INFORME LABORATORIO

BIOQUIMICA

PRESENTADO POR:
Laura Gutirrez Vargas
C.c. 53094646
John Jairo Mogolln
C.C. 80069787
Edwin Len Manzano

PRESENTADO A: DIEGO ALBARRACIN

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

BOGOTA

PRCTICA 1

pH Y SOLUCIONES BUFFER

Resumen.

En el presente informe se encuentran contenidos los pasos y procedimientos

seguidos en la preparacin de soluciones Buffer cidas y bsicas, con el fin de
determinar de manera experimental el ph para estas soluciones en distintas
concentraciones, los resultados obtenidos fueron comparados con el ph terico y
as poder deducir los posibles inconvenientes y errores que se cometieron durante
el calculo experimental y establecer el por que de la variacin de los ph de estas
soluciones.Introduccin.

En esta practica de laboratorio, se trabajo con soluciones buffer, tambin

conocidas como tampn, las cuales son sustancias que afectan la concentracin
de los iones de hidrogeno (o hidronios) en el agua.
Las soluciones buffer o tampn, son disoluciones que por el agregado de
cantidades moderadoras de cidos o bases fuertes mantienen prcticamente
constante el ph.
Tambin se dice que una solucin es amortiguadora, reguladora o tampn si la
concentracin de protones H+, es decir el ph de una solucin no se ve afectada
significativamente por la adicin de pequeas cantidades o volmenes de cidos y
bases.

Los buffer consisten en sales hidroliticamente activas que se disuelven en el agua.

Los iones de estas sales se combinan con cidos y lcalis. Estas sales
hidroliticamente activas son los productos que resultan de la reaccin entre los
cidos dbiles y los lcalis fuertes como el carbono de calcio (a partir del acido
carbnico e hidrxido de calcio) o entre cidos fuertes y lcalis dbiles como el
cloruro de amonio (a partir del acido clorhdrico e hidrxido de amonio).
Un acido buffer reacciona cuando un acido dbil o base dbil se combina con su
correspondiente sal hidrolitica en una solucin de agua, se forma un sistema
amortiguador denominado buffer.

No siempre un sistema buffer es apropiado, por que los iones de algunas sales
hidroliticas pueden, por ejemplo, daar a los organismos que entran en contacto
con el.

Luego de haber obtenido las disoluciones necesarias para realizar la practica,

procedimos a hallar de manera experimental los ph de estas disoluciones. El ph no
es otra cosa que el potencial de hidrogeniones (o peso de hidrogeno), que es
regulado por un buffer o amortiguador.
Cuando un buffer es aadido al agua, el primer cambio que se produce es que el
ph del agua se vuelve constante.
El ph obtenido experimentalmente se comparo con el ph terico, el cual se obtiene
mediante el desarrollo del balance de masa y balance de carga para una solucin
reguladora tpica, llegando a una ecuacin cbica donde la incgnita es la
concentracin de iones hidronio u oxhidrilo.
El pH de las disoluciones amortiguadoras depende de la proporcin de stas entre
cido y sal, y a una proporcin dada ser siempre invariable. De aqu que, cuando
se preparan las disoluciones amortiguadoras, se puede calcular tericamente el
pH segn la frmula:

H CC

cido
sal

K o OH

C base
K
C sal

Donde Ccido es la concentracin del cido, C sal es la concentracin de la sal,

Cbase

es la concentracin de la base y K es la constante de disociacin electroltica

del cido o base segn el caso. De aqu se deduce que al cambiar las
proporciones entre las concentraciones de los componentes de la mezcla
amortiguadora, es posible preparar disoluciones con diferentes pHs dentro de los
lmites determinados por la constante de disociacin de los cidos o bases. La

proporcin de los componentes que constituyen la mezcla amortiguadora se

quedan invariables. Cada disolucin amortiguadora se caracteriza por una
capacidad amortiguadora determinada. Esta capacidad es la medida de la accin
amortiguadora de la disolucin y se expresa por el nmero de equivalentes gramo
de cido o de base que deben ser agregados a 1 L de disolucin amortiguadora
para desplazar su pH en una unidad. La capacidad amortiguadora de las
disoluciones depende de su concentracin absoluta y con la dilucin disminuye de
una manera directamente proporcional al grado de dilucin.

Metodologa.

Reactivos y materiales
* 2 Pipetas graduadas de 10 ml
* 1 Soporte para tubos de ensayo
* 14 tubos de ensayo

* 60 ml de disolucin 0.15M de fosfato potsico monosustituido

* 30 ml de disolucin 0.15M de fosfato potsico disustituido
* 28 ml de disolucin 0.1 N de cido actico
* 35 ml de disolucin 0.1 N de acetato sdico
* pH metro

Procedimiento

1. Preparacin soluciones buffer cidas:

En 6 tubos de ensayo previamente numerados, verter las disoluciones de cido

actico y acetato sdico en las proporciones dadas en la tabla 1:

Disolucin

Nmero del tubo de ensayo

1

Cantidad de cido
actico 0.1 N (ml)

Cantidad
de
acetato sdico 0.1
N (ml)

pH calculado
pH experimental

Tabla 1. Soluciones Buffer cidas

Con la ayuda del pH metro, determine el pH experimental de cada muestra.

2. Preparacin de soluciones buffer bsicas:

En ocho tubos de ensayo previamente numerados, verter las disoluciones de
fosfato potsico monosustituido y fosfato sdico disustituido en las proporciones
dadas en la tabla 2.

Disolucin

Nmero del tubo de ensayo

1

Cantidad de NaH2PO4
0.15 M (ml)

9.5

Cantidad de Na2HPO4
0.15 M (ml)

0.5

7
4

ph calculado
ph experimental

Tabla 2. Soluciones Buffer Bsicas

Con la ayuda de un pH metro, determine el pH experimental de cada muestra.

Resultados.

Diagrama de flujo

8
3
7

Numerar los tubos

de ensayo

Medir y aadir el
volumen de cido o de
base correspondiente

Medir y aadir el
volumen de sal
correspondiente
Determinar el pH de
la solucin

Tablas.

Disolucin

Nmero del tubo de ensayo

1

Cantidad de cido
actico 0.1 N (ml)

Cantidad
de
acetato sdico 0.1
N (ml)

pH calculado

3.80

4.15

4.76

5.12

5.36

5.71

pH experimental

3,48

4,11

4,70

5,28

4,95

6,32

Tabla 3. pH calculado y pH experimental para cada solucin preparada (acidas)

Disolucin

Nmero del tubo de ensayo

1

Cantidad de NaH2PO4
0.15 M (ml)

9.5

Cantidad de Na2HPO4
0.15 M (ml)

0.5

pH calculado

5.58

5.90

6.25

6.49

6.68

6.86

7.03

7.23

pH experimental*

5,68

5,72

6,04

6,30

6,80

6,70

8
3

Tabla 4. pH calculado y pH experimental para cada solucin preparada (bsicas)

Clculos.

pH calculado (acidas):

 H CC

cido

sal

K = 1.74 10 -5 M
C cido = 0.1 N x 9 mL / 10 mL = 0.9 meq-gr x (1mmol/1meq-gr) / 10 mL
C cido = 0.09 M
C sal = 0.1 N x 1 mL/10 mL = 0.1 meq-gr x (1mmol/1meq-gr) / 10 mL
C sal = 0.01 M

H 00..09
1.74 10
01

1.566 10 4

pH = -Log H = 3.8

pH calculado (bsicas):

H CC

cido

sal

K = 1.38 10 -7 M
C cido = 0.15 M x 9.5 mL / 10 mL = 1.425 mmol / 10 mL
C cido = 0.1425 M
C sal = 0.15 M x 0.5 mL/10 mL = 0.075 mmol / 10 mL
C sal = 0.0075

H 00..1425
1.38 10
0075

2.622 10 6

pH = -Log H = 5.58

Anlisis de resultados.

1. Para el clculo del pH de las soluciones buffer bsicas, se hace necesario

aclarar que las soluciones preparadas son dbilmente cidas debido a que
las sales utilizadas para su elaboracin son cidos dbiles, las especies
mono y di sustituidas del fosfato sdico tienen carcter cido ya que
provienen del cido fosfrico, el cual tiene tres hidrgenos capaces de
protonarse. Debido a lo anterior, el clculo se hace con la ecuacin para
pH cidos.
2. En la mayora de los casos el pH calculado estuvo un poco por encima del
pH experimental, lo que se puede explicar por el valor de la constante o por
del nmero de cifras significativas que se usaron en los clculos. En
general, los pH calculados coincidieron (en un rango aceptable) con los pH
medidos experimentalmente.

3. Para un mismo tipo de solucin amortiguadora, por qu vara el pH de las

diferentes soluciones preparadas?
El pH vara de acuerdo a la proporcin entre la concentracin del cido y la
concentracin de la sal

Conclusiones.

 Se lograron preparar dos soluciones buffer, una con pH entre 3 y 6 y otra

con un pH entre 5 y 7.
Fue posible determinar el pH experimental usando un pH metro
El pH terico fue calculado a partir de la constante de disociacin del cido
actico y del fosfato monosustitudo.
Al comparar los valores del pH terico y experimental se encontr que son
muy cercanos y que siguen una misma tendencia.
Bibliografa.

http://dta.utalca.cl/quimica/profesor/urzua/cap9/acidobase/acidobase.htm
http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/constantes
de
disociacion.html

RESUMEN
JUSTIFICACION

La bioqumica es una ciencia que estudia todas las formas de vida, lo que
pretendemos es adquirir conocimientos bsicos acerca de las biomoleculas y
su metabolismo comprendiendo la interaccin entre ellas, las propiedades
estructurales y funcionales de las principales molculas que intervienen en la
alimentacin y el papel que juegan en le metabolismo de los medicamentos,
esta es la clave para la correcta interpretacin y un prediccin acertada de la

DETERMINACIN DE VITAMINA C EN FRUTAS Y VERDURAS

OBJETIVOS:

Determinar la cantidad de vitamina C o acido ctrico contenida en una muestra

dada.

Determinar si los conservadores o aditivos qumicos de productos procesados

afectan la vitamina C.

Reactivos
2-nitroanilina 0.16% en actico HCI
Nitrito de sodio 0,08% en H2O
Etanol 96%
Acido oxlico 0.15%
Solucin de vitamina C, recin preparada (0.2 mg/mI)

1. Procedimiento
En este grupo tomamos la pulpa de un mandarina, Para obtener el extracto problema se
procede de la siguiente manera: En el caso de las frutas ctricas se toma 1 ml de jugo, se
pesa y luego se agregan 4 ml de cido oxlico al 0,15%, se mezcla bien y se filtra, el
filtrado se conserva para hacer la determinacin colorimtrica.

Rotular 8 tubos de ensayo y adicionar los siguientes reactivos

Fruta problema 1gr +4ml acido oxlico (0.15%) filtrar completar filtrado con 5 ml tomar 1
ml

Tubos
Condiciones

Fruta
D1

Verdura
D2

2-nitroanilina, ml

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

Nitrito de sodio, ml

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

0.1

Mezclar y esperar la decoloracin

Etanol 96%, ml

3.8

3.8

3.8

3.8

3.8

3.8

3.8

3.8

3.8

Patrn vitamina C, ml

0.1

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

cido oxlico, ml

1.0

0.9

0.8

0.6

0.4

0.2

Extracto problema, ml

1.0

1.0

Mezclar bien y dejar en reposo cinco minutos

NaOH 10%, ml

1.2

1.2

1.2

1.2

1.2

1.2

1.2

1.2

1.2

Agua destilada, ml

3.8

3.8

3.8

3.8

3.8

3.8

3.8

3.8

3.8

Se mezcla bien el contenido de cada tubo y se lee en el espectrofotmetro las

Absorbancias correspondientes a una longitud de onda de 540 nm.
Elabore la curva de calibracin e interpole las Absorbancias de sus muestras.

RESULTADOS
G

PROM

Tu
b
o
1

1.
31
6

1.
38
7

1.
13
4

1.
12
4

1.
08
7

Tu
b
o
2

1.
18
5

1.
41
6

1.
30
6

1.
33
7

1.
08
6

Tu
b
o
3

1.
18
0

1.
42
4

1.
48
3

1.
29
6

0.
93
3

Tu
b
o
4

1.
29
7

1.
15
8

1.
33
4

1.
30
1

1.
12
1

Tu
b
o
5

1.
12
3

1.
26
0

1.
42
0

1.
17
8

1.
13
3

Tu
b
o
6

1.
29
1

1.
44
3

0.
90
9

1.
37
8

0.
97
6

Tu
b
o
M

0.
01
6

0.
01
4

0.
03
6

0.
03
1

0.
00
3

EDIO

ABSORBANCIA es la cantidad de intensidad de luz que absorbe una muestra esta varia
de acuerdo a la luz el tiempo que pasa antes de llevarla a l espectrofotmetro ya que los
componentes se sientan y los resultados varan
ESPECTROFOTOMETRO es un instrumento que tiene la capacidad de manejar un haz
de Radiacin Electromagntica (REM), comnmente denominado Luz, separndolo en
facilitar la identificacin, calificacin y cuantificacin de su energa.
ste tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica (de una longitud de

onda particular) a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por
dicha muestra. Esto permite obtener informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la
muestra; midiendo la absorbancia (Abs) a distintos largos de onda (l) y graficar estos
valores en funcin del largo de onda, formando un espectrograma
Cuando se hace pasar un rayo de luz por una probeta (habitualmente un tubo
transparente estandarizado para el aparato en uso) con una solucin que se desea
analizar, algo de la luz lo atravesar y otra parte quedar "retenida" por la muestra. A lo
"retenido" se lo denomina Absorbancia, y a lo que pasa: Transmitancia, existiendo una
relacin entre ambas. Conocida una tabla de valores, es posible calcular la concentracin
de la solucin en anlisis.
Esto se puede realizar con el Fotocolormetro (se colocan filtros especficos de luz, para
que pase slo una determinada frecuencia) o con el Espectrofotmetro (tiene un prisma
que descompone la luz y permite utilizar una frecuencia especfica que es la ms til para
analizar la sustancia en cuestin).

OBSERVACIONES

Durante el proceso hubieron interferencias que pudieron haber sido contaminacin

u algn otro factor como la luz el tiempo que transcurri antes llevar la muestra al
espectrofotmetro, los componentes pudieron sentarse y al tomar los resultados
se alteraron.

Realizamos titulaciones para determinar la concentracin de cido existente.

CONCLUSIONES:

Determinamos la cantidad de vitamina C o cido ctrico

Observamos si los conservadores o el proceso de elaboracin no afectan a la

vitamina C

3. Cuestionario
1.

Compare el mtodo que utiliz con otro mtodo de determinacin de la misma

vitamina.

Determinacin de vitamina C:

El cido ascrbico o vitamina C (C6H8O6) se puede determinar por medio de una

titulacin
yodomtrica. La vitamina C es un agente reductor suave que reacciona rpidamente con
el in
triyoduro, en esta prctica se genera un exceso conocido de ion triyoduro (I3
- ) por reaccin de
yodato con yoduro, se deja reaccionar y luego el exceso de I3
- se titula por retroceso con una
solucin de tiosulfato. El mtodo se basa en las siguientes reacciones:
8I- + IO3
- + 6H+ 3I3
- + 3H2O
C6H8O6 + I3
- + H2O
_
C6H8O7 + 2H+ + 3Icido
ascrbico cido deshidroascrbico
I3
- + 2(S2O3)-2 3I- + (S4O6)-2
Tiosulfato tetrationato
2Qu ocurrira si no se decolora por completo la solucin de 2-nitroanilina al adicionar
nitrito de sodio?
El NaNO2 (nitrito de sodio) lo estas utilizando como un agente oxidante para formal la sal
de diazonio en la amina.

la reaccin es:
2-nitroanilina + NaNO2 --> 2-Nitro-benzenediazonio
hay varias causas por las cuales no se decoloro
1. lo que puede haber pasado es que tu NaNO2, lo hallas preparado mucho tiempo antes
y haya perdido su poder oxidante (cosa q es poco comn... la 2 es mpas comn).
2. otra causa es que el medio no sea lo suficientemente cido se necesita al menos una
concentracin tres veces superior a la del nitrito de sodio en protones en el medio para
que se genre el agente que permite la reaccin NO (generalmente se hace en un medio
con exceso de cido H2SO4 generalmente esto es porque se debe generar el NO in situ
en el medio:
H+ + NaNO2 --> HNO2 + Na+ (primer equivalente gastado)
H+ + HNO2 --> H2O + NO+ (segundo equivalente gastado)
(y el tercero es para mantener el equilibrio)
esto se puede saber colocando una gota del medio en papel de almidon iodulado , si
cambia a negro inmediatamente est bien (hay poder xidante NO).

3. La nitroanilina puede haberse oxidado antes produciendo un 1,2-dinitrobenceno, el

cual genera N-nitroso derivados.

2.

Cul es la funcin del hidrxido de sodio en la determinacin de la vitamina C?

La vitamina C es el cido ascrbico y el hidrxido de sodio una base, por tanto este acta
como titulante de la vitamina C.

3.

Cmo se afectara la determinacin si la muestra ha sido tratada previamente

con calor?

La vitamina C se oxida rpidamente y por tanto requiere de cuidados al momento de

exponerla al aire, calor y agua. Por tanto cuanto menos calor se aplique, menor ser la
prdida de contenido. Las frutas envasadas por haber sido expuestas al calor, ya han
perdido gran contenido vitamnico, lo mismo ocurre con los productos deshidratados. En
los jugos, la oxidacin afecta por exposicin prolongada con el aire y por no conservarlos
en recipientes oscuros

HIDRLISIS DE POLIZACARIDOS
ALMIDON GLUCOSA

B
s/n
alm
ido
n
ml

0
.
4

0
.
4

0
.
4

0
.
4

0
.
4

0
.
4

0
.
4

0
.
6

0
.
6

0
.
6

0
.
6

0
.
6

0
.
6

Ag
ua
des
tila
da

0
.
1

Na
oH
(2
4N)

Ncl
(4N
)

0
.
6

0
.
6

COLOCAR LOS TUVOS 1-6 EN BAO DE MARIA A EBULLICION Y DEJARLOS EN EL

SIGUIENTE TIEMPO
Tiem
po de
incub
acin

1
2

1
5

2
5

Finalizado el tiempo de incubacin sacar cada tubo y detener la hidrlisis

agregando
NaoH

24 N
ml
Reacti
vo3.5
dinitris
ilato

Introducir todos los tubos en bao de Mara a ebullicin durante 5 minutos

dejar enfriar y agregar 7 ml de agua destilada agitar medir tranmitancia a 540
nm utilice el B para ajustar 100% de transmitancia
1

0.02
0

0.18
8

0.05
1

0.03
0

0.01
6

0.02
6

0.34
8

0.14
8

0.29
4

0.16
6

0.15
0

0.36
1

0.26
6

0.46
6

0.38
5

0.12
5

0.21
4

0.43
3

0.62
2

0.53
4

0.24
2

0.60
1

0.78
5

0.76
2

0.70
6

0.26
4

0.84
1

0.82
2

0.84
1

0.53
7

0.34
9

0.90
4

1.31

0.64
7

grup
o
tubo

HIDRLISIS DE CELULOSA
Hidrlisis acida en ZnCL2
1

1.0
87

2.1
54

2.0
10

2.2
82

2.00
1

1.5
83

2.1
90

2.3
49

2.1
31

2.28
0

1.8
27

2.2
36

2.3
00

2.2
94

2.33
5

S/n
almidn

0.1

0.1

0.1

HCL( 4N)

0.2

0.2

0.2

Calentar
minutos

10

20

NaoH(2.
4N)

0.3

0.3

0.3

3.5
dinitro

0.3

0.3

0.3

Temperatura inicial 22c

30c x 10 minutos
G1

G2

G3

G4

G5

Tubo1

0.03
1

0.03
4

0.02
6

0.12
2

0.03
8

Tubo
2

0.07
5

0.07
2

0.06
1

0.06
2

0.06
8

Tubo3

0.12
6

0.10
9

0.11
5

0.17
5

0.12
5

Tubo4

0.15
4

0.15
6

0.17
1

0.23
1

0.16
3

Tubo5

0.20
4

0.19
1

0.20
5

0.30
6

0.19
8

Tubo6

0.29
8

0.27
8

0.27
5

0.02
3

0.26
9

Tubo7

0.02
1

0.00
6

0.04
5

0.01
5

Tubo8

0.01
3

0.00
4

0.00
4

0.03
3

Tubo9

0.00
6

0.13
8

0.10
9

0.05
2

0.22
2

Tubo1
0

0.02
9

0.29
3

0.22
2

0.00
5

0.40
9

Tubo1
1

0.03
1

0.25
4

0.22
4

0.00
5

0.10
6

Tubo1
2

0.01
6

0.09
1

0.42
0

0.03
2

0.19
3

Tubo1
3

0.03
8

0.02
1

0.10
2

0.02
6

0.07
8

Tubo1
4

0.02
9

0.01
0

0.00
1

0.03
6

0.04
2

Tubo1
5

PRACTICA # 5 EXTRACCION DE PROTEINAS EN SEMILLAS DE

LEGUMINOSAS Y CEREALES POR SOLUBILIDAD.

RESUMEN
De la siguiente practica de laboratorio podemos encontrar los diferentes pasos
para la extraccin de protenas de una sustancia determinada en este caso de la
harina de soya en las cuales encontramos albuminas, globulinas, prolaminas y
glutelinas. El rendimiento de estas extracciones los cuales se deducen de los
porcentajes de protena total
La solubilidad de una buena cantidad de protena es funcin de la fuerza ionica, el
ph y la concentracin de solvente orgnico.

OBJETIVOS

Identificacin de la solubilidad de los diferentes tipos de protena}

Compara los resultados de la literatura consultada con los obtenidos en la
practica

INTRODUCCION

La extraccin de protenas es considerada a menudo como un paso preliminar

para una subsiguiente purificacin o para un estudio electrofortico, pero de hecho
constituye un paso crucial para el estudio de protenas vegetales, ya que el
procedimiento de extraccin determina la naturaleza y la estabilidad de las
protenas extradas, lo que a su vez determina la calidad y la validez de los
resultados.
La extraccin con buffers acuosos de baja fuerza inica nos permite recuperar las
protenas solubles citoplsmicas y de los espacios intercelulares, mientras que con
buffers de alta fuerza inica tambin extraemos las protenas ligadas a la pared
celular.
Acontinuacion explicaremos algo sobre los materiales que vamos a utilizar en el
laboratorio
Reactivo Biuret: El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de
protenas, pptidos cortos y otros compuestos con dos o ms enlaces peptdicos
en sustancias de composicin desconocida.
Est hecho de hidrxido potsico (KOH) y sulfato cprico (CuSO4), junto con
tartrato de sodio y potasio (KNaC4O64H2O). El reactivo, de color azul, cambia a
violeta en presencia de protenas, y vira a rosa cuando se combina con
polipptidos de cadena corta. El Hidrxido de Potasio no participa en la reaccin,
pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar.
Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un mtodo colorimtrico que permite
determinar la concentracin de protenas de una muestra mediante
espectroscopa ultravioleta-visible a una longitud de onda de 560 nm (para
detectar el in Cu2+).

Procedimiento
1. Se toma un tubo de ensayo y se colocan tres centmetros cbicos de
albmina de huevo, es decir la parte transparente.
2. Se aaden 2 centmetros cbicos de solucin de hidrxido de sodio al 20%.
3. Ms adelante se agregan 4 5 gotas de solucin de sulfato cprico diluida
al 1%.
4. El resultado es que la mezcla se torna de color violeta, indicando la
presencia de protenas.

METODOLOGIA

H2O desmineralizada
NaCl al 1 %
Etanol al 75%
Naoh al 0.1 N
Reactivo de Biuret
Solucin de concentracin conocida

Procedimiento en Diagrama de flujo

RESULTADOS

TABLA
Condiciones B 1

10 11 12 13 14

0.1 0.3 0.5 0.7 0.9 1.2 -

Sol patrn
albumina

Fraccin
albumina,
ml

Fraccin
globulinas

Fraccin
prolaminas

Fraccin
glutelinas

H2O
destilada,
ml

2 1.9 1.7 1.5 1.3 1.1 0.8 1.5 1.0 1.5 1.0 1.5 1.0 1.5 1.0

0.5 1.0

0.5 1.0

0.5 1.0

0.5 1.0

REACTIVO DE BIURET EN TODOS LOS TUBOS 4 ML

GRU
PO
1

0,031
0,075
0,125
0,154
0,204
0,298
0,021
0,013
0,006
0,029
0,031
0,016
0.038
0,029

0,034
0,072
0,109
0,156
0,191
0,278
0,006
0,004
0,138
0,293
0,054
0,091
0,021
0,010

0,026
0,061
0,115
0.0171
0,205
0,275
0,045
0,004
0,109
0,222
0,224
0.420
0,102
0,061

0,122
0,066
0,072
0,231
0,306
0,023
0
0,033
0,052
0,005
0,032
0,026
0,036
0,063

0,032
0,068
0,125
0,163
0,098
0,296
0.015
0
0.222
0,409
0,106
0,193
0,078
0,048

TUBO
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14

GRAFICA DE RESULTADOS

COLOR DE LOS TUBOS DESPUES DE UN BAO DE A 30 C

ANALISIS DE RESULTADOS
En el resultado de la practica determinamos la concentracin de protenas en la
harina de soya y el nivel de absorbancia atraves de un fotmetro. Tambin los
diferentes tipos de protena que en ella se encuentra como la albumina, globulinas
prolaminas y glutelinas, dando respuesta de su solubilidad.
Por medio de la grafica anterior se pudo determinar la cuantificacin de las
fracciones obtenidas por muestra.

BIBLIOGRAFIA

http://www.dclmexico.com/espa%F1ol/proteina_total.pdf

MODULO QUIMICA ORGANICA UNAD

PRACTICA DE LABORATORIO NUMERO 6 ESTUDIO CINETICO DE LA

UREASA

RESUMEN
La ureasa es una enzima que se utiliza como agente cataltico y en este trabajo se
pretende determinar varios factores caractersticos de la ureasa como su
temperatura y ph caracterstico en este caso nos permite el estudio sobre la
temperatura y la comparacin de micromoles de urasa vs temperatura.
Objetivos

Determinar la concentracin de ureasa y la temperatura sobre la velocidad

de reaccin

INTRODUCCION
Las reacciones qumicas que ocurren en los sistemas vivientes son tan variadas
como complejas. Sin embargo, la naturaleza provee velocidades de reaccin en
condiciones por dems suaves, que haran avergonzar al mejor qumico. La
mayora de las reacciones que ocurren en los sistemas vivos son catalizadas por
protenas conocidas con el nombre de enzimas. Cientos de enzimas han sido
aisladas y probablemente existen cientos de miles en la naturaleza. Su estructura
es muy compleja, y puede ser representada como se muestra en la figura 4.
Las enzimas reciben su nombre en funcin de su actividad especfica, as, por
ejemplo, la enzima "ureasa" cataliza con eficiencia la hidrlisis de la urea, las
proteasas actan sobre las protenas, las amidasas sobre las amidas, etc. Todas
las enzimas desde el punto de vista qumico son protenas, pero pueden
asociarse con substancias no protenicas, llamadas coenzimas o grupos
prostticos, que son esenciales para la accin de la enzima. A veces las enzimas
son inactivas catalticamente, si no se encuentran en presencia de ciertos iones
metlicos.

A la luz de muchos estudios se ha logrado establecer que no toda la molcula de

protena presenta actividad cataltica, sino nicamente una regin relativamente
pequea, la cual se denomina centro activo. Los mecanismos de reaccin de las
enzimas son muy complejos, implicando un nmero de etapas elementales cada
una de las cuales puede incluir interacciones complejas entre varios grupos de las
molculas de la enzima y el sustrato. En las reacciones catalizadas por enzimas
las velocidades de reaccin, as como los mecanismos se ven afectados por
cambios en la concentracin, el pH y la temperatura.

METODOLOGIA
DIAGRAMA DE FLUJO

Condiciones

Tubos
B

4.5

4.5

4.5

4.5

4.5

4.5

HgCl2, gotas

Temperatura de incubacin,
C

16

16

37

60

92

Urea 0.25 M, ml
Buffer de fosfato pH ptimo,
ml

Colocar cada tubo en bao de agua a la temperatura indicada

por cinco minutos y sin sacarlos agregar.
Solucin de ureasa, ml

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

Agitar e incubar por 25 minutos a la temperatura correspondiente

HgCl2 1%, gotas

6M
L

5M
L

Titular con HCl (normalidad conocida)

Resultados, ml de HCl
5M
L

Titulacin con acido clorhdrico

6ML 5M
L

6ML

3.9

3.4

0,4

1.6

1.2

2.5

0,3

1.1

1.6

0.5

0.6

0.5

0.7

0.3

0.3

0.5

0.4

5ml

6ml

5ml

6ml

5ml

6ml

1ml

1.3ml

1,2ml

2ml

2,8ml

Concentracin del acido clorhdrico es de 0,12 N

ANALISIS DE RESULTADOS

Segun los resultados obtenidos la ureasa tiene un comportamiento optimo

a los 60C ya que a otras temperaturas es inestable y no se puede
determinar su funcin adecuada y no permite neutralizar el acido que se
agrega.

BIBLIOGRAFIA

Modulo de bioqumica

http://www.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/bioqui
mica/guia_5_2.pdf