DETERMINACIN DE GLUCOSA EN SANGRE

[Mtodo Enzimtico]
1.

INTRODUCCIN

Hormonas que intervienen en la regulacin de [Glucosa]

GLUCAGN
Es producida por las clulas alfa de los islotes de Langerhans en el pncreas endocrino. Es una hormona
hiperglicemial ya que se incrementa en la sangre al disminuir el nivel de glucosa, cuando llega al hgado
por la vena porta causa la glucogenlisis (degradacin de glucgeno para obtener glucosa).
Cuando la necesidad de glucosa es muy grande en nuestro organismo y no se dispone de la suficiente
cantidad en la dieta, se puede formar glucosa mediante la gluconeognesis (obtencin de glucosa a
partir de vas alternativas como: lactato, aminocidos glicerol, cidos grasos, cuerpos cetnicos, etc.).
Este proceso tiene lugar en las clulas hepticas, clulas renales, clulas adiposas y en el tejido
muscular.
Tambin es importante diferenciar el concepto de glucognesis, que es la formacin de glucosa, en
general.
INSULINA
Hormona secretada por las clulas beta del pncreas endocrino (islotes de Langerhans). Se le considera
hipoglicemiante, ya que cuando los niveles de glucosa en sangre se incrementan tambin se incrementa
la insulina,esto se conoce como repuesta directa a la hiperglicemia.
Su concentracin en sangre es similar a la de la glucosa sangunea.
2.

FUNDAMENTO

Se basa en que la glucosa es oxidada enzimticamente por la glucosa oxidasa a cido glucnico y agua
oxigenada.

C6H12O6 + O2 + H2O

cido Glucnico + H2O2

Esta, en presencia de una peroxidasa produce la copulacin oxidativa del fenol con la 4-amino fenazona,
dando lugar a la formacin de un cromgeno rojo cereza que es proporcional a la cantidad de glucosa
presente.

H2O2 + cido Parahidroxibenzoico

Cromgeno rojo cereza + H2O

A este proceso se le denomina sistemas de relacin acopladas.

3.

PROCEDIMIENTO

Preparar la siguiente batera, corriendo solo una vez el Tubo Blanco y el Tubo Estndar.
Suero Diluido (ml.)
Estndar de Glucosa
(ml.)
Reactivo de Trabajo
(ml.)

Tubo M.P.
0.01

Tubo Estndar
---

Tubo Blanco
---

---

0.01

---

Incubar en bao mara a 37C durante 10 minutos. Retirar del bao mara y luego agregar, segn la
tabla:
Agua Destilada (ml.)

Tubo M.P.
2

Tubo Estndar
2

Tubo Blanco
2

Mezclar bien la solucin. Leer las ABSs para cada unos de los tubos en el espectrofotmetro a 505 nm.
Encontrar la [Glucosa] en mg/dL de las muestras de suero.

4.

RESULTADOS

[Estndar de Glucosa] = 4 mg/dL

[Glucosa] STD = 100 mg/dL
ABSMP = 1.392
ABS ESTANDAR = 0.861

Tubo M.P
Cromgeno rojo
cereza
Presencia de glucosa

5.

Tubo Estndar
Cromgeno rojo
cereza
Presencia de glucosa

Tubo Blanco
Reactivo de trabajo

CLCULOS

[Glucosa] = ( 100 mg/dL / ABS ESTANDAR) x ABS MP

[Glucosa] = ( 100 mg/ dL / 0.861 ) x 1.392
[Glucosa] = 161.672 mg/dL
6.

VALORES NORMALES

En ayunas:
[Glucosa] = de 60 mg/dL a 110 mg/dL
7.

IMPORTANCIA CLNICA

Alteraciones y patologas en el metabolismo de los carbohidratos.

-

Hiperglicemia: estado biolgico donde los niveles de glucosa sangunea est por
encima de los valores normales.

Hiperglicemia Fisiolgica: niveles bajos de glucosa en sangre debido a esfuerzos fsicos

intensos, exitacin psquica y emocional.

Diabetes mellitus: es una condicin de hiperglicemia patolgica. Se caracteriza por el

aumento de glucosa durante el ayuno, por encima de 140 mg/dL y a cualquier hora del
da encima de 200 mg/dL. Algunas caractersticas son: glucosuria, poliuria, polidipsia y
polifagia. Las consecuencias mas saltantes de la enfermedad son los trastornos
vasculares, ceguera, insuficiencia renal y gangrenas.

Hipoglicemia: cuando los niveles de glucosa alcanzan valores de 40 mg/dL a 45 mg/dL.

Puede presentarse durante el ayuno o la actividad fsica intensa.