CLASE 8 Cinética Enzimática

𝐴+𝐵 → 𝐶 + 𝐷

Cinética Enzimática
 CLASE 8 Cinética Enzimática
Qué es una enzima?
• Son macromoléculas (proteínas)
• Catalizan reacciones químicas que sean posibles energéticamente
• las enzimas no son consumidas en las reacciones que catalizan pero si se saturan
• Son específicas
• Aceleran una reacción química
• Presenta sitios activos donde se lleva la catálisis
 Consideraciones
• Los modelos cinéticos se basan en datos en operación batch
• El volumen de líquido es constante.
• Se opera con un único sustrato y una única enzima
• Se conocen las concentraciones iniciales de sustrato, [S0] y enzima, [E0].

Cinética Enzimática
𝜈 = 𝑡𝑎𝑠𝑎 𝑜 𝑣𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑑𝑒 𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒𝑙 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜 𝑜 𝑒𝑙 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑒𝑛 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠/𝐿 ∗ 𝑠.

𝑘2 = 𝐶𝑜𝑛𝑠𝑡𝑎𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝑣𝑒𝑙𝑜𝑐𝑖𝑑𝑎𝑑.

𝑉𝑚 = 𝑘2 [𝐸0] ó 𝑉𝑚𝑎𝑥
(1)

𝐾𝑚 =
Cinética de tipo Michaelis-Menten

Cinética Enzimática
 𝜈

Cinética Enzimática
 Linealizando la Ecuación (1)
𝑆0 ; [𝐸0]

Diagrama Lineweaver-Burk
• Los puntos de datos a bajas concentraciones de sustrato
Cinética Enzimática influyen en la pendiente y la intersección, más que en las
concentraciones altas de sustrato
Diagrama Eadie–Hofstee
Reorganizando la Ecuación (1)

• Este método para calcular

parámetros puede estar
sujeto a grandes errores ya
que ambas coordenadas
contienen v.
• Hay menos desviación en
los puntos con baja
concentración de sustrato
[S]

Cinética Enzimática
Diagrama Hanes–Woolf.
Reorganizando la Ecuación (1)

• Esta gráfica se utiliza para

calcular de una manera
más precisa la velocidad
máxima Vm

Cinética Enzimática
Cinética Batch
En función del consumo de sustrato: Integrando se obtiene:

Igualando con (1) Dividiendo en Km

1 𝑆0 1 𝑆0 − 𝑆 𝑉𝑚
∗ 𝐿𝑛 =− +
𝑡 𝑆 𝐾𝑚 𝑡 𝐾𝑚

Cinética Enzimática
 1 𝑆0 1 𝑆0 − 𝑆 𝑉𝑚
∗ 𝐿𝑛 =− +
𝑡 𝑆 𝐾𝑚 𝑡 𝐾𝑚
𝑉𝑚
𝐾𝑚

1
−
𝐾𝑚
𝑆0
𝑆
∗ 𝐿𝑛
1
𝑡

𝑆0 − 𝑆
𝑡

Cinética Enzimática
Durante una reacción catalizada por enzimas, se han
obtenido los siguientes datos experimentales, evaluando
dos concentraciones iniciales de enzima

[E0] = 0.015 g/L [E0] = 0.00875 g/L

[S] (g/l)
v (g/l-min) v (g/l-min)
1.14 20 0.67
0.87 10 0.51 a. Hallar Km.
0.7 6.7 0.41 b. Encuentre Vm para [E0] = 0.015 g/l.
0.59 5 0.34 c. Encuentre Vm [E0] = 0.00875 g/l.
0.5 4 0.29 d. Halle k2.
0.44 3.3
0.39 2.9
0.35 2.5

Ejercicio
 Homework.
¿Qué es una
unidad
enzimática?