UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLAN

CAMPO 1

INGENIERÍA QUÍMICA

LABORATORIO DE QUÍMICA ANALÍTICA III

REPORTE EXPERIMENTAL CORRESPONDIENTE A LA PRÁCTICA N°7 “SEPARACION DE ALCOHOLES Y

DETERMINACIÓN DE ETANOL EN UNA MUESTRA DE RON AÑEJO MARCA BACARDÍ POR
CROMATOGRAFÍA DE GASES”

PROFESOR (A): VILLEGAS GONZÁLEZ MARTHA ANGELICA

MARTÍNEZ RESÉNDIZ RUTH

ALUMNOS: CRUZ ROBLES FERNANDO HAZEL

GUERRERO ZARRAGA CITLALLI ITZEL

GUZMAN AMOROSO JOSE LUIS

SAN JUAN DELOSO ELIZABET

SEMESTRE 2019-1

FECHA DE ENTREGA: 23 DE OCTUBRE DE 2018

INTRODUCCION
La cromatografía de gases es una técnica analítica que puede ser utilizada para separar compuestos
orgánicos basada en sus volatilidades. También provee información cualitativa y cuantitativa de los
componentes presentes en una mezcla. Los componentes son separados por sus diferencias de
partición entre la fase móvil gaseosa y la fase estacionaria en la columna, permitiendo que sean
separados en tiempo y espacio.La forma más usual de hacer cromatografía de gases es utilizando
un líquido como fase estacionaria; recibe entonces el nombre de cromatografía gas-líquido (CGL).
También se utilizan absorbentes, dando lugar a la cromatografía gas-sólido (CGS), pero en mucho
menor proporción.

Algunos factores que afectan en esta técnica son:

Temperatura
Fase estacionaria (polaridad –solubilidad).

Un cromatógrafo de gases consta de:

Sistema de suministro de fase móvil

Sistema de inyección de muestra
Columna cromatografía situada en un horno
Detector.
Sistema de registro.

Las fases estacionarias en esta técnica sonde vital importancia puesto que la fase móvil debe de ser
inerte, estas en su mayoría son liquidas como ya se ha comentado y deben de seguir algunos
requisitos:

Baja volatilidad
Estables a temperaturas elevadas
Químicamente inertes (no reaccionar)

Un análisis cuantitativo utilizando esta técnica se basa en la comparación de área y altura de los
picos del analito en la muestra o los picos de estándares de concentración conocida de una
sustancia. Es por ello que la cromatografía de gases es una técnica aconsejada para analizar
compuestos orgánicos volátiles con un punto de ebullición menos a 250°C. Algunas de las
aplicaciones de esta técnica en la vida cotidiana son:

Análisis de plaguicidas
Análisis de disolventes organoclorados
Análisis de compuestos orgánicos
Análisis de gases inorgánicos en muestras de aire.
OBJETIVOS
Señalar y reconocer cada una de las partes de un cromatógrafo de gases.
Estudiar algunos parámetros que afectan la elución, la resolución y la eficiencia de lospicos
en la cromatografía de gases.
Separar, identificar y cuantificar los alcoholes presentes en una muestra de Ron añejo
Bacardí.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Tabla 1. Material, equipo y reactivos a utilizar

Material
3 matraces aforados de 10 mL Cromatógrafo de gases Marca Metanol
10 tubos de ensayo
1 Gradilla
1 micro pipeta 100-1000 μL
Jeringa para inyectar al
cromatógrafo de gases
Equipo Reactivos
BUCK 910
Columna DB-WAX Etanol
(Polietilenglicol, dimensiones:
60m x 0.53 mm D. I 1.5 um
espesor de película)
Gas acarreador: nitrógeno @ n-propanol
7 psi (aprox. 10 mL/min)
Gases para el detector de n-Butanol
Ionización de Flama (FID):
Hidrógeno @ 20 psi; Aire @ 7 Muestra de bebida alcohólica
psi de ron añejo marca Bacardí

a) Encendido del equipo

- Se abrió la llave de los tanques H2 y N2 ubicados en la planta baja.
- Se abrieron las llaves de paso de las líneas de gas que se encuentran a la derecha del
equipo.
- Se encendió el equipo y se activó el filtro del compresor de aire del cromatógrafo.
Esperamos a que el indicador se apagara.
- Se encendió el detector (FID).
- Se encendió la computadora y se seleccionó el ícono del programa que controla el
equipo.
b) Identificación de los alcoholes
- Se colocó por separado en tubos de ensaye 100 μL de cada uno de los alcoholes:
metanol, etanol, n-propanol y n-butanol. Se agregaron 900 μL de agua desionizada a
cada uno. Se mezcló y se realizó la inyección de 1 μL de cada uno de los alcoholes
diluidos con el fin de identificar el orden de elución de cada compuesto. Se llenó la tabla
3 con los resultados correspondientes.

La temperatura del horno se mantuvo en 100 °C

c) Influencia de la temperatura en la separación

 - Se preparó una mezcla de los alcoholes colocando en un tubo de ensaye 100 μL de cada
uno de los alcoholes y diluyendo con 500 μL de agua.
- Se realizó la inyección de 1 μL de esta mezcla a las mismas condiciones del apartado
anterior (isotérmica a 100 °C) y enjuagando la jeringa con acetona asegurándose de
secarla perfectamente antes de usarla de nuevo.
- Se inyectó 1 μL de la misma mezcla, pero en condiciones isotérmicas a 150 y 200 °C
esperando a que se acondicionara el equipo a la nueva temperatura.
- Se inyectó 1 μL de la misma mezcla anterior mediante el siguiente programa de
temperatura (gradiente) del horno: Temperatura inicial 50 °C por 5 min. Se calentó
mediante rampa 20 °C/min hasta una temperatura final de 200 °C por 2 min.
- Se llenó la tabla 4 con los resultados obtenidos.

d) Identificación de alcoholes en licores y su cuantificación por el método de factor respuesta

Para el cálculo del factor de respuesta (Fr) se utilizó n-Propanol como estándar interno.
Se prepararon los sistemas como se indican en la tabla siguiente:

Tabla 2. Preparación de los sistemas para la cuantificación de MeOH y EtOH por el método de
factor respuesta

Sistema V MeOH STD V EtOH STD V n-Prop STD V Problema V Aforo/H2O

(μL) (μL) (μL) (μL) (mL)
TDS´s 200 200 100 - 10.0
Prob. MeOH - - 100 10.0 10.0
Prob. MeOH - - 100 0.250 10.0

Se inyectaron los sistemas bajo las condiciones de corrida del apartado C número 4 (programa de
temperatura del horno)
Los resultados obtenidos se reportaron en la tabla 5.

RESULTADOS

Tabla 3. Resultados obtenidos en el análisis de la mezcla estándar aplicando un gradiente de

temperatura (40-160° C)
Analito tR(min) W(min) Área
Metanol 3.916 0.45 34997.3130
Etanol 4.633 0.4 53266.3670
n-Propanol 6.900 0.233 37717.8245

Tabla 4. Resultados obtenidos en el análisis de la mezcla de alcoholes a diferentes temperaturas

Gradiente (40-160°C) 80°C 60°C

Analito tR(mi W 1/2(m Área tR(min) W 1/2(m Área tR(min W 1/2(m Área
n) in) in) ) in)
MeOH 3.9 0.45 34997.3 2.566 0.15 40298.8420 2.950 0.1 20230.1610
EtOH 4.6 0.4 53266.4 2.733 0.2 66240.1605 3.283 0.116 34002.7490
n-Prop 6.9 0.115 37717.8 3.550 0.25 90768.9900 4.816 0.15 42603.8650
ButOH 9.2 0.115 37717.8 5.366 0.416 144998.2100 8.250 0.266 46691.2290
 Tabla 5. Resultados obtenidos de los cromatogramas de la determinación de Metanol y Etanol
aplicando gradiente de temperatura (40-160°C)

Sistema tR W1/2 Área tR W1/2 Área tR W1/2 Área

[min] [min] (metanol) [min] [min] (etanol) [min] [min] (propanol)

3.916 0.45 34997.3130 4.633 0.4 53266.3670 6.9 0.23 37717.8245

MEZCLA
STD
Prob --------- ------- ----------------- 4.683 0.26 15607.2590 6.916 0.18 2127.1120
EtOH - -
NOTA. Solo se pudieron obtener los cromatogramas para la mezcla de estándares y la muestra de
etanol y propanol, después de eso no se pudo continuar con la experimentación debido a que la
jeringa te tapo impidiendo poder inyectar las soluciones para leer Metanol.

Tabla 6. Resultados experimentales de la cuantificación de Etanol en la muestra comercial

Sustancia Concentración Concentración (%v/v) Bebida Marca Error %

(%v/v) teórica experimental utilizada comercial
Etanol 38 37.96 Ron añejo Bacardí 0.1

ANÁLISIS DE RESULTADOS
Para llevar a cabo la cromatografía de gases, primero se preparó una solución estándar con 100 μL
de propanol (estándar interno), 200 μL etanol y 200 μL metanol y se llevo a un aforo de 10 mL. De
donde obtendremos el %v/v de cada uno de estos compuestos de la siguiente manera:

99 𝑚𝐿 𝑀𝑒𝑂𝐻 1
0.2 𝑚𝐿𝑀𝑒𝑂𝐻𝑅.𝐴. ( )( ) (100%) = 1.98%
100 𝑚𝐿 𝑀𝑒𝑂𝐻𝑅𝐴 10 𝑚𝐿

95 𝑚𝐿 𝐸𝑡𝑂𝐻 1
0.2 𝑚𝐿𝐸𝑡𝑂𝐻𝑅.𝐴. ( )( ) (100) = 1.9%
100 𝑚𝐿 𝐸𝑡𝑂𝐻𝑅𝐴 10 𝑚𝐿

99 𝑚𝐿 𝑃𝑟𝑜𝑝𝑂𝐻 1
0.1 𝑚𝐿𝑃𝑟𝑜𝑝𝑂𝐻𝑅.𝐴. ( )( ) (100) = 0.99%
100 𝑚𝐿 𝑃𝑟𝑜𝑝𝑂𝐻𝑅𝐴 10 𝑚𝐿

Para la determinación de etanol, fue preparada una solución con 100 μL de propanol (como patrón
interno) y 0.25 mL de la muestra problema y aforado con agua destilada a 10 mL.

Para llevar a cabo la técnica de cromatografía de gases capilar, primeramente, se analizó la solución
estándar de alcoholes (Metanol-Etanol-Propanol), con gradiente de temperatura de 40°C a 160
°C.Los cromatogramas obtenidos mediante el equipo generan una serie de resultados: tiempo de
retención, área y altura del pico cromatográfico, número de platos de la columna cromatográfica,
ancho y ancho medio, todos estos resultados obtenidos a las condiciones impuestas en el
cromatógrafo.

Es importante recordar que para poder llevar a cabo el método de cuantificación de factor
respuesta, se requiere del manejo de reactivos analíticos de alta pureza, por lo que los
cromatogramas obtenidos a temperatura constante (isotérmicos) nos pueden servir para identificar
el orden de elución de los diferentes alcoholes contenidos en la muestra. En el cromatograma 1 (ver
Anexo) se observan 4 picos; sabemos que el orden en el que se eluyen los componentes es: (1)
Metanol, (2) Etanol, (3) Propanol y (4) Butanol esto se infiere a partir de la temperatura de ebullición
para cada reactivo 65 °C, 78.5°C y 97.4°C 117,7 °C respectivamente (ver tabla 7), lo cual nos habla
de qué compuesto es más volátil y cuál podría ser arrastrado con mayor facilidad por la fase móvil.
Lo anterior también tiene una relación estrecha con el largo de la cadena hidrocarbonada, pues
conforme aumenta el número de carbonos aumenta el punto de ebullición debido a que las
interacciones entre las moléculas incrementan por el área de contacto entre ellas al tener mayor
peso molecular, por ello, el metanol al ser un compuesto con menor peso molecular es detectado a
menor tiempo dentro del cromatógrafo.

Tabla 7. Propiedades físicas de alcoholes

Evidentemente el tiempo de retención menor corresponde al metanol cuyo punto de ebullición es

el más pequeño, el número de platos de la columna cromatográfica es menor ya que se necesita
una menor cantidad de equilibrios entre la fase líquida y el gas para poder separar al metanol;
corresponde también una menor área, altura y ancho del pico para esta sustancia. Los valores más
elevados corresponden al estándar interno (propanol). Para calcular el número de platos teóricos y
la altura se realiza con las siguientes ecuaciones:
2
𝑡𝑅
𝑁 = 5.54 ( )
𝑊1/2

Donde:

N= número de platos teóricos

TR: tiempo de retención

W1/2: medio ancho del pico

𝐿
𝐻=
𝑁

Donde:
H= altura de plato teórico

L= longitud de la columna

N= número de platos teóricos

Numero de platos para la mezcla de estándares con gradiente de temperatura (40-160°C)

Metanol

2
𝑡𝑅 3.916 𝑚𝑖𝑛 2
𝑁 = 5.54 ( ) = 5.54( ) = 419.54
𝑊1/2 0.45 𝑚𝑖𝑛

Etanol

2
𝑡𝑅 4.633 𝑚𝑖𝑛 2
𝑁 = 5.54 ( ) = 5.54( ) = 743.2
𝑊1/2 0.4 𝑚𝑖𝑛

Propanol

2
𝑡𝑅 6.9 𝑚𝑖𝑛 2
𝑁 = 5.54 ( ) = 5.54( ) = 4986
𝑊1/2 0.23 𝑚𝑖𝑛

Altura para la mezcla de estándares con gradiente de temperatura (40-160°C)

Metanol

60 𝑚 60 𝑚
𝐻= = = 0.143 𝑚
𝑁 419.54

Etanol
60 𝑚 60 𝑚
𝐻= = = 0.08 𝑚
𝑁 743.2
Propanol
60 𝑚 60 𝑚
𝐻= = = 0.012 𝑚
𝑁 4986

Número de platos para la mezcla de alcoholes a 80°C

Metanol

2.566 𝑚𝑖𝑛 2
𝑁 = 5.54 ( ) = 1621.22
0.15 𝑚𝑖𝑛
Etanol

2.733 2
𝑁 = 5.54 ( ) = 1034.5
0.2
Propanol

3.550 2
𝑁 = 5.54 ( ) = 1117.1
0.25
Altura para 80°

Metanol

60 𝑚
𝐻= = 0.037 𝑚
1621.22
Etanol
60 𝑚
𝐻= = 0.058 𝑚
1034.5
Propanol
60 𝑚
𝐻= = 0.054 m
1117.1

Numero de platos para 60°C

Metanol

2.950 𝑚𝑖𝑛 2
𝑁 = 5.54 ( ) = 4821.2
0.1 𝑚𝑖𝑛
Etanol

3.283 𝑚𝑖𝑛 2
𝑁 = 5.54 ( ) = 𝟒434.77
0.116 𝑚𝑖𝑛
Propanol

4.816 𝑚𝑖𝑛 2
𝑁 = 5.54 ( ) = 5710.84
0.15 𝑚𝑖𝑛
Altura para 160°

Metanol
 60 𝑚
𝐻= = 0.0124 𝑚
4821.2
Etanol
60 𝑚
𝐻= = 0.0135 𝑚
4434.77
Propanol
60 𝑚
𝐻= = 0.0105 𝑚
5710.84

Si comparamos los cromatogramas 1 y 2 (ver Anexo) en donde se tiene la mezcla de alcoholes a 80

°C en el segundo caso, se puede observar a simple vista que el aumento de la temperatura logró
una resolución más baja, a simple vista se ven más traslapados los picos cromatográficos del etanol
y del metanol, lo cual se puede corroborar con el cálculo del mismo Rs, que dio de: 0.4 para el
primero y de 0.36 para el segundo. Pese a que hasta este punto no se logró tener una resolución
entre los picos correspondientes al etanol y al metanol, se pudo notar que un aumento en la
temperatura no favoreció la separación de ambos componentes.

Para el cálculo de las resoluciones (Rs):

2(𝑡𝑅2 − 𝑡𝑅1 )
𝑅𝑠 =
𝑊𝑏1 + 𝑊𝑏2

Dónde:

Rs= resolución

tr2=tiempo de retención de etanol

tr1=tiempo de retención de metanol

Wb2 =anchura del pico de etanol

Wb1 =anchura del pico de metanol

Mezcla de estándares con gradiente de temperatura (40-160°C)

Resolución entre metanol y etanol

2(4.6 𝑚𝑖𝑛 − 3.9 𝑚𝑖𝑛)

𝑅𝑠 = = 0.52
1.93 𝑚𝑖𝑛 + 0.76 𝑚𝑖𝑛
Resolución entre etanol y n-propanol

2(6.9 𝑚𝑖𝑛 − 4.6 𝑚𝑖𝑛)

𝑅𝑠 = = 1.183
1.96 𝑚𝑖𝑛 + 1.93 𝑚𝑖𝑛

Solución problema con gradiente de temperatura (40-160°C)

Resolución entre etanol y propanol

 2(6.916 𝑚𝑖𝑛 − 4.683 𝑚𝑖𝑛)
𝑅𝑠 = = 1.33
1.5 𝑚𝑖𝑛 + 1.86 𝑚𝑖𝑛
Mezcla de alcoholes a 80°C
Resolución entre metanol y etanol

2(2.733 𝑚𝑖𝑛 − 2.566 𝑚𝑖𝑛)

𝑅𝑠 = = 0.36
0.62 𝑚𝑖𝑛 + 0.32 𝑚𝑖𝑛
Resolución entre etanol y propanol
2(3.55 𝑚𝑖𝑛 − 2.733 𝑚𝑖𝑛)
𝑅𝑠 = = 0.753
1.55 𝑚𝑖𝑛 + 0.62 𝑚𝑖𝑛
Resolución entre propanol y butanol
2(5.366 𝑚𝑖𝑛 − 3.55 𝑚𝑖𝑛)
𝑅𝑠 = = 1.24
1.37 𝑚𝑖𝑛 + 1.55 𝑚𝑖𝑛
Mezcla de alcoholes a 60°C
Resolución entre metanol y etanol
2(3.283 𝑚𝑖𝑛 − 2.95 𝑚𝑖𝑛)
𝑅𝑠 = = 0.4
1.23 𝑚𝑖𝑛 + 0.43 𝑚𝑖𝑛
Resolución entre etanol y propanol
2(4.816 𝑚𝑖𝑛 − 3.283 𝑚𝑖𝑛)
𝑅𝑠 = = 1.16
1.42 𝑚𝑖𝑛 + 1.23 𝑚𝑖𝑛
Resolución entre propanol y butanol
2(8.25 𝑚𝑖𝑛 − 4.816 𝑚𝑖𝑛)
𝑅𝑠 = = 2.41
1.43 𝑚𝑖𝑛 + 1.42 𝑚𝑖𝑛

Como podemos darnos cuenta analizando las resoluciones a diferentes temperaturas de manera
isoterma obtenemos mejores resultados a 60°C, esto es porque a esa temperatura comienzan a
ebullir los alcoholes más pequeños como el metanol, por tanto cada uno de los componentes de la
mezcla de alcoholes van a ir siendo arrastrados por la fase móvil con intervalos relativamente
cercanos entre sí, la regla nos dice que para que exista una buena separación el valor de la
resolución debe ser mayor igual a 1.5. Si comparamos la resolución entre metanol y etanol a una
temperatura fija contra un gradiente de temperatura vamos a encontrar mejores resultados utilizando
el gradiente, esto se debe a que conforme se aumenta de manera gradual la temperatura vamos a
ir arrastrando por el eluyente a los componentes de la mezcla, dejando un poco de separación entre
ellos, pero no demasiada para que el experimento no se prolongue.

Para la obtención de un factor respuesta que nos ayude a encontrar la concentración dentro de
nuestra muestra problema, procederemos utilizando los datos proporcionados por el cromatograma
cuando fue utilizado un gradiente de temperatura (40-160°C):

Sistema Área Etanol Área Propanol FR Conc. (%v/v)

STD’s 53266.367 37717.8245 0.7358 -----------------
Prob. Etanol 15607.259 22127.112 -----------------

Donde partiremos de la relación de la concentración la cual es directamente proporcional a el área

de los picos cromatográficos respectivos de cada alcohol.
𝐴𝛼𝐶
Para romper esa relación de proporcionalidad y convertirlo en una igualdad es necesario hacer uso
de una constante que nos proporcione esa relación.
𝐴 = 𝑘𝐶
Si tomamos en cuenta que usamos un estándar interno (propanol) con el fin de poder obtener la
concentración exacta de etanol en nuestra muestra problema
𝐴𝐸𝑡𝑂𝐻 𝑘𝐸𝑡𝑂𝐻 𝐶𝐸𝑡𝑂𝐻
= ∗
𝐴𝑃𝑟𝑜𝑝𝑂𝐻 𝑘𝑃𝑟𝑜𝑝𝑂𝐻 𝐶𝑃𝑟𝑜𝑝𝑂𝐻
Procedemos a despejar ese factor respuesta:
 𝑣
𝑘𝐸𝑡𝑂𝐻 𝐴𝐸𝑡𝑂𝐻 ∗ 𝐶𝑃𝑟𝑜𝑝𝑂𝐻 (53266.367 𝑢)(0.99% 𝑣)
𝐹𝑅 = = = = 0.7358
𝑘𝑃𝑟𝑜𝑝𝑂𝐻 𝐴𝑃𝑟𝑜𝑝𝑂𝐻 ∗ 𝐶𝐸𝑡𝑂𝐻 (37717.8245 𝑢)(1.9% 𝑣)
𝑣
Ahora haciendo uso de este factor respuesta, podremos conocer la concentración de etanol
presente en nuestra muestra problema:
𝐴𝐸𝑡𝑂𝐻 1 15607.259 𝑢 1 𝑣
𝐶𝐸𝑡𝑂𝐻 = ( ∗ )𝐶 =( ∗ ) ∗ (0.99% ) = 0.949% 𝑣/𝑣
𝐴𝑃𝑟𝑜𝑝𝑂𝐻 𝐹𝑅 𝑃𝑟𝑜𝑝𝑂𝐻 22127.112 𝑢 0.7358 𝑣
Considerando los aforos realizados a partir de la muestra comercial de Ron:
𝑣 10 𝑚𝐿 𝑣
0.949% ∗ ( ) = 37.96%
𝑣 0.25 𝑚𝐿 𝑣
Si comparamos el dato obtenido con el proporcionado con el fabricante (Bacardí, ver tabla 6),
podemos darnos cuenta que se obtuvo un valor bastante aproximado, generando un error de apenas
0.1%, lo que nos habla de lo eficiente que resulta esta técnica instrumental cromatografía de gases,
con la ayuda de una curva de calibración de patrón interno a la hora de cuantificar muestras volátiles.
37.96% 𝑣/𝑣
%𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟 = ∗ 100% = 0.1% 𝑑𝑒 𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟
38% 𝑣/𝑣

CONCLUSIONES

Se logró separar, identificar y cuantificar el etanol presente en una muestra de Ron Bacardí añejo
mediante la técnica instrumental de cromatografía de gases con un rendimiento bastante alto,
generando apenas un error de 0.1% al comparar con el dato proporcionado por el fabricante,
encontrando un 37.96% en volumen de etanol frente al 38% reportado; entendiendo que el
principal parámetro que afecta la elución, resolución y eficiencia de los picos de la cromatografía de
gases, es la temperatura, parámetro que está directamente ligado con las propiedades físicas de los
componentes a separar (punto de ebullición y tamaño de la cadena hidrocarbonada), puesto que
dicha temperatura influirá no solo en el orden de separación, sino también en los tiempos de
retención que a su vez son una señal clara de la efectividad de la técnica instrumental.

Así mismo se obtuvieron mejores resultados mediante la aplicación de un gradiente de

temperatura, aumentando la separación entre picos, lo que hace que tengamos una mejor
resolución, además optimizando el tiempo invertido en la experimentación.

BIBLIOGRAFÍA

 VARCÁRCEL, Cases M. “Técnicas analíticas de separación”. Editorial Reverté S.A. España

1988.

CIBERGRAFÍA

 http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/5.2CromatografiaDefiniciones_2621.pdf?fbc
lid=IwAR2jqN90ht5YEAztUKOz__4U2kvi8sZBUNonbTHZT96yzJLEMWLqLPmPxyE