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Stevia rebaudiana
Lirged Delgado*, Mara Anglica Torres**, Carlos Andrs Prez G.***, lvaro
Calero****
RESUMEN
Director Centro de Investigaciones en Ciencias Bsicas, Ambientales y Desarrollo Tecnolgico (CICBA) y del
***
Grupo de Investigacin en Biotecnologa y Medio Ambiente (GIBMA), es Bilogo con nfasis en Gentica, especialista
en Simulacin Molecular, maestra en Bioinformtica, estudios avanzados y doctorales en Biotecnologa. Profesor de
dedicacin exclusiva de la Universidad Santiago de Cali. caperez@usc.edu.co
Profesor programa de Qumica, Codirector del Grupo de Investigacin en Biotecnologa y Medio Ambiente
****
(GIBMA), Es Qumico, maestra en Biotecnologa, exdirector de Investigaciones de la USC, coordinador del rea de
bio-remediacin, acalero@usc.edu.co
Bilogo Universidad del Valle (1998), Mejor trabajo de investigacin en biologa molecular para estudiante de
*****
ABSTRACT
This research was performed to realize a new extraction methodology for the Stevia
Rebaudiana, and characterize its glucosides. Several methods were researched: solvent
based, ion exchange, absorption chromatography, and pressurized fluids; analyzing
each procedure, adjusting it to a new extraction method and with reagents of easy
acquisition, basing it on the researched glucoside extractions. After performing several
extraction trials (Soxhlet, Reflux), with solvents at different concentrations, temperature
and pressure variations, the conditions yielding the best mixture purity were chosen. The
process steps are: Drying, extraction, precipitation, clarification, and purification. The
Soxhlet extraction allowed for a good deal of the sweetening power to remain intact
during the purification step, as opposed to the reflux extraction. The process was
controlled using thin plate chromatography and IR. To identify the glucosides present in
the Stevia sample, their infrared standards were looked up. In this case the stevioside
and rebaudioside A infrared standards were found, which can be compared with the
produced extract's spectrum.
INTRODUCCIN
Sus hojas tienen un intenso sabor dulce, propiedad que se debe al contenido de
glicsidos, de los cuales el estevisido es el que se halla en mayor proporcin, seguido
del rebaudisido A, B, C, D, E, dulcsido A y B, esteviol 2. Presentan caractersticas de
estabilidad al calor (198-200C), al pH en un rango de tres a nueve, no se fermentan, y
son de 200 a 300 veces ms dulce que la sacarosa.3
Adems, desde hace tiempo se sabe que el rebaudisido A es el que tiene mejor
propiedades sensoriales (es ms dulce y menos amargo) de los cuatro4.
1
Alicia Ester Soto1 y Susana Del Val2. Extraccin de los principios edulcorantes de la stevia rebaudiana.
URL: http://www2.uca.edu.ar/esp/sec-fagrarias/esp/docs-revista/volumenes/pdf/vol20_1.pdf
2
LAURA DAYANA LPEZ TORRES y LUIS GUILLERMO PEA GUEVARA. Plan Estratgico Para La Creacin De
Una Empresa, Dedicada A La Produccin Y Comercializacin De Edulcorante A Base De stevia. Tesis De Grado.
Biocomercio sostenible. Stevia Rebaudiana Bertoni Instituto de Investigacin de Recursos Biolgicos Alexander von
Humboldt. 2002. URL: http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ingenieria/tesis17.pdf
3
David I. Habeych; Catalina Giraldo1; Luz D. Marn. Universidad EAFIT. Departamento de Ingeniera de Procesos.
Desarrollo de un proceso de extraccin y purificacin de glicsidos de Stevia rebaudiana. En: XXIII Congreso
Colombiano de Ingeniera. Qumica. ...
URL: http://www.eafit.edu.co/NR/rdonlyres/16CF7453-10B0-468D-801AD E561FF5A1F 5/0/Cuaderno41.pdf
4
Eustas, European stevia association: componente botanic de stevia.
URL: http://www.eustas.org/esp/botanic_esp.htm
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El consumo de Stevia es cada vez mayor, por lo cual se debe investigar y desarrollar
una alternativa de extraccin econmica y socialmente viable, favoreciendo as su
consumo regional y nacional. Adems, existen motivos para a nivel de la salud para su
consumo, por ejemplo: puede ser consumida por personas con diabetes, obesidad,
ayuda a la prevencin de caries, etc. La planta ha llamado la atencin en un momento
de incremento en la demanda de los alimentos alternativos bajos en caloras y se ha
demostrado resultados prometedores en investigaciones mdicas en el tratamiento de la
obesidad y presin arterial. La Stevia no tiene ningn efecto en el azcar en sangre, y es
por esta razn, que resulta un edulcorante natural atractivo para el uso de pacientes
diabticos y los que se encuentran bajo dietas con control de hidratos de carbono5.
Por tanto, es necesario buscar un endulzante como la Stevia, que cumpla con las
necesidades actuales de las personas, y que ante todo no tiene efectos txicos. En
Argentina y en Colombia su uso esta avalado tanto por la Liga Argentina de Proteccin
al Diabtico como por la Federacin Diabetolgica Colombiana respectivamente6.
1. MATERIALES Y METODOS
5
Todo sobre stevia. Instituto de Estudios Salud Natural de Chile. IESN-Chile. Informe del IESN - Noviembre 2001.
URL: http://www.geocities.com/iesnchile/todostevia.html
6
LAURA DAYANA LPEZ TORRES y LUIS GUILLERMO PEA GUEVARA. Plan Estratgico Para La Creacin De
Una Empresa, Dedicada A La Produccin Y Comercializacin De Edulcorante A Base De stevia. Tesis De Grado.
Biocomercio sostenible. Stevia Rebaudiana Bertoni Instituto de Investigacin de Recursos Biolgicos Alexander von
Humboldt. 2002. 18. URL: http://www.javeriana.edu.co/biblos/tesis/ingenieria/tesis17.pdf
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Posteriormente se pasa a triturar a un molino de cuchillas tipo Willey Mill con el objetivo
que durante la extraccin se obtenga la mayor parte de los glicsidos responsable del
sabor dulce.
El extracto obtenido, pasa por rotoevaporacin recuperando parte del etanol utilizado,
luego le sigue un proceso de purificacin con sal de calcio que se utiliza para precipitar
las impurezas que dan el sabor amargo y se filtran al vaco.
El producto de la filtracin pasa aun reflujo por unos 15 minutos con carbn activado que
ayudara a remover algunos pigmentos y sustancias de alto peso molecular, aclarando el
extracto; seguido de una filtracin.
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Reflujo. Al baln del equipo a reflujo, se le agrega 40g de hojas molidas secas, con
798mL de alcohol, y se deja cinco horas trabajando.
El extracto obtenido, pasan por un proceso de filtracin al vaci para remover partculas
en suspensin y posteriormente se pasan a rotoevaporar cuyo objetivo, es el de
recuperar el etanol utilizado y dejar la muestra libre de este solvente.
Luego el extracto, es tratado con una sal de calcio, y se pasa a filtrar al vaci. El
producto del proceso descrito anteriormente, se mezcla con carbn activado; para mejor
remocin de sustancias no deseadas, se coloca a reflujo la muestra, por unos 15
minutos, seguido de una filtracin. Despus la muestra es sometida de nuevo a
procesos de purificacin y una segunda rotoevaporacin, que eliminara ahora el exceso
de agua en el extracto.
Para aclarar aun ms las muestras, se somete a un proceso fotocatalitico en muy poca
cantidad. El contiguo es realizar los anlisis de caracterizacin (espectroscopia de
infrarrojo), que servirn para la identificacin de grupos funcionales y el tipo de glicsido
presente.
2. RESULTADOS
2. Rotaevaporacin soxhlet
Condicin de rotoevaporacin: temperatura de 50C el bao de mara y a una
presin de 131mmHg
Cantidad de alcohol recuperado: 33.5mL
Cantidad de extracto obtenido: 23Ml
3. Rotaevaporacin reflujo
Condicin de rotoevaporacin: temperatura de 60C el bao de mara y a una
presin de 190mmHg
Cantidad de alcohol recuperado: 538mL
Cantidad de extracto obtenido: 50mL
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6. Purificacin
La utilizacin de carbn activado, logro precipitar aun ms impurezas y aclarar aun mas
el extracto, pero igual que el procedimiento anterior pierde algo de dulzor el producto.
Hay que tener en cuenta, que una cantidad mayor a 2g de carbn activado, logra aclarar
completamente el extracto, pero a la vez hace perder todo su dulzor. Por ello se
necesita utilizar poca cantidad de este reactivo.
7. Segunda rotoevaporacin
Rotaevaporacin soxhlet
Cantidad rotoevaporada: 100mL de extracto
Condicin de rotoevaporacin: temperatura de 45C el bao de maria y a una
presin de 250mmHg.
Cantidad de H2O recuperada: 37mL ~ 37%
Cantidad de extracto total obtenido: 40mL
Rotaevaporacin reflujo
Cantidad rotoevaporada: 100mL
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8. Proceso fotocataltico
Este procedimiento a base de TiO2 se utilizo para aclarar el extracto, y dio un muy buen
resultado, el color paso a ser de un amarillo mucho mas claro del que se haba obtenido.
Se debe tener cuidado al utilizar el reactivo ya que el exceso de este, en la muestra
produce la desaparicin completa del sabor dulce.
Vale la pena sealar, que se utiliz otro mtodo para eliminar lo que todava exista
de agua en el extracto; con un desecador al vacio con sulfato de magnesio (MgSO 4)
y otra prueba con sulfato de sodio (NaSO4); pero estos procedimientos, modificaron
el sabor dulce del extracto dando un sabor desagradable.
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De acuerdo a los resultados del anlisis, se plantea por similitud de los espectros de
la figura 3 y el estndar de rebaudisido A, la presencia del rebaudisido A en la
muestra obtenida. La similitud de la figura 2 con la figura 3, permite plantear la
presencia de componentes dulces en la planta.
Rendimiento de la reaccin
% de rendimiento x 100
rendimiento terico
3. CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Alicia Ester Soto1 y Susana Del Val2. Extraccin de los principios edulcorantes de la
Stevia rebaudiana.
URL:http://www2.uca.edu.ar/esp/secfagrarias/esp/docsrevista/volumenes/pdf/vol20_1
.pdf
67
PAYZANT John Donald et al. Method of extracting selected sweet glycosides from
the Stevia rebaudiana plant.Canadian Intellectual Property Office. 1999.
URL: http://www.freepatentsonline.com/5962678.html
Todo sobre Stevia. Instituto de Estudios Salud Natural de Chile. IESN-Chile. Informe
del IESN - Noviembre 2001.
URL: http://www.geocities.com/iesnchile/todostevia.html