Instituto OHiggins

Hermanos Maristas
Rancagua

Laboratorio
Biologa
Enzimas

Marco Terico:
Las enzimas son las protenas encargadas de catalizar las
reacciones bioqumicas del metabolismo. Las enzimas no alteran el
equilibrio de dichas reacciones ni tampoco el balance enrgico,
slo aceleran el proceso. Se las puede clasificar en:
xido-reductasas: estas enzimas estn vinculadas con las
reducciones y oxidaciones biolgicas que intervienen en los
procesos de fermentacin y de respiracin. Estas son esenciales en
ciertas cadenas metablicas como por ejemplo la escisin
enzimtica de la glucosa y en la produccin de ATP.
Transferasas: estas enzimas son las encargadas de catalizar la
transferencia de una porcin de molcula a otra. Adems, estas
enzimas son las que actan sobre distintos sustratos, transfiriendo
glucosilo, sulfat, amina, aldehdo, entre otros grupos
Hidrolasas: estas enzimas actan sobre las molculas de
protoplasma, tales como las de grasas, de glicgeno y de
protenas.
Isomerasas: estas son las que actan sobre ciertas sustancias a
las que transforman en otras ismeras, lo que significa que tienen
la misma frmula emprica pero un desarrollo diferente.
Liasas: estas enzimas son las que actan sobre los enlaces entre
los tomos de carbono, carbono y oxgeno, carbono y azufre o
carbono y nitrgeno
Ligasas: son las que permiten que dos molculas se unan. Esto se
da al mismo tiempo en que el ATP se degrada y libera energas que
son las necesarias para que dichas molculas puedan unirse
Un catalizador es una sustancia que disminuye la energa de
activacin de una reaccin qumica. Al disminuir la energa de
activacin, se incrementa la velocidad de la reaccin. La mayora
de las reacciones de los sistemas vivos son reversibles, es decir,
que en ellas se establece el equilibrio qumico. Por lo tanto, las

enzimas aceleran la formacin de equilibrio qumico, pero no

afectan las concentraciones finales del equilibrio.
Los mecanismos de la actividad enzimtica son 5, primero el
sustrato hace contacto con el centro o sitio activo, a partir de esto
se forma un complejo intermedio llamado enzima-sustrato la
molcula de sustrato se transforma por reorganizacin de los
tomos, por rotura, o por combinacin de varias molculas de
sustrato , luego el sustrato transformado, los productos de
reaccin se liberan de la molcula de enzima y por ltimo la
enzima ahora libre puede reaccionar con otras molculas de
sustrato. Hay factores que afectar la actividad enzimtica, entre
estos esta:
La temperatura: La actividad enzimtica se incrementa al
aumentar la temperatura, hasta que la enzima se desnaturaliza.
PH: En este caso la enzima es ms activa alrededor del PH 6
Concentracin del sustrato: Al aumentar la concentracin del
sustrato, la velocidad de reaccin se incrementa, hasta que se
ocupan todos los centros activos
Inhibidores: inhibidor competitivo donde este compite con el
sustrato por el mismo centro activo de la enzima y por otro lado la
inhibicin no-competitiva donde el inhibidor se une a la enzima
en un centro de unin diferente al centro activo de la enzima.
Las coenzimas son cofactores orgnicos
no proteicos, termoestables, que unidos a
una apoenzima constituyen la holoenzima o
forma catalticamente activa de la enzima. Tienen en general
baja masa molecular y son claves en el mecanismo de catlisis,
por ejemplo, aceptando o donando electrones o grupos
funcionales, que transportan de una enzima a otra.
A diferencia de las enzimas, las coenzimas se modifican durante
la reaccin qumica; por ejemplo, el NAD+ se reduce

a NADH cuando acepta dos electrones (y un protn) y por tanto se

agota; cuando el NADH libera sus electrones se recupera el NAD+,
que de nuevo puede actuar como coenzima.

Introduccin:
Las clulas llevan a cabo simultneamente una gran cantidad de
reacciones qumicas necesarias para la vida. Muchos de los
productos de esas reacciones se necesitan inmediatamente, y si no
fuera por la participacin de las enzimas, algunas reacciones no se
produciran tan rpido.
Las enzimas, en su mayora protenas o RNA (riboenzimas), son
catalizadores qumicos que agilizan una reaccin que envuelve la
formacin o rompimiento de enlaces qumicos.

Objetivos:
Comprobar como la temperatura y el pH afecta el funcionamiento
de una enzima durante el proceso de reaccin qumica,
observando cada paso del experimento utilizando ciertos
vegetales.

Hiptesis:
El pH y la temperatura determinan el funcionamiento de una
enzima, la cual baja el nivel de activacin de la reaccin
provocando que aumente la velocidad; ya que, a alta temperatura
de la enzima, esta perder sus propiedades, o sea, se
desnaturalizara no teniendo efecto en la reaccin.

Diseo Experimental:
Materiales:
Perxido de Hidrogeno
Acelga

 Championes
Tomate
Mortero
Tubos de Ensayo
Panti
Vaso Precipitado
Goteros
Hielo
Agua hervida
Agua a temperatura ambiente
Procedimiento:
1. Para preparar los homogenados, corten pedazos las muestras
de acelga y tomates
2. Usando mortero, muele el material con un poco de agua
hasta diluir parte de la muestra; no muela excesivamente
para que no queden pedazos muy pequeos del material
3. De ser necesario filtre el macerado con una gasa o panti.
4. Coloque cada homogenado en 3 tubos de ensayos.
5. Mantenga los tubos a las siguientes temperaturas:
Tubo 1: 70C x 15 Min.
Tubo 2: 37C x 15 Min.

Tubo 3: Hielo x 30 Min.

Tubo 4: T ambiente.
6. Usando un gotero, coloque 5 gotas de perxido de hidrogeno
en cada tubo de ensayo.
Procedimiento 2:
1. Rotule 3 tubos de ensayos A, B y C.
2. Aada el homogenado de champin a cada tubo.
3. Aada soluciones 3M, de HCl y 3M de NaOH a los tubos y
agite suavemente hasta mezclar.
4. Aada 3ml. Agua oxigenada a cada tubo.
5. Observe los resultados.

Resultados:
Procedimiento 1

Hoja
picada,
ms
agua en
el
mortero

Se filtra con la panti en un

vaso precipitado y luego y se
ponen en cada tubo de
ensayo.

Se ponen a las temperaturas correspondientes

Tubos a 70C,
por 15 minutos

Tubos a a 4C
por 30 minutos

Tubos a 37C,
por 15 minutos

Se le agregan gotas de perxido de

hidrogeno

1
2

3
Tubo 3 se encontraba en una temperatura de
37C anteriormente en el cual se observa
una alta actividad enzimtica.
Tubo 2 se encontraba a una temperatura de
70C anteriormente, no se observan cambios
por lo cual decimos que se desnaturalizo la
enzima.

Tubo 1 se encontraba a temperatura

ambiente, se observa un cambio por lo tanto
la enzima conserva sus propiedades.
Tubo 4 se encontraba a una temperatura de
4C anteriormente, se observan muy pocos
cambios con lo que decimos que las enzimas
estn adormecidas.

Tomate por picar,

en el mortero

Se filtra con la panti en

el vaso precipitado y se
ponen en cada tubo de
ensayo.

A cada
tubo se le
agregan
las gotas
de
perxido
de
hidrogeno
para

Tubo 1 se encontraba durante 15 minutos

a 37C, se observa una alta actividad
enzimtica.
Tubo 2 se encontraba durante 30 minutos
en el hielo, se observa muy poca actividad
por lo cual decimos que estn
adormecidas las enzimas.
Tubo 3 se encontraba a una temperatura
ambiente, observamos actividad
enzimtica, la enzima no pierde sus
propiedades.
Tubo 4 se encontraba a 70C durante 15

Procedimiento 2

Champin
molido en el
mortero ms
agua.

Se le agrego a
los tubos:
Tubo 3: HCl
Tubo 4: Neutro
Tubo 5: NaOH

Se le agrego
perxido de
hidrogeno a
cada tubo
4

5 se le haba agregado un pH
Tubo 5, al cual
bsico, se nota poca reaccin enzimtica,
decimos que las enzimas deben estar
adormecidas pero no han perdido del todo sus
propiedades.

Tubo 4, el cual se mantuvo con un pH neutro

fue el que ms reacciono, sea tubo ms
actividad enzimtica.
Tubo 3, el cual se le agrego un pH acido, no se
observa actividad enzimtica probablemente

Procedimiento 1:
Homogen
ado
Tomate

Acelga

Reaccin al aadir gotas de perxido de

hidrogeno
Pudimos observar que no produjo gran
cantidad de burbujas, o sea, las enzimas
no bajaron significativamente el nivel de
energa en la reaccin.
Pudimos observar que a diferencia del
tomate, se produjo gran cantidad de
burbujas por lo que actividad enzimtica
fue alta.

Procedimiento 2:
Tub
o

Tiempo que toma la reaccin en

completarse.

Descripcin
comparativa de las
reacciones.

A
B
C

Anlisis:
Procedimiento 1:
1. Qu ocurri al aadir el perxido?
Al aadir a cada tubo de ensayo perxido, en alguno de ellos pudimos
observar cambios, esto dependa de la temperatura que tenan los mismos,
obteniendo como resultado que los tubos con altas o bajas temperaturas no
reaccionaban al aadir este qumico, por otro lado, las muestras con
temperatura ambiente o a 37 C presentaban una reaccin, dando cuenta
de la participacin de las enzimas en presencia del perxido.

2. Ocurri lo mismo en todas las muestras?

No, como dije anteriormente, las enzimas depende de la variable
temperatura; por lo que en las diferentes muestras de clulas vegetales no

ocurrir lo mismo, o tendrn la misma respuesta al perxido debido a la

temperatura a la que se encuentran.

3. Por qu se forman burbujas?

Las burbujas que salen se debe ya que al aadir el perxido, las enzimas lo
diluyen convirtindolo en oxigeno, de ah la espuma; esto suceder siempre
donde las enzimas mantengan sus propiedades.

4. Qu otro organismo podran usarse para esta prueba?

Todos los organismos que presenten enzimas a una temperatura en que
pueda reaccionar con la sustancia utilizada.

5. Por qu se prepararon los homogenados? Por qu no se

aadi el perxido directamente a los tejidos sin macerarlos?
Se debe preparar los homogenados ya que es necesario romper la
membrana plasmtica para poder tener acceso al citoplasma, lugar donde
se encuentra la mayor parte de las enzimas, las que posteriormente
reaccionarn.
Si agregamos perxido directamente a los tejidos, sin molerlos o
macerarlos, lo mas probable es que no haya reaccin alguna o si es que lo
hay sea muy pequea, ya que lo que estara en contacto con la sustancia
sera la membrana plasmtica donde no encontramos una gran cantidad de
enzimas para que posteriormente acten.

6. Explique por qu la gran mayora de las especies de plantas y

animales producen la enzima catalasa.
La catalasa es una enzima que se encuentra en las clulas de los tejidos
animales y vegetales. La funcin de la catalasa en los tejidos es necesaria
porque durante el metabolismo celular, se forma una molcula toxica que es
el perxido de hidrogeno, H2O2. La catalasa aumenta la velocidad de la
descomposicin del perxido de hidrogeno o agua oxigenada
aproximadamente 1000 millones de veces. Adems, cumple una funcin
protectora contra determinados microorganismos patgenos, sobre todo
anaerobios. Las bacterias anaerobias, mueren al estar en contacto con
oxgeno, es por esta razn que el oxgeno producido por esta enzima tiene
efecto bactericida sobre estos microorganismos.

Procedimiento 2:
1. Cmo se relaciona el pH y la actividad enzimtica?
2. La enzima del estmago funcionan ptimamente a un pH de
2. Cmo se afectara la digestin si el pH aumenta a 4?

3. De que otra manera se podra explorar el funcionamiento de

las enzimas estudiadas en el laboratorio?
4. Pueden mencionar otras enzimas que actan en nuestro
cuerpo?
5. Qu efecto podra tener una fiebre alta prolongada sobre el
funcionamiento de las enzimas?
6. Conocen alguna condicin mdica que se deba al mal
funcionamiento de la enzima?

Conclusin:
1. Comprobamos nuestra hiptesis de manera positiva, por los
resultaos obtenidos pudimos comprobar que en los dos casos
a alta temperatura, (70C) la enzima se desnaturalizo sea
perdi todas sus propiedades.
2. Con este trabajo practico, se pudo observar la actividad
enzimtica (evidenciada con la aparicin de burbujas) tiene
una temperatura limite y una ideal, a medida que se sube de
esta temperatura ideal va perdiendo sus propiedades
llegando hasta desnaturalizarse pasado aproximadamente los
70C.
3. Tambin observando los resultados del procedimiento 1,
podemos notar que la temperatura ideal se podra decir que
son los 37C; temperatura que corresponde a la ideal del
cuerpo humano; por lo cual las enzimas tiene condiciones
optimas para reaccionar en el cuerpo humano.
4. Tambin pudimos observar que el pH afecta en la reaccin de

una enzima, observando los resultados podemos decir que a

pH acido provoca que la enzima pierda sus propiedades sea
se desnaturalice; mientras que a pH neutro la encima efecta
su trabajo efectivamente y con un pH bsico disminuye su
potencia de reaccin probablemente perdi parte de sus
propiedades; sea la enzima tambin tiene un Ph ideal y uno

de limite.