PRODUCCION DE ACIDO CITRICO POR ACCION DEL ASPERGILLUS

NIGER A PARTIR DE MELAZA DE CAA DE AZUCAR MEDIANTE UN

PROCESO SUMERGIDO
I.

INTRODUCCIN
Dentro de los procesos industriales, la melaza de caa mayormente
empleada en la fermentacin alcohlica, encontrara altos niveles de
utilizacin si se destinara amplia y simultneamente a procesos
fermentativos tales como las fermentaciones ctrica, lctica, glutamica,
etc. Para derivar en la obtencin de cidos orgnicos de vasta utilidad en
la Industria Alimentaria.
Uno de estos procesos a destacarse, es la fermentacin ctrica, que
conduce a la obtencin de cido ctrico, acidulante de gran demanda
en la Industria de bebidas gaseosas, produccin de cacao, chocolates y
confitera en general, sectores que representan ms del 90% del
consumo nacional.
En el presente trabajo se tratar de delinear el proceso de obtencin del
Acd. Citrico, a travs del mtodo de cultivo sumergido, para esto se
utiliza una especie de hongos, del gnero Aspergillus.

II.

FUNDAMENTO TEORICO
II.1.

HISTORIA

A partir del jugo de limn, Scheele logr aislar por primera vez en 1784
el cido ctrico usando el proceso de cal-sulfrico para separar el micelio
del caldo que contiene cido ctrico en el proceso fermentativo.
Antes de que se desarrollaran los procesos microbianos la principal
fuente de cido ctrico eran los ctricos provenientes de Italia (limones
con un contenido entre 6 y 7 %) y el citrato de lima. En 1917 debido a la
imposibilidad de comprar limones italianos y citrato de lima, comienzan a
experimentar otros mtodos para obtenerlo.
En 1923, los hermanos Pfizer logran obtener cido ctrico a partir de
Aspergillus Nger y la fermentacin del azcar. Como sustrato se utiliz
melazas de remolacha y se est diversificando en sustratos como
sacarosa, melazas de caa o jarabe de glucosa. Posteriormente, se
registr una importante expansin debido al desarrollo del proceso de
fermentacin sumergida, mucho ms econmico.
II.2.

HONGO

Aspergillus niger es un hongo que produce un moho negro en vegetales

-muy comn en la lechuga, el tomate o la acelga-. Es una de las
especies ms corrientes del gnero Aspergillus.
En 1729 los catalog por primera vez el bilogo italiano Micheli.

Aspergillus niger

Micrografa de A. niger crecido en una placa de agar Sabouraud.

Aumento 100x.
Clasificacin cientfica
Dominio:
Reino:
Filo:
Subfilo:
Clase:
Orden:
Familia:
Gnero:
Especie:
Nombre binomial
Aspergillus niger

Eucariota
Fung
Ascomicota
Pezizomycotina
Eurotiomycetes
Eurotiales
Trichocomaceae
Aspergillus
Aspergillus niger

P.E.L. van Tieghem

Usos industriales
Aspergillus niger se cultiva para varios productos qumicos: cido ctrico
(E330), cido glucnico (E574) enzimas: glucoamilasa, galactosidasa,
etc.
A. niger es cultivada para la produccin industrial de muchas sustancias.
Diversas cepas de A. niger se utilizan en la preparacin industrial de
cido ctrico (E-330) y el acido gluconico (E574) y se han evaluado como
aceptable para la ingesta diaria de la Organizacin Mundial de la Salud.
II.3.

MELAZA DE CAA

La melaza es un producto lquido espeso derivado de la caa de azcar

y en menor medida de la remolacha azucarera, obtenido del residuo
restante en las cubas de extraccin de los azcares. Su aspecto es
similar al de la miel aunque de color parduzco muy oscuro,
prcticamente negro. El sabor es dulce ligeramente similar al del regaliz.
Nutricionalmente presenta un altsimo contenido en hidratos de carbono
adems de vitaminas del grupo B y abundantes minerales, entre los que
destacan el hierro, cobre y magnesio. Su contenido de agua es bajo.
Principalmente se emplea la melaza como suplemento energtico para
la alimentacin de rumiantes por su alto contenido de azcares y su bajo
costo en algunas regiones. No obstante, una pequea porcin de la
produccin se destina al consumo humano, emplendola como
endulzante culinario.
Es importante diferenciar la melaza empleada en la alimentacin animal,
la cual es un producto residual de la industria azucarera, de la melaza

que es empleada como materia prima en la produccin de azcar.

II.4.

ACIDO CITRICO

El cido ctrico, es un slido translucido o blanco. se ofrece en forma

granular; es inodoro, sabor cido fuerte, fluorescente al aire seco;
Cristaliza a partir de soluciones acuosas concentradas calientes en
forma de grandes prismas rmbicos, con una molcula de agua, la cual
pierde cuando se caliente a 100oC5, fundindose al mismo tiempo.
El cido ctrico se produce en su totalidad por fermentacin. El
descubrimiento de la capacidad de algunos hongos filamentosos de
producir cido ctrico se remonta a 1893, gracias a los estudios de
Wehmer.
En 1917 Currie demostr que especies de Aspergillus niger acumulaban
cido ctrico a la par con cido oxlico.
Posteriormente se definieron las condiciones que reduzcan la produccin
del cido oxlico contaminante.
A partir de entonces, variedades de Aspergillus niger han dominado la
produccin industrial. Fundamentalmente porque su fisiloga.
El cido ctrico, o su forma ionizada, el citrato, es un acido orgnico
tricarboxilico que est presente en la mayora de las frutas, sobre todo en
ctricos como el limn y la naranja. Su frmula qumica es C6H8O7.
Es un buen conservante y antioxidante natural que se aade
industrialmente como Aditivo alimentario aditivo en el envasado de
muchos alimentos como las conservas de vegetales enlatadas.

CARACTERSTICAS
La acidez del acido ctrico es debida a los tres grupos carboxilos -COOH
que pueden perder un protn en las soluciones. Si sucede esto, se
produce un ion citrato. Los citratos son unos buenos controladores del
pH de soluciones acidas. Los iones citrato forman sales llamadas citratos
con muchos iones metlicos. El citrato de calcio precipita a temperatura
ambiente.
El acido ctrico es un polvo cristalino blanco. Puede existir en una forma
anhidra (sin agua), monohidrato que contenga una molcula de agua por
cada molcula de acido ctrico. La forma anhidra se cristaliza en el agua
caliente, mientras que la forma monohidrato cuando el acido ctrico se
cristaliza en agua fra. El monohidrato se puede convertir a la forma
anhidra calentndolo sobre 74 C.
Qumicamente, el acido ctrico comparte las caractersticas de otros
cidos carboxlicos. Cuando se calienta a mas de 175 C, se
descompone produciendo dioxido de carbono y agua. El nombre IUPAC
del acido ctrico es acido 2-hidroxi-1,2,3-propanotricarboxlico.

II.5.

OBTENCIN DEL CIDO

ASPERGILLUS NGER

CTRICO

POR

MEDIO

DE

La preparacin del cido ctrico consiste, en trminos generales, en una

fermentacin aerbica del azcar, utilizando un cultivo de Aspergillus

Nger que es un hongo que produce como metabolito primario cido

ctrico, por eso en este proceso se usa como agente fermentador. Luego
la posterior purificacin, mediante el proceso cal-sulfrico y la
recuperacin final del producto.
II.5.1. Materias Primas (Proceso a partir de Aspergillus Nger)
Melaza o jarabe de Caa de Azcar
Lquido viscoso de color castao oscuro que se obtiene como producto
secundario en la fabricacin del azcar de caa. Las melazas son la
parte no cristalizable del azcar. Formada por un 67% de sacarosa, junto
con algo de glucosa y fructosa; las melazas se utilizan tambin para
fabricar alcohol industrial, cido actico, cido ctrico, levaduras y en
general para cualquier proceso donde se requiera de un medio de cultivo
que sirva como fuente de nutrientes para facilitar la germinacin,
crecimiento y reproduccin de los microorganismos productores de
determinado metabolito en este caso del cido ctrico.
Cal apagada (Ca(OH)2)
El hidrxido de calcio, dihidrxido de calcio o cal hidratada con
frmula Ca(OH)2, se obtiene, de manera natural, por hidratacin
del xido de calcio (cal viva) en unos equipos denominados
hidratadores. El agua de cal, que es una disolucin alcalina de cal
apagada en agua, se utiliza principalmente en medicina como anticido,
como neutralizador de un cido venenoso o para el tratamiento de las
quemaduras. En muchos procesos qumicos se usa para neutralizar el
pH. En la elaboracin de cido ctrico es usada para formar citrato de
calcio y as poder separar el cido ctrico.
cido sulfrico
El cido sulfrico es un cido fuerte, es decir, en disolucin acuosa se
disocia fcilmente en iones hidrgeno (H+) e iones sulfato (SO42-). Sus
disoluciones diluidas muestran todas las caractersticas de los cidos:
tienen sabor amargo, conducen la electricidad, neutralizan los lcalis y
corroen los metales activos desprendindose gas hidrgeno. A partir del
cido sulfrico se pueden preparar sales que contienen el grupo sulfato
SO4, y sales cidas que contienen el grupo hidrogenosulfato, HSO 4.
El cido sulfrico concentrado, llamado antiguamente aceite de vitriolo,
es un importante agente desecante. Acta tan vigorosamente en este
aspecto que extrae el agua, y por lo tanto carboniza, la madera, el
algodn, el azcar y el papel. Debido a estas propiedades desecantes,
se usa para fabricar ter, nitroglicerina y tintes. Cuando se calienta, el
cido sulfrico concentrado se comporta como un agente oxidante
capaz, por ejemplo, de disolver metales tan poco reactivos como el
cobre, el mercurio y el plomo, produciendo el sulfato del metal, dixido
de azufre y agua.

En el proceso es muy importante porque reacciona con el citrato de

calcio y lo hace precipitar en forma de yeso o sulfato clcico, permitiendo
liberar el cido ctrico presente.
El citrato de calcio (citrato clcico o sal amarga) es la sal del cido
ctrico e hidrxido de calcio.
Amoniaco, NH3
Gas de olor picante, incoloro, de frmula NH 3, muy soluble en agua. Una
disolucin acuosa saturada contiene un 45% en peso de amonaco a 0
C, y un 30% a temperatura ambiente. Disuelto en agua, el amonaco se
convierte en hidrxido de amonio, NH4OH, de marcado carcter bsico y
similar en su comportamiento qumico a los hidrxidos de los metales
alcalinos. En la fermentacin de la glucosa con Aspergillus Nger, el
amoniaco representa una importante fuente de nitrgeno, til para que
se lleve a cabo la germinacin y crecimiento del hongo.
II.5.2. Procedimiento
1. PREPARACIN DEL SUSTRATO (MELAZA)
El objetivo de esta primera etapa del proceso es la purificacin del
jarabe. Se inicia mezclando el jarabe con agua para diluirlo; una vez
diluido se pasa por un filtro de vaco para eliminar los slidos
suspendidos y las impurezas de la melaza. Luego el jarabe es
pasado por una celda de intercambio inico para retirar los iones del
flujo. Despus el jarabe es sometido a un proceso de pasteurizacin
que consiste en elevar la temperatura a 105 0C durante tres minutos y
bajarla nuevamente hasta 370C. La pasteurizacin se lleva a cabo
primero en un calentador de evaporacin instantnea, despus se
utiliza un circuito de acumulacin y un enfriador de jarabe.
2. FERMENTACIN
Una vez pasteurizado, es bombeado al fermentador el cual es un
recipiente rgido de 150 m3 en donde se lleva a cabo la
transformacin de la sacarosa en cido ctrico por medio del
Aspergillus Nger. El Aspergillus Nger es inoculado en este
fermentador. Se hace el ajuste del pH y se aaden nutrientes
(amoniaco NH3, sales de fermentacin). El aire estril se burbujea
dentro del fermentador. Luego de la fermentacin, el flujo es pasado
por un filtro rotatorio al vaco para separar el micelio. La masa
conformada por el micelio y el microorganismo muerto se denomina
biomasa o torta y constituye un subproducto o un efluente del
proceso.
3. PURIFICACIN DEL CIDO CTRICO
El cido ctrico debe ser separado del micelio, el microorganismo
muerto, el azcar residual, las protenas producidas por la
fermentacin y otras impurezas solubles. Para lo cual se lleva a cabo
el proceso denominado cal-sulfrico: se basa en tratar el licor madre

con una lachada de la cal (Ca(OH)2 cal apagada)de lo cual se forma

citrato de calcio. Este citrato resultante es lavado y el micelio es
filtrado. Posteriormente se aade cido sulfrico para descomponer
el citrato de calcio. Por lo tanto en esta etapa se forma sulfato de
calcio el cual es retirado de la solucin por medio de un filtro rotatorio
al vaco y se constituye como un desperdicio o como un subproducto
del proceso.
3.1 Celdas primarias de carbn activado
En estas celdas son removidas las impurezas solubles que producen
color a la solucin de cido Ctrico y en general sustancias orgnicas
contenidas en el licor. Debido que a lo largo del proceso se aaden
sustancias que aumentan la cantidad de iones contenidos en la
solucin de acido Ctrico, antes de cristalizarlo hay que retirar estos
iones (Ca++ y SO4=) para estos se usan celdas de resinas de
intercambio inico.
La corriente alimenta los evaporadores de doble o de triple efecto
donde se busca retirar la mayor cantidad de agua para pasar al
cristalizador.
3.2 Cristalizacin
En este proceso se separan los cristales formados del lquido
saturado que se denomina licor madre. Este licor se recircula a la
etapa de intercambio inico (celdas de carbn) o al tanque de
tratamiento por cal. Los cristales de cido ctrico hmedos se
redisuelven y se recristalizan al vaco. Luego pasan a la centrifuga en
donde es eliminado el licor madre de los cristales formados.
3.3 Secado
Se realiza en un equipo de lecho fluidizado, que permite retirar
humedad hasta cumplir con las especificaciones.
II.6.

TIPOS DE FERMENTACIN PARA EL ACIDO CTRICO

Hay tres tcnicas bsicas de procesos de fermentacin para el acido
ctrico:

CULTIVO DE SUPERFICIE

Se permite que un medio estril con azcar fluya en recipientes

de acero inoxidable o de aluminio, arreglados en fila en cmaras
de fermentacin estriles. La mayora de las cmaras controlan la
temperatura, la humedad relativa y la circulacin del aire. El
medio se inocula con esporas de A. Niger a una temperatura
constante de 28-30 C con una humedad relativa de 40-60 %
durante 8-12 das. El organismo crece y se extiende sobre la
superficie acidificando el medio. Al final de la fermentacin
seguida mediante la medicin del ph del medio, el licor se drena y

el acido ctrico se cristaliza. El micelio puede reutilizarse

adicionando medio nuevo.
El proceso de superficie es el mtodo mas antiguo y aunque aun
se utiliza, ha sido reemplazado en gran medida por los procesos
sumergidos.

PROCESOS SUMERGIDO

Este es el principal proceso en uso en el que se inocula el medio

seguido por la agitacin y aeracin vigorosas y controladas en grandes
fermentadores. El periodo de fermentacin se reduce bastante (3-5 das)
a 25-30 C. Despus, el licor se drena para la extraccin del acido ctrico
y el micelio se puede reutilizar.
El micelio es la masa de hifas que constituye el cuerpo vegetativo de
un hongo.
Una modificacin de este mtodo tiene un proceso en dos etapas en los
cuales inicialmente el medio se inocula primero con esporas y despus
de 3 o 4 das, el micelio se separa y adiciona al medio de produccin.
Despus de 3 o 4 mas a 25-30 C con oxigenacin, se extrae el acido
ctrico.

FERMENTACIN EN ESTADO SOLIDO

Este proceso fue descrito inicialmente por Cahn en 1935, pero a
pesar de su potencial no se ha empleado industrialmente a ningn
grado importante debido a su laboriosidad.

III.

DIAGRAMA DE BLOQUES

IV.

VI.

Resinas de Intercambio

Agua

V.
Melaza

PREPARACION DEL SUSTRATO

A. Niger

PASTEURIZACION

Aire

FERMENTACION
(6 das aprox.)

VII.
VIII.

Impurezas

Microelementos
CAL

IX.

Ac. Sulfrico

DESCOMPOSICON DEL CITRATO

X.
XI.

FORMACION DEL CITRATO

FILTRACION

Sulfato de Calcio
Micelio

XII.

Carbn activado

XIII.

FILTRACION CON CARBON ACITVADO

Ac. Citrico
EVAPORACION

XIV.

CRISTALIZACION

ENVASADO

XV.

CONCLUSIONES

XVI.
El cido ctrico si se puede elaborar mediante la fermentacin del azcar por parte de un microorganismo llamado
Aspergillus Niger
Mediante el estudio de un proceso industrial como el utilizado para la elaboracin de cido ctrico es fcilmente evidenciable
la aplicacin de conceptos propios de la ingeniera qumica.
Al final de nuestra experiencia nos dimos cuenta que este proceso es muy eficaz ya que obtuvimos un rendimiento del 50.67
%
Pudimos comprobar que en 6 das de fermentacin a 25 C podemos obtener nuestro producto.
XVII.
XVIII.
RECOMENDACIONES
XIX.
Las condiciones deben ser estrictamente cumplidas, en un ambiente esteril y con las variables adecuadas.
Asesorarnos de la disponibilidad de nuestra materia prima asi como los reactivos a utilizar.
Estimular el uso de este tipo de tecnologa para darle un mayor aprovechamiento a materia que se desecha.
XX.
XXI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
LIBROS
XXII.

1. AUSTIN, G.T. (1983) Shreves Chemical Process Industries, 5th international ed., McGraw-Hill, New York, Sydney, 597598.

XXIII.

2. CARVAJAL C., Fabricio; ROJAS D., Carlos. Diseo de un proceso del filtrado de Citrato Triclcico. Tesis Ingeniero
Qumico. Facultad de Ingeniera. Universidad del Valle. Cali (1993)

XXIV.

3. FONDO DE PROMOCION DE EXPORTACIONES. Catalogo del Potencial Exportable de la Industria Qumica en

Colombia. Bogot (1979) 147 148.

XXV.

4. McKETTA, John J., DEKKER, Marcel. "Encyclopedia of Chemical Processing and

INTERNET

XXVI.

5.http://www.lurgilifescience.com/english/nbsp/menu/portfolio/renewable_resources/citric_acid/overview/index.html

XXVII.

6. http://www.foodproductdesign.com/archive/1993/0593DE.html&prev=/

XXVIII.

7. www.pfizer.com.ar/about/em_historia.asp

XXIX.
XXX.
XXXI.

8. www.infomed.sld.cu/revistas/far/vol_34_3_00/