UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA

FACULTAD DE LA SALUD HUMANA

CARRERA DE LABORATORIO CLÍNICO

Trabajo Autónomo

Tema: Investigar sobre Técnicas y procedimientos en la

medición de diversos metabolitos de la sangre: ColesterolHDL,
Bilirrubinas, TGOTGP, GGT

Integrantes

ABAD YOSSELYN
LAPO YADIRA
QUEZADA ANDREA
OCHOA JANETH
TOLEDO JOFFRE

DOCENTE: Lic. María del Cisne Loján.

 COLESTEROL-HDL

El Colesterol es una grasa que produce nuestro organismo y necesaria para obtener energía
y para la formación y composición de estructuras celulares vitales. El hígado se encarga de
producir la cantidad adecuada para el correcto funcionamiento de las células.

El Colesterol, a su vez, está formado por unas fracciones que en dependencia de la densidad
que tienen se les da un nombre u otro, así:

 HDL (23%): lipoproteínas de alta densidad

 LDL (50%): lipoproteínas de baja densidad
 VLDL (18%): lipoproteínas de muy baja densidad
Dado que cada familia posee distinta actividad biológica, el significado clínico de un
aumento de colesterol depende de la o las lipoproteínas que se encuentran en exceso.

Las HDL y las LDL han sido las más estudiadas por su importante actividad biológica:

 Las LDL, producto del metabolismo de las VLDL en plasma, son las encargadas del
transporte del colesterol exógeno (y en mucho menos proporción, endógeno) hacia
el interior de las células.
 Las HDL, sintetizadas en el hígado, remueven el colesterol no utilizado por las
células (dentro de ciertos límites de concentración), transportándolo hacia el hígado
para su degradación. (Sánchez, 2012)

FUNCIÓN COLESTEROL-HDL

Su función es remover eficazmente el exceso de colesterol de las células periféricas, para lo

cual utiliza transportadores proteicos y luego esterifica este colesterol libre; de esta manera,
la partícula pobre en lípidos se convierte en una partícula madura, esférica, rica en ésteres
de colesterol. Posteriormente, tiene dos alternativas para llevar el colesterol de vuelta hacia
el hígado: puede hacerlo por vía indirecta, mediante la CETP (Colesterol Esther Transfer
Protein), o puede llevarlo directamente para que lo capten los receptores de la membrana
del hepatocito, cuyo funcionamiento se modula enzimáticamente. (Isabel Carrero)

PATOLOGÍAS FRECUENTES

La mayor parte de variaciones se debe, a combinaciones de causas genéticas y ambientales.

Entre los factores ambientales son bien conocidos los efectos del ejercicio, el alcohol y la
grasa saturada, que aumentan las HDL, mientras que el tabaco y los ácidos grasos
poliinsaturados n-6 las disminuyen. Además, existen influencias hormonales entre las que
destaca el efecto positivo de los estrógenos. Los factores genéticos que influyen en las
concentraciones plasmáticas de las HDL en la población general no son conocidos, pero
existen muchas posibilidades. Hay que tener en cuenta que el metabolismo de las HDL es
muy complejo, que está determinado por diversas enzimas y proteínas y que está
estrechamente relacionado con el metabolismo de las otras lipoproteínas. (SÁNCHEZ DE
MEDINA)

Dentro de los defectos genéticos, Las principales dislipidemias son la Hipercolesterolemia

Familiar, la Dislipidemia Familiar Combinada, la Hipercolesterolemia Poligénica, la
Disbetalipoproteinemia, las Hipertrigliceridemias Familiares y la hipoalfalipoproteinemia.
(tercero)

La hipoalfalipoproteinemia es la disminución del colesterol de las HDL en sangre. La

deficiencia de apolipoproteína A-1 (Apo A-1) es un trastorno raro del metabolismo de las
liporpoteínas caracterizado bioquímicamente por la ausencia total de apolipoproteína A1 y
una concentración extremadamente baja de lipoproteínas de alta densidad (HDL) en
plasma, y clínicamente por opacidades corneales y xantomas complicados con enfermedad
coronaria prematura. La enfermedad está causada por varias deleciones y mutaciones en el
gen APOA1 (11q23-q24), que codifica la apoproteína apo A-1, un constituyente principal
de las HDL, que provoca una disminución de la producción de apo A-1, un deteriorio de su
función o un aumento de su catabolismo. (BENLIAN, 2013)

DIAGNÓSTICO EN EL LABORATORIO

METODOS ENZIMATICOS COLORIMETRICOS

Basados en la utilización de diferentes reacciones influidas por enzimas que finalizan en la

formación de complejos colorimétricos que pueden ser medidos, observando cómo cambia
la luz absorbida por la solución en la que se está dando la reacción. Para poder utilizar este
método debe haber entre los sustratos o los productos alguno que absorba luz a una
longitud de onda determinada.

Cuando la luz absorbida se encuentra en el espectro visible se observar un cambio en

el color de la muestra. Esto implica que la cantidad de luz absorbida por la muestra es
directamente proporcional a la concentración de la muestra, por ende mientras más
concentración, mayor será su coloración. (Kndia)

Principio

HDL COLESTEROL es una prueba enzimática homogénea para la determinación

cuantitativa de Colesterol HDL (HDL). El HDL es conocido como un componente lipídico
protector contra las enfermedades cardiovasculares (ECV). Junto con el Colesterol LDL es
de importancia diagnóstica en la determinación del riesgo individual de ECV.
Método
La prueba combina dos pasos específicos: En el primer paso se eliminan y destruyen los
quilomicrones, y los colesteroles VLDL y LDL por reacción enzimática. En el segundo
paso, se determina el colesterol restante de la fracción HDL, a través de reacciones
enzimáticas bien establecidas en presencia de surfactantes específicos para HDL.
Muestra
Suero/Plasma
Reactivos

Enzimas (ENZ) SUSTRATO(SUB) CALIBRADOR(CAL)

Buffer Ph 6,6 Peroxidasa Colesterol
Cloruro de sodio 4- aminoantipirina
Colesterol esterasa Buffer
Colesterol oxidasa Preservantes
Catalasa Detergentes
Ascorbato oxidasa Azida de sodio
N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)
-3-5-dimetoxianilina
Preservantes

Preparación de reactivos y estabilidad

(ENZ) (SUB) están listos para usar.

Estabilidad: Después de abrir los reactivos se conservan estables por 2 meses cuando se
almacenan entre 2...8°C. Evite la contaminación. No congele. No mezcle las tapas. Proteger
(ENZ) de la luz.

(CAL) Reconstituya el contenido del frasco con exactamente 4 ml de agua destilada libre
de gérmenes, cierre el frasco y agite cuidadosamente para disolver todo el liofilizado. Evite
que se forme espuma. Deje reposar por 30 minutos al menos antes de usar.
Estabilidad: 10 días entre 2...8°C. Si se necesita, el calibrador recién preparado se puede
dividir en alicuotas y mantener congelado a –20°C por máximo 30 días. Congele y
descongele una sola vez. Mezcle cuidadosamente después de descongelar.

Condiciones del ensayo

‒ Longitud de onda: 593nm (570-620nm)
‒ Paso de luz: 1cm
‒ Temperatura: 37°C
‒ Medición: contra blanco de reactivo. Se necesita un blanco por serie.
Procedimiento
Atemperar los reactivos y las cubetas a 37°C. La temperatura se debe mantener constante
(± 0,5°C) durante la prueba.
Cálculo

Valores de referencia

< 35 mg/dl (< 0,9 mmol/l) factor de riesgo para ECV

> 60 mg/dl (> 1,54 mmol/l) poco riesgo para ECV
Este rango se da sólo como orientación, cada laboratorio debe establecer sus propios
valores de referencia ya que factores como: sexo, dieta, edad, ubicación geográfica y otros,
pueden afectar los valores esperados.
 BILIRRUBINA

Pigmento de color amarillento; esta biomolécula se forma cuando

los eritrocitos desaparecen del aparato circulatorio, por su extrema fragilidad, cuando han
alcanzado la plenitud de su vida (aproximadamente 120 días). Su membrana celular se
rompe y la hemoglobina liberada es fagocitada por los macrófagos tisulares del organismo,
sobre todo los macrófagos del bazo, el hígado y la médula ósea.

En esta degradación de la hemoglobina, se separan, por un lado, la molécula de globina y,

por otro, el grupo hemo.
La hemo-oxigenasa degrada el grupo hemo en los macrófagos, para dar origen a
llamada biliverdina, además de hierro libre La biliverdina es luego reducida por la enzima
biliverdina reductasa para dar bilirrubina. Durante las horas o los días siguientes los
macrófagos liberan el hierro de la hemoglobina que será transportado por la transferrina
hasta la médula ósea (para formar nuevos hematíes), o almacenado en el hígado y otros
tejidos en forma de ferritina para situaciones de necesidad.
Los macrófagos de los tejidos transforman la porfirina de la hemoglobina en bilirrubina que
viaja unida a la albúmina sérica (proteína transportadora) por el torrente sanguíneo al
hígado, donde se separan, y la bilirrubina se secreta por la bilis y se degrada

 Bilirrubina directa o bilirrubina conjugada. Se encuentra unida con ácido

glucurónico, para luego ser acumulada en la vesícula biliar y constituir parte de la bilis,
para su posterior eliminación.
 Bilirrubina indirecta o bilirrubina no conjugada. Se encuentra unida a
la albúmina ya que aún no se ha unido a ácido glucurónico, en el hígado para su
eliminación, porque aún no ha tenido el proceso adecuado de degradación para formar
parte de la bilis.

SIGNIFICACION CLINICA

La bilirrubina, compuesto de degradación de la hemoglobina, es captada por el hígado para

su conjugación y excreción en la bilis. Las alteraciones hepatocelulares u obstrucciones
biliares pueden provocar hiperbilirrubinemias. La eritroblastosis fetal o anemia hemolítica
del recién nacido es una patología provocada por incompatibilidad materno-fetal en la que
se produce una destrucción excesiva de glóbulos rojos. Esto resulta en un severo aumento
de la bilirrubina sérica con el consecuente riesgo de difusión del pigmento al sistema
nervioso central, por lo que la determinación de la bilirrubina en estos niños recién nacidos
resulta sumamente importante.
Manifestaciones clínicas de la hiperbilirrubinemia

La elevación de la bilirrubina se manifiesta como ictericia. El umbral para la detección

clínica de ictericia está entre 2 y 3 mg/dL. Cuando la hiperbilirrubinemia es directa
(conjugada), se produce eliminación de la bilirrubina por orina, lo que produce un color
oscuro característico, llamado coluria. Durante el período de recuperación de un episodio
de ictericia prolongada puede desaparecer la coluria pero mantenerse la ictericia, lo que se
explica por la bilirrubina delta. Si hay una obstrucción completa de la vía biliar o una falla
de la excreción hepática muy marcada de la bilirrubina, ésta no llega al intestino y no
produce la pigmentación color café de las deposiciones normales. Esto explica la acolia,
que describe la presencia de deposiciones blanquecinas.

Interpretación de la bilirrubina elevada

Una vez que se determina una elevación de bilirrubina en los exámenes de sangre, el primer
paso es verificar si se trata de una hiperbilirrubinemia de predominio conjugado
(hiperbilirrubinemia “directa”) o no conjugado (hiperbilirrubinemia “indirecta”).
Habitualmente se habla de hiperbilirrubinemia de predominio directo cuando la bilirrubina
directa representa más del 30% de la bilirrubina total.

PRINCIPO DE LA REACCION

La bilirrubina reacciona con el acido sulfanilico diazotado (DSA) formando un color rojo.
La absorbancia de este color a 546nm es directamente proporcional a la concentración de
bilirrubina en la muestra. Los glucorónidos de la bilirrubina solubles en agua reaccionan
con DSA mientras la bilirrubina mientras que la bilirrubina “indirecta” conjugada con la
albumina reacciona solo en presencia de acelerador.

Bilirrubina total = Bilirrubina directa + Bilirrubina indirecta.

Ácido sulfanilico+nitrito de sodio  DSA

Bilirrubina + DSA directa  azcobilirrubina DIRECTA
Bilirrubina + DSA+acelerador  azobilirrubina TOTAL

Contenido:

TBR: 1X100 ml Reactivo de bilirrubina total (tapa blanca)

TNR: 1x9 ml Reactivo T-nitrito (Tapa blanca)
DBR: 1x100 ml Reactivo de bilirrubina directa (Tapa azul)
DNR: 1x9 ml Reactivo de D-Nitrito (Tapa azul)
Preparacion y estabilidad de los reactivos:

Ambos reactivos y las soluciones de nitrito están listos para su uso; y son aun después de
haberse abierto, hasta la fecha de caducidad y almacenados de 15…25ºC.

Muestras
Suero o plasma con heparina
Evitar la hemolisis, las muestras deben estar protegidas de la luz.
Estabilidad: cuando se almacena la muestra protegida de la luz de 2…8ºC la bilirrubina es
estable por 3 dias.

Ensayo

Longitud de onda 546 nm

Paso de luz 1 cm
Temperatura 20….25ºC
Medicion Frente a un blanco de muestra.

Procedimiento para bilirrubina TOTAL:

1 gota = 40 ul

Procedimiento para bilirrubina DIRECTA:

1 gota = 40 ul
Cálculos:

Características de la prueba

Linealidad: el ensayo es lineal hasta mg/dl. Para concentraciones que exceden de mg/dl
diluir la muestra 1:4 con solución salina fisiológica (0.9%) y repetir la prueba. Multiplicar
los resultados por 5.

Valores de referencia.

Notas.

1. Es importante asegurarse que el reactivo de bilirrubina y el reactivo de nitrito sean

muy bien mezclados antes de adicionar la muestra
2. Los niveles de bilirrubina se reducen si la muestra se expone a la luz. La hemolisis
también puede causar niveles bajos de bilirrubina por un efecto inhibitorio de la
hemoglobina con la reacción diazo.
 TGP

La alanina-aminotransferasa (ALT o TGP) es una enzima unilocular (citoplasmática) cuya

mayor actividad se localiza en el tejido hepático. En menor proporción, se encuentra
actividad de ALT en: músculo esquelético, corazón, riñón, páncreas y eritrocitos. La
destrucción o cambio de permeabilidad de las membranas celulares en los tejidos antes
mencionados, provoca la liberación de ALT a la circulación sanguínea, lo que se evidencia
al presentarse valores elevados de ALT en los análisis.

Los mayores aumentos de actividad ALT en suero, se producen como consecuencia de

alteraciones hepáticas. En el caso de hepatitis virales, el aumento de ALT precede a la
aparición de ictericia, alcanzando un máximo luego de la observación de dicho síntoma. Si
los valores permanecen elevados luego de 6 semanas, debe pensarse en la posibilidad de
una hepatitis activa o en el comienzo de una hepatitis crónica, por lo que es de utilidad las
determinaciones seriadas de la enzima. La determinación de ALT adquiere importancia
diagnóstica cuando sus valores se comparan con los de otras enzimas como la de aspartato
aminotransferasa (AST), fosfatasa alcalina, lactato deshidrogenasa (LDH) y bilirrubina.
Ambas pruebas de los niveles de ALT y de AST son pruebas fiables de daño hepático.

El nivel de alanina aminotransferasa se determina habitualmente como parte de un análisis

de sangre.
La prueba de alanina aminotransferasa (ALT) se realiza para:
 Identificar las enfermedades hepáticas, especialmente la cirrosis y la hepatitis causada
por el alcohol, las drogas o un virus.
 Ayudar a detener el daño hepático.
 Averiguar si la ictericia se debe a un trastorno de la sangre o a una enfermedad del
hígado.
 Realizar un seguimiento de los efectos de los medicamentos para reducir el colesterol
y de otros medicamentos que pueden dañar el hígado.

Análisis: Alanina aminotransferasa (ALT o GPT).

Nombres alternativos: SGPT; Glutamato piruvato transaminasa en suero; Alanina

transaminasa; Alanina aminotransferasa

Tipo de muestra: Suero o plasma

Preparación del paciente: No es necesaria una preparación especial. Ayuno no requerido.

Muestra: Suero o plasma

Recolección: Se debe obtener de la manera usual.

Aditivos: en caso de que la muestra a utilizar sea plasma, se puede usar heparina o EDTA
como anticoagulantes.

Sustancias interferentes conocidas:

 Las muestras provenientes de pacientes hemodializados o con hipovitaminosis o

patologías asociadas con deficiencia de piridoxal fosfato producen valores
falsamente disminuidos.
 No se observan interferencias por bilirrubina hasta 25 mg/dl, ni triglicéridos hasta
1000 mg/dl. La hemoglobina interfiere significativamente aumentando los
resultados, a partir de hemólisis moderada, debido a la presencia de GPT en los
eritrocitos. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las drogas en el
presente método

Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la GPT en suero es estable hasta 3 días

en refrigerador, sin agregado de conservantes. No congelar.

Fundamento del método.

La alanina aminotransferasa (ALT o GPT) cataliza la transferencia del grupo amino de la

alanina al 2-oxoglutarato, formando piruvato y glutamato. La concentración catalítica se
determina, empleando la reacción acoplada de la lactato deshidrogenasa (LDH), a partir de
la velocidad de desaparición del NADH, medido a 340 nm.

L alanina + 2  oxoglutarato GTP

piruvato + L  Glutamato

piruvato + NADH + H+ LDH

L lactato + NAD+

Procedimiento:

Pipetear en cubetas 25°C, 30°C 37°C

Muestra 200ul 100ul
BUF 1000ul 1000ul
Mezclar, incubar por 5 minutos a la temperatura deseada
SUB 250ul 250ul
Mezclar, leer la absorbancia después de 1 minutos y al mismo tiempo activar el
cronómetro. Leer nuevamente la absorbancia exactamente después de 1, 2 y 3 minutos.

Procedimiento 2:

Pipetear en cubetas 25°C, 30°C 37°C

 200ul 100ul
Muestra de reactivo de 1000ul 1000ul
trabajo
Mezclar, leer la absorbancia después de 1 minuto y al mismo tiempo activar el cronómetro.
Leer nuevamente la absorbancia exactamente después de 1, 2 y 3 minutos.

Cálculos

Para cambios de absorbancia por minuto (A/min) entre 0,060,08 (Hg 365nm) ó de
0,120,16 (Hg 334nm, 340nm) emplear la medición de los dos primeros minutos en el
cálculo.

(1 minuto de incubación, 2 minutos de medición)

U/l=A/min x Partida con muestra Partida con substrato

Longitud de onda 25°C, 30°C 37°C 25°C, 30°C 37°C
Hg 334 nm 971 1780 1173 2184
340nm 952 1745 1151 2143
Hg 365 nm 1765 3235 2132 3971

Factor de conversión de unidades tradicionales U/l en unidades SI kat/l

1 U/l = 16,67 x 102ukat/l

1ukat/l = 60 U/l

Valores de referencia

Temperatura 25°C 30°C 37°C IFCC

Hombres 22 U/l 30 U/l 42 U/l 45 U/l
Mujeres 17 U/l 23 U/l 32 U/l 34 U/l
 TGO

La transaminasa glutámica oxalacética (GOT) o aspartato aminotransferasa pertenece al

grupo de las transaminasas, las cuales catalizan la transformación de los aminoácidos a los
respectivos alfaceto-ácidos, a través de la transferencia del grupo amino y viceversa. La
GOT está presente en cantidad elevada en muchos tejidos con localización celular en las
mitocondrias y en el citoplasma. Los tejidos más ricos de GOT son: corazón, hígado,
músculo, riñón, cerebro, páncreas, eritrocitos, leucocitos, pulmón y bazo.

La determinación de la GOT en el suero está indicada para seguir los fenómenos lesivos de
las células. Si la concentración de la enzima en el suero es moderada, ésta proviene del
citoplasma y, en menor medida, de las mitocondrias; si la concentración de la enzima está
elevada en relación con fenómenos lesivos y necróticos de la célula, proviene en mayor
medida de las mitocondrias. Los valores más elevados de la GOT se relacionan con los
procesos necróticos del órgano: infarto del miocardio, hepatopatía, distrofia muscular. La
determinación de la GOT es útil en presencia de un informe dudoso de electrocardiograma.
Puede aumentar también en el infarto pulmonar, en la pancreatitis aguda, en las hepatitis,
en el envenenamiento por hongos o por la absorción de algunos fármacos (isoniazide,
rifampicina y algunos antibióticos).

Análisis: transaminasa glutámica oxalacética (GOT) o aspartato aminotransferasa

Preparación del paciente.- Ayuno en rutina (Para realizar el examen en sangre,

previamente es necesario que el paciente, unos días antes, haga una dieta en la que no
sobrecargue el hígado, no tomando alcohol, escasas proteínas y grasas y también es
necasrio no realizar esfuerzos físicos importantes)

Recolección y preparación de la muestra.- Suero o plasma heparinizado o con EDTA.

Estabilidad de la muestra.- La muestra se puede conservar por 1 día a temperatura

ambiente, y por lo menos 3 meses a – 20ºC.

Sustancias interferentes

Las interferencias más significativas son:

 Hemólisis
 Ictericia: con bilirrubina ≥ 4.0 mg/dl ,
 Lipemia: con triglicéridos ≥ 2000.0 mg/dl.
 Muchos fármacos (cefalosporina, cloranfenicol, rifampicina, isoniazide,
alfametildopa) pueden dar valores elevados (Anónimo, 2007)
Fundamento del método

La aspartato aminotransferasa (AST/GOT) cataliza la transferencia del grupo amino del

aspartato al cetoglutarato con la formación de glutamato y oxalacetato. Este último es
reducido a malato por la malato deshidrogenasa (MDH) en presencia de nicotinamido
adenin dinucleótido reducido (NADH). La reacción se controla cinéticamente a 340 nm a
través de la disminución de la absorbancia resultante de la oxidación del NADH a NAD+ ,
proporcional a la actividad AST en la muestra1

Procedimiento

 Preincubar el reactivo de trabajo, muestras y controles a la temperatura de reacción.

 Ajustar a 0 el fotómetro con agua destilada.
 Pipetear en una cubeta:

 Mezclar suavemente por inversión. Insertar la cubeta en el compartimiento

termostatado del instrumento y poner el cronómetro en marcha.
 Incubar durante 1 minuto, y anotar la absorbancia inicial.
 Repetir las lecturas exactamente a los 1,2 y 3 minutos.
 Calcular la diferencia entre absorbancias.
 Calcular el promedio de los resultados para obtener el cambio promedio en
absorbancia por minuto (ΔA/min).

Cálculos

U/L = ΔA/min x 3333 (37ºC)

U/L = ΔA/min x 1746 (30ºC)

Valores de referencia (varía de acuerdo a la marca comercial del reactivo y a la

temperatura de medición):
TGO: Mujeres hasta 32 U/l

Hombres hasta 38U/l

Interpretación de resultados

 Niveles aumentados de TGO pueden indicar: Hepatopatías de distinta etiología

(inflamatorias, obstructivas, autoinmunes, por virus hepatotróficos: HAV, HBV,
HCV,HDV,HEV, parasitaria, tóxica, necrótica). Por infección sistémica de virus no
hepatotróficos: herpes, CMV, EBV, HIV, Parotiditis, Rubeola, Varicela Zoster etc.
Traumatismo extenso del músculo esquelético; golpe de calor; miocarditis, cirrosis,
ictericia obstructiva, infarto agudo de miocardio, enfermedades hemolítica
Cardiopatías como el IAM, embolia pulmonar, miocarditis, pericarditis, disritmias,
cirugía de revascularización cardíaca.
 Niveles disminuidos de TGO pueden indicar: deficiencia de Vitamina B1 y
enfermedades renales.
 GGT

Entre las enzimas que resultan de interés clínico en la enfermedad hepática se encuentra la
gamma glutamil transferasa (GGT) sérica que desempeña una función fundamental en el
metabolismo del glutatión y el transporte de aminoácidos. También es importante en la
absorción de aminoácidos de la luz intestinal.

La γ-glutamil transferasa (γ-GT) es una enzima de membrana ampliamente distribuida en el

organismo. El tejido más rico en esta enzima es el riñón (en el túbulo renal proximal),
seguido del páncreas (ductos y células del acino), hígado, bazo, intestino, cerebro y
pulmones. Dentro de la célula, se localiza en las membranas, fundamentalmente en el
retículo endoplasmático liso, en los microsomas, en la fracción soluble del citoplasma y en
los conductillos biliares. La actividad de la GGT proviene principalmente del hígado, y es
muy utilizada para detectar la disfunción hepática. (Garcia, 2014)

Su actividad es influenciada por cualquier factor que afecte a las membranas celulares de
los órganos que la contienen.

En el caso de alteraciones hepáticas, la γ-GT generalmente es índice de agresión tóxica. Sin

embargo, la determinación sólo tiene valor clínico cuando sus valores son comparados con
los de otras enzimas de mayor órgano-especificidad. El análisis conjunto de γ-GT,
fosfatasas alcalina, transaminasas y bilirrubina, amplía significativamente el panorama del
diagnóstico diferencial de las enfermedades hepáticas primarias y secundarias, formando
parte del hepatograma. (Lab, 2014)

La gamma-glutamil transferasa (GGT) puede solicitarse para determinar la causa de un

aumento de la fosfatasa alcalina (ALP). En obstrucciones de la vía biliar y en varias
enfermedades hepáticas suelen aumentar tanto la GGT como la ALP, pero en caso de que
sólo exista aumento de ALP, la lesión probablemente será de tipo óseo. Aumentos de GGT
suelen indicar que el hígado está lesionado pero no indican la causa de tal lesión.

También se puede solicitar esta prueba si se sospecha de un abuso crónico de alcohol (la
GGT aumenta en aproximadamente un 75% de los bebedores crónicos) ya que mide el
nivel de daño que tiene una persona alcohólica, y para la monitorización del consumo y/o
abuso de alcohol en personas tratadas por hepatitis alcohólicas o en terapias de
desintoxicación alcohólica. (Lab, 2014)

La GGT puede solicitarse junto con otras pruebas para evaluar el estado de un individuo
que presenta signos o síntomas sugerentes de una enfermedad hepática. Alguno de los
signos y síntomas de lesión hepática son:

 Debilidad, fatiga
  Pérdida de apetito
 Náuseas y vómitos
 Hinchazón y/o dolor abdominal
 Ictericia
 Orina oscura, heces descoloridas
 Prurito (picor)

DIAGNOSTICO EN EL LABORATORIO
Análisis: Gama-glutamil transferasa
Nombres alternos: Gama-glutamil transpeptidasa, GGT, GGTP
Tipo de muestra: Suero sanguíneo.
Ayuno: no requerido, pero como se utiliza la misma muestra de sangre para determinar
otros parámetros bioquímicos en el laboratorio es mejor el estar en ayunas para realizar
todos ellos de una misma extracción sanguínea.
Condiciones especiales: no se recomienda realizar este examen si el día anterior se
ingirieron bebidas alcohólicas.

Este análisis mide la cantidad de la enzima gama-glutamil transpeptidasa o gama-glutamil

transferasa (GGT o GGTP) en la sangre. Una enzima es una proteína con la capacidad
de catalizar (por así decirlo "acelerar") una reacción química en el cuerpo.

Al igual que el análisis de fosfatasa alcalina, la medición de la GGT es sumamente útil para
diagnosticar obstrucciones en los conductos biliares. De hecho, en una obstrucción biliar
ambas enzimas aumentan paralelamente. Sin embargo la GGT presenta dos ventajas sobre
la fosfatasa alcalina:

1) La GGT es más sensible. Es decir, puede ayudar a detectar un problema biliar

más tempranamente.

2) La GGT es más específica. A diferencia de la fosfatasa alcalina la GGT no va a elevarse

por condiciones que afecten los huesos u otros órganos.

Fundamento del método.

Método: El reactivo se basa en el procedimiento cinético descrito por SzaszPersijn, que

utiliza el substrato carboxílico L-gamma-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida.

La Gamma-glutamiltransferasa (γ-GT) cataliza la transferencia de un γ-glutamil grupo de γ-

glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida a glicilglicina con el formación de L-γ-glutamil-
glicilglicina y 5 amino-2-nitro-benzoato.

L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida + glicilglicina --- γ - GT ->

 glutamilglicilglicina + 5-amino-2-nitrobenzoato

La cantidad de 5-amino-2-nitro-benzoato formado, monitoreada cinéticamente a 405 nm, es

proporcional a la actividad de la enzima presente en la muestra.

Instrucciones para su uso de reactivos

A. Reactivo A: viales conteniendo L-γ-glutamil-3-carboxi-4- nitro-anilida y glicilglicina.

B. Reactivo B: solución de buffer Tris 100 mmol/l para pH final de 8,25 a 25o C.

Reactivos Provistos: listos para usar. Estos pueden usarse separados o como Reactivo
único, mezclando 4 partes de Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A +
1 ml Reactivo B).

Condiciones de reacción

 Longitud de onda: 405 nm

 Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37o C
 Tiempo de reacción: 3 minutos
 Volumen de muestra: 100 ul
 Volumen de Reactivo único: 1 ml
 Volumen final de reacción: 1,1 ml

Procedimiento.

En una cubeta mantenida a la temperatura seleccionada colocar:

 Reactivo único 1 ml Preincubar unos minutos.

 Luego agregar: Muestra 100 ul
 Mezclar rápidamente y proseguir de inmediato la incubación. Ajustar la absorbancia
a un valor de referencia (0,200 ó 0,300 D.O.) y disparar simultáneamente el
cronómetro. Registrar la absorbancia a los 1, 2 y 3 minutos.
 Determinar la diferencia promedio de absorbancia (∆A/min) restando cada lectura
de la anterior y promediando los valores. Utilizar este promedio para los cálculos.

Calculo de los resultados .

γ-glutamil transferasa (U/l) = ∆A/min x 1.158

Valores normales de GGT en la sangre.

El rango normal de GGT se encuentra entre 0 y 51 unidades internacionales por litro

(UI/L).
Interpretación de resultados:

Algunos análisis de la función hepática, como el análisis de la GGT (gamma glutamil

transpeptidasa) son muy sensibles y pueden elevarse por algo tan simple como tomar
paracetamol con regularidad. Esto podría evitar que el análisis muestre los daños causados
por el exceso de alcohol.

Entre los fármacos que pueden hacer aumentar los niveles de GGT se incluyen fenitoína,
carbamazepina y barbitúricos; otros fármacos que los pueden hacer aumentar son
antiinflamatorios no esteroideos, fármacos hipolipemiantes (reducen las concentraciones de
lípidos), antibióticos, agentes antifúngicos. El clofibrato y los contraceptivos orales pueden
hacer disminuir la concentración de GGT.

La concentración de GGT aumenta con la edad en las mujeres, pero no en los hombres, y
siempre es más elevada en los hombres que en las mujeres, debido a la cantidad adicional
debida a la próstata.

 Una concentración elevada de GGT indica afectación del hígado pero sin indicar
específicamente de qué se trata. Generalmente, cuanto más elevada está la GGT más
importante es la lesión hepática. Valores elevados de GGT suelen indicar
enfermedad hepática como hepatitis o cirrosis, pero también pueden darse en otros
trastornos como insuficiencia cardíaca congestiva, diabetes o pancreatitis; también
pueden ser causados por consumo abusivo de alcohol o por toma de fármacos
tóxicos para el hígado.
 Una concentración normal o baja de GGT indica que es muy poco probable que
exista una enfermedad hepática o que una persona haya consumido alcohol. (Garcia,
2014)
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