ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DEL REACTIVO
La suspensin del antgeno siempre debe refrigerarse
RPR
Prueba Rpida de Reagina
(Sfilis)
Prueba en placa de floculacin con carbn activado para la
determinacin cualitativa y cuantitativa de anticuerpos
reagnicos en suero o plasma
RESUMEN Y PRINCIPIO
La prueba de RPR es una prueba de floculacin no
treponmica macroscpica que es utilizada para detectar y
cuantificar reaginas, un anticuerpo anti-lipdico encontrado
en el suero o plasma de personas con sfilis y ocasionalmente
en personas con infecciones agudas o crnicas en otras
condiciones aparte de la sfilis.
El antgeno utilizado en el equipo es una modificacin del
antgeno VDRL que contiene micropartculas de carbn para
realzar la diferencia entre un resultado positivo y negativo.
Si una muestra contiene reaginas, ocurre la floculacin con
las partculas de carbn contenidas en la suspensin del
antgeno, la cual aparece como un cmulo negro. Las
muestras no reactivas se observan con un ligero color gris.
PRESENTACIONES
Equipo para 50 pruebas
Equipo para 100 pruebas
Equipo para 200 pruebas
Equipo para 300 pruebas
Equipo para 500 pruebas
REACTIVOS
Suspensin de Antgeno RPR.
1
Suspensin de cardiolipina , conteniendo micropar-
tculas de carbn activado.
Control Positivo RPR.
Control lquido estabilizado, reactivo con antgeno
RPR.
Control Negativo RPR.
Control lquido estabilizado, no reactivo con antgeno
RPR.
Precauciones: Unicamente para uso diagnstico in-vitro.
PREPARACIN DEL REACTIVO
La suspensin del antgeno debe agitarse por 5 a 10
segundos antes de abrirse, para resuspender las partculas
de carbn. Los controles estn listos para su uso.
cuando no se utilice. Proteger de la luz No congelar!.
El antgeno es estable sin abrir y almacenado entre 2-8C,
hasta la fecha de caducidad marcada en su respectiva
etiqueta. Los controles son estables hasta la fecha de
caducidad indicada en su etiqueta cuando se almacenan
entre 2-8C.
Lleve a temperatura ambiente la suspensin del antgeno y
los controles antes de utilizarse.
MATERIAL PROPORCIONADO
Aguja No. 18 sin bisel utilizada para dispensar
aproximadamente 17mL de la suspensin del
antgeno.
Pipetas/ agitadoras utilizadas para dispensar
aproximadamente 50 mL (0.05 mL) de muestra.
Tarjetas de Prueba (crculos de aproximadamente
18 mm). Utilice como superficie de prueba.
Se debe tener cuidado en la manipulacin de las
tarjetas de prueba para evitar introducir contami-
nantes al circulo de prueba. Extienda cada muestra
sobre el total del rea del crculo de prueba.
Nota: Deseche la aguja cuando el equipo se haya utilizado
completamente.
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO
PROPORCIONADOS
Rotador (100 2 rpm)
Solucin salina (0.9%)
Cronmetro
Lmpara
RECOLECCIN Y PREPARACIN DE LA MUESTRA
Las muestras pueden ser sueros activados o inactivados o
plasmas recolectados con EDTA como anticoagulante. Evite
la hemlisis. La lipemia no interfiere con la suspensin del
antgeno, sin embargo, si la muestra esta severamente
lipmica de manera que se obscurece el estado de las
partculas de antgeno, la muestra no debe ser utilizada.
ESTABILIDAD DE LA MUESTRA
Las muestras de suero se reportan estables por 5 das,
almacenadas entre 2-8C. Los plasmas recolectados con
EDTA y almacenados entre 2-8C se reportan estables hasta
24 hrs.2
SUSTANCIAS INTERFERENTES
Como con todos los antgenos tipo cardiolipina, pueden
ocurrir resultados falsos positivos. Estos resultados pueden
ser causados por enfermedades como lepra, lupus
eritematoso, mononucleosis infecciosa, paludismo y
neumona viral.
Varios reportes indican la presencia de resultados falsos
positivos en el embarazo.3,4 Enfermedades autoinmunes y
adicciones narcticas pueden dar reacciones falso-positivas.5
PROCEDIMIENTO
Procedimiento cualitativo
1. Lleve a temperatura ambiente la suspensin del antgeno
de RPR, los controles y las muestras.
2. Tome la pipeta/agitador del extremo sellado. Al tiempo
que oprime y mantiene presionado dicho extremo,
coloque la pipeta dentro de la muestra. Suelte para
permitir que la pipeta aspire un poco de muestra.
3. Sostenga en posicin vertical la pipeta/agitador
directamente sobre un crculo de la tarjeta de prueba y
coloque una gota de muestra sobre esta rea.
4. Utilizando el extremo plano de la pipeta/agitador,
extienda la muestra para cubrir el total de la superficie
del crculo. Deseche la pipeta/agitador. Repita el mismo
procedimiento para cada muestra.
5. Agite el frasco de la suspensin del antgeno antes de
utilizarlo. Sostngalo en posicin vertical y dispense
varias gotas en la tapa del frasco para asegurarse de
que el paso por la aguja es correcto. No limpie la aguja.
Coloque una gota de la suspensin del antgeno sobre
cada muestra. NO EXTIENDA!
6. Agite por 8 minutos a 100 rpm en un rotador mecnico.
7. Transcurrido este tiempo retire la tarjeta del rotador y
agtela breve y suavemente.
8. Lea macroscpicamente bajo una lmpara de luz
intensa.
RESULTADOS CUALITATIVOS
Reactivo: Presencia de flculos grandes o pequeos
en el centro o la periferia del crculo de prueba.
Dbil reactivo: Presencia de flculos pequeos pero
definidos.
No reactivo: Apariencia lisa, uniforme pero sin flculos
visibles.
Los resultados positivos deben ser confirmados mediante
pruebas de las muestras utilizando procedimientos
cuantitativos. Se recomiendan pruebas serolgicas
confirmativas como el ensayo de microhemaglutinacin para
anticuerpos treponmicos (MHA-TP). El diagnstico final
debe estar en base a la correlacin de los resultados de
prueba junto con otros hallazgos clnicos. (Vase
Limitaciones)
Procedimiento cuantitativo
1. Seleccione los sueros positivos obtenidos en la prueba
cualitativa.
2. Colocar en una gradilla cuatro tubos 12 x 75 mm y
numerarlos.
3. Agregar a cada uno de ellos 0.5 mL de solucin salina.
4. Depositar 0.5 mL de suero problema en el tubo No. 1 y
mezclar.
5. Pasar 0.5 mL del tubo No. 1 al tubo No. 2 y mezclar.
6. Continuar esta operacin hasta el tubo No. 4.
7. Depositar 0.05 mL de cada una de las diluciones sobre
anillos diferentes de la placa de reaccin. Extienda sobre
el total de la superficie de cada crculo donde se
colocaron las diluciones.
8. Aadir una gota de la suspensin del antgeno
previamente resuspendido, exactamente sobre cada una
de las gotas de las diluciones anteriores utilizando el
frasco gotero al cual se le ha insertado la aguja No. 18
sin bisel.
9. Agite por 8 minutos a 100 rpm en un rotador mecnico.
10. Transcurrido este tiempo retire la tarjeta del rotador y
agtela breve y suavemente.
11. Leer el resultado macroscpicamente.
RESULTADOS CUANTITATIVOS
La ltima dilucin que contenga agregados macroscpicos
indica el ttulo de la muestra.
Ejemplo:
Tubo No. Dilucin del suero Resultado
1 1:2 Positivo
2 1:4 Positivo
3 1:8 Positivo
4 1:16 Negativo
El ttulo del suero problema ser: 1:8.
LIMITACIONES
El diagnstico de la sfilis no debe ser hecho basado en un
resultado positivo nico de una prueba no treponmica, sin
el soporte de una historia positiva o evidencia clnica. Las
muestras de suero que son reactivas en pruebas cualitativas
deben ser cuantificadas para establecer un tratamiento en
el cual los cambios de ttulo puedan ser determinados como
un indicador de la respuesta al mismo.
Las muestras de plasma no deben ser utilizadas para
pruebas cuantitativas. Las muestras que son no-reactivas
pero dudosas, se deben de repetir y cuantificar ya que se
pueden detectar reacciones poco frecuentes de prozona.
CARACTERSTICAS DE FUNCIONAMIENTO
Se obtuvieron 625 muestras de laboratorios pblicos de salud
y fueron sujetos a comparacin entre la prueba de RPR Sfilis
y Tarjetas de Prueba Macro-Vue TMRPR (BBL Division of
Becton Dickinson and Company) con los siguientes
resultados:
RPR Sfilis Macro-VueTM
No-reactivo 431 433
Reactivo 194 192
Hubo una concordancia de 431 de los sueros no reactivos y
de 194 de los sueros reactivos. Esto representa un 99.4%
de concordancia.
Veinticinco (25) de los sueros reactivos probados por ambos
procedimientos fueron seleccionados al azar y comparados
en un procedimiento semi-cuantitativo descrito anteriormente.
Los ttulos se extendieron de 1:4 a 1:512. Hubo concor-
dancia en la dilucin final en 22 casos. Los otros 3 resultados
fueron como se mencionan a continuacin:
 RPR Sfilis Macro-VueTM Rev. 11/07/02
A. 1:4 1:8 IN-118
B. 1:128 1:64
C. 1:32 1:16 Fabricado en Mxico por:
Laboratorios Licon S.A.
Viveros del Roco No. 33
Esto representa una concordancia dentro de una dilucin en
Col. Viveros de la Loma
todos los casos.
C.P. 54080 Tlalnepantla, Edo. de Mxico
Tel.: (55) 5362-0299
BIBLIOGRAFA Fax: (55) 5362-1792
1. MANUAL OF TESTS FOR SYPHILIS, 1990, APHA
publication.
2. Larsen, SA, Pettit DE, Perryman MW, Hambie EA,
Mullally R, Whittington W. EDTA-treated plasma in the
rapid plasma reagin card test and the toluidine red
unheated serum test for serodiagnosis of syphilis. J Clin
Microbiol 1983; 17:341-345.
3. Walker, An. N: Brit. Jr. Ve. Dis., 47:259-262, August 1971.
4. Garner, M.F. & Backhouse , J.L.: Med. Jr. Australia, 1:737-
739, April 1973.
5. Kaufman, R.E.: Weiss, S, Moore, J.D.; Falcone, V. And
Weisner, P.J.: Brit. Jr. Ven. Dis., 50:350-353, 1974.