claros y sin color. Descartar si se ve turbio si contiene partculas.

. El reactivo de trabajo es estable por 4 semanas de 275 a 281 K (2 a 8C) o 5 das a temperatura ambiente 288 a 298 K (15 - 25C). Proteger de la luz directa. El reactivo de trabajo deber desecharse si la absorbancia inicial, leda contra agua a 340 nm es menor de 1.000. Materiales requeridos pero no incluidos Espectrofotmetro capaz de realizar lecturas de absorbancia a 340 nm con 1 cm de paso luz. Bao de temperatura constante a 310 K (37C) o portacubeta de temperatura controlada. Pipetas serolgicas automticas Tubo de ensaye Cronmetro Recoleccin y Almacenamiento de la muestra El suero no hemolizado es la muestra de eleccin. Siempre que sea posible, las muestras deben ser separadas y analizadas el mismo da que se recolectan. Se deben evitar los anticoagulantes que contienen amonio o sales de flor. La urea en el suero es estable por 24 horas a temperatura ambiente 288 a 298 K (15 - 25C), varios das si se refrigera de 275 a 281 K (2 a 8 C) y por lo menos de 2 a 3 meses cuando se congelan a 253 K (-20C). Niveles de bilirrubina por arriba de 40 mg/dL, hemoglobina por arriba de 200 mg/dL y niveles de triglicridos por arriba de 2000 mg/dL no muestran interferencia con esta prueba4. Sustancias Interferentes. Adems de la hemlisis, el flor a concentraciones elevadas y el amonio pueden causar interferencias.3 Procedimiento Manual. 1. Prepare el reactivo de trabajo de BUN de acuerdo al instructivo. 2. Calibre a cero el espectrofotmetro a 340 nm con agua destilada. 3. Por cada Muestra y Control, agregar 1.0 mL. de reactivo de trabajo a la cubeta o tubo de prueba y llevar a 310K (37C) por 3 minutos. 4. Adicionar 10 L (0.010mL) de suero a cada tubo respectivamente y agitar levemente. 5. Leer y anotar la absorbancia (A1) exactamente despus de 30 segundos. 6. Exactamente a los 60 seg despus de leer (A1), lea y registre la absorbancia (A2). 7. Calcule el cambio de absorbancia por minuto (A) mediante la resta de (A1-A2). 8. Procese las muestras de pacientes y controles siguiendo los pasos del 4 al 7. NOTA: Si la cubeta no est a temperatura controlada, incube las muestras 310 K (37C) entre lectura y lectura. Los volmenes se pueden duplicar, si el instrumento requiere un volumen mayor de 1 mL. Control de Calidad. Los sueros control Normal Ser-T- Fy I y Suero Control anormal, Ser- T- Fy II son recomendados en cada ensayo. Otros controles comerciales disponibles con valores de BUN probados por este mtodo tambin pueden ser utilizados. La concentracin de BUN determinada en estos materiales y por este mtodo, deber caer dentro de los rangos establecidos para los controles. Dos niveles de controles deben ser analizados en cada ensayo. Calibracin. Requiere calibracin. Se debe seguir la gua del fabricante del instrumento para calibrar el analizador. Resultados. Los valores se derivan de la comparacin del cambio de absorbancia (A) de la muestra (u) con la del estndar (s).
BUN suero (mg/dL) = Au As x 30

dilucin de 2. Los valores de BUN en pacientes neonatos no han sido establecidos

con este procedimiento.

Valores Esperados2. Rango normal: BUN 8 -23 mg/dL UREA 17-49 mg/dL UREA (mg/dL) = BUN (mg/dL) x 2.14 UREA (mmol/L) = UREA (mg/dL) x 0.167
El rango deber servir solamente como gua. Se recomienda que cada laboratorio establezca su propio rango de valores normales ya que existen diferencias entre instrumentos, laboratorio y poblacin local.

Stanbio UREA (BUN) Liqui-UV

Para la determinacin cuantitativa cintica de Urea (Nitrgeno de Urea (BUN) en suero.
Principio y Resumen. La urea es el principal producto de desecho del catabolismo de protenas. Es sintetizada en el hgado a partir del amonio, el cual es producido como resultado de la desaminacin de aminocidos. Normalmente, el nitrgeno de urea en la sangre comprende slo el 45% del nitrgeno no protico. La importancia de la determinacin del Nitrgeno de urea es su valor como buen indicador del funcionamiento heptico y renal. La disminucin de los niveles de Nitrgeno de urea (BUN) se ha visto en la nefritis, destruccin heptica aguda, amiloidosis y embarazo1. Valores elevados de BUN se han visto en casos de nefritis aguda y crnica, obstruccin urinaria e intestinal, uremia, envenenamiento por metales, neumona, enfermedad de Addison, peritonitis, shock en ciruga y fallas cardiacas. El procedimiento Bun de Stanbio es una modificacin del mtodo descrito por Sampson1. La urea se convierte catalticamente a carbonato de amonio por accin de la ureasa. La velocidad de reaccin depende de la concentracin de deshidrogenasa glutmica. La velocidad de reaccin de esta segunda reaccin es dependiente de la primera y puede medirse por la velocidad de conversin de NADH a NAD por el cambio de absorbancia a 340 nm.
Urea + H20 2-Oxoglutarato + NH4+ + NADH

Caractersticas4. Las siguientes caractersticas de funcionamiento fueron llevadas a cabo utilizando un Epos 5060. Comparacin. Un grupo de 68 muestras dentro de un rango de BUN de 11 - 97 mg/dL, fue realizado por el mtodo de BUN descrito y por otro similar comercialmente disponible. Con la comparacin de resultados se obtuvo un coeficiente de correlacin de 0.999 y con una ecuacin de regresin de y= 1.012x - 0.47. (La comparacin de estudios se llev a cabo de acuerdo a la gua tentativa NCCLS EP9-T). Precisin. La precisin intraensayo fue realizada mediante 20 ensayos con tres diferentes niveles de sueros controles comerciales. Los valores de precisin total se obtuvieron por el ensayo de 3 controles comerciales por cinco das consecutivos.
INTER-ENSAYO Media BUN (mg/dL) Desviacin Std. (mg/dL) C.V. (%) Suero 1 22 0.6 2.6 Suero 2 45 0.8 1.8 Suero 3 54 0.6 1.2

PRECISION TOTAL Media BUN (mg/dL) Desviacin Std. (mg d/L) C.V. (%) Suero 1 15 0.4 3.0 Suero 2 46 0.6 1.2 Suero 3 70 0.7 1.0

Ureasa

2NH4+ + 2HO3L-glutamato + NAD+ + H2O

GLDH

Se llevaron a cabo estudios de precisin de acuerdo con la gua tentativa de la NCCLS, EP5-T. Linearidad. Es lineal de 2-140 mg/dL4. De acuerdo a la gua NCCLS EP6-P. Sensibilidad. En base a la resolucin del instrumento de A=0.001, ste mtodo muestra una sensibilidad de 2.0 mg/dL. Los valores por debajo de 2.0 mg/dL deben reportarse como < 2.0 mg/dL.
Referencias. 1. Sampson, E.J., Baird, M.A., Burtis, C.A., et. al.: A coupled-enzyme equilibrium method for measuring urea in serum: Optimization and evaluation of de AACC Study Group on urea candidate reference method. Clin. Chem., 26, 816-826, 1980. 2. Henry, R.J., Clinical Chemistry Principles and Techniques, 2nd, Edition, Harper and Row, Hagerstown, NY, (1974), p. 511. 3. Tietz, N.W., Textbook of Clinical Chemistry, W.B. Saunders Company, Philadelphia, PA, (1986), p. 1270-1271. 4. Stanbio Laboratory Data. Fabricado en EUA por: Stanbio Laboratory. 1261 North Main Street Boerne TX, 78006 Distribuido en Mxico por: Laboratorios Licon, S.A. Viveros del Roco No. 33 Col. Viveros de la Loma Tlalnepantla, Edo. de Mx. C.P. 54080 Tel.: 5-362-02-99 Fax: 5-362-17-92 Rev. 24/12/02 IN-352

Reactivos. -Regulador de UREA (BUN) (R1) Composicin: Tris, pH 7.8 120 mmol/L 2-Oxoglutarato 7.0 mmol/L ADP (Sal monosdica 0.6 mmol/L Tris Buffer, pH 7.5 80 mmol/L. Ureasa 60000 U/L GLDH (Levadura de pan) 10000 U/L -Enzima UREA (BUN) (R2) Composicin: NADH (sal disdica) 0.25 mmol/L. -Estndar de UREA (64.2 mg/dL) - BUN (30 mg/dL) Solucin acuosa de urea con trazas de estabilizador. Es estndar esta referido contra material NIST. Presentaciones Disponibles: Equipo para 100 - 200 pruebas. Precauciones: Para uso diagnstico In-Vitro. Tome las precauciones normales para el manejo de reactivos de laboratorio. Los reactivos contienen azida de sodio que puede ser txico si se ingiere. Se ha reportado que la azida de sodio puede reaccionar con plomo y cobre de tuberas, pudiendo formar azidas metlicas explosivas. Consulte su hoja de seguridad para ms informacin. Preparacin del reactivo El Buffer y los reactivos enzimticos lquidos esta listos para su uso. Prepare el reactivo de trabajo en un proporcin de 5 partes de Buffer (R1) y 1 parte de enzima (R2), (por ejemplo 25 mL de Buffer y 5 mL de enzima). Antes de utilizarse mantener el reactivo de trabajo a temperatura ambiente 288298 K (15-25C) por lo menos 30 minutos. Estabilidad y almacenamiento del reactivo: Los reactivos son estables hasta su fecha de caducidad marcada en la etiqueta cuando se almacena de 275 a 281 K (2 a 8 C) y protegidos de la luz. Los reactivos deben verse

Donde Au y As son los cambios de absorbancias (decrementos) de la muestra y del estndar, respectivamente y 30 es la concentracin del estndar (mg/dL).
Ejemplo: u = 0.045, As = 0.090

BUN suero (mg/dL) = 0.045 x 30 = 15 0.090

Limitaciones. Si el valor de BUN excede 140 mg/dL, la muestra debe diluirse al doble (1+1), con solucin salina, repetir el ensayo y multiplicar los resultados por el factor de