UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS

CARRERA DE INGENIERÍA BIOQUÍMICA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA I

NOMBRE: Gavilánez Christian, Escobar Mercy, Judith Valle

SEMESTRE: Quinto “U”
PROFESOR: Dra. PHD. Gloria Serrano PRÁCTICA N0:2
AYUDANTE: José Burgos
FECHA: Mayo 12de 2015

TEMA: DETERMINACION DE PROTEINAS (REACCION DE BIURET).

1.- INTRODUCCION

La reacción de biuret la producen los péptidos y las proteínas, pero no los

aminoácidos, ya que se debe a la presencia del enlace peptídico (- CO - NH -) que se
destruye al liberarse los aminoácidos. Cuando una proteína se pone en contacto con
un álcali concentrado, se forma una sustancia compleja denominada Biuret (Mora,
1990).

La reacción debe su nombre al biuret, una molécula formada a partir de dos de

urea (H2N-CO-NH-CO-NH2), que es la más sencilla que da positiva esta reacción. La
presencia de proteínas en una mezcla se puede determinar mediante la reacción del
Biuret. El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solución acuosa alcalina (de NaOH o
KOH) La reacción se basa en la formación de un compuesto de color violeta, debido a
la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de
electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos
presentando un máximo de absorción a 540 nm. Da positiva esta reacción en todos
los compuestos que tengan dos o más enlaces peptídicos consecutivos en sus
moléculas(Franco & Yepes, 2000).

2.- OBJETIVO GENERAL

  Determinar la presencia de proteínas en alimentos (leche, suero de queso y
Seven up vite mediante la reacción de Biuret

2.1.- OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Identificar los alimentos que poseen mayor contenido proteico

 Analizar las reacciones de las proteínas al añadir la reacción de Biuret (Cu2SO4)

3.- MATERIALES

- Guantes - Hidroxido de Sodio

- 3 tubos de ensayo - Vaso de precipitado

- Gradilla - 5 ml sulfato de cobre (reactivo Biuret)

- Pipeta graduada - Alimentos: leche, suero de queso y

Seven up vite
- Agua destilada

4.- PROCEDIMIENTO

Diagrama Nº1.- Determinación de Proteínas

Elaborado por: (Gavilánez; Escobar; Valle; 2015)

Fuente: Lab. de Bioquímica I, UTA, FCIAL
5.-DATOS

Cuadro Nº1

Alimento Grafico Observaciones

Leche + H2O + Cu2SO4 +

NaOH

Leche -Se tornó de un color

amarillo a un color azul
muy fuerte

Suero de queso + H2O +

Cu2SO4 + NaOH
Suero de queso
-Se tornó de un color
amarillo a un color azul
muy leve

Seven up vite + H2O +

Cu2SO4 + NaOH
Seven up vite
-Se tornó de un color
incoloro a un color celeste

Elaborado por: (Gavilánez; Escobar; Valle; 2015)

Fuente: Lab. De Bioquímica I, UTA, FCIAL

6.- RESULTADOS

Cuadro Nº2 Determinación de Proteínas

Alimento Prueba
Leche +
Suero de queso +
Seven up vite -
Elaborado por: (Gavilánez; Escobar; Valle; 2015)
Fuente: Lab. De Bioquímica I, UTA, FCIAL
7.-DISCUSION
El método de Biuret es aquella que permite determinar si una mezcla tiene enlaces
peptídicos en él o no, para ello se identificó la presencia de proteínas en alimentos
(leche, suero de queso y Seven up vite) mediante la aplicación del método de Biuret.

La reacción de Biuret se basa en la formación de un complejo coloreado entre el Cu 2+ y

los grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico (1Cu 2+ se acompleja con 4
NH), esta reacción provoca un cambio de coloración: violeta purpura o violeta rosado.
(Failor ,2003).

Al analizar los resultados con los tres alimentos se observó la presencia y ausencia
de proteínas.

En la leche se observó que al añadir el reactivo Biuret y el NaOH, la caseína (proteína

presente en la leche y sus derivados) se tornó de un color amarillo a un color azul muy
fuerte, lo que confirmo que la presencia de proteínas en la caseína es positiva. Esto se
debe a la presencia de un medio acido ya que las proteínas sufren una
desnaturalización y es por eso que cambia levemente de color.

En el suero de queso al estar compuesto por proteínas solubles, son sensibles al

cambio de Ph, entonces al mezclar con el reactivo Biuret y NaOH, se desnaturalizo
fácilmente la proteína, generando el cambio de color de amarillo a un azul muy leve lo
que confirma la presencia de proteínas.

Mientras que el Seven up vite no se observó la presencia de proteínas debido a su

coloración ya que paso de un color incoloro a celeste, esto se debe que en su
estructura no hay presencia de enlaces péptidos dando una prueba negativa.

Se señala que el color depende de la naturaleza de las proteínas: proteínas y péptidos

dan un color rosado y la gelatina da un color azul, en este caso la proteína que se
utilizo fue la gelatina ya que se utiliza en la fabricación de alimentos para el
enriquecimiento proteínico (Peretó, J; 2007).

8.-CUESTINARIO
1. Que alimento (leche, suero de queso o seven up vite) posee mayor contenido
proteico? Por qué?

Mayor contenido proteico tiene la leche ya que el suero de leche se deriva del proceso
de hacer queso que a su vez es un derivado de la leche y la soda seven up no posee
ninguna proteína. La leche contiene cientos de tipos de proteínas, la mayoría de ellas
en muy pequeñas cantidades. Los tres grupos principales de las proteínas en la leche
son distinguidos por sus amplias diferencias en cuanto a comportamiento y forma de
existencia se refiere. Las caseínas son fácilmente precipitadas de la leche en una
variedad de formas, mientras que las proteínas del suero usualmente permanecen en
solución. De otro lado, las proteínas que conforman la membrana de los glóbulos
grasos se adhieren, tal como su nombre lo indica, a la superficie de los glóbulos grasos,
y solamente son liberadas por acción mecánica, como por ejemplo, durante el batido
de la crema para producir la mantequilla (Bartrina & Majem, 2005).

2. ¿Cómo podríamos saber que una sustancia desconocida es una proteína?

Para saber si una sustancia desconocida, es una proteína se utiliza el Reactivo de Biuret
es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos o
más enlaces peptídicos en sustancias descomposición desconocida(Franco & Yepes,
2000).

3. ¿Qué coloración da la reacción de Biuret?

La reacción Biuret produce un complejo color purpura al reaccionar con una solución
alcalina de sulfato de cobre. Quedando en el fondo del tubo una tonalidad azul cielo
reacción positiva. Precipitando a una coloración amarilla la reacción se torna negativa
al no haber presencia de proteínas.

4. ¿Una proteína coagulada podría dar la reacción de Biuret?

Si debido a que el reactivo reacciona con cualquier proteína, liquida o sólida, por
ejemplo cuando se hace la cuantificación de proteínas en suero (liquida).

9.-CONCLUSIONES
- Se determinó la presencia de proteínas en alimentos (leche, suero de queso y Seven
up vite mediante la reacción de Biuret Biuret, el cual en la leche y suero de queso
muestra la presencia de péptidos que presentan enlaces peptídicos (dos o más) y una
coloración azul muy fuerte y en el Seven up vite presento una coloración celeste muy
clara y al final un precipitado amarillo debido a que no existen proteínas

- Se identificó los alimentos que poseen mayor contenido proteico el cual primero se
encuentra la leche ya que contiene las caseínas que es fácilmente precipitadas de la
leche en una variedad de formas, después el suero de queso ya que permanece en
solución y al final el Seven up vite ya que no contiene enlaces proteicos.

-Se analizó las reacciones de las proteínas al añadir la reacción de Biuret (Cu2SO4, el
cual el reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solución acuosa alcalina en este caso
NaOH. La reacción consiste en la formación de un compuesto de color violeta, debido a
la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de
electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos.

10.-BIBLIOGRAFIA

-Bartrina, J. A., & Majem, L. S. (2005). Leche, lácteos y salud. Ed. Médica Panamericana.
Mexico, pag 20 Retrieved from https://books.google.com/books?id=RnR9M
8HTOngC&pgis=1

-Failor, 2003. Reaccion de Biuret. Recuperado de http://mazinge

r.sisib.uchile.cl/repositorio/lb/ciencias_quimicas_y_farmaceuticpenacchiottii0/capitulo
01/07.html

-Franco, A. G., & Yepes, P. N. M. (2000). Experimentos de Química Orgánica. España:

ELIZCOM S.A.S. pág. 201 Retrieved from https://books.google.com/books?id
=Otm5wsEeKYEC&pgis=1

-Peretó, J; 2007. Coloración de las proteínas. Recuperado de

https://books.google.com/books?id=TL98uAXZ3JQC&pgis=1

11.-ANEXOS
 Suero de queso

Seven up vite

Leche

Figura Nº1 Suero de queso, Leche, Seven up vite + H2O

Seven up vite

Suero de queso

Leche

Figura Nº2 Suero de queso, Leche, Seven up vite + H2O + Cu2SO4 + NaOH