Recuento De Coliformes En Alimentos.

Count Of Coliform In Food.

Angarita Bautista Leidy Yudith Cdigo: 02171043, Eulegelo Osorio Yulie

Astrith
Cdigo: 03172027, Parada Cardenas Geisel Yelene Cdigo: 04172026,
Porras Manrique ana patricia Cdigo: 03172011
RESUMEN
Los jugos de frutas que se venden en las calles, poseen fuerte potencialidad para la
transmisin de enfermedades gastrointestinales debido a que son alimentos
extensamente manipulados. Los coliformes son microorganismos que se utilizan como
ndice de contaminacin fecal al encontrarse principalmente en el intestino del hombre
y animales de sangre caliente. En algunos alimentos se requiere la investigacin de la
presencia o ausencia de estos microorganismos, por exigencias de disposiciones
legislativas porque en dichos productos la presencia es indicadora de mala calidad
microbiolgica. La metodologa es basada en sembrar en el Agar Chromocult y caldo
Lauryl Sulfato de la cantidad de muestra en la que se quiera conocer la presencia o
ausencia de coliformes totales y fecales, y posterior incubacin a 37 C durante 48
horas. Las colonias sospechosas se confirman con las pruebas IMVIC y emisin de
fluorescencia.
Palabras Claves: Coliformes, NMP (numero ms probable), Recuento, Vertido en
placa, E. coli.
ABSTRACT
The fruit juices sold on the streets are good vehicle to transmit gastrointestind diseases
to consumers because they are highly manipulated. The coliform organisms that are
used as an indicator of fecal contamination to be found primarily in the intestines of
humans and warm-blooded animals. In some foods is required investigating the
presence or absence of these microorganisms, either because of legislative
requirements well in those products that the
presence is indicative of poor
microbiological quality. The methodology is based in sow in the Chromocult Agar and
Lauryl Sulfate Broth of the amount of shows in which they want to know the presence
or absence of fecal and total coliform, and after incubation at 37 C for 48 hours. The
suspect colonies are confirmed with evidence IMVIC and issuance of fluorescence.
Key Word: Coliform, MPN (most probable number), Count, Landfill plate, E. coli.

INTRODUCCION
La venta de alimentos en la calle
constituye un factor positivo por su
posibilidad de generar empleos,
movilizar gran cantidad de recursos y
satisfacer la obtencin de obtener
comidas
rapidas,
entre
otras
ventajas;
pero
la
frecuente
presentacin de malas condiciones
higienicas en el procesamiento y
oferta sealan la importancia de
mantener el control sanitario a esta
actividad.
Los microorganismos patgenos que
se han detectado en alimentos
vendidos en la calle no difieren de
los encontrados en las comidas
preparadas
y
servidas
en
establecimientos cerrados, aunque
los
problemas
potenciales
son
mayores y ms frecuentes. En este
sentido se reconoce la necesidad de
mejorar los programas de proteccin
de los consumidores de alimentos
que se venden en las calles.
MATERIALES
* 4 cajas de petri estriles
* 9 tubos estries con campana de
durman y caldo Lauryl Sulfato.
* 2 pipetas estriles de 10ml
* 2 pipetas estriles de 1ml
* 1 pipeteador
* 1 gradilla
* 2 fiolas con caldo peptona estriles
METODO
* Tipo de muestra: Jugo pasteurizado
Fecha vencimiento: 18/03/09
Lote: 31701
Sabor: Fresa
Marca: Alpina

* Tipo de muestras: Jugo casero

Fecha de preparacin: 19/08/08
Hora: 4:00 p. m.
Sabor: Guayaba en agua.
Procedimiento Salmonella spp.
1. Fase PRE- enriquecimiento en
lquido no selectivo
Pesar 25 gr. De la carne
aspticamente
Adicionar y Homogenizar

cruda

25 gr. de carne cruda

255 ml Agua peptona
Dilucin 10-1
Incubar a 37C por 18-24 horas
2. Fase Enriquecimiento no selectivo
Adicionar
1ml
Dilucin 10-1
Selenito

caldo
Cistena
Dilucin

10-2
Incubar a 42C en Bao Mara, por 18
horas
3. Fase Aislamiento diferencial en
selectivos

Sembrar por
Aislamiento
Dilucin 10-2
Caldo Selenito Cistena
salmonella-shigella

Agar S-S

Incubar a 37C, por 24 horas a 48 horas

Oxidasa a las colonias tpicas

Observar la presencia de colonias
negras con un alo rosado, realizar
Gram a las colonias tpicas, Si hay
bacilos Gram Negativos realizar
bioqumica

Catalasa a las colonias tpicas

A partir de las colonias del Gram. Que

sean bacilos cortos gram positivos,
catalasa positiva oxidasa negativa

Procedimiento Listeria
monocytogenes:
1. Fase PRE- enriquecimiento en
lquido no selectivo

Se les realiza identificacin:

Tomar 25 ml. De la avena en leche

casera, Adicionar agua peptona y
Homogenizar

Agar Sangre

25 ml. de avena en
leche casera
255 ml Agua peptona
Dilucin 10-1
Incubar a 37C por 18-24 horas en la
incubadora
2 Fase siembra en medios
diferenciales:

Dilucin 10-1 Sembrar por

Sangre
Aislamiento

Glucosa sacarosa VP-RM

movilidad

TSI

Agar

Incubar a 37C, por 24 horas

3. Fase Identificacin
Realizar coloracin de Gram. a las
colonias tpicas

RESUMEN
Todos los coliformes son lactosa
positiva, pero se diferencian en el agar
chromocult por reacciones bioqumicas.
Los colifomes totales tienen la Bgalactosidasa, este complejo activa el
compuesto cromgeno alfa GAL que
produce un color azul violeta.
Los coliformes son habitantes de tracto
gastrointestinal tanto del hombre como
de los animales. El mas representativo

del grupo es la E. coli, La presencia

de coliformes en cualquier alimento
nos indica una mala calidad higinica
de los manipuladores. Estos son uno
de
los
grupos
indicadores
determinados en la industria de
alimentos para el control de calidad,
mas que todo la importancia radica
en la presencia de coliformes fecales
que es indeseable por que no dice la
mala manipulacin e higiene de
quien procesa el alimento y tambin
indicndonos
contaminaciones
cruzadas
El alimento analizado en esta
prctica fue el jugo casero y el
pasteurizado, Resultando el jugo
casero con un recuento en la siembra
NMP de 330 con 240 bac/100ml
indicando la presencia de coliformes
totales, se realizo la prueba de
fluorescencia a cada tubo dando
negativa.
En
la
siembra
en
placa
se
encontraron 27 colonias de color rojo
en la dilucin 10-3 y 7 colonias en la
dilucin 10-4,
El en la siembra en placa del jugo
pasteurizado,
no
hubo
ningn
crecimiento demostrando que en el
procedimiento se cumpli con las
normas exigidas para el anlisis y
que cumple con los parmetros
admisibles para el consumo humano.
BIBLIOGRAFA
http://www.javeriana.edu.co/biblos/te
sis/ciencias/tesis105.
http://www.uprm.edu/biology/profs/m
assol/manual/p4nmpenumeracion.pdf
http://usuarios.lycos.es/zandoli/web3/
Tabla%20NMP.htm

http://www.ainia.es/pdf/laboratorios/fich
as/ColiformesTotalesFecalesyE_coli(Inv)(
110086).pdf