Factores Que Influyen en La Producción de Proteínas Unicelulares Por Fermentación Sumergida - Una Revisión - ScienceDirect

15/11/2019 Factores que influyen en la producción de proteínas unicelulares por fermentación sumergida: una revisión - ScienceDirect
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Revista Electrónica de Biotecnología

Volumen 37 , enero de 2019 , páginas 34-40
revisión
Factores que influyen en la producción de proteínas unicelulares

por fermentación sumergida: una revisión
S. Fatemeh S. Reihani , Kianoush Khosravi-Darani
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https://doi.org/10.1016/j.ejbt.2018.11.005 Obtenga derechos y contenido

De una licencia de licencia acceso abierto
Resumen
Desde hace más de veinte años, algunas especies de bacterias y hongos se han utilizado para producir
biomasa de proteínas o proteínas unicelulares (SCP), con materias primas y desechos de bajo costo
que se utilizan como fuentes de carbono y energía. El papel de SCP como alimento y alimento inocuo
se destaca más debido a la escasez mundial de proteínas. A pesar de que SCP se ha comercializado
con éxito en el Reino Unido durante décadas, muchos investigadores siguen investigando las
condiciones óptimas de fermentación , varios sustratos potenciales y una amplia gama de
microorganismos . En este artículo, se revisan brevemente los métodos utilizados comúnmente para
la producción de SCP y diferentes sistemas de fermentación, con fermentación sumergidasiendo
resaltado como un método más comúnmente usado. Se hace hincapié en el efecto de los factores que
influyen en el rendimiento y la productividad de la biomasa en un esfuerzo por proporcionar una
revisión exhaustiva para los investigadores en los campos de interés relacionados.
Cómo citar: Reihani SFS, Khosravi-Darani K. Factores que influyen en la producción de proteínas
unicelulares por fermentación sumergida: una revisión. Electron J Biotechnol 2019; 37.
https://doi.org/10.1016/j.ejbt.2018.11.005 .
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https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0717345818300484#s0015 1/23
Palabras clave
Aireación; Residuos agrícolas; Algas; Las bacterias; Biomasa; Condición de fermentación;
Hongos; Crecimiento de la población; Pobreza; Demanda de proteínas; Proteína unicelular;
Fermentación sumergida
1 . Introducción
El crecimiento demográfico extremo conduce a una menor calidad de vida, pobreza e inanición . Por
lo tanto, la humanidad ha estado tratando de superar las crisis a través de avances tecnológicos que
pueden ayudar a un mayor acceso a los alimentos. En esta era de una sociedad globalizada, se
podrían hacer estimaciones confiables de los recursos disponibles para la subsistencia humana
eventualmente a través de la revolución tecnológica. De hecho, dos mecanismos principales resultan
en un aumento importante en la demanda futura de alimentos y agua: Primero, el crecimiento de la
población con un factor de 1.4, lo que significa que para 2050, la población aumentará a
aproximadamente 9.3 mil millones de personas [1]; segundo, el hecho de que el nivel de vida
aumentará y aproximadamente 3 mil millones de personas pertenecerán a esta clase media en
expansión para 2050, principalmente debido al crecimiento económico en los países en desarrollo, lo
que puede conducir a un cambio en el estilo de vida y la dieta. Un aumento del 50% en la demanda
de proteínas [2] y del 102% en la demanda de productos cárnicos será la consecuencia de estos
cambios [3] . Por lo tanto, frente a estos problemas mundiales, la producción de proteínas ha sido
objeto de varias investigaciones de investigación. Uno de los enfoques más ventajosos entre estos
estudios de investigación es el acceso a proteínas unicelulares (SCP) producidas a partir de una
fuente de residuos agrícolas por fermentación [4] , [5]. Como se define en la literatura, los SCP son las
células secas de microorganismos como hongos, algas y bacterias que se usan como suplemento
proteico en alimentos humanos o alimentos para animales. Al utilizar productos de desecho y
materia prima de bajo costo como fuente de carbono y energía, los microorganismos pueden usarse
para cultivar biomasa o concentrados de proteínas [4] , [5] .
Aunque el hombre ha estado utilizando microorganismos en la producción de alimentos y piensos

durante siglos, la tecnología de producción de SCP como alimento se ha desarrollado durante los
últimos 100 años. En realidad, su producción a gran escala se desarrolló en el siglo XX y
particularmente después de la Primera Guerra Mundial [6] . Teniendo en cuenta la amplia gama de
microorganismos existentes, la investigación de su condición óptima para producir una mayor
cantidad y desde el punto de vista nutricional, la mejor calidad de SCP sigue siendo un campo
atractivo para la investigación en todo el mundo. Se están realizando esfuerzos para determinar
sustratos y métodos alternativos capaces de eliminar los problemas de las fuentes nutricionales y los
métodos actualmente en uso para la producción de SCP para una mejor aceptación de este valioso
suplemento de nutrientes en todo el mundo[7] .
Esta revisión se centra en la producción de SCP a partir de diferentes fuentes de carbono mediante
fermentación sumergida , y se hace hincapié en la evaluación de los factores que influyen en la
biomasa producida, que se considera como el producto final.
2 . Diseño experimental en producción SCP

Tradicionalmente, la optimización en química analítica se ha llevado a cabo mediante el monitoreo
de la influencia de un factor a la vez en una respuesta experimental. Aunque solo se cambia un
parámetro, los otros se mantienen en un nivel constante. Esta técnica de optimización se llama una
variable a la vez. Su principal desventaja es que no incluye los efectos interactivos entre las variables
estudiadas. En consecuencia, esta técnica no describe completamente los efectos del parámetro en la
respuesta [8] . Otra desventaja de la optimización de un factor es el aumento en el número de
experimentos necesarios para llevar a cabo la investigación, lo que conduce a un aumento en el
tiempo y los gastos, así como a un aumento en el consumo de reactivos y materiales [9]. Para tener un
procedimiento más sistemático para realizar experimentos, algunos estudios se basan en
experimentos planificados mediante la evaluación del efecto de varias variables y su interacción en
las respuestas finales. De hecho, el diseño de un experimento requiere identificar factores de
influencia importantes y lograr los resultados más válidos de los ensayos menos experimentales con
un mínimo esfuerzo, recursos y tiempo. El diseño experimental es un conjunto específico de
experimentos definidos por una matriz compuesta de diferentes combinaciones del nivel de
variables estudiadas [9] . La Tabla 1 resume los estudios informados que utilizaron diseños
experimentales y muestra el impacto de variables independientes en la producción de SCP como
respuesta.
Tabla 1 . Diseños experimentales de estudios sobre el efecto de la condición de fermentación en la

producción de SCP.
Diseño Fuente Microorganismo Variables independientes Variables Referencias

experimental de dependientes
carbono
Diseño de Extracto Fusarium Agua de Jaggery, extracto de Productividad del [25]

Plackett-Burman de fecha venenatum fecha, KH 2 PO 4 , K 2 HPO 4 , rendimiento
MgSO 4 , tamaño del inóculo,
tiempo de incubación

carbono
Metodología de Agua de Fusarium Jaggery water rendimiento [24]

superficie de Jaggery, venenatum Fecha ext. conc.
respuesta, diseño extracto KH 2 PO 4
central de fecha K 2 HPO 4
compuesto Tamaño del inóculo
Tiempo
Fracción de la Glucosa Saccharomyces Glucosa concentrada, sulfato Producción de [10]

metodología cerevisiae de amonio, sulfato de hierro, biomasa
factorial glicina, glucosa
completa.
Modelo Suero de Kluyveromyces Tiempos de retención de Producción de [35]

matemático queso fragilis concentración de lactosa 12, biomasa
18 y 24 h;
caudales de aire, velocidades
de mezcla
Harina Mucor hiemalis Harina de trigo (g / L), NH 4 Producción de [44]

Modelo de de trigo NO 3 (g / L), KH 2 PO 4 biomasa
regresión Tiempo
polinómica ,
diseño central
compuesto
Taguchi como Glucosa Aspergillus niger Glucosa con., MgSO 4 con., Producción de [47]
método KH 2 PO 4 g / L, pH SCP Rendimiento
estadístico
factorial
fraccional
Diseño Jugo de Fusarium Conc. de fecha azúcar, conc. de Rendimiento de la [43]

compuesto fecha venenatum nitrógeno NH 4 H 2 PO 4 , producción
central centrado tamaño de semilla mycoprotein w / w
en la cara (FCCD) de proteína /
biomasa

carbono
Diseño de Fecha de Fusarium Fecha de concentración de Producción de [42]

Plackett-Burman azúcar venenatum azúcar, (NH 4 ) H 2 PO 4 , KH 2 biomasa y
PO 4 , temperatura, tiempo, proteínas.
edad de la semilla, tamaño de
la semilla
Prueba ortogonal Almidón Levadura activa Volumen líquido pH inicial, SCP [61]
de ñame seca tiempo de cultivo tamaño del
inóculo
Taguchi Metanol Cepas Metanol, aireación, agitación SCP y contenido [45]

seleccionadas de pH total de proteínas
Methylobacterium
3 . Factores influyentes en la producción de SCP

El rendimiento (g / L) y la productividad (g / L · h −1 ) de la producción de SCP dependen en gran
medida de la composición del medio de cultivo y las condiciones ambientales [10] . Según la
literatura, se ha realizado un esfuerzo considerable para evaluar los factores que afectan el
crecimiento de SCP, como el pH, la temperatura, el período de incubación , el oxígeno disuelto, la
tasa de aireación y los requisitos nutricionales , como las fuentes de carbono y nitrógeno, para
cultivar y utilizar esta información. para optimizar las condiciones de cultivo [11] . El efecto de estos
factores en el crecimiento de SCP se discute individualmente a continuación.
3.1 . Fuente de carbono

La producción de SCP se puede realizar utilizando desperdicios de alimentos fácilmente disponibles,
que anteriormente se consideraban de bajo o nulo valor. Sin embargo, los materiales de desecho y la
materia prima de bajo costo, especialmente los desechos agrícolas, se han reconocido recientemente
como materias primas de valor potencial para producir compuestos bioactivos de plataforma por
fermentación [12] . Los materiales comunes utilizados como sustratos para la producción de SCP a
partir de diferentes microorganismos incluyen los residuos de cáscara de naranja, paja de trigo,
naranja dulce, caña de azúcar, desechos de fábrica de papel, cáscara de arroz , desechos de yuca ,
virutas de madera, aserrín, mazorcas de maíz, pulpa de remolacha azucarera , desechos de coco,
desechos de uva, desechos de mango, etc. [13] , [14]. La biomasa lignocelulósica , como los desechos
de celulosa y hemicelulosa , se ha utilizado como sustrato adecuado para aumentar la producción de
SCP [15] . Sin embargo, varias características estructurales y de composición proporcionan resistencia
a la degradación biológica, lo que limita la bioconversión de sustratos lignocelulósicos.
Por lo tanto, las materias primas se hidrolizan por métodos físicos, químicos y enzimáticos antes de
usarse como sustratos [16] , [17] . De hecho, los métodos de pretratamiento se volvieron
fundamentales para romper la capa resistente de lignina.reduciendo la cristalinidad de la celulosa,
aumentando así la disponibilidad de carbohidratos (celulosa amorfa y hemicelulosas) para ser
utilizados por los microorganismos. Los pretratamientos físicos incluyen mecánica (es decir,
molienda, astillado, fresado, molino de cuchillas, tijeras, etc.), microondas, ultrasonido, explosión de
vapor y agua caliente líquida. Por el contrario, los pretratamientos químicos se inician puramente
por reacciones químicas para alterar la estructura de la biomasa. Los pretratamientos biológicos
pueden realizarse aplicando enzimas comerciales u hongos al material de lignocelulosa [18] . Además
de los materiales convencionales como la melaza, los desechos de frutas y verduras y los sustratos no
convencionales como los derivados del petróleo, el gas natural, el etanol y el metanol se han utilizado
[11] , [13]. La tecnología de proteínas del proceso de petróleo fue desarrollada por British Petroleum
para producir SCP con levadura usando n-parafina cerosa, un producto producido por las refinerías
de petróleo, como sustrato [19] , [20] .
El grado de producción de SCP depende del tipo de sustrato utilizado y también de la composición
del medio [14] . Es extremadamente importante usar el sustrato correcto porque afecta directamente
el resultado de la fermentación. Cada tipo de técnica de fermentación de sustrato debe optimizarse
porque los organismos reaccionan de manera diferente a cada sustrato y, por lo tanto, la tasa de
utilización de nutrientes varía en cada sustrato.
De hecho, la utilización de residuos en la producción de SCP no solo puede desempeñar un papel

eficiente en el control de la contaminación ambiental, sino que también es una estrategia efectiva
para reducir el costo de producción de SCP [21] .
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La Fig. 1 . Microorganismos y sustratos utilizados para la producción de SCP.
Sin embargo, los materiales de desecho deben tener algunos criterios para ser un sustrato útil para la
producción de proteína microbiana. Estos criterios incluyen ser no tóxico, abundante, regenerable,
no tóxico y económico. También deberían ser capaces de soportar el rápido crecimiento y la
multiplicación de los microorganismos y una producción de biomasa de alta calidad . En otras
palabras, el uso de desechos orgánicos como sustrato en los procesos de fermentación puede
aceptarse como una de las soluciones para reducir el precio total del cultivo, así como un método
más amigable con el medio ambiente para eliminar estos residuos. La figura 1 muestra los diferentes
sustratos utilizados como fuente de carbono y también diversos microorganismos utilizados para la
producción de SCP [22] . Tabla S1resume los estudios que informaron sobre el uso de diferentes
sustratos como fuente de carbono y el impacto de diferentes variables de fermentación que influyen
en el rendimiento y la productividad de la biomasa. Para la mayoría de las especies de hongos
filamentosos, los desechos de fruta fueron utilizados como fuente de carbono, tales como pulpa de
limón para Aspergillus niger [23] y los residuos fecha para Fusarium venenatum, Fusarium
graminearum , y Aspergillus oryzae [24] , [25] , [26 ] , [27] , [28] . Además de los desechos de frutas,
mono y disacáridos como glucosa, fructosa , sacarosa,maltosa y lactosase utilizaron para Fusarium
moniliforme y Fusarium oxysporum . Del mismo modo, las especies de levadura estuvieron expuestas
principalmente a los desechos de frutas y elsuero dequesocomo fuentes de carbono. Por ejemplo, la
fecha de desecho se utilizó para la producción de SCP de Trichoderma reesei y Thermomyces lanuginosus
[24]. Otros desechos de frutas como las cáscaras de fruta Beles, la piel de plátano, los desechos de
mango, la cáscara de naranja dulce, la cáscara degranada, los desechos de manzana, los desechos de
piña, el plátano naranja, la pulpa de remolacha, el cactus y el orujo de uva virgen se usaron como
sustratos para Saccharomyces cerevisiae , Candida utilis yCandida tropicalis [29],[30],[31],[32],[33],[34],[35].
Para Kluyveromyces marxianus ,Clavaria versatilis, Kluyveromyces lactis ,S. cerevisiae, Mucor
hiemalis,Kluyveromyces fragilis,Torulopsis cremorisse utilizarondesechos industriales como aguas
residuales de fabricación ricas en aceite, suero de queso, pulido de arroz desgrasado, glicerol crudode
producción de biodiesel y harina de trigo.y Yarrowia lipolytica [36], [37] , [38] , [39] , [40] , [41] , [42] , [43] .
Para las especies bacterianas tales como Bacillus cereus , Bacillus subtilis , Bacillus coagulans , Bacillus
licheniformis , Bacillus stearothermophilus , Escherichia coli , y Brevibacterium lactofermentum ,
hidrolizado de cuerno carnero, remolacha hidrolizado de pulpa y melaza, suero líquido, y la glucosa
fueron utilizados como fuente de carbono [33 ] , [43] , [44] , [45], [46] . La concentración de la fuente de
carbono utilizada como sustratos varió de 4 a 192 g / L, lo que produjo 21.89 g / L y 19.8-23 g / L de
rendimiento de biomasa por M. hiemalis y S. cerevisiae, respectivamente [29] , [44] . Como se muestra
en la Tabla S1 , hongos como F. venenatum, con una concentración de fuente de carbono de 20 g / L
(tomada de la fecha de azúcar residual), produjeron aproximadamente 0.35 g / g de biomasa [22] .
Además, S. cerevisiae, usando un nivel significativamente más alto de azúcar (tomado de orujo de uva
virgen), es decir , 192 g / L, produjo una biomasa más baja, es decir, aproximadamente 0.12 g / g [29].
En otro estudio realizado por Ardestani y Alishahi [45] , A. niger utilizó 70 g / L de glucosa para
producir 0,62 g / g de biomasa, lo que se considera un alto rendimiento. Un informe de Ghaly et al.
[35] mostró que K. fragilis puede producir un rendimiento de biomasa tan alto como 0.74 g / g (37 g /
L) usando 34.3 g / L de lactosa. Como se vio y se indicó anteriormente, la estructura química y el tipo
de sustrato pueden afectar directamente el crecimiento celular y el resultado de la fermentación. Un
ejemplo claro lo proporciona una comparación de las dos levaduras K. fragilis y C. utilis. Aunque
estuvieron expuestos a dos fuentes de carbono diferentes, es decir, suero de queso y pulido de arroz
desgrasado, ambos produjeron un rendimiento de biomasa bastante alto de 0,74 g / gy 0,65 g / g,
respectivamente [37] , [40] . Por lo tanto, es extremadamente importante optimizar las técnicas de
fermentación para cada tipo de sustrato utilizado y nutrientes de cultivo para lograr la mayor ventaja
del proceso.
3.2 . Fuente de nitrógeno

Debido a las propiedades estructurales, la fuente de nitrógeno es uno de los factores más
importantes durante la síntesis de proteínas por microorganismos. Las fuentes de nitrógeno que son
útiles para el crecimiento incluyen amoníaco, sales de amonio, urea, nitrato y nitrógeno orgánico en
diferentes sustratos como los desechos. Además, a veces se sugiere agregar un suplemento de
nutrientes minerales al medio de cultivo para restaurar la deficiencia de nutrientes con una
concentración insuficiente para apoyar el crecimiento.
Similar a la fuente de carbono, la utilización de diferentes fuentes de nitrógeno podría conducir a un

rendimiento diferente de la producción de SCP. Por ejemplo, la urea como fuente de nitrógeno para
C. utilis tuvo un efecto adverso en su crecimiento (12.7 g / L de masa celular) en comparación con las
fuentes orgánicas como el licor de maíz (CSL), un subproducto de bajo costo de la industria del
almidón. ; extracto de levadura ; peptona ; y harina de soya (20.7, 18.4, 16.3 y 14.3 g / L de masa
celular, respectivamente) o fuentes inorgánicas como sulfato de amonio y cloruro de amonio (16.2 y
15.3 g / L de masa celular, respectivamente) [46] . En otro informe de Taran y Bakhtiyari [47] , el
halófila Haloarculasp. podría crecer en NH 4 Cl y peptona, pero no se produjo mucho SCP usando
extracto de levadura, peptona y triptona como fuentes de nitrógeno. Una concentración de 0,8% ( p /
v ) de fuente de nitrógeno fue más efectiva en la producción de biomasa que otras concentraciones.
El rendimiento máximo de SCP se obtuvo cuando la triptona se suplementó a una concentración de
0.8% ( p / v ) [47] . En otro informe de Adoki [32] , el sulfato de amonio era una mejor fuente de
nitrógeno para el crecimiento de C. utilis que el nitrato de amonio. En su estudio, el nitrato de
amonio y el sulfato de amonio se usaron como fuentes de nitrógeno para otras especies de levadura
como M. hiemalis, T. cremoris, K. marxianus,y S. cerevisiae . Ouedraogo y col. [48] observó que con una
concentración de 0,75 g de peptona, se obtuvo el crecimiento máximo de células de C. utilis como
biomasa de levadura (3,25 g / L). Sin embargo, observaron que el uso de extracto de levadura como
fuente de nitrógeno con una concentración de 0.5% resultó en la producción máxima de biomasa
(4.56 g / L). Se observó un aumento gradual en el crecimiento con un aumento en la fuente de
nitrógeno. Sin embargo, se observó un efecto adverso después de alcanzar 4,56 g / L, y el uso de
mayores cantidades de extracto de levadura resultó en un menor crecimiento. Levaduras como C.
utilishan sido alimentados con una variedad de fuentes orgánicas (CSL, extracto de levadura, harina
de soja y peptona) e inorgánicas (sulfato de amonio, cloruro de amonio y urea) y el CSL parece
generar el mayor rendimiento para este microorganismo [49] .
Las fuentes de nitrógeno para SCP bacteriano como se ve en la Tabla S1 fueron suero de leche para B.
subtilis [41] ; hidrolizado de cuerno de carnero para B. subtilis, B. cereus y E. coli [39] ; y CSL para B.
lactofermentum [30] .
Como se muestra en la Tabla S1 , hasta ahora, el extracto de fecha se usó para F. venenatum como
fuente de nitrógeno [22] , [23] , [24] , [25] . Además, Hosseini et al. Utilizaron fosfato de dihidrógeno y
amonio (NH 4 H 2 PO 4 ) para F. venenatum . [22] y Hosseini y Khosravi-Darani [23] . Se utilizaron
nitrato y nitrito de sodio, urea, extracto de levadura, peptona y una variedad de aminoácidos
diferentes como fuentes de nitrógeno inorgánico y orgánico para el crecimiento de F. moniliforme.,
siendo la peptona la mejor fuente en términos de producción de mayor rendimiento y productividad
[50] . Ardestani y Alishahi [45] utilizaron pulpa de limón como fuente de nitrógeno y carbono para el
crecimiento de A. niger . Según un informe de Haddish [26] , el uso de fuentes de nitrógeno
inorgánico en comparación con las fuentes orgánicas podría reducir el porcentaje de proteína en el
SCP producido por S. cerevisiae utilizando fruta Beles como sustrato. Adoki [32] usó desechos de
naranja, plátano y plátano como sustratos y observó que el uso de sulfato de amonio tuvo un mejor
efecto en el rendimiento de la producción de SCP por Candida spp. que el del nitrato de amonio.
Zheng y col. [33] recomendó una proporción de N: C tan alta como 1: 6 y 1: 8, a partir de una
proporción de N: C igual a 1:25 para la producción de SCP de especies de Candida y Rhodotorula
mediante el uso de aguas residuales para la fabricación de aceite de ensalada rico en aceite como el
sustrato. En otro estudio, Rajoka et al. [40] comparó el efecto de algunas variables como CSL, sulfato
de amonio, nitrato de amonio, dihidrógeno fosfato de amonio, urea y nitrato de sodio para la
producción de SCP mediante el uso de pulido de arroz desgrasado y descubrió que CSL (5%) tuvo el
mejor efecto sobre SCP de C. utilis .
Se usaron fuentes de nitrógeno orgánico como CSL, extracto de levadura, harina de soja y peptona (5
g / L, p / v ) y fuentes inorgánicas (sulfato de amonio, cloruro de amonio y urea) a una concentración
de 2 g / L para investigar El efecto de diferentes variables en SCP por C. utilis mediante el uso de
medio de polvo de pimiento (CPM) [46] . Según sus resultados, la urea tuvo un efecto adverso sobre el
crecimiento celular de C. utilis y CSL (20.7 g / L) tuvo el mejor efecto. El contenido de proteína cruda
de C. utilis 1769 fue de 48.2%, que fue más que el de C. utilis OZ993 cultivado en aguas residuales de
fabricación de aceite de ensalada, reportado por Zheng et al. [33] y el de C. utilisY900 cultivado en el
efluente de enlatado de piña reportado por Nigam [49] . Para mejorar la producción en masa celular
de C. utilis 1769, se añadieron varias fuentes de nitrógeno orgánico e inorgánico a CPM. Los
resultados mostraron que estos compuestos de nitrógeno influyeron en el rendimiento de la masa
celular. Además, CSL apoyó la producción máxima de masa celular de C. utilis 1769 (20,7 g / L) en
comparación con los de otros compuestos de nitrógeno [36] , [46] .
3.3 . Tamaño y edad del inóculo
El logro de un crecimiento óptimo en la etapa de producción podría depender de la edad y el tamaño

del inóculo del cultivo de semillas porque pueden afectar el rendimiento total de la producción y el
costo del proceso de fermentación [51] , [52] , [53] , [54] , [55] . El tamaño óptimo del inóculo varió para
diferentes microorganismos como se muestra en la Tabla S1 . Por ejemplo , Hosseini et al. [22] y
Hosseini y Khosravi-Darani [23] utilizaron un tamaño de cultivo del 13% y 10% v / v para la
inoculación de F. venenatum,conduciendo así a un rendimiento de biomasa de 4.84 g / L y
aproximadamente 47% de rendimiento de proteína, respectivamente. En un trabajo similar, Prakash
et al. [25] utilizó un tamaño de cultivo del 5% para F. venenatum y obtuvo un rendimiento de biomasa
de 5 g / L, que es significativamente menor que el informado por Hosseini y Khosravi-Darani [23] .
Kurbanoglu y Algur [43] aplicaron un tamaño de inóculo de 5% para B. cereus, y el resultado fue un
máximo de 7.3 g / L de producción de biomasa. Además, la edad del inóculo puede desempeñar un
papel crucial en el rendimiento final de biomasa. Hosseini y col. [22] mostró que un inóculo de 48 h
proporcionaba una mejor condición para el crecimiento de F. venenatum . En un estudio realizado
por Ugwuanyi[42] para la producción de SCP de B. stearothermophilus , se utilizó un tamaño de inóculo
de 0.5% v / v y una edad de 12 h, y esto proporcionó el mayor rendimiento de 2.41 g / L de biomasa.
Yunus y col. [4] utilizaron C. utilis y Rhizopus oligosporus como cultivo microbiano y salvado de trigo
como sustrato y descubrieron que un tamaño de inóculo de 10% v / v puede conducir a la producción
del nivel más alto de proteína. Pogaku y col. [53] obtuvo la biomasa máxima de A. oryzae mientras
usaba un tamaño de inóculo de 3% ( v / v ) en salvado de arroz sin aceite , lo que está de acuerdo con
el resultado de Yunus et al. [4] . Rajoka y col. [40] estudió la cinética de la producción por lotes de SCP
a partir del pulido de arroz con C. utilisen reactores de tanque continuamente aireados y observamos
que al usar un tamaño de inóculo de 10% ( v / v ), se puede obtener el máximo rendimiento de
biomasa y proteína. Las diferencias en el rendimiento máximo al usar diferentes tamaños de inóculo
pueden deberse al hecho de que se emplearon diferentes microorganismos, sustratos y técnicas de
fermentación [4] , [43] . En otro informe de Zhao et al. [46] , C. utilis, C. tropicalis y S. cerevisiae se usaron
con un tamaño de inóculo de 5% v / v , y C. utilis mostró el mayor rendimiento (14 g / L) en
comparación con las otras levaduras analizadas.
3.4 . Aireación
Como se indicó anteriormente, la aireación es una operación importante en la fermentación
sumergida para que los microorganismos absorban oxígeno. En general, cuanto más reducido es el
sustrato, mayor es el rendimiento celular y más oxígeno requerido para la oxidación del sustrato.
Según lo informado por Nanou et al. [54] , la morfología de los microorganismos juega un papel
crucial en la absorción de oxígeno [56] , [57] . Un estudio, por ejemplo, ha demostrado que la mejor
tasa de aireación (volumen de aire, volumen de medio, minuto) y oxígeno disuelto para producir un
mayor rendimiento de C. utilis es 1 vvm y 50%, respectivamente [40] . La concentración de oxígeno
disuelto se analizó para un grupo de microorganismos (Rhodotorula rubra , C. tropicalis, C. utilis,
Candida boidinii y Trichosporon cutaneum ), yC. utilismostraron una mejor elección que otras en
términos de mayor rendimiento, que fue de 2 mg / L según Zheng et al. [33]. Curto y col. [29]utilizó
un flujo de aire de3 vvmparaS. cerevisiaeen un reactor Biostat E-level de 15 l. En otro estudio,
Kurbanoglu et al. [43]utilizó una tasa de aireación de 1.5 vvm paraBacillusspp. yE. coli. Otro trabajo
reciente fue realizado por Anvari y Khayati[37]enK. lactis, K. marxianus, S. fragilis, K. lactisyS. cerevisiae,
y entre ellos, K. marxianus mostró el mayor rendimiento cuando se usó aireación de 1 vvm para un
tanque agitado de 2 l. Un estudio realizado por Ugwuanyi [42] mostró que 1 vvm de aireación produjo
un rendimiento mayor que 0.5 vvm de aireación usando tres bacterias diferentes, es decir , B.
coagulans, B. licheniformis y B. stearothermophilus .
3.5 . Temperatura y pH
La temperatura es uno de los factores más influyentes en el crecimiento de microorganismos y, por
lo tanto, en el rendimiento y la productividad en el proceso de producción de SCP [58] , [59] . La
temperatura más común utilizada para la incubación de diferentes microorganismos fue la
temperatura ambiente, es decir, 25–27 ° C ( Tabla S1 ). Sin embargo, para algunos hongos como K.
fragilis y C. utilis , se informó que la temperatura entre 33 y 35 ° C era la óptima [35] , [46] . Para
bacterias como Bacillus spp. y E. coli, Kurbanoglu et al. [43] utilizó una temperatura fija, es decir, 30 °
C. Gomashe y col. [41]utilizó una temperatura de 37 ° C para B. subtilis, y Curto et al. [29] utilizó una
temperatura de 30 ° C para el crecimiento de S. cerevisiae . Sin embargo, la temperatura óptima para la
producción de SCP a partir de C. utilis fue de 25 ° C y 30 ° C cuando se utilizaron aguas residuales
para la fabricación de aceite de ensalada rico en aceite y fruta de pera de cactus como fuentes de
carbono, respectivamente [31] , [33] . F. moniliforme también mostró un crecimiento óptimo a 28 ° C
con diferentes medios de cultivo que contienen diferentes tipos de carbohidratos simples [49] . Del
mismo modo, Hosseini et al. [22] observó que 28 ° C es la temperatura óptima para el crecimiento de
F. venenatumcuando se usa azúcar de fecha como sustrato. Rhizopus sp. exhibió diferentes morfologías
de crecimiento durante el cultivo a diferentes temperaturas. Creció como pequeños grupos de
micelios a 30, 35 y 40 ° C, mientras que creció como pequeños gránulos miceliales a 25 y 45 ° C.
Debido a su morfología de crecimiento, el cultivo de hongos filamentosos ha sido ampliamente
investigado utilizando reactores con un diseño más simple, como puentes aéreos y columnas de
burbujas, en comparación con los reactores de tanque agitado tradicionales [59] .
Un estudio reciente de Ferreira et al. [60] demostró que un reactor más simple, como una columna de
burbujas, puede usarse para la producción de etanol y biomasa con el mismo rendimiento que el que
usa un puente aéreo, que en un punto de partida es rentable. Además de la temperatura, se han
realizado estudios sobre el efecto del pH que oscila entre 3.5 y 7. En los estudios que utilizaron S.
cerevisiae para la producción de SCP, un pH fijo de 5.8 (uvas vírgenes como sustrato) [29] y 6 (glucosa
como sustrato) se utilizó [11] . En otro estudio, Neurospora intermedia, Rhizopus sp. , A. oryzae, F.
venenatum y Monascus purpureusfueron utilizados para producir biomasa a un pH fijo de 5.5 [59] . Sin
embargo, se usó un rango de pH de 3–6.2 para la producción de SCP usando Candida sp. por Adoki
[32] y se determinó que un valor de pH 4.2 es el pH óptimo para una mayor generación de biomasa.
En caso de cultivo mixto de Candida sp. y Brevibacterium , el pH se fijó en 6 [30] . Del mismo modo,
Rajoka et al. [40] utilizó un valor fijo de pH, es decir, pH 6 mediante el uso de pulido de arroz
desgrasado para la producción de SCP de C. utilis . Se utilizó un cultivo mixto de K. marxianus y Torula
sp. A un pH fijo de 4.8 [36]. Entre todas las especies, un pH relativamente más alto de 7,2 fue
utilizado por Kurbanoglu y Algur [43] para Bacillus sp. y E. coli para producir SCP utilizando
hidrolizado de cuerno de carnero [43] . Chen y col. [61] examinó el efecto de un rango de pH (3.5-5.5)
como condiciones de fermentación inicial en la producción de SCP a partir de levadura seca activa, y
el pH inicial óptimo se observó como pH 5.0.
Como se muestra en la Tabla S1, para la mayoría de los estudios realizados, el valor de pH no estaba
entre las variables independientes para evaluar la condición óptima para una mayor producción de
biomasa y proteínas.
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Fig.2 . El mayor rendimiento reportado (g biomasa / g sustrato) y productividad (g / L · h −1 ) de SCP.
Otros factores, por ejemplo, el enriquecimiento del medio de cultivo por macronutrientes y
micronutrientes tales como aminoácidos y diferentes sales metálicas, también fueron efectivos en los
rendimientos de proteínas y biomasa. Como se muestra en la Tabla S1 , la biomasa más alta
alcanzable se informó como 21.9 g / L, que es producida por M. hiemalis con harina de trigo como
sustrato [34]. La cantidad de harina de trigo utilizada como sustrato fue baja (4 g / L), pero resultó en
un rendimiento de biomasa muy alto. Cabe señalar que en este trabajo, la filtración al vacío, con un
filtro de tamaño de poro de 11 μm, se utilizó para filtrar la biomasa, aunque este no parece ser un
método adecuado para separar las partículas de harina, que tienen un tamaño de partícula promedio
de 45 μm, de la biomasa. Además, el valor de la productividad no fue sobresaliente (0.22 g / L · h −1 ).
Se requiere una verificación adicional mediante la realización de estudios similares para confirmar
su informe. Sin embargo, K. fragilis demostró tener un alto potencial para producir un rendimiento
tan alto como 0.74 g / g junto con un alto valor de productividad, es decir, 3 g / L · h · h −1 [35] . El
hongo filamentoso F. moniliformefue el tercero en términos de rendimiento de biomasa, es decir, 0,74
g / g [49] . Sin embargo, no había un valor tan alto como su productividad, que era aproximadamente
0.077 g / L · h −1 según Pradeep y Pradeep [50] . Finalmente, Rajoka et al. [30] informaron que C. utilis
produjo 0,65 g / g de biomasa con 1,24 g / L · h −1 de productividad, lo que puede considerarse un
valor relativamente alto en comparación con lo informado en estudios similares. Por lo tanto,
hongos como Mucor , Kluyveromyces , Fusarium y Candida fueron las especies con el mayor
rendimiento de biomasa reportado ( Fig. 2 ).
4 . Conclusión
De la literatura, se puede concluir que los estudios realizados se realizaron principalmente a 28–32 °
C y un pH fijo y, a menudo, con sustratos fermentables baratos, es decir, productos de desecho de
una industria, cuya eliminación es costosa. A pesar de que el diseño de un experimento requiere
identificar variables de influencia importantes y lograr los resultados más válidos de los ensayos
menos experimentales con un mínimo esfuerzo, recursos y tiempo, muchos estudios en esta área se
han llevado a cabo sin un diseño experimental sistemático adecuado, y esto es considerado como una
brecha grave en esos estudios.
En general, el tipo de microorganismo utilizado, la temperatura de incubación , el tiempo de

incubación , la velocidad de agitación, la estructura química y la disponibilidad de la fuente de
carbono de diferentes sustratos se consideraron y se monitorearon en varios trabajos. Sin embargo,
el tamaño del inóculo , la edad del inóculo, el pH y la tasa de aireación también son factores
importantes por los cuales es necesario investigar sus efectos sobre la producción de SCP. Además,
biomasala productividad tiene un papel crucial en el aspecto económico de la investigación debido a
su inclusión del factor tiempo y podría ser una variable dependiente más informativa que el
rendimiento de la biomasa; sin embargo, no se calcula y reporta adecuadamente en la mayoría de los
estudios. En la producción de SCP, solo hay unos pocos informes que utilizaron más de 2 L de
biorreactores . El futuro de la producción de SCP dependerá en gran medida de reducir el costo de
producción y mejorar la calidad, lo que podría lograrse mediante un menor costo de materia prima,
la mejora de su calidad nutricional y de salud, y su aceptación por parte de los consumidores en la
sociedad. El uso de SCP como proteína no animal es prometedor, y se están realizando nuevos
desarrollos para el futuro. Una mayor investigación y desarrollo asegurará el uso de biomasa
microbianacomo SCP o comosuplemento dietético particularmente en países en desarrollo.
Conflicto de intereses
Los autores declaran que no hay conflictos de intereses.
Soporte financiero
Los autores agradecen el apoyo financiero proporcionado por la Fundación Nacional de Élites de
Irán (INEF). Los autores agradecen el apoyo financiero de la Universidad de Ciencias Médicas Shahid
Beheshti para la subvención 12407 y el Instituto Nacional de Investigación de Nutrición y Tecnología
de Alimentos para el apoyo técnico.
Material suplementario
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Tabla S1 . Resumen de los factores que influyen en la producción de SCP mediante el uso de
fermentación sumergida.
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15/11/2019 Factores que influyen en la producción de proteínas unicelulares por fermentación sumergida: una revisión - ScienceDirect

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Revista Electrónica de Biotecnología

Factores que inﬂuyen en la producción de proteínas unicelulares

https://doi.org/10.1016/j.ejbt.2018.11.005 Obtenga derechos y contenido

Aunque el hombre ha estado utilizando microorganismos en la producción de alimentos y piensos

2 . Diseño experimental en producción SCP

Tabla 1 . Diseños experimentales de estudios sobre el efecto de la condición de fermentación en la

Diseño Fuente Microorganismo Variables independientes Variables Referencias

Diseño de Extracto Fusarium Agua de Jaggery, extracto de Productividad del [25]

Diseño Fuente Microorganismo Variables independientes Variables Referencias

Metodología de Agua de Fusarium Jaggery water rendimiento [24]

Fracción de la Glucosa Saccharomyces Glucosa concentrada, sulfato Producción de [10]

Modelo Suero de Kluyveromyces Tiempos de retención de Producción de [35]

Harina Mucor hiemalis Harina de trigo (g / L), NH 4 Producción de [44]

Diseño Jugo de Fusarium Conc. de fecha azúcar, conc. de Rendimiento de la [43]

Diseño Fuente Microorganismo Variables independientes Variables Referencias

Diseño de Fecha de Fusarium Fecha de concentración de Producción de [42]

Taguchi Metanol Cepas Metanol, aireación, agitación SCP y contenido [45]

3 . Factores inﬂuyentes en la producción de SCP

3.1 . Fuente de carbono

De hecho, la utilización de residuos en la producción de SCP no solo puede desempeñar un papel

La Fig. 1 . Microorganismos y sustratos utilizados para la producción de SCP.

3.2 . Fuente de nitrógeno

Similar a la fuente de carbono, la utilización de diferentes fuentes de nitrógeno podría conducir a un

3.3 . Tamaño y edad del inóculo

El logro de un crecimiento óptimo en la etapa de producción podría depender de la edad y el tamaño

Fig.2 . El mayor rendimiento reportado (g biomasa / g sustrato) y productividad (g / L · h −1 ) de SCP.

En general, el tipo de microorganismo utilizado, la temperatura de incubación , el tiempo de

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Producción de proteínas unicelulares: una revisión

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