Alayo Rodriguez Nilder Marino PDF

Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA
A
IC
M
UI
Q
“IDENTIFICACIÓN PRELIMINAR DE
O
FITOCONSTITUYENTES EN LAS INFLORESCENCIAS BI
Y
DE Bejaria Aestuans L. (purum - rosa)”.
IA
AC
TESIS I
RM
PARA OBTAR EL GRADO ACADÉMICO

FA
DE
DE
BACHILLER EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA

CA
TE
AUTORES:
IO
 Alayo Rodríguez, Nilder Marino.

BL
 Guevara Enríquez, Leslie Katherine.

BI
ASESORA:
 Mg. Soto Vásquez, Marilú Roxana.
TRUJILLO - PERÚ
2012
Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú.
Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/
PRESENTACIÓN
SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO:
A
IC
Dando cumplimiento a lo establecido por el reglamento para trabajos de
M
UI
investigación de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad
Q
O
Nacional de Trujillo, sometemos a vuestra consideración y elevado criterio
profesional el presente trabajo de

BI
investigación titulado“Identificación
Y
IA
preliminar de fitoconstituyentes en las inflorescencias de Bejaria aestuans L.

AC
(purum - rosa)”.
RM
Es propicia esta oportunidad para manifestar el más sincero

FA
DE
reconocimiento a nuestra Alma Máter y su plana docente, que con su capacidad y

CA
buena voluntad contribuyen con nuestra formación profesional.

TE
Dejamos a criterio, señores miembros del jurado la calificación del

IO
presente trabajo de investigación científica.

BL
BI
Trujillo, Enero del 2012
DEDICATORIA
A nuestros padres, por su comprensión y apoyo incondicional. Nos han
A
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M
enseñado a encarar las adversidades sin perder nunca la dignidad ni
UI
Q
desfallecer en el intento. Nos han dado todo lo que somos como
O
BI
personas; valores, principios, perseverancia y empeño. Todo ello con
Y
IA
AC
una gran dosis de amor y sin pedir nunca nada a cambio.

RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
Muchas gracias de todo corazón….

BI
ii
AGRADECIMIENTOS
Primero y antes que nada, dar gracias a Dios, por estar con todos
nosotros en cada paso que damos, por fortalecer nuestros corazones e
A
IC
M
iluminar nuestras mentes y por haber puesto en nuestro camino a
UI
Q
aquellas personas que han sido una gran compañía durante todo este
O
BI
periodo de estudio.
Y
IA
AC
RM
FA
A la Mg. Soto Vásquez, Marilú Roxana; asesora de este Trabajo de

DE
CA
investigación por su esfuerzo y dedicación, sus conocimientos, sus

TE
orientaciones, su manera de trabajar, supersistencia, y sobre todo su

IO
BL
paciencia y su motivación han sido fundamentales a lo largo de este

BI
periodo. Que Dios la bendiga siempre.
Los autores.
iii
INDICE
PRESENTACIÓN______________________________________________ i
DEDICATORIA ________________________________________________ ii
A
AGRADECIMIENTOS___________________________________________iii
IC
M
UI
Q
INDICE ________________________________________________________ iv
O
BI
Y
IA
RESUMEN _____________________________________________________ v
AC
RM
ABSTRACT ____________________________________________________vi
FA
DE
I. INTRODUCCIÓN _________________________________________ 01
CA
II. MATERIAL Y METODO__________________________________ 05

TE
IO
2.1. Materiales______________________________________________ 05
BL
2.2. Método _______________________________________________ 07

BI
III. RESULTADOS ______________________________________________ 20
IV. DISCUSIÓN ________________________________________________ 23
V. CONCLUSIONES ___________________________________________ 30
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ___________________________ 31
VII. ANEXOS ___________________________________________________ 34
iv
RESUMEN
El presente trabajo tuvo como finalidad extraer y determinar los
fitoconstituyentes presentes en las inflorescencias de Bejaria aestuans L. (purum
- rosa). La especie fue identificada en el Herbarium Truxillensis de la Universidad
Nacional de Trujillo. El estudio químico cualitativo se realizó mediante tamizaje
A
fitoquímico según el método de Miranda Martínez M. y Cuellar Cuellar A. De
IC
M
acuerdo con este método, sometimos la muestra pulverizada a la acción extractiva
UI
Q
de solventes de polaridad ascendente; diclorometano, etanol 96º y agua; de menor
O
BI
a mayor polaridad, respectivamente. Las reacciones de coloración y precipitación
Y
IA
obtenidas en el tamizaje fitoquímico nos indicó la presencia de alcaloides,

AC
lactonas, triterpenos y esteroides, azúcares reductores, saponinas, fenoles y

RM
taninos, flavonoides, antocianidinas, sustancias amargas y astringentes; además no

FA
se evidenció aceites y grasas, catequinas, resinas, quinonas, cardenólicos, ni

DE
mucílagos.
CA
TE
IO
Palabras Claves: Bejaria aestuans L. (purum - rosa), fitoconstituyentes,

BL
polaridad.
BI
ABSTRACT
The study had as purpose to extract and determine the phytoconstituents
present in the inflorescences of Bejariaaestuans L. (purum -rosa).The species was
identified in the Herbarium Truxillensis at National University of Trujillo. The
qualitative chemical studywas carried out by phytochemical sieve according to the
A
method of Miranda Martínez M. and Cuellar Cuellar A. According to this method,
IC
M
we submitted the sprayed sample to the extraction with solvent of growing
UI
Q
polarity; dichloromethane, ethanol 96º and water; from lower to higher polarity,
O
BI
respectively. The coloration and precipitation reactions obtained in the
Y
IA
phytochemical sieve indicated us the presence of alkaloids, lactones, triterpenes

AC
and steroids, sugars reducers, saponins, phenols and tannins, flavonoids,

RM
anthocyanidins, bitter and astringent; also was not evidenced oil and grease,
FA
catechins, resins, quinones, cardenolides, or mucilage.

DE
CA
Keywords: Bejaria aestuans L. (purum - rosa), phytoconstituents, polarity.

TE
IO
BL
BI
vi
I. INTRODUCCIÓN
Las plantas medicinales son vegetales que elaboran productos
denominados fitoconstituyentes, que ejercen acción beneficiosa y/o perjudicial, en
el organismo vivo. Su utilidad primordial, es aliviar la enfermedad y restablecer
la salud; es decir, que tienden a disminuir o neutralizar el desequilibrio orgánico
A
en el organismo enfermo 1.
IC
M
Los fitoconstituyentes se pueden dividir en metabolitos primarios y
UI
Q
secundarios. Los primeros son muy abundantes en la naturaleza, se encuentran
O
BI
presentes en grandes cantidades y son indispensables para el desarrollo fisiológico
Y
IA
de la planta. Son de fácil extracción y su explotación es relativamente barata,

AC
además de conducir a la síntesis de los metabolitos secundarios 2.

RM
Los metabolitos secundarios son derivados de los primeros, pero su

FA
distribución en el reino vegetal es más limitada y para determinados compuestos

DE
queda restringida a ciertas especies e incluso a algunos grupos dentro de una

CA
misma especie, por lo tanto es improbable que desarrollen un papel fundamental

TE
IO
en el metabolismo primario 3.
BL
De los principales fitoconstituyentes podemos encontrar: Los flavonoides

BI
(también conocidos como antoxantinas), son compuestos fenólicos que suelen
encontrarse bajo la forma de glucósidos con una o dos unidades de azúcar. Las
cumarinas, se presentan a menudo en forma: libre, mezcladas o glucósidos. Los
esteroides se encuentran como glucósidos formando las llamadas saponinas
triterpenoidales y esferoidales. Los alcaloides, constituyen el grupo más grande de
metabolitos secundarios que pueden encontrarse en estado libre, como glucósido o
formando sales con ácidos. Para conocer los fitoconstituyentes responsables de la
acción fisiológica, se les debe extraer con métodos adecuados, aislar, determinar
su estructura química, así como también diseñar métodos de síntesis 4, 5, 6.
Probablemente más del 90 por ciento de los principios activos que si bien
es cierto, actualmente son sintetizados por las industrias farmacéuticas; su
naturaleza química fue descubierta en diferentes especies vegetales. Esto hace ver
la urgencia de nuevas e intensas investigaciones de nuestra flora, para buscar
A
principios activos que nos permitan hacer frente a las múltiples enfermedades que
IC
M
día a día cobran más víctimas 7.
UI
Q
Para alcanzar el nivel de cuantificación de fitoconstituyentes debe
O
BI
asegurarse la presencia de estos a través de métodos de extracción específicos
Y
IA
(secuencia lógica de extracción con solventes apropiados, aplicación de pruebas

AC
de coloración y precipitación). Una de las técnicas que se emplea es del Tamizaje

RM
Fitoquímico de la Dra. Miranda Martínez M. y Cuellar Cuellar A.8.

FA
Nuestro país, el Perú, es considerado el tercer país mega diverso del

DE
planeta, lo que implica que en nuestro territorio existe un gran potencial de

CA
estudio de especies vegetales, 50000 para ser exactos, lo que constituye el 20% de
TE
IO
las especies del planeta, de las que 2000 han sido utilizadas con fines curativos 6.
BL
El Perú presenta un gran riqueza en su flora, de la cual hay miles de

BI
especies conocidas y cientos por descubrir, con menos del 10% estudiadas;
nuestro país se caracteriza por su variedad geográfica y diversidad de climas que
favorecen la existencia de numerosas plantas medicinales, sin embargo uno de los
mayores problemas es el poco conocimiento de su verdadera actividad terapéutica.
Es indudable que existen muchas especies de plantas que contienen sustancias de
valor medicinal, pero poco a poco nada se ha hecho por comprobar su eficacia en
la terapia convencional y utilizarlas como recursos naturales orientadas a
solucionar problemas de salud 9.
Muchas de estas plantas son usadas como remedios no oficiales y circulan
solo por la reputación que el uso popular le ha conferido; como Bejaria aestuans
L. que se conoce en nuestros medio como “purum - rosa” y es utilizada para
infecciones urinarias y vaginales. La Bejaria aestuans L. es una especie arbustiva
con inflorescencias blancas- rosadas que frecuentan en quebradas boscosas,
A
terrenos pedregosos; laderas abiertas, pedregosas y boscosas ubicadas entre los
IC
M
2050 – 3400 m.s.n.m. en los departamentos de la mayor parte del Perú 10.
UI
Q
Yon (1977) manifiesta que las hojas e inflorescencias de Bejaria glauca
O
BI
H&B presentan glicósidos saponínicos del tipo saponinas triterpénicas,
Y
IA
encontrándose éstas, en mayor proporción en las hojas. Cabe decir que este tipo
AC
de saponinas se le atribuyen posibles propiedades expectorantes11.

RM
Núñez (1989) menciona que la especie Bejaria glauca H&B presenta un

FA
tallo con cutícula y colénquima laminar; mientras que las hojas presentan
DE
parénquima lagunoso, células claviformes típicas y cutícula muy desarrollada.

CA
Asimismo expresa que esta especie es usada tradicionalmente para el tratamiento

TE
IO
de descensos vaginales por la presencia de mucílagos12.

BL
Bussmann R. and Sharon D. (2006) manifiestan que las hojas e

BI
inflorescencias de Bejaria aestuans L., se usan en medicina tradicional, en forma
de decocto (1.5 g/1Litro de agua), mezclándola con otras plantas (flor de arena,
flor blanca, berbena, amor seco, llantén, cola de caballo, gaullusa, pasuchaca,
malva, chumbiaura, palo de China, huaminga, quinuajiro), tomándose 3 veces al
día para la diabetes, próstata, regulación menstrual, inflamaciones del útero,
riñones, hígado, vejiga, ovarios, dolores menstruales, quistes y baños de
florecimiento13.
Bussmann R, Glenn A. & Sharon D. (2010) demostraron que las flores y
hojas de la Bejaria aestuans L. presentan actividades antibacterianas frente a
Staphylococcus aureus y Escherichia coli. 14.
La OMS ha determinado que alrededor del 80% de la población mundial
utiliza la medicina tradicional para atender las necesidades primarias de asistencia
A
médica. Analizando el interés por el estudio y empleo de medicina tradicional en
IC
M
la asistencia médica y el reconocimiento de la importancia de las plantas
UI
Q
medicinales para el sistema de salud de países en desarrollo, es que a través del
O
BI
presente trabajo de investigación se pretende contribuir con el conocimiento y
Y
IA
proporcionar información de los fitoconstituyentes que presenta la especie

AC
Bejaria aestuans L. (purum - rosa) utilizada de manera tradicional para el

RM
tratamiento de descensos vaginales, inflamaciones e infecciones.

FA
Nuestro interés se expresó en la interrogante ¿Cuáles son los

DE
fitoconstituyentes presentes en las inflorescencias de Bejaria aestuans L.

CA
(purum - rosa)?
TE
IO
La presente pregunta es de tipo descriptiva por lo tanto su hipótesis está

BL
implícitamente sostenida en el enunciado del problema científico.

BI
Durante la realización del presente trabajo pretendemos cumplir los
siguientes objetivos:
- Extraer los fitoconstituyentes presentes en las inflorescencias de Bejaria
aestuans L. (purum - rosa).
- Determinar los fitoconstituyentes presentes en las inflorescencias de
Bejaria aestuans L. (purum - rosa).
II. MATERIAL Y MÉTODO
2.1. MATERIALES.-
2.1.1. Material biológico.-
Se utilizó 1 Kg de inflorescencias de Bejaria aestuans L. (purum - rosa);
las que se recolectaron del caserío de Capachique, distrito de Usquil, provincia de
A
Otuzco, departamento La Libertad.
IC
M
UI
Q
2.1.2. Materiales y Equipos de Laboratorio.-
O
BI
Y
IA
a. Material de vidrio.-
AC
Material de vidrio del laboratorio de Farmacognosia.

RM
FA
b. Material Químico.-
DE
CA
Reactivos.-
TE
IO
 Ácido 3,5 – dinitrobenzoico

BL
 Ácido acético
BI
 Ácido nítrico
 Ácido clorhídrico
 Ácido pícrico
 Ácido sulfúrico
 Alcohol amílico
 Anhídrido acético
 Bicloruro de mercurio
 Carbonato de sodio cristales
 Clorhidrato de hidroxilamina
 Cloruro férrico
 Hidróxido de potasio
 Hidróxido de sodio
 Hipoclorito de sodio
A
 Ninhidrina
IC
M
 Nitrato de plata
UI
Q
 Pentacloruro de antimonio
O
 Resorcina BI
Y
 Subnitrato de Bismuto
IA
AC
 Sudán III
RM
 Sulfato cúprico
FA
 Tartrato de sodio y potasio

DE
 Tricloruro de antimonio
CA
 Tricloruro férrico
TE
IO
 Yodo resublimado
BL
 Yoduro de potasio
BI
Solventes.-
 Acetona
 Agua destilada
 Benceno
 Cloroformo
 Etanol 96º
 Diclorometano
 Glicerina
 Metanol
 Tetracloruro de carbono
c. Equipos.-
A
 Balanza analítica OHAUS GA 200
IC
M
 Cocina eléctrica Finely
UI
Q
 Refrigeradora Coldex
O
 Baño María BI
Y
 Estufa Memmert
IA
AC
 Bomba al vacío Gast Model Nº107Cb18 (Cole-Parmer)

RM
 Balanza triple brazo OHAUS 700/800 series

FA
DE
CA
2.2. MÉTODO.-
TE
IO
BL
2.2.1. IDENTIFICACIÓN Y DETERMINACIÓN TAXONÓMICA DE LA

BI
ESPECIE.-
La identificación botánica del material, estuvo a cargo del Dr. Eric
Rodríguez Rodríguez, curador del Herbarium Truxillensis (HUT). El ejemplar de la
especie vegetal fue depositado en el Herbarium Truxillensis (HUT) con el código
50974 (Anexo 1).
2.2.2. RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA.-
La especie de Bejaria aestuans L. (purum - rosa) se recolectó del caserío
de Capachique ubicado a una altitud de 3018 m.s.n.m., situado a 07°52´00´´ L.S. y

15
78°19´00´´ L.O ; distrito de Usquil, provincia de Otuzco, departamento La
Libertad. La recolección de la especie se realizó por el método convencional o
clásico de herborización, seleccionando el material en el campo y verificando que
esté en buenas condiciones.
A
IC
M
2.2.3. ANÁLISIS FITOQUÍMICO.-
UI
Q
2.2.3.1. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA.-
O
BI
- Selección de la muestra.- El material recolectado fue
Y
IA
transportado al laboratorio de Farmacognosia de la Facultad de Farmacia y

AC
Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, en donde se eliminaron las

RM
sustancias extrañas presentes en el material vegetal.

FA
- Secado y pulverización.- Se secaron las inflorescencias de

DE
Bejaria aestuans L. a temperatura ambiente. Luego se pulverizó con la ayuda de

CA
un mortero para la obtención de una muestra homogénea utilizando el set de

TE
IO
tamices.
BL
BI
2.2.3.2. TAMIZAJE FITOQUÍMICO PRELIMINAR.-
El tamizaje fitoquímico preliminar se realizó siguiendo el
método de Miranda Martínez M. y Cuellar Cuellar A. 8.
Fundamento.- De acuerdo con este método para la marcha
fotoquímica de Miranda Martínez M. y Cuellar Cuellar A., cada muestra fue
sometida a la acción extractiva de solventes de polaridad creciente:
Diclorometano, Etanol y Agua, para modificar el pH del medio obteniendo los
metabolitos secundarios de acuerdo a su solubilidad, luego se llevó a concentrar
dichos extractos utilizando destilación al vacío. Después de separar las fracciones
se realizó la identificación de los metabolitos secundarios haciendo uso de
reactivos de coloración y precipitación.
A
Método y procedimiento.- En este caso empleamos un
IC
M
esquema general, donde se utilizó una extracción sucesiva con solventes de
UI
Q
polaridad creciente. De este modo, se realizó la extracción sucesiva del material
O
BI
vegetal para la aplicación de la técnica de tamizaje fitoquímico detallado según el
Y
IA
esquema I (Anexo 7). Posteriormente en cada extracto por separado se

AC
procedió de acuerdo a los esquemas II, III y IV. (Anexos 8, 9 y 10).

RM
En cada caso, para realizar los ensayos se procedió

FA
de la siguiente forma:
DE
CA
 ENSAYO DE SUDAN.- Permitió reconocer en un extracto

TE
IO
de diclorometano la presencia de compuestos grasos, para

BL
ello, a la alícuota de la fracción en el solvente de extracción,

BI
se le añadió 1mL de una solución diluida en agua del
colorante Sudan III. Se calentó en baño de agua hasta
evaporación del solvente.
La presencia de compuestos grasos se considera positiva si
aparecen gotas o una película coloreada de rojo en el seno
del líquido o en las paredes del tubo de ensayo.
 ENSAYO DE DRAGENDORFF.- Permitió reconocer en
el extracto acuoso, alcohólico y de diclorometano la
presencia de alcaloides; para ello, a la alícuota se le añadió
I gota de ácido clorhídrico concentrado, (calentamos
suavemente y dejamos enfriar). Con la solución acuosa
ácida se realizó el ensayo, se añadió III gotas del reactivo de
Dragendorff, Se considera (+) cuando presenta
A
opalescencia, (++) cuando presenta turbidez definida, y
IC
M
(+++) cuando presenta precipitado.
UI
Q
O
 BI
ENSAYO DE MAYER: Se realizó según la forma descrita
Y
IA
anteriormente, hasta obtener una solución ácida. Se añadió

AC
luego, una pizca de cloruro de sodio en polvo, se agitó y

RM
filtró. Se añadió III gotas de la solución reactiva de Mayer,

FA
y se observó: opalescencia (+), turbidez definida (++),

DE
precipitado coposo (+++).

CA
TE
IO
 ENSAYO DE WAGNER: Se comenzó al igual que en los

BL
casos anteriores de la solución ácida, se añadieron III gotas

BI
del reactivo y los resultados se clasificaron de la misma
forma.
 ENSAYO DE HAGER: Se comenzó igual que en los casos
anteriores de la solución ácida, se añadieron tres gotas del
reactivo y los resultados se clasificaron de la misma forma.
10
 ENSAYO DE BALJET: Permitió reconocer en un extracto
alcohólico (lactonas) y de diclorometano (lactonas y
cumarinas) la presencia de compuestos con agrupamiento
lactónico, en particular cumarinas, aunque otros compuestos
lactónicos pueden dar positivo al ensayo.
En estas condiciones se adicionó 1mL del reactivo,
considerándose un ensayo positivo la aparición de
A
coloración o precipitado rojo (++ y +++) respectivamente.
IC
M
UI
Q
 ENSAYO DE BORNTRÄGER: Permitió reconocer en un
O
BI
extracto alcohólico la presencia de quinonas. Se agregó
Y
IA
1mL de hidróxido de sodio. Se agitó, mezclando las fases y

AC
se dejó en reposo hasta su ulterior separación. El ensayo se

RM
consideró positivo cuando la fase acuosa alcalina (superior)

FA
se coloreó de rosado o rojo. Coloración rosada (++),

DE
coloración roja (+++).

CA
TE
IO
 ENSAYO DE LIEBERMANN-BURCHARD: Permitió

BL
reconocer en un extracto alcohólico la presencia de

BI
triterpenos y/o esteroides, por ambos tipos de productos
poseer un núcleo del androstano, generalmente insaturado
en el anillo B y la posición 5-6.
Para ello, si la alícuota del extracto no se encuentra en
cloroformo, el solvente se debe evaporar en baño de agua y
el residuo redisolverse en 1mL de cloroformo. Se adicionó
11
1mL de anhídrido acético y se mezcló bien. Por la pared del
tubo de ensayo se dejaron resbalar II a III gotas de ácido
sulfúrico concentrado sin agitar. Un ensayo positivo se
reconoce por un cambio rápido de coloración:
1. Rosado-azul muy rápido.
2. Verde intenso-visible aunque rápido.
3. Verde oscuro-negro-final de la reacción.
A
Muy pocas veces puede observarse el primer cambio. El
IC
M
tercer cambio generalmente ocurre cuando el material
UI
Q
evaluado tiene cantidades importantes de estos compuestos.
O
BI
IMPORTANTE: Para realizar este ensayo no puede haber
Y
IA
agua en el medio de reacción, pues ésta con el ácido

AC
sulfúrico reacciona de forma violenta y puede ocurrir un

RM
accidente.
FA
DE
 ENSAYO DE CATEQUINAS: Para ello se tomó I gota de

CA
la solución alcohólica, con la ayuda de un capilar y se

TE
IO
aplicó sobre papel filtro. Sobre la mancha se aplicó una

BL
solución de carbonato de sodio. La aparición de una mancha

BI
verde carmelita a la luz UV, indica un ensayo positivo.
 ENSAYO DE RESINAS: Para detectar este tipo de
compuesto, se añadió a 2mL de la solución alcohólica,
10mL de agua destilada. La aparición de un precipitado
indica un ensayo positivo.
12
 ENSAYO DE FEHLING: Permitió reconocer en un
extracto acuoso y alcohólico la presencia de azúcares
reductores. Para ello, cuando la alícuota del extracto no se
encuentra en agua, se debe evaporar el solvente en baño de
agua y el residuo redisolverse en 1 a 2mL de agua. Se
adicionaron 2mL del reactivo y se calentó en baño de agua
5 a 10min. El ensayo se considera positivo si la solución se
A
colorea de rojo o aparece precipitado rojo.
IC
M
UI
Q
 ENSAYO DE LA ESPUMA: Permitió reconocer en un
O
BI
extracto acuoso y alcohólico la presencia de saponinas,
Y
IA
tanto del tipo esteroidal como triterpénica. Cuando la

AC
alícuota se encontró en alcohol, se diluyó con cinco veces

RM
su volumen en agua y se agitó, dicha mezcla, fuertemente

FA
durante 5 a 10min.
DE
El ensayo se considera positivo si aparece espuma en la

CA
superficie del líquido de más de 2mm de altura y persistente

TE
IO
por más de 2min.

BL
BI
 ENSAYO DEL CLORURO FÉRRICO: Permitió
reconocer la presencia de compuestos fenólicos y/o taninos
en un extracto vegetal. Cuando el extracto de la planta se
realizó con alcohol, el ensayo determinó tanto fenoles como
taninos. A una alícuota del extracto alcohólico se le
añadieron III gotas de una solución de tricloruro férrico al
13
5% en solución salina fisiológica. En el extracto acuoso, el
ensayo determinó fundamentalmente taninos. A una
alícuota del extracto se añadió acetato de sodio para
neutralizar y III gotas de una solución de tricloruro férrico
al 5% en solución salina fisiológica, un ensayo positivo da
la siguiente información general:
- Desarrollo de una coloración rojo-vino: compuestos
A
fenólicos en general.
IC
M
- Desarrollo de una coloración verde intensa: taninos del tipo
UI
Q
pirocatecólicos.
O
BI
- Desarrollo de una coloración azul, taninos del tipo
Y
IA
pirogalotánicos.
AC
RM
 ENSAYO DE LA GELATINA: Permitió reconocer la

FA
presencia de tánicos en el extracto acuoso. Tomar 1 ml de

DE
muestra y añadir I gota de solución de gelatina. Se debe

CA
observar la presencia de un precipitado blanco que indica la

TE
IO
presencia de taninos.
BL
BI
 ENSAYO DE SHINODA: Permitió reconocer la presencia
de flavonoides en extractos alcohólico y acuoso de un
vegetal. Cuando la alícuota del extracto no se encontró en
alcohol, se diluyó con 1mL de ácido clorhídrico
concentrado y un pedacito de cinta de magnesio metálico.
Después de la reacción se esperó 5min, se añadió 1mL de
14
alcohol amílico, se mezclaron las fases y se dejó reposar
hasta que se separaron.
Cuando la alícuota del extracto se encontró en agua, se
procedió de igual forma, a partir de la adición de ácido
clorhídrico concentrado.
El ensayo se considera positivo cuando el alcohol amílico se
colorea de amarillo, naranja, carmelita o rojo; intenso en
A
todos los casos.
IC
M
UI
Q
 ENSAYO DE KEDDE: Permitió reconocer en un extracto
O
BI
alcohólico la presencia de glucósidos cardiotónicos. Una
Y
IA
alícuota del extracto en etanol se mezcló con 1mL del

AC
reactivo y se dejó reposar durante 5 a 10 min. En un ensayo

RM
positivo se desarrolla una coloración violácea, persistente

FA
durante 1 a 2h.
DE
CA
 ENSAYO DE ANTOCIANIDINAS: Permitió reconocer

TE
IO
en los extractos vegetales alcohólicos la presencia de

BL
estructuras de secuencia C6-C3-C6 del grupo de los

BI
flavonoides. Se calentó 2mL del extracto etanólico 10min.
con 1mL de HCl q. p. se dejó enfriar y se añadió 1mL de
agua y 2mL de alcohol amílico. Se agitó y se dejó separar
las dos fases. La aparición de color rojo a marrón en la fase
amílica indica un ensayo positivo.
15
 ENSAYO DE MUCÍLAGOS: Permitió reconocer en los
extractos acuosos de vegetales la presencia de una
estructura tipo polisacárido, el cual formó un coloide
hidrófilo de alto índice de masa que aumentó la densidad
del agua donde se extrae. Para ello una alícuota del extracto
se enfrió en agua de 0 a 5 ºC y cuando la solución toma una
consistencia gelatinosa el ensayo se considera positivo.
A
IC
M
 ENSAYO DE PRINCIPIOS AMARGOS Y
UI
Q
ASTRINGENTES: El ensayo se realizó, saboreando I gota
O
BI
del extracto acuoso del vegetal y reconociendo el sabor de
Y
IA
cada uno de estos principios, bien diferenciados al paladar.

AC
RM
En el estudio fitoquímico se buscaron los siguientes

FA
componentes:
DE
Alcaloides, aceites esenciales, aminoácidos, antocianidinas,

CA
azúcares reductores, carotenos, catequinas, compuestos

TE
IO
grasos, cumarinas, esteroides, fenoles, flavonoides,

BL
glicósidos cardiotónicos, hidrocarburos, lactonas,

BI
mucílagos, quinonas, resinas, saponinas, taninos,
triterpenoides 16,17.
16
III. RESULTADOS
Tabla 1. Resultados del tamizaje fitoquímico: Identificación de metabolitos

secundarios en las inflorescencias de Bejaria aestuans (purum – rosa).
Ensayos Metabolitos Resultado

Sudán Aceites y grasas -
A
Dragendorff Alcaloides +
IC
Mayer Alcaloides +
M
UI
Wagner Alcaloides +
Q
Hager Alcaloides -
O
Baljet Lactonas y Cumarinas
BI +
Y
Liebermann – Burchard Triterpenos y esteroides +
IA
Catequinas Catequinas -
AC
Resinas Resinas -
RM
Fehling Azúcares Reductores +

FA
Espuma Saponinas +
DE
Cloruro Férrico Fenoles y Taninos +

Bornträger Quinonas -
CA
Shinoda Flavonoides +
TE
Kedde Cardenólicos -
IO
Antocianidinas Antocianidinas +
BL
Gelatina Taninos +
BI
Mucílagos Mucílagos -
Sustancias Amargas y Sustancias Amargas y +
Astringentes Astringentes
Leyenda: + Presente
- Ausente
17
Tabla2. Metabolitos secundarios en el extracto de diclorometano de las

inflorescencias de Bejaria aestuans (purum – rosa).
Fitoconstituyentes Ensayos Intensidad Identificación
Aceites y Grasas Sudan - -
Dragendorff ++ +
Mayer ++ +
Alcaloides Wagner + +
Hager - -
Lactonas y Cumarinas Baljet - -
A
Triterpenos y Esteroides Liebermann +++ +
IC
Leyenda:
M
INTENSIDAD: + Baja IDENTIFICACIÓN: + Positivo
UI
++ Moderada – Negativo
+++ Alta
Q
O
BI
Tabla3. Metabolitos secundarios en el extracto etanólico de las inflorescencias de
Y
IA
Bejaria aestuans (purum – rosa).

AC

RM
Catequinas Catequinas - -
FA
Resinas Resinas - -
Azúcares Reductores Fehling +++ +
DE
Lactonas Baljet +++ +

CA
Triterpenos y Esteroides Liebermann - Burchard +++ +

TE
Saponinas Espuma +++ +

IO
Fenoles y Taninos Cloruro Férrico +++ +

BL
Quinonas Bornträger - -
BI
Flavonoides Shinoda +++ +

Cardenólicos Kedde - -
Antocianidina Antocianidinas +++ +
Alcaloides Dragendorff +++
Mayer +++
Wagner +++ +
Hager +
Leyenda:
+++ Alta
18
Tabla 4. Metabolitos secundarios en el extracto acuoso de las inflorescencias de

Bejaria aestuans (purum – rosa).

Dragendorff ++ +
Mayer + +
Alcaloides Wagner ++ +
A
Hager - -
IC
Gelatina ++
M
UI
Taninos Cloruro Férrico ++ +
Q
Flavonoides Shinoda + +
O
Azucares Reductores Ensayo de Fehling
BI
Y
+++ +
IA
Saponinas Espuma - -
AC
Mucilagos Mucilagos - -
RM
Sustancias Amargas y Sustancias Amargas

FA
Astringentes y Astringentes + +
DE
Leyenda:
CA
+++ Alta
TE
IO
BL
BI
19
IV. DISCUSIÓN
En el presente trabajo realizamos la identificación preliminar de
fitoconstituyentes en las inflorescencias de Bejaria aestuans L. (purum – rosa)
siguiendo el método de Miranda Martínez M. y Cuellar Cuellar A. De acuerdo
con este método, sometimos la muestra pulverizada a la acción extractiva de
A
solventes de polaridad ascendente; tal es así que utilizamos tres solventes:
IC
M
diclorometano, etanol y agua; de menor a mayor polaridad, respectivamente 8, 16.
UI
Q
La polaridad se define como la habilidad de las moléculas de interactuar
O
BI
de distintas formas (dispersión de cargas, formación de dipolos, puentes de
Y
IA
hidrógeno, fuerzas de Van der Walls, etc.); cuantas mas formas de interactuar
AC
tenga el solvente, más polar será. Así, solventes polares van a tener afinidad por
RM
sustancias polares y solventes no polares, tendrán afinidad por sustancias no

FA
polares 8.
DE
La extracción de los fitoconstituyentes sigue un orden de polaridad

CA
ascendente; debido a que las células de donde se los ha de extraer, constituyen

TE
IO
sistemas hidrofílicos internos, donde se encuentran los primeros, inmersos dentro

BL
de una vesícula, que consta de una membrana lipofílica. Cuando se pulveriza la

BI
droga, se rompen las paredes y membranas celulares, dejando libres las vesículas
que almacenan a los fitoconstituyentes mencionados 19.
El diclorometano, al ponerse en contacto con la droga pulverizada, va a
difundir fácilmente por la membrana vesicular, disolviéndola a su paso y
extrayendo los principios activos de polaridad semejante (lipofílicos); este
solvente, no extrae aquellos metabolitos secundarios unidos no covalentemente a
20
sistemas hidrofílicos (proteínas, péptidos) en el citoplasma expuesto; sino que se
repele con estos últimos 19.
El etanol, como solvente de polaridad intermedia, extrae los
fitoconstituyentes afines; su labor se ve facilitada por la secuencia del
procedimiento: el diclorometano ya disolvió las membranas vesiculares, tal es así
que solo se remite a romper las interacciones que mantienen atraídos (no unidos) a
los principios activos, hacia los sistemas hidrofílicos 6, 17.
A
Finalmente, el agua extrae los principios activos más hidrosolubles, debido
IC
M
a su elevada polaridad; esta es capaz de extraerlos en sus formas ionizadas,
UI
Q
situación que escapa a las particularidades de los solventes anteriores 19.
O
BI
La solubilidad es una medida de la capacidad de una sustancia para
Y
IA
disolverse en otra. La sustancia que se disuelve se denomina soluto y la sustancia

AC
donde se disuelve el soluto se denomina solvente. La sustancia será más o menos

RM
soluble en el solvente dependiendo de su carácter polar o apolar; esto se

FA
fundamenta en los grupos funcionales presentes en las moléculas, los que le

DE
confieren polaridad gracias a las interacciones que permiten que se den 20.
CA
En el extracto de diclorometano identificamos alcaloides, triterpenos y

TE
IO
esteroides. Del extracto alcohólico identificamos azúcares reductores, lactonas,

BL
triterpenos y esteroides, saponinas, fenoles y taninos, flavonoides, antocianidinas

BI
y alcaloides. En cuanto al extracto acuoso, identificamos alcaloides, taninos,
flavonoides, azúcares reductores, sustancias amargas y astringente 19.
Según los resultados obtenidos en los diferentes extractos, la mayor
proporción de alcaloides existe en el extracto alcohólico, siguiendo en proporción
el extracto acuoso y, al final el de diclorometano. Por tanto se infiere que Bejaria
aestuans L. posee mayor proporción de alcaloides de polaridad intermedia y, en
21
menor proporción alcaloides de baja polaridad. Las reacciones de alcaloides, con
reactivos generales, se encuentran dentro del grupo de las reacciones de
precipitación; éstas se basan en un intercambio del anión voluminoso del reactivo
en acción, que reemplaza a los aniones pequeños de las sales de los alcaloides.
Estos principios activos, poseen un grupo amino, que les confiere propiedades
alcalinas y, al ser llevados a un medio ácido, se protonan e interaccionan
electrostáticamente con los aniones voluminosos mencionados 6, 17.
A
La reacción de Dragendorff produce sales de los alcaloides precipitados
IC
M
coloreados; el bismuto presenta una geometría octaédrica y una carga formal de -
UI
Q
2, en su esfera de coordinación (anión voluminoso) para interactuar
O
BI
electrostáticamente con dos moléculas de alcaloide protonadas 19.
Y
IA
La reacción de Mayer presenta como metal de coordinación al mercurio

AC
(Hg2+), el cual forma una coordinación tetraédrica, con una carga formal, en su
RM
esfera de –2; interactuando de manera semejante al reactivo anterior.

FA
En la reacción de Wagner, se forma un complejo de Triyoduro (I3–), esto

DE
debido a que el Yodo (I2), se comporta como un ácido de Lewis frente al Yoduro
CA
(I–), entonces se produce una interacción de I2-I–, en algunos casos se puede

TE
IO
formar pentayoduro (I5–) y/o heptayoduro (I7–), esto depende de la concentración

BL
de I2 respecto al I–. El anión triyoduro es el que atrae de manera electrostática al

BI
alcaloide protonado 17.
Según los resultados, las lactonas de naturaleza sesquiterpénica insaturada
(según el ensayo) se obtuvieron, de acuerdo a su intensidad de coloración, en
mayor proporción en el solvente de polaridad intermedia; resultando nula en el
diclorometano y agua. Esto justifica la presencia de lactonas lipofílicas, en
contraposición con las solubles en agua, que poseen sustituyentes hidrofílicos.
22
Cabe resaltar, también que las lactonas pueden estar en forma de glucósidos; pero
éstos son muy inestables (Glucósidos lactónicos) y que se pudieron destruir en el
tratamiento previo de la droga, a la marcha fitoquímica. Tal es así que no
aparecieron en el extracto acuoso 16.
La reacción de Hager, presentó como reactivo clave el ácido pícrico que
actuó como tal frente al alcaloide; por otro lado el anillo del ácido pícrico se
encontró con deficiencia electrónica, que fue compensado por el anillo del grupo
A
metóxi del alcaloide, el cual se encontraba ávido de electrones, produciéndose de
IC
M
esta manera un complejo sigma dando como resultado cristales amarillos,
UI
Q
evidenciándose al realizar el análisis fitoquímico de Bejaria aestuans L. (purum
O
rosa) 17, 21. BI
Y
IA
En el ensayo de Liebermann-Burchard, el extracto de diclorometano

AC
extrajo mayor proporción de triterpenos, esto se puso de manifiesto en la

RM
intensidad de coloración roja evidenciada, en dicho extracto. Se descarta la

FA
presencia de los esteroides. Los triterpenos son compuestos de 30 átomos de

DE
carbono producidos por ciclación del escualeno, los cuales se consideran

CA
liposolubles. La reacción de Liebermann-Burchard es típica de los ciclos

TE
IO
fusionados que contienen dos dobles enlaces conjugados, en un mismo anillo, en

BL
dos anillos adyacentes o un doble en un anillo adyacente con un grupo hidroxilo.

BI
La reacción debe realizarse en medio absolutamente anhidro, ya que, al existir
moléculas de agua, estas reaccionan con el anhídrido acético, anulando de esta
manera la formación de un agente oxidante, muy necesario para la efectividad del
ensayo en mención. El Cloroformo solubiliza a la muestra, favoreciendo la
captación de algunas moléculas de agua presentes, debido a que es un solvente
inmiscible, que absorbe el agua y el ácido sulfúrico, reacciona con el anhídrido
23
acético, dando lugar a la liberación de hidrogeniones, los cuales catalizan la
dimerización del triterpeno inicial y además, la generación de trióxido de azufre,
el agente oxidante que promoverá una deslocalización generalizada y, con ello la
generación de un compuesto coloreado 6, 16, 17, 18.
El ensayo para antocianidinas resultó positivo para el extracto etanólico; si
bien es cierto, estos pigmentos son hidrosolubles, en su mayoría se encuentran
dando la coloración respectiva a flores y frutos. Los antocianósidos debido al
A
núcleo del flavilio, son muy inestables en disolución acuosa, lo que se manifiesta
IC
M
por cambio de coloración de las mismas en función del potencial del ion
UI
Q
hidrogenión (pH): en medio ácido predomina el ion flavilio (rojo), en medio
O
neutro o ligeramente ácido predomina la base libre 6. BI
Y
IA
El ensayo para azúcares reductores resultó positiva en los extractos

AC
etanólico y acuoso. Esta situación está más que justificada porque dichos azúcares
RM
se caracterizan por ser de naturaleza altamente polar, debido al marcado número

FA
de grupos funcionales hidroxilo (OH-) que poseen. Éstos, según su estructura de

DE
Fisher (forma abierta) poseen un grupo carbonilo en el primer o segundo carbono

CA
o según la cíclica, un Carbono anomérico, el cual es altamente reactivo. En el

TE
IO
ensayo se utilizó reactivos diferentes, el llamado Fehling A, que es una solución

BL
acuosa de sulfato de cobre (II) y el Fehling B, que contiene hidróxido de sodio y

BI
tartrato de sodio y potasio; la función de este último es formar un quelato con el
Cu2+ y evitar que este ion sea precipitado por los iones hidróxido. Al mezclarlos,
se genera el tartrato de cobre (II), éste va a reaccionar con la forma abierta del
azúcar reductor, específicamente con el grupo aldehído (que en las 2-
hidroxicetonas, puede producirse por una tautomería). Como productos se va a
llevar a la oxidación del grupo aldehído, hacia el carboxílico correspondiente y un
24
metal con su mínimo estado positivo de oxidación (Cu 1+). Esta peculiar forma del
metal se caracteriza por presentar un color rojo-ladrillo, característico de una
reacción positiva para dicho ensayo 18.
La reacción del tricloruro férrico, es un tipo de reacción ácido - base de
Lewis, teniendo como donador de electrones a los hidroxilos del catecol del
tanino, existiendo la formación de cargas parciales para la posterior eliminación
de átomos de hidrógeno y cloruro hasta llegar a la formación de un complejo de
A
color verde oscuro, sugiriendo la presencia de taninos no hidrolizables 17.
IC
M
Las proteínas presentes en la gelatina son precipitadas por los taninos por
UI
Q
formación de complejos, que pueden ser reversibles o irreversibles. La formación
O
BI
reversible de complejos se explica por la formación d enlaces de hidrógeno y por
Y
IA
interacciones hidrófobas. La formación irreversible de complejos, de los taninos,

AC
se explica, teniendo en cuenta su marcada tendencia a la auto-oxidación 1.

RM
En el ensayo de Shinoda, para flavonoides, éstos aparecieron en el extracto

FA
etanólico y acuoso, lo cual indica que en su mayor parte, se encuentran en su

DE
forma de heterósidos; dado que estos últimos son solubles en agua y alcohol e
CA
insolubles en disolventes orgánicos de baja polaridad. La reacción de Shinoda

TE
IO
(magnesio en ácido clorhídrico) permite distinguir algunos tipos de flavonoides:

BL
coloración naranja con las flavonas, rojo cereza con los flavonoles, violeta con las
BI
flavanonas. En esta reacción, el magnesio metálico es oxidado por el HCl
concentrado, dando como productos al hidrógeno molecular, que es eliminado en
forma de gas y el cloruro de magnesio, que es el que forma complejos con los
flavonoides dando coloraciones características. El magnesio divalente, actúa sobre
el grupo carbonilo de dos flavonas, produciendo una coloración roja, este aumento
de intensidad es debido a que el magnesio divalente intensifica la coloración por
25
estar doblemente coordinado. En los flavonoles el magnesio divalente presenta
dos enlances de coordinación fuertes y dos débiles; los primeros son formados por
los oxígenos de los grupos carbonilos y los segundos por los hidroxilos de la
posición 3, de esta manera la intensidad aumenta como dando como resultado una
coloración que va desde el rojo al crimson. Respecto a las flavonas el magnesio
divalente produce un movimiento de electrones 6.
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
26
V. CONCLUSIONES
1. Se logró extraer los fitoconstituyentes presentes en las inflorescencias de
Bejaria aestuans L. (purum - rosa) con diclorometano, etanol y agua.
2. Según las técnicas de tamizaje fitoquímico, las inflorescencias de Bejaria
aestuans L. (purum - rosa) del caserío de Capachique - Distrito de Usquil
A
- Provincia de Otuzco, Departamento La Libertad - Perú presenta
IC
M
alcaloides, lactonas, triterpenos y esteroides, azúcares reductores,
UI
Q
saponinas, fenoles, taninos, flavonoides, antocianidinas, sustancias
O
BI
amargas y astringentes; no conteniendo aceites y grasas, catequinas,
Y
IA
resinas, quinonas, cardenólicos, ni mucílagos.

AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
27
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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http://www.sea-entomologia.org/PDF/BOLETIN_16/B16-022-189.pdf
10. Mostacero J. Taxonomía de las Plantas Fanerógamas Útiles del Perú. Ed.
CONCYTEC; Trujillo – Perú. 2002. pp. 614 - 617.
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Bejaria glauca H&B. Universidad Nacional de Trujillo [Trabajo de
IC
M
habilitación] Trujillo. Perú.1977
UI
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12. Núñez A. Histaxonomia y consideraciones de uso vernacular de Bejaria
O
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glauca HBK “Purum rosa” (Ericaceae). [Tesis para optar el grado de bachiller
Y
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en Farmacia y Bioquímica]. Universidad Nacional de Trujillo. Perú. 1989

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13. Bussmann R, Sharon D. Traditional medicinal plant use in Northern Peru:

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tracking two thousand years of healing culture. J Ethnobiol Ethnomed [en

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IO
of Northern Peru – can traditional applications provide leads for modern

BL
science? IJTK. [En línea] 2010 [Fecha de acceso: 9 de diciembre de 2010]; 9

BI
(4),724753.Disponibleen:http://nopr.niscair.res.in/bitstream/123456789/10330
/1/IJTK%209(4)%20742-753.pdf
15. Carta-Natal. [en línea]. Coordenadas geográficas y zona horaria actual de
30585 ciudades de Perú. [Actualizado el 12 de mayo 2009; fecha de acceso:
25 de noviembre del 2010]. Disponible en: http://carta-
natal.es/ciudades.php?iso=PE&pag=168
29
16. Miranda M. Farmacognosia y Productos Naturales. Ed. Félix Varela. Cuba.
2001.
17. Ganoza, Y.: “Fundamentación de Reacciones de Coloración y Precipitación
en la Identificación de Metabolitos Secundarios de Plantas Medicinales”
Universidad Nacional de Trujillo, Perú. 2001. Pp. 41 – 46.
18. Avendaño C. Introducción a la Química Farmacéutica”. 2º ed. Mc Graw –
Hill Interamericana. España. 2001. pp. 823, 836,850 – 851.
A
19. Enríquez A, Prieto E, De los Ríos E, Ruíz S. Estudio farmacognóstico y
IC
M
fitoquímico del rizoma de Zingiber officinale Roscoe “Jengibre” de la ciudad
UI
Q
de Chanchamayo - Región Junín. Perú. Rev. Med. Vallejiana. [en línea]
O
[accesado el 26 de julio del BI
2011]; 5(1). Disponible en:
Y
IA
http://revistas.concytec.gob.pe/pdf/rmv/v5n1/a07v5n1.pdf
AC
20. Brown T.: Química, La ciencia aplicada. 9º ed. Ed. Pearson. México. 2004.
RM
pp. 492.
FA
21. Lock O. Investigación fitoquímica – métodos en el estudio de productos

DE
naturales. 2º ed. Ed. Fondo Editorial Pontificia Universidad Católica del Perú.
CA
Lima, Perú.1994:114-115.
TE
IO
BL
BI
30
VII. ANEXOS
ANEXO 1
Boucher del ejemplar de herbario de la especie de Bejaria aestuans L.
(purum - rosa)
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
31
ANEXO 2
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Fig. 1. Inflorescencias de Bejaria aestuans L. (purum-rosa).
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
Fig. 2. Selección de las Inflorescencias de Bejaria aestuans L. (purum-rosa).
32
ANEXO 3
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Fig. 3. Secado de las inflorescencias de Bejaria aestuans L. (purum-rosa).
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
Fig. 4. Extractos de diclorometano, etanólico y acuoso de Bejaria aestuans L.

(purum - rosa).
33
ANEXO 4
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Fig. 5. Reacciones químicas del extracto de diclorometano de Bejaria aestuans L.
Y
(purum- rosa). En el Tubo 1, Sudan (negativo); en el Tubo 2a, Dragendorff
IA
(positivo); en el Tubo 2b, Mayer (positivo); en el Tubo 2c, Wagner (positivo); en

el Tubo 2d, Hager (negativo); en el Tubo 3, Baljet (negativo); en el Tubo 4,
AC
Lieberman Burchard (positivo).

RM
FA
DE
1
CA
TE
IO
BL
BI
Fig. 6. Reacciones químicas del extracto etanólico de Bejaria aestuans L.

(purum - rosa). En el Papel 1, Catequinas (negativo); en el Tubo 2, Resinas
(negativo); en el Tubo 3, Fehling (positivo); en el Tubo 4, Baljet (positivo); en el
Tubo 5, Lieberman - Burchard (positivo); en el Tubo 6, Espuma (positivo); en el
Tubo 7, Cloruro férrico (positivo); en el Tubo 8, Bornträger (negativo); en el
Tubo 9, Shinoda (positivo).
34
ANEXO 5
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Fig. 7. Reacciones químicas del extracto etanólico de Bejaria aestuans L.
Y
(purum - rosa). En el Tubo 10, Kedde (negativo); en el Tubo 11, Antocianidinas
(positivo); en el tubo 12a, Dragendorff (positivo); en el Tubo 12b, Mayer
IA
(positivo); en el tubo 12 c, Wagner (positivo); en el tubo 12d, Hager (positivo).

AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
Fig. 8. Reacciones químicas del extracto acuoso de Bejaria aestuans L. (purum-

rosa). En el tubo 1a, Dragendorff (positivo); en el tubo 1b, Mayer (positivo); en el
tubo 1c, Wagner (positivo); en el tubo 1d, Hager (negativo); en el tubo 2, Gelatina
(positivo); en el tubo 3, Cloruro Férrico (positivo).
35
ANEXO 6
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Fig.9. Reacciones químicas del extracto acuoso de Bejaria aestuans L. (purum
Y
rosa). En el tubo 4, Shinoda (positivo); en el tubo 5, Fehling (positivo); en el tubo
IA
6, Espuma (negativo); en el tubo 7, Mucílagos (negativo).

AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
36
ANEXO 7
TAMIZAJE FITOQUÍMICO DE LA Bejaria aestuans L. (Purum - rosa)
ESQUEMA I
EXTRACCIÓN SUCESIVA DEL MATERIAL VEGETAL PARA LA

APLICACIÓN DE TÉCNICAS DE TAMIZAJE FITOQUÍMICO
MATERIAL VEGETAL
50 g
A
IC
Se extrajo con 180 mL de diclorometano por
medio de maceración durante 48 horas.
M
UI
Q
O
FILTRAMOS
BI
Y
EXTRACTO DE RESIDUO SÓLIDO
IA
DICLOROMETANO Se pesó y secó

Wmuestra = 49.8177 g
AC
Volumen = 75 mL
RM
SE EXTRAJO CON 295 mL DE

FA
ETANOL DE 96º POR MEDIO DE

MACERACIÓNDURANTE 65 HORAS
DE
FILTRAMOS
CA
TE
RESIDUO SÓLIDO
IO
EXTRACTO ALCOHÓLICO DE
Se pesó y secó 96º
BL
Wmuestra = 46.9133 g Volumen = 110 mL

BI
SE EXTRAJO CON 250 mL DE AGUA

DESTILADA POR MEDIO DE
MACERACIÓN DURANTE 72 HORAS
FILTRAMOS
RESIDUO SÓLIDO EXTRACTO ACUOSO

Se pesó y secó Volumen = 103 mL
Wmuestra = 42.5573 g
37
ANEXO 8
ESQUEMA II
REACCIONES A REALIZAR EN EL EXTRACTO DE DICLOROMETANO
EXTRACTO
DICLOROMETANO
A
IC
M
DIVIDIMOS EN
UI
FRACCIONES
Q
O
BI
Y
IA
5mL
AC
ENSAYO DE
SUDAN 5mL
RM
(Aceites y ENSAYO DE
Grasas) BALJET
FA
(Lactonas y 5mL
Cumarinas)
DE
15mL (dividido en 3 ENSAYO DE

porciones) LIEBERMANN-
CA
ENSAYOS DE BURCHARD
DRAGENDORFF
TE
MAYER, WAGNER Y (Triterpenos -Esteroides)

HAGER
IO
(Alcaloides)
BL
BI
38
ANEXO 9
ESQUEMA III
A
IC
REACCIONES A REALIZAR EN EL EXTRACTO ALCOHOLICO AL 70º
M
UI
Q
EXTRACTO ALCOHÓLICO DE 96º
O
BI
Y
IA
DIVIDIMOS EN FRACCIONES
AC
RM
FA
1mL 2 mL 2mL
2mL
DE
ENSAYO 2mL 2mL
ENSAYO DE ENSAYO DE 6 mL en 3 porciones
DE ENSAYO DE
FeCl3
CA
CATEQUINAS FEHLING LIEBERMAN- ENSAYO DE
(Fenoles y ENSAYO DE ENSAYOS DE
(Azúcares BURCHARD
TE
Taninos) BORNTRÄGER KEDDE

reductores) (Triterpenos y DRAGENDORFF
O
Esteroides)
(Quinonas) (Cardenólidos)
LI
MAYER, WAGNER
B
Y HAGER
BI
2 mL
2mL
(Alcaloides)
ENSAYO
ENSAYO DE 2mL 2mL
DE 2mL
BALJET
RESINAS
ENSAYO DE ENSAYO DE ENSAYO DE
(Lactonas) 2mL
ESPUMA NINHIDRINA SHINODA
(Saponina) (Aminoácidos) (Flavonoides) ENSAYO DE
ANTOCIANIDINAS
39
ANEXO 10
ESQUEMA IV
A
IC
REACCIONES A REALIZAR EN EL EXTRACTO ACUOSO
M
UI
Q
O
BI
Y
DIVIDIMOS EN FRACCIONES
IA
AC
RM
FA
DE
5 mL en 3 porciones 2 mL 2 mL I ó II gotas
ENSAYO DE DRAGENDORFF, MAYER, ENSAYO DE ENSAYO DE ENSAYO DE PRINCIPIOS
CA
WAGNER Y HAGER SHINODA ESPUMA AMARGOS Y
TE
(Alcaloides) (Flavonoides) (Saponinas) ASTRINGENTES

O
B LI
BI
2mL 2mL 10mL

ENSAYO DE CLORURO FERRICO ENSAYO DE FEHLING ENSAYO DE
(Taninos) (Azúcares Reductores) MUCILAGOS
2mL
ENSAYO DE GELATINA
(Taninos)
40
ANEXO 11
REACCION DEL TRICLORURO FÉRRICO (para identificar fenoles y
taninos)
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
41
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
42
ANEXO 12
REACCIÓN DE SHINODA (para identificar flavonoides)
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
43
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
44
ANEXO 13
REACCIÓN DE LA GELATINA (para identificar taninos)
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
REACCIÓN DE LIEBERMAN - BURCHARD (para identificar esteroides)

DE
CA
TE
IO
BL
BI
45
ANEXO 14
REACCIÓN DE BORNTRÄGER (para identificar quinonas)
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
46
ANEXO 15
REACCIÓN DE BALJET (para identificar cardenólidos)
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
CA
TE
IO
BL
BI
47
ANEXO 16
REACCIÓN DE DRAGENDORFF (para identificar alcaloides)
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
REACCIÓN DE MAYER (para identificar alcaloides)

DE
CA
TE
IO
BL
BI
48
ANEXO 17
REACCIÓN DE WAGNER (para identificar alcaloides)
A
IC
M
UI
Q
O
BI
Y
IA
AC
RM
FA
DE
REACCIÓN DE LA ESPUMA (para identificar saponinas)

CA
TE
IO
BL
BI
49

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Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

PARA OBTAR EL GRADO ACADÉMICO

BACHILLER EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA

 Alayo Rodríguez, Nilder Marino.

 Guevara Enríquez, Leslie Katherine.

SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO:

profesional el presente trabajo de

preliminar de fitoconstituyentes en las inflorescencias de Bejaria aestuans L.

Es propicia esta oportunidad para manifestar el más sincero

reconocimiento a nuestra Alma Máter y su plana docente, que con su capacidad y

buena voluntad contribuyen con nuestra formación profesional.

Dejamos a criterio, señores miembros del jurado la calificación del

presente trabajo de investigación científica.

Trujillo, Enero del 2012

A nuestros padres, por su comprensión y apoyo incondicional. Nos han

una gran dosis de amor y sin pedir nunca nada a cambio.

Muchas gracias de todo corazón….

nosotros en cada paso que damos, por fortalecer nuestros corazones e

A la Mg. Soto Vásquez, Marilú Roxana; asesora de este Trabajo de

investigación por su esfuerzo y dedicación, sus conocimientos, sus

orientaciones, su manera de trabajar, supersistencia, y sobre todo su

paciencia y su motivación han sido fundamentales a lo largo de este

periodo. Que Dios la bendiga siempre.

II. MATERIAL Y METODO__________________________________ 05

2.2. Método _______________________________________________ 07

III. RESULTADOS ______________________________________________ 20

IV. DISCUSIÓN ________________________________________________ 23

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ___________________________ 31

VII. ANEXOS ___________________________________________________ 34

El presente trabajo tuvo como finalidad extraer y determinar los

fitoconstituyentes presentes en las inflorescencias de Bejaria aestuans L. (purum

- rosa). La especie fue identificada en el Herbarium Truxillensis de la Universidad

Nacional de Trujillo. El estudio químico cualitativo se realizó mediante tamizaje

obtenidas en el tamizaje fitoquímico nos indicó la presencia de alcaloides,

lactonas, triterpenos y esteroides, azúcares reductores, saponinas, fenoles y

taninos, flavonoides, antocianidinas, sustancias amargas y astringentes; además no

se evidenció aceites y grasas, catequinas, resinas, quinonas, cardenólicos, ni

Palabras Claves: Bejaria aestuans L. (purum - rosa), fitoconstituyentes,

The study had as purpose to extract and determine the phytoconstituents

present in the inflorescences of Bejariaaestuans L. (purum -rosa).The species was

identified in the Herbarium Truxillensis at National University of Trujillo. The

qualitative chemical studywas carried out by phytochemical sieve according to the

phytochemical sieve indicated us the presence of alkaloids, lactones, triterpenes

and steroids, sugars reducers, saponins, phenols and tannins, flavonoids,

catechins, resins, quinones, cardenolides, or mucilage.

Keywords: Bejaria aestuans L. (purum - rosa), phytoconstituents, polarity.

Las plantas medicinales son vegetales que elaboran productos

denominados fitoconstituyentes, que ejercen acción beneficiosa y/o perjudicial, en

el organismo vivo. Su utilidad primordial, es aliviar la enfermedad y restablecer

la salud; es decir, que tienden a disminuir o neutralizar el desequilibrio orgánico

de la planta. Son de fácil extracción y su explotación es relativamente barata,

además de conducir a la síntesis de los metabolitos secundarios 2.

Los metabolitos secundarios son derivados de los primeros, pero su

distribución en el reino vegetal es más limitada y para determinados compuestos

queda restringida a ciertas especies e incluso a algunos grupos dentro de una

misma especie, por lo tanto es improbable que desarrollen un papel fundamental

De los principales fitoconstituyentes podemos encontrar: Los flavonoides

(también conocidos como antoxantinas), son compuestos fenólicos que suelen

cumarinas, se presentan a menudo en forma: libre, mezcladas o glucósidos. Los

esteroides se encuentran como glucósidos formando las llamadas saponinas

triterpenoidales y esferoidales. Los alcaloides, constituyen el grupo más grande de

metabolitos secundarios que pueden encontrarse en estado libre, como glucósido o