionan con el metanol para
producir acetales y cetales. El agua es un subproducto de esta
reacción, y su producción conduce a contenidos de agua erróneamente
altos: esto puede remediarse utilizando reactivos de un componente
disponibles comercialmente que contienen 2-metoxietanol y 2-
cloroetanol en lugar de metanol. En presencia de SO2 y base, los
aldehídos experimentan lo que se llama la adición de bisulfito.
Esta reacción consume agua. Adición de bisulfito: CH3CHO + H2O +
SO2 + NR → HC (OH) SO3 (HNR) (14.6) La cinética de este tipo de
reacción es lenta, por lo que se puede evitar iniciando la reacción
inmediatamente después de la adición de la muestra. Muchas muestras
tienen potenciales redox tales que pueden ser oxidadas por el yodo.
Por lo tanto, el yodo en el valorante puede ser consumido por
muestras fácilmente oxidables que darán un valor falso alto para
el contenido de agua. Algunas sustancias comunes que pueden ser
oxidadas por el yodo son ácido ascórbico, arsenito (AsO2−),
arseniato (AsO43−), boricacid, tetraborate (B4O72−), carbonate
(CO32−), disulfite (S2O52−), hierro (II) sales , derivados de
hidrazina, hidróxidos (OH-), bicarbonatos (HCO3−), sales de cobre
(I), mercaptanos (RSH), nitrito (NO2−), algunos óxidos metálicos,
peróxidos, selenito (SeO32−), silanoles (R3SiOH), Sales de sulfito
(SO32−), telurito (TeO32−), tiosulfato (S2O32−) y estaño (II). Para
situaciones como estas donde el material bajo análisis reacciona
con el yodo, se puede usar un horno para liberar la humedad de la
muestra, que luego se transporta al recipiente de reacción y se
titula sin interferencia.
14.1 INTRODUCTION
The Karl Fisher titration is one of the most common and most sensitive methods used in the analytical laboratory.
The titrimetric determination of water is based on the quantitative reaction of water with an anhydrous solution of
sulfur dioxide and iodine in the presence of a buffer that reacts with hydrogen ions. This titration is a two-stage
process:
SO2 + MeOH + RN→ (RNH)SO3Me (14.1) (RNH)SO3Me + I2 + H2O + 2RN→ (RNH)SO4Me + 2(RNH)I (14.2)
where RN is a base, typically pyridine or imidazole. Reaction (14.1) reaches equilibrium and produces methylsulfite
as the reaction intermediate. Reaction (14.2) the redox process, is very rapid. From equation (14.2) the direct relation
between water and iodine consumption can be seen, which enables the amount of water to be determined. Complete
esterification of the sulfur dioxide with the alcohol, and the ability of the base to neutralize the methyl sulfurous acid,
are the key requirements for the reaction above to be stoichiometric. Pyridine was used in the beginning of the
development of the method. The reaction was slow and the endpoint unstable because of weak basicity of pyridine.
The pyridine system buffers at about pH 4. A stronger base, imidazole, has been used to replace pyridine since it
gives a faster response and has the advantages of lower toxicity and decreased odor. The optimal pH range for the
SO2 imidazole buffer is at pH 6. It is important that the pH of the Karl Fisher reaction be maintained within the range
5 to 7. Outside this recommended pH range, the endpoint may not be reached. There are two types of Karl Fisher
titrations: volumetric and coulometric. Volumetric titration is used to determine relatively large amounts of water (1
to 100 μg) and can be performed using the single- or two-component system. Most commercially available titrators
make use of the one-component titrant, which can be purchased in two strengths; 2 mg of water per milliliter of
titrant and the 5 mg of water per milliliter of titrant. The choice of concentration is dependent on the amount of water
in the sample and any sample size limitations. In both cases, the sample is typically dissolved in a methanol solution.
The iodine/SO2/pyridine (imidazole) required for the reaction is titrated into the sample solution either manually or
automatically. The reaction endpoint is generally detected bivoltametrically. Coulometric titration is used to
determine relatively low concentrations of water (10 μg to 10 mg) and requires two reagents: a catholyte and an
anolyte (the generating solution). The iodine required for the reaction is generated in situ by the anodic oxidation of
iodide. 2I− → I2 + 2e− (14.3)
The iodine then reacts with the water that is present. The amount of water titrated is proportional to the total current
(according to Faraday’s law) used in generating the iodine necessary to react with the water. One mole of iodine
reacts quantitatively with 1 mol of water. As a result, 1 mg of water is equivalent to 10.71 C. Based on this principle,
the water content of the sample can be determined by the quantity of current that flows during the electrolysis. For
this reason, the coulometric method is considered an absolute technique, and no standardization of the reagents is
required.

14.2 SCOPE OF CHAPTER

The Karl Fisher instrumentation and its performance verification are discussed in this chapter. The instrumentation,
calibration practices, and common difficulties that are encountered are presented. Neither method validation nor
method specific problems are discussed.

14.3 INSTRUMENTATION
Karl Fisher apparatus has to be designed to exclude moisture, deliver titrant, and to detect the endpoint. The air in the
system is kept dry with a suitable desiccant, and the titration vessel may be purged by means of a stream of dry
nitrogen or air. For endpoint detection, most commercially available units use a bivoltametric method to indicate that
the endpoint has been reached. For this method a constant current of about 20 μA is applied across a pair of platinum
electrodes that are about 2.5 mm apart. As the titration proceeds, water reacts with iodine and is consumed. When the
endpoint is reached and all the water is consumed, there is a buildup of free iodine in solution. The free iodine causes
ionic conduction in the solution. As a result, the voltage must be reduced to keep the polarization current constant
[1,2]. When the voltage drops below a defined value, the titration is stopped. Figure 14.1 shows a schematic diagram
of a typical KF titrator. In some cases (see below) a KF drying oven is required to get the water from a sample into
the titration vessel. For these special cases, a solid sample (usually) is placed into a specially designed KF oven
where the sample is heated, and the water goes into the vapor phase. A stream of dry carrier gas (usually, N2 or air)
sweeps the liberated moisture into the reaction vessel, where it is titrated by either the coulometric or the volumetric
method. It is critical that the carrier gas is dry and that there are no leaks along the pathway to the reaction vessel.
Passing the carrier gas over activated molecular sieve prior to the sample will ensure that the gas is dry.

The KF reaction depends on free water available for titration. Instruments may be designed to homogenize the
sample to release water prior to the titration. Inthis case, a high-speed blender may be used directly in the titration
vessel. This is a particularly useful accessory for determination of water in tablets or certain food products that are
difficult to prepare for analysis.

14.3.1 Performance Verification

The performance verification of Karl Fisher apparatus should include checks for the accuracy and precision of the
instrument. The linearity of the instrument should be determined at installation. The first step is to standardize the
instrument (see Section 14.3.2); pure water is sufficient for this purpose. Sodium tartrate dihydrate standard (water
content 15.66 •} 0.05%) can be used to assess the accuracy, precision, and linearity of the instrument. Typically, one
would measure the water content of at least five samples, over the intended instrument user range. For example, the
water content of sodium tartrate dehydrate samples that were 65 mg (ca. 10 mg H 2O), 195 mg (ca. 30 mg H2O), 325
mg (ca. 50 mg H2O), 455 mg (ca. 70 mg H2O), and 650 mg (100 mg H2O) could be determined. Calculate the percent
water to assess the instrument’s accuracy. The results should be within 98 to 102% of 15.66% water. Determine the %
RSD of the percent water found to assess the precision of the instrument. The % RSD should be less than or equal to
1%. Finally, plot the expected water content versus the percent water content to assess the linearity of the instrument’s
response. A correlation coefficient (r) value of 0.999 or greater is acceptable.

14.3.2 Standardization
Standardization should be performed daily, since the titrant will absorb moisture over time. The standardization is
typically performed using one of three standards: (1) disodium tartrate dihydrate (15.66% water, w/w), (2)
commercially available water standards with a certified concentration of water (typically, 10 mg of water per gram of
standard), or (3) pure water. In all of these cases, a suitable balance should be used, preferably one that gives at least
•}0. l mg of resolution. When disodium tartrate dihydrate is used, samples ranging from 50 to 120 mg are dissolved
in methanol, and the concentration of the KF reagent is determined. Based on volume of titrant used, the weight of the
sample and the percent water in the disodium tartrate dihydrate (15.66% w/w), the standardization factor can be
calculated. One pitfall with this method is the solubility of the disodium tartrate dihydrate in methanol. It is
recommended that the disodium tartrate dihydrate be finely divided and that a suitable extraction time be given for the
solids to dissolve. If a water standard is used, samples of the water standard ranging from 1.0 to 1.5 g are injected into
the methanol via syringe. This method is best performed by opening the ampoule that contains the water standard,
rinsing out a 10-mL syringe with about 1 mL of the standard, and then filling the syringe with the remaining contents
of the ampoule. Aliquots of approximately 1 mL are then injected into the vessel, and the true weights are determined
by difference. Standardization of the KF titrant using purified water is widely accepted andglass syringe, a known
volume of purified water can be added in the titration vessel, and the KF value for the titrant can be determined. This
method is highly operator dependent and is not recommended for measurements where the accuracy of the
determination is critical. The preferred method would be to add a known quantity of water by weight. In the coulometric
method, standardization is not necessary, since the current consumed can be measured absolutely. However, a standard
with known water content should be checked periodically to ensure that the system is functioning properly. In this
case, a certified water standard is generally used, and the amount of water is determined and compared with the amount
that is certified to be present. Some coulometric titrators are equipped with an oven for liberating the moisture from
samples that are either insoluble in methanol or that react with I2, methanol, or one of the other reagents. Solid standards
(e.g., potassium citrate monohydrate) are available for checking the oven, and this check is performed after the
coulometer function has been verified.

14.3.3 Measurement of Samples

The handling of the sample, its storage, and the amount of sample used are very important to consider when making a
KF measurement. When taking a sample from the bulk material, great care must be taken to exclude atmospheric
moisture, which is one of the most common sources of error. If the sample absorbs or desorbs water during its handling,
the true moisture content can no longer be determined. The sample must also contain the average amount of water that
is contained in the material as a whole. This is a particular problem when dealing with nonpolar liquids such as fats or
oils where the water is floating on the top or settled to the bottom of the container. In this situation the liquids must be
mixed thoroughly just prior to sampling to disperse the water evenly. Once a sample is taken, it is best to determine
the water as quickly as possible. If a sample must be stored, it is best to keep it in a small, tightly sealed glass bottle
with a screw cap. Glass is better than plastic since plastic is not water vapor–tight. The size of the bottle should be as
small as possible to minimize the gas space that is above the sample. A smaller gas space will mean less moisture
vapor. The size of the sample to be used depends on the expected water content and the degree of accuracy that is
desired. If a high level of accuracy is required, a large sample size should be used to minimize the effect of atmospheric
moisture. For titrimetric KF, the United States Pharmacopoeia recommends using a sample that will contain between
10 and 250 mg of water. The minimum amount of water is generally agreed to be 10 mg.
14.4 COMMON PROBLEMS AND SOLUTIONS
Atmospheric moisture is a major cause of error in Karl Fischer titrations. Moisture can enter the sample, titrant, and
titration vessel. The apparatus and titrant mustbe sealed against atmospheric moisture and situated away from high
humidity areas of the laboratory. Desiccants and dry purge gases can be used to reduce moisture ingress. Proper
conditioning of the apparatus is required to remove moisture present in the apparatus before the titration. Moisture
will, however, enter the apparatus during introduction of the sample in a normal lab environment. With high-speed
blending, this introduction of moisture can cause bias due to homogenizing air containing water into the sample. To
reduce bias when highspeed blending is used, it is necessary to apply background correction or purge the sample
compartment to exclude moisture. The titrant delivery system can also be a source of error. The delivery system needs
to be precise in the number of steps required to titrate a fixed amount of water. The delivery of titrant is typically
controlled by either a peristaltic pump or an automatic buret. Both are acceptable methods for the delivery of titrant;
however, the peristaltic pump relies on the contact between the pump rollers and the tygon tubing, which is pressed
into position by a platen. Therefore, the quality of the tubing that is used is critical to the accuracy of the instrument,
so this tubing should be examined frequently to make sure that it is in good working order (free of blockages and not
pinched to the point that flow is restricted). The pump rollers should also be examined to make sure that they are
operating well, and the platen should be examined to make sure that it holds the tubing tightly against the rollers. The
automatic buret is actually a syringe driven by a metered servomotor. For this type of delivery system the key concerns
are that the servomotor is operating properly (i.e., delivering the correct amount of liquid) and that there are no leaks,
blockages, or air bubbles in the lines or in the syringe itself. Depending on the samples being titrated, electrode
contamination may be an issue. The electrodes may become coated when substances such as oils and sugars are titrated.
This results in delayed endpoint detection and an overtitration. A dark brown color on the electrodes indicates that they
should be cleaned. The coatings can usually be removed by polar organic solvents or by cleaning the platinum
physically. Side reactions can cause major problems in the determination water [3]. Some chemical species react with
methanol to produce water that will lead to higher water results, some react with water (low results), and some react
with iodine (high result). Aldehydes and ketones react with methanol to produce acetals and ketals. Water is a by-
product of this reaction, and its production leads to erroneously high water contents: This can be remedied by using
commercially available one-component reagents that contain 2-methoxyethanol and 2-chloroethanol rather than
methanol. In the presence of SO2 and base, aldehydes, undergo what is called the bisulfite addition. This reaction
consumes water. Bisulfite addition: CH3CHO + H2O + SO2 + NR → HC(OH)SO3(HNR) (14.6)
The kinetics of this type of reaction are slow, so this can be avoided by starting the reaction immediately after sample
addition. Many samples have redox potentials such that they can be oxidized by iodine. Therefore, the iodine in the
titrant may be consumed by readily oxidizable samples that will give a false high value for the water content. Some
common substances that can be oxidized by iodine are ascorbic acid, arsenite (AsO2−), arsenate (AsO43−), boricacid,
tetraborate (B4O72−), carbonate (CO32−), disulfite(S2O52−), iron(II) salts, hydrazine derivatives, hydroxides (OH −),
bicarbonates (HCO3−), copper(I) salts, mercaptans (RSH), nitrite (NO2−), some metal oxides, peroxides, selenite
(SeO32−), silanols (R3SiOH), sulfite (SO32−), tellurite (TeO32−), thiosulfate (S2O32−), and tin(II) salts. For situations
such as these where the material under analysis reacts with iodine, an oven can be used to liberate the moisture from
the sample, which is then carried into the reaction vessel and titrated without interference.