DETERMINACIN DE BILIRRUBINA EN SUERO

1. INTRODUCCIN

La bilirrubina es un producto derivado del metabolismo de la hemoglobina en el Sistema Retculo Endotelial. Los
hemates al degradarse liberan la hemoglobina que es metabolizada a dos molculas el grupo hemo y el grupo globina,
el grupo hemo se transforma en biliverdina y esta en bilirrubina a la cual se le llama no conjugada o indirecta. Al
pasar por el hgado esta bilirrubina se conjuga con cido glucurnido transformndose en bilirrubina conjugada o
directa.

El hgado segrega esta bilirrubina directa a travs de las vas biliares hacia el intestino, al metabolizarse por la flora
intestinal se convierte en urobilinas que dan el color marrn a las heces. Parte de estas urobilinas se reabsorben y
pueden aparecer en la orina en forma de urobilingeno.

Cuando se eleva la bilirrubina, la piel y los tejidos toman un color amarillo que se llama ictericia. Segn cual sea el
origen de la bilirrubina elevada podemos saber si es un problema de hgado (elevacin de la bilirrubina no
conjugada) o de las vas biliares (elevacin de la bilirrubina conjugada).

Cuando se realiza un anlisis de rutina se mide la bilirrubina total (directa ms indirecta), el 70 al 85 % corresponde
a la bilirrubina no conjugada o indirecta.

El Sistema Retculo Endotelial esta formado por la unin de macrfagos (este termino lo asigno Aschoff
en el ao 1924 a un conjunto de clulas formado por monocitos , histocitos, fibroblastos, clulas
endoteliales y reticulares) , mviles y tisulares fijos.

Sntesis de Bilirrubina Directa: en el hgado

+ cido Glucurnico

Bilirrubina Directa o
Conjugada

Vescula Biliar

Bilirrubina Indirecta o no
Conjugada (unida a la
albmina) Bilis

Heces Estercobilingeno

Intervencin de bacterias
saprofticas

Orina
(urobilina)

Urobilingeno

Sntesis de Bilirrubina Indirecta: en la sangre

Fe 2+
Grupo Hemo

Hb Anillos pirrlicos Biliverdina Bilirrubina Indirecta

Globina
 2. OBJETIVO

Determinar los valores de bilirrubina directa, total e indirecta en suero sanguneo. Diferenciar los tipos de bilirrubina
segn su solubilidad y mediante la reaccin de diazotacin.

3. FUNDAMENTO DEL MTODO

La determinacin de bilirrubina en suero se realiza mediante un mtodo no enzimtico.

Reaccin de Diazotacin: reaccin qumica que usa al xido nitroso (N2O) para formar un complejo de color.

Bilirrubina Total + Acelerador + Diazoreactivo Azobilirrubina

(en suero) (Benzoato de cafena) (Cromgeno rosado a = 555nm)

Bilirrubina Directa + Acelerador + Diazoreactivo Azobilirrubina

(en suero) (Benzoato de cafena) (Cromgeno rosado a = 555nm)

Diazoreactivo = NaNO2 (nitrato de sodio) + cido Sulfanlico

Bilirrubina Indirecta = Bilirrubina Total Bilirrubina Directa

4. PROCEDIMIENTO

Tubo Blanco Tubo Problema

Bilirrubina Total 1,5 mL 1,5 mL
Bilirrubina Directa --- 50 L
Muestra 100 L 100 L

Mezclar e incubar a 37 C por 5. Leer a 555 nm. Repetir el procedimiento para Bilirrubina Total y Directa.

5. CLCULOS

F.C = [Standard] /ABS STANDARD

F.C = 17,85 mg/dL

[B. Total] = F.C x ABS M.P

[B. Total] = 0.071

[B. Directa] = F.C x ABS M.P

[B. Directa] = 0.535

6. IMPORTANCIA CLNICA

Los niveles aumentados de bilirrubina indirecta pueden indicar:

- Anemia hemoltica
- Eritroblastosis fetal
- Ictericia fisiolgica del recin nacido
- Problemas en las transfusiones de sangre
- Otras anemias

Los niveles aumentados de bilirrubina total pueden indicar:

- Cirrosis
- Hepatitis
- Obstruccin de va biliar (colangitis, colelitiasis)
- Tumores de vas biliares
- Deficiencia enzimtica
- Ictericia