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PARASITOLOGIA VETERINARIA,

TECNICAS DE DIAGNOSTICO COPROLOGICO

Recoleccin de materias fecales.


Las materias fecales que se utilizan para diagnsticos parasitarios se deben
tomar directamente del recto por encontrarse libres de elementos extraos que
puedan impedir su interpretacin.
De no lograr extraerlas directamente del recto, pueden tomarse al momento de
la deposicin o en caso extremo las materias frescas encontradas en el piso,
libres de cuerpos extraos, de tierra o de heces de otros animales.

Obtencin:
Las muestras se pueden obtener mediante el uso de guantes quirrgicos o bolsas
de polipropileno
Las bolsas de polipropileno tienen la ventaja de ser desechables y permiten ser
utilizadas como medio de envase, conservacin y transporte.
Se recomienda, antes de introducir la mano con la bolsa o el guante en el recto
(en grandes animales) o el dedo (en pequeas especies ) humedecer la bolsa con
agua corriente al igual que la regin anal para no maltratar al animal
En animales de poca edad o en los que sea imposible la penetracin rectal del
dedo, se debe utilizar cnulas con bordes no cortantes o utilizar el material
adherido al termmetro al momento de tomar la temperatura rectal.
A los animales que no se les pueda obtener la materia fecal, por ser estticos, o
presentar poca evacuacin se deben aislar individualmente en lugares limpios y
obtener las materias fecales del suelo.
Tambin se recomienda al no obtener las muestras del recto, la aplicacin de un
enema rectal de agua corriente, centrifugar el material obtenido y el sedimento
procesarlo a travs de mtodos coprolgicos de enriquecimiento como solucin
salina o azucarada saturada.

Recipientes para envo de muestras.


Las materias fecales por lo general se envan en bolsas de polipropileno con que
se toman las muestras y que se invierten sobre s mismas.
Las bolsas se cierran con dos nudos y se incluye la identificacin del animal en
el espacio de los nudos, impidiendo que la humedad borre la identificacin del
animal.
Cuando se utilizan frascos como recipientes de envo, se deben utilizar de boca
ancha y llenarlos en su totalidad con el fin de eliminar el aire y evitar la
velocidad de desarrollo y eclosin de huevos de parsitos

Cantidad de materia fecal para diagnsticos


La cantidad de materia fecal a enviar est relacionada con la especie animal que
se desea evaluar y con el nmero de exmenes o tcnicas a practicar, o la
posibilidad de contar con material si se desea repetir algunos exmenes.
En los bovinos y equinos es recomendable el envo aproximado de 100 gr de
materia fecal, considerando que se pueden evaluacin de parasitismo
gastrointestinal (helmintos y protozoarios ) parasitismo heptico y parasitismo
pulmonar.
En las especies porcina, ovina y caprina se deben enviar 50gr.
En conejos aproximadamente 10 bolos o el intestino completo.
En aves se recomienda enviar el intestino completo o un ave con signos
representativos del problema parasitario que se sospecha o que se desea
confirmar.

Conservacin de materias fecales.


Las muestras de materia fecal deben tomarse por lo general en las primeras
horas de la maana y cuando el animal no ha ingerido ningn tipo de alimento.
Las muestras obtenidas deben enviarse al laboratorio y procesarse de inmediato
especialmente en climas clidos donde el desarrollo de huevos y procesos de
eclosin se produce ms rpidamente.
Cuando exista dificultad para realizar el examen pocas horas despus de la toma,
se deben conservar en refrigeracin (climas fros) o agregar a las muestras
soluciones de formaldehdo o formalina al 10 o 20 % en agua o solucin salina
fisiolgica.
Para cada 10gr de materia fecal se debe agregar 1a 2 ml de la solucin indicada
y mezclar homogneamente todo el material para la preservacin total de la
muestra.
Para exmenes coprolgicos donde se desea investigar la presencia de larvas
de helmintos pulmonares (bronquitis verminosa), no se recomienda utilizar
ningn preservativo ya que el diagnostico se fundamenta en la migracin de
larvas que deben permanecer vivas a la observacin.
Tampoco se debe utilizar preservativos en las muestras que se quiera determinar
la presencia de trofozoitos o quistes de protozoarios intestinales, normalmente
estas formas parasitarias se destruyen a las pocas horas, siendo imposible su
diagnstico.
Su observacin inmediata o una refrigeracin moderada es lo ms
recomendable.

EXAMENES COPROLGICOS
La utilizacin de diferentes tcnicas en los exmenes coprolgicos permite evaluar o
determinar los agentes parasitarios causantes de las enfermedades, confirmando los
diagnsticos presuntivos que se hacen a la valoracin clnica de los animales. Es
necesario, conocer una adecuada metodologa del trabajo de laboratorio para lograr
diagnsticos precisos o por lo menos confiables que orienten las apreciaciones clnicas y
garanticen un buen tratamiento.
Examen macroscpico.
Debe realizarse inmediatamente a las muestras tomadas, considerndose su
consistencia, color, olor, presencia de mucosas, sangre, cogulos, cuerpos extraos y
an la posibilidad de encontrar parsitos o partes de ellos, elementos de importancia
para evitar errores de procedimiento.
Examen microscpico.
Debe ser realizado por laboratoristas o expertos en el conocimiento de tcnicas,
procedimientos y de las entidades u organismos a evaluar, con capacidad de interpretar
las caractersticas macroscpicas de las muestras con los anamnsicos reportados y las
enfermedades que padecen los animales. Es necesario contar con condiciones mnimas
de laboratorio, con los materiales, soluciones y reactivos indispensables para procesar
las diferentes tcnicas
Tcnicas coprolgicas.
La valoracin parasitaria en muestras de materia fecal se realiza a travs de
tcnicas que indican la presencia o cuantifican el grado de infeccin causado por
los parsitos.
Lo anterior y para mayor comprensin del tema, permite clasificar las tcnicas
coproparasitarias en tcnicas cualitativas y tcnicas cuantitativas.

Tcnicas cualitativas.

Son de gran ayuda por poder realizarse en forma rpida durante el examen
clnico, brindando elementos de fuerza para llegar a diagnsticos ms precisos.
Estas tcnicas no indican la cantidad de parsitos existentes pero informan en
trminos cualitativos el grado de la infeccin.
Tradicionalmente se ha utilizado el sistema de cruces segn campos
microscpicos para valorar el grado de infeccin, al igual que se hace para
determinar presencia bacterias, hemates y otras clulas en los exmenes de
orina.
Algunos trminos cualitativos que pueden orientar al clnico corresponden a
Infecciones bajas, leves, moderadas y graves. Correspondindose con el
sistema de cruces segn el nmero de formas parasitarias as:

Infeccin baja: ( Campos con 1 a 3 formas ) = Una cruz. ( + )


Infeccin leve: ( Campos con 4 a 7 formas ) = Dos cruces. ( + + )
Infeccin moderada ( Campos con 8 a 10 formas ) = Tres cruces (++ + )
Infeccin grave: (Campos con mas de 10 formas ) = Cuatro cruces (+++ + )

El nmero de formas para indicar el grado de infeccin es a criterio particular de quin


realiza el examen al igual que el nmero de campos microscpicos observables.
Se recomienda hacer lectura de cinco campos escogidos al azar en la preparacin o
frotis. Los mtodos comunes de tcnicas cualitativas son los siguientes
Mtodo de Frotis directo. (Preparaciones frescas). De gran utilidad en el diagnstico de
formas vegetativas o qusticas de protozoarios intestinales, y de huevos de
helmintos. Se requiere de muestras frescas para evitar la alteracin de formas
vegetativas o qusticas de protozoarios o el desarrollo de huevos de helmintos a estados
de mrula o larvas que impiden el adecuado reconocimiento.
Tcnica
En una lmina portaobjeto colocar una o dos gotas de solucin salina
fisiolgica* o isotnica **
1. Con un palillo o esptula, colocar sobre la solucin un poco de heces frescas
evitando la presencia de partculas de arena u otros cuerpos extraos.
2. Mezclar con la solucin salina hasta obtener una pelcula poco gruesa y clara
3. Colocar una laminilla sobre la preparacin de haces
4. Mirar al microscopio con objetivo de 10X 40X
* Solucin salina fisiolgica: Se prepara con 8.5 g de Cloruro de sodio (NaCl) en 1000 cc de agua destilada. Calentar a 50C
hasta disolver completamente la sal
** Solucin de Ringer o Solucin salina isotnica .Se prepara con 0.42 g de Cloruro de potasio, 0.24 g de Cloruro de sodio, 0.20
g de Bicarbonato de sodio en 1000cc de agua destilada.

Mtodos de concentracin o enriquecimiento.


Son varias las tcnicas de enriquecimiento que permiten la utilizacin de mtodos de
flotacin, sedimentacin o migracin larvaria.
Mtodo de Flotacin con solucin salina saturada .
De uso corriente en las prcticas de diagnstico en veterinaria por ser rpida, brindar
buenos resultados y facilidad de preparacin de la solucin.
Tcnica
Colocar de 2-5 g. De heces en un mortero
Agregar de 30 a50 cc de solucin salina saturada*
Disolver con una esptula o varilla de vidrio
Filtrar con un cedazo de mallas finas
Llenar uno o dos tubos de ensayo por encima del borde (menisco convexo)
Eliminar las burbujas o sustancias que flotan
Colocar una laminilla encima del tubo de 15 a 30 minutos
Retirar la laminilla y colocarla en un portaobjeto
Mirar al microscopio con objetivo de 10X
* Solucin salina saturada Se prepara con 331g de Cloruro de sodio (NaCl) en 1000 cc de agua destilada. Calentar a 50C hasta
disolver

Tcnica de flotacin sencilla.


Colocar en un tubo de ensayo pequeas cantidades de heces
Mezclar las materias fecales
Llenar hasta el borde con solucin salina saturada
Colocar una laminilla en el borde del tubo por tiempo de 3 a 5 minutos
Retirar la laminilla y colocarla en un portaobjeto, mirar al microscopio con 10X, 40X.

La solucin salina puede ser reemplazada por las siguientes soluciones :


Solucin azucarada de Sheather Se prepara con 454 g de azcar, 6 cc de fenol o formol en 355 cc de agua destilada
Solucin de sulfato de magnesia Se prepara con 331 g de sulfato de magnesia en 1000 cc de agua destilada.

Mtodo de Graham
Conocido con el nombre de Tcnica de cinta de celofn, de utilidad en el diagnstico de
oxiuros equinos y humanos y de tenas caninas del gnero Dipylidium. Se fundamenta
en lograr la adhesin de huevos o segmentos de parsitos en la cinta y recuperarlos
posteriormente por sistema de sedimentacin .
Tcnica
Colocar una cinta adhesiva en la regin perianal
Retirar la cinta y montarla en una lamina
Observar al microscopio con objetivo de 10X
Modificacin del mtodo de Grahan para oxyurosis equina
En equinos se recomiendan las siguientes modificaciones:
Lavar la regin anal y perianal con solucin salina o con agua destilada
Exprimir las torundas de algodn o gasa utilizadas en un beaker con capacidad de 500cc
Centrifugar el material obtenido a 1500 r. p.m. y eliminar el sobrenadante
Colocar el sedimento en lminas
Observar al microscopio con objetivo de 10X
Tcnicas cuantitativas Indican la cantidad de parsitos existentes informando el grado
de la infeccin. Tradicionalmente se ha utilizado el sistema de valoracin de h.p.g
(huevos por gramo) o de l.p.g. (larvas por gramo) segn sean las formas parasitarias
diagnosticadas. En Medicina Veterinaria es frecuente el uso de las siguientes
tcnicas: Dennis, Borays Pearson, McMaster, Soll Modificado y Baerman

Mtodos para diagnstico de tremtodos


Para el diagnstico de helmintos tremtodos y especficamente para Fasciola heptica se
utiliza la tcnica de Dennis, fundamentada en repetidos lavados y filtrados de la
muestra fecal y la observacin posterior de huevos obtenidos por procesos de
sedimentacin.
Tcnica de Dennis
Pesar 2g de materia fecal
Colocarlos en un recipiente o mortero con capacidad de 100 cc.
Agregar 25 cc de solucin detergente*
Mezclar con un agitador sin formar espuma
Colocar una malla metlica ( No.80 ) en un embudo
Filtrar la suspensin en un tubo de 50 cc
Lavar con solucin detergente el recipiente que contena la muestra
Filtrar el lavado y agregarlo al tubo de 50 cc
Adicionar solucin detergente al sedimento de la malla hasta llenar el tubo
Dejar en reposo el tubo por tiempo de 5 a 10 minutos
Eliminar las partes del sobrenadante del lquido.
Lavar el embudo con solucin detergente y agregarla al tubo
Llenar el tubo hasta el reborde con solucin detergente
Dejar en reposo durante 10 minutos
Eliminar el sobrenadante del tubo, dejando 2 a 3 cc del sedimento
Agregar 1 a2 gotas de tintura de yodo y dejar en reposo de 2 a5 minutos

Verter el contenido en una caja de petri


Mirar al esteromicroscopio y contar los huevos de Fasciola heptica
Solucin detergente: Se prepara con 5 cc de detergente lquido en 95 cc de agua destilada

Recuento: El nmero de huevos contados se divide por 2 y se expresa en huevos por


gramo (h.p
Tcnica de Borays Pearson.
Pesar 5 g de materia fecal
Colocarlos en un recipiente o mortero con capacidad de 100 cc.
Agregar agua corriente y preparar una suspensin
Mezclar con un agitador sin formar espuma
Colocar una malla metlica ( No.80 ) en un embudo
Filtrar la suspensin en una probeta de 1000 cc
Lavar con agua el recipiente y el tamiz que contenan la muestra
Filtrar el lavado y agregarla a la probeta de 1000 cc
Adicionar agua hasta llenar la probeta
Dejar en reposo la probeta por tiempo de 5 minutos
Eliminar el sobrenadante dejando 100 a 200 cc del sedimento
Llenar nuevamente la probeta con agua
Dejar en reposo durante 5 (Repetir ltimo paso tres veces)
Eliminar el sobrenadante de la probeta dejando 5 cc del sedimento
Agregar 3 a 5 gotas de azul de metileno al 1:1000
Agitar el sedimento y tomar 1 cc del sedimento
Preparar el nmero de lminas suficientes con el cc del sedimento
Mirar al microscopio con objetivo de 10X
Recuento: El nmero de huevos contados equivale al nmero de huevos por gramo de la
muestra
Tecnica de McMaster
Pesar 2g de materia fecal recientemente tomadas.
Depositarla en un recipiente de Mc Master, calibrado a 28 cc.
Agregar 28 cc de solucin azucarada sobresaturada de Sheather
Agitar o mezclar fuertemente hasta homogenizar
Tamizar en un colador o cedazo metlico ( No. 80 ) o colador comn
Presionar el sedimento con una esptulas de madera y eliminar el contenido.
Llenar dos cmaras de Mc Master evitando la presencia de burbujas.
Mirar al microscopio con objetivo de 10X
El recorrido de la cmara debe hacerse trasladando el campo entre las columnas.
Recuento. El clculo se basa en el espacio de la cmara y el volumen de la solucin a
leer. Cada cmara tiene un volumen de 1 cc. El nmero total de cmara a leer debera
ser de 30. Razn por la cual debe leerse un mnimo de dos cmara, determinar el
promedio de las mismas y multiplicar por la constante 30.
La formula para expresar el nmero de huevos por gramo (h.p.g) corresponde a la
siguiente
Recuento de la C1 + Recuento de la C2 ...x 30
Nmero de cmaras ledas
Mtodo de Sloss modificado
Tcnica

Pesar 2g de heces
Colocarlas en un beaker con capacidad de 40 cc
Agregar 20 cc de agua corriente
Agitar y homogenizar la muestra hasta formar una suspensin
Tamizar con un cedazo corriente ( No. 80 ) en una caja de petri
Agregar 10 cc de agua para arrastrar los huevos existentes
Comprimir el sedimento con una esptula de madera
Desechar el sedimento
Distribuir los 30 cc en dos tubos de ensayo de 15 cc
Centrifugar a 1500 r. p.m. durante cinco minutos
Botar el sobrenadante y dejar 2 cc del sedimento
Agitar el sedimento y Colocar los tubos en una gradilla
Agregar solucin azucarada hasta el borde de los tubos
Colocar una laminilla durante cinco minutos
Retirar las laminillas y colocarlas sobre un portaobjeto
Mirar al microscopio con objetivo de 10X
Recuento: El clculo requiere del conteo total de huevos discriminados por gneros de
parsitos El conteo por gnero se divide por dos y se obtiene el nmero de huevos por
gramo ( h.p.g.) de la muestra
DIAGNOSTICO DE LARVAS DE HELMINTOS EN MATERIA FECAL, TEJIDOS
Y PASTOS
Mtodo de Baerman. Utilizado especialmente para el diagnstico de parsitos
pulmonares causantes de bronquitis verminosa. tambin se utiliza para exmenes de
larvas en pastos o en tejidos. Se fundamenta en lograr la eclosin de huevos y permitir
por gravedad la migracin de larvas al fondo del tubo que posteriormente son
recuperadas por sistemas de sedimentacin o centrifugacin
Tcnica
Organizar el aparato de baerman uniendo un tubo de ensayo a un embudo por
medio de una manguera
Colocar el aparato de baerman en un soporte o mesa para baerman
Llenar con agua el aparato de baerman hasta 1-2 cm por debajo del borde del
embudo
Colocar en el embudo un tamiz o malla metlica
Colocar 10 g de la muestra encima del tamiz en contacto con el agua por
Tiempo de 12 a 24 horas
Cubrir con gasa para evitar la contaminacin con artrpodos
Desmontar el aparato de baerman y retirar con cuidado el tubo de ensayo
Centrifugar a 1500 r.p.m. durante cinco minutos
Botar el sobrenadante y dejar de 1-2 cc de sedimento.
Colocar en una lamina 1-2 gotas del cubrindolo con un portaobjeto hasta
agotarlo completamente
Mirar al microscopio con objetivo de 10X
Recuento. Se basa en la lectura de todo el sedimento y el recuento de todas las larvas
existentes. El reporte se da por el nmero de larvas contadas en la cantidad de materia

fecal montada. Existen embudos de diferentes capacidades, logrndose mejores


diagnsticos entre mayor sea la cantidad de materia fecal a examinar.
La tcnica de Baerman, tambin es de utilidad para el diagnstico de larvas de
nematodos existentes en msculos ( Trichinella spiralis ) y larvas existentes en pastos El
mtodo de Baerman digestivo se fundamenta en la tcnica anterior con las siguientes
modificaciones:
Tcnica de Baerman digestivo.
Montar el aparato de baerman segn tcnica estndar
Remplazar la materia fecal por 5 g de msculo en trozos finos
Remplazar el agua por solucin digestiva artificial*
Incubar a37C durante 12 horas
Desmontar el aparato de baerman y retirar con cuidado el tubo de ensayo
Centrifugar a 1500 r.p.m. durante cinco minutos
Botar el sobrenadante y dejar de 1-2 cc de sedimento.
Colocar en una lamina 1-2 gotas del cubrindolo con un portaobjeto hasta
agotarlo completamente
Mirar al microscopio con objetivo de 10X
Solucin digestiva artificial: Se prepara con5 g de pepsina ala 1%, 11 cc de cido
clorhdrico al 0.75%, 10 cc de Cloruro de sodio al 0.15 Molar y agua bidestilada estril,
en cantidad suficiente para preparar 1000cc.
Baerman para diagnstico de larvas en pasto: De importancia para conocer el grado de
infestacin existente en explotaciones ganaderas, especialmente al iniciar un programa
de sanidad y tomar medidas de prevencin.
Tcnica
Elegir 5 sitios de muestreo al azar en el potrero seleccionado
Cortar un total de 300 g de pasto en horas de la maana ( 6: a.m.)
Tomar las muestras de pasto 5 cm por encima del suelo
Empacar las muestras en bolsas plsticas y llevar inmediatamente al
Laboratorio para evitar la muerte larvaria
Procesar las muestras segn mtodo estndar de baerman
Colocar la muestra encima del tamiz
Agregar agua al bao de mara ( 37-40C) hasta dejar el pasto en el agua
Mover el pasto peridicamente para desprender las larvas
Desmontar el aparato de baerman a las 24 horas
Retirar con cuidado el tubo de ensayo
Centrifugar a 1500 r.p.m. durante cinco minutos
Botar el sobrenadante y dejar de 1-2 cc de sedimento.
Colocar en una lamina 1-2 gotas del cubrindolo con un portaobjeto hasta agotarlo
completamente
Mirar al microscopio con objetivo de 10X
Recuento: El diagnstico se da en nmero de larvas contadas segn gnero de
parsitos, con base en la cantidad de pasto montada

DIAGNOSTICO DE HUEVOS DE HELMINTOS EN ORINA


Los exmenes realizados en orina para el diagnstico de parsitos, permiten el
reconocimiento de huevos de Stephanurus dentatus en la especie porcina y de Capillaria
plica en carnvoros. La orina a obtener debe ser tomada a travs de sondas, puncin
vesical o miccin espontnea
Tcnica:
Obtener entre 50 y 100 cc de orina.
Centrifugar la orina a 1500 r.p.m. durante 3-5 minutos
Decantar el sobrenadante
Colocar el sedimento en laminillas
Mirar al microscopio con objetivo de 10X
AISLAMIENTO Y CLASIFICACION DE HELMINTOS
Para el aislamiento de parsitos gastrointestinales se requiere del conocimiento preciso
de la tcnica de necropsia. para cada especie animal. El procedimiento bsico de la
necropsia es el siguiente:
Tcnica de necropsia
Colocar al animal sobre su dorso en una mesa y sujetar sus extremidades
Con bistur o tijeras practicar una incisin en la cara interna de cada muslo
Desarticular haciendo presin hacia adentro y hacia fuera
Incidir la regin axilar y desarticular
Hacer un corte longitudinal de la piel desde el extremo anterior del trax continuando
por la lnea alba hasta terminar en la regin pbica.
Separar piel, fascia y msculo cutneo desde la regin abdominal hasta el dorso de la
cara ventral del abdomen y del cuello
Incidir los msculos abdominales y penetrar a la cavidad abdominal
Seccionar las costillas a nivel de la articulaciones cndro- esternales y uniones
costo-vertebrales
Extender las porciones del tracto digestivo haciendo doble ligadura (5 cm entre ellas)
Retirar lengua, traquea y esfago de adelante hacia atrs
Aislar rganos abdominales
Examinar rganos torxicos, pleuras, columna. Cerebro.
Tcnica de aislamiento de parsitos
Tomar el tracto digestivo obtenido de la necropsia
Cortar entre las dobles ligaduras separando esfago, estmago, intetestino delgado
ciego e intestino grueso.
Trabajar independientemente cada uno de los segmentos digestivos
Eliminar los contenidos digestivos cuando existen
Lavar chorro logrando que la mucosa quede en el lavado
Del contenido total del lavado de cada porcin, se agita y se toma el 20% como
representativo de la muestra
El contenido tomado se preserva con igual cantidad de formol al 10%

Se revisa todo el contenido mirando al esteromicroscopio, pequeas cantidades del


material depositadas en una caja de petri
Aislar el material obtenido de la pesca
Conservar el material aislado en frascos con formol al 10%
Montar entre lamina y laminilla los parsitos agregndoles 1-2 gotas de lactofenol
para aclarar y observar mejor las estructuras del parsito
METODOS DE COLORACIN Y MONTAJE DE HELMINTOS
Los helmintos de importancia en Medicina Veterinaria, corresponden a los tremtodos,
cestodos y nematodos, con caractersticas morfolgicas y tamaos diferentes, lo que
implica la utilizacin de diferentes tcnicas para su aclaracin, coloracin y montaje y
permitir a los parsitlogos la identificacin de partes para llegar a la clasificacin de
gneros y especies
Montaje y coloracin de tremtodo y cestodos La estructura de los helmintos
tremtodos y cestodos se caracteriza por ser aplanados dorsoventralmente con espesores
diferentes. Para el caso de los tremtodos, unos pueden ser delgados y
aplanados ( duelas ) y otros robustos. con forma de pera. Los tremtodos robustos se
trabajan por cortes histolgicos
Tcnica
Fijar o conservar los tremtodos en formol actico alcohlico
Comprimir al tremtodo entre dos lminas
Sumergir en el lquido fijador durante 24 horas
Pasarlos por alcohol al 70% durante 6 horas
Pasarlos a paracarmn durante 24 horas
Pasarlos en alcohol cido durante 15 minutos
Alcohol al 70% durante 30 minutos
Alcohol absoluto durante 60 minutos
Montar en blsamo o glicerina gelatinada
Secar las lminas a la estufa y rotular
Montaje y coloracin de nematodos Los nematodos pueden presentarse de tamaos
diferentes, unos son microscpicos mientras que otros, alcanzan longitudes prximas al
metro. Por lo general, el montaje se hace para parsitos pequeos
Tcnica
Lavar con solucin salina fisiolgica los parsitos recolectados
Fijarlos en alcohol al 70% o formol al 5%
Conservarlos en formol al 5%
Pasarlos a paracarmn durante 24 horas
Pasarlos por alcohol al 70% durante 30 minutos
Pasarlos en alcohol cido durante 15 minutos
Alcohol al 70% durante 30 minutos
Alcohol absoluto durante 60 minutos
Montar en blsamo o glicerina gelatinada
Secar las lminas a la estufa y rotular
DIAGNOSTICO DE LARVAS DE HELMINTOS EN SANGRE
Algunos helmintos como las filarias aunque presenten en su estado adulto
localizaciones diferentes como corazn, testculos o cavidad peritoneal, tienen la

propiedad de evolucionar en forma especial, caracterizndose por ser vivparos u


ovovivparos, produciendo grandes cantidades de larvas (microfilarias) que toman la
circulacin en la bsqueda de sus huspedes intermediarios (artrpodos hematfagos
como mosquitos, pulgas y garrapatas) para continuar su evolucin. Razn por la cual,
la muestra a enviar para el diagnstico es necesariamente sangre con anticoagulante
para el reconocimiento del estado larval. Se recomienda la toma de las muestra en las
horas de la tarde ( 5 a 7 p.m.) por ser mas abundante el nmero de larvas
Tcnica sencilla
Tomar una gota de sangre fresca
Colocarla en una lmina y cubrirla con una laminilla
Mirar al microscopio con objetivo de 10X y reconocer las microfilarias
Reportar los resultados como positivo o negativo a microfilarias
Tcnica del microhematocrito
Llenar varios tubos de microhematocrito con sangre sin coagular
Taponar uno de los extremos con plastilina
Centrifugar los microhematocritos a 1500 r.p.m. durante 3 minutos
Colocar los microhematocritos en una lmina y fijarlos con plastililna
Observar en la divisin del sedimento y el plasma
Reportar los resultados como positivo o negativo a microfilarias
Tcnica de knott modificado
Colocar en un tubo de ensayo 1 cc de sangre sin coagular.
Agregar 10 cc de formol al 25% en solucin amortiguadora
Tapar el tubo y homogenizar suavemente
Centrifugar a 1500 r.p.m. durante un minuto
Decantar el lquido sobrenadante
Agregar 1-3 gotas de azul de metileno
Tomar con un gotero el sedimento y preparar extendidos de varias lminas
Observar al microscopio con objetivo de 10X y 40X
Reportar los resultados como positivo o negativo a microfilarias

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