body feed filtration=filtrado por adicin continua

Titulo de una solucin

El ttulo de una solucin es el peso de alguna substancia que equivale
qumicamente a 1 ml de dicha solucin. As, una solucin de nitrato de plata,
que posea un ttulo de 1 mg de cloruro, contiene nitrato de plata en cantidad
suficiente para que cada mililitro de solucin reacciones completamente con
dicho peso de ion cloruro. El ttulo se podr haber expresado tambin en
miligramos o en gramos de cloruro de potasio, cloruro de bario, ioduro de
sodio o de cualquier otro compuesto que reaccione con el nitrato de plata. La
concentracin de las soluciones de los reactivos que se utilizan en los
laboratorios industriales para el anlisis de rutina de muchas muestras, se
suelen expresar con ventaja en funcin de su ttulo.

Filtracin con Tierra de Diatomeas:

Conceptos innovadores de un solo uso
para la clarificacion de cultivos
celulares mamiferos de alta densidad.

Figura 1: principio de filtracin de filtracin cuerpo de alimentacin dinmico (DBF) con tierra
de diatomeas (DE) (izquierda) y la filtracin convencional (derecha)

En la ultima decada, los fabricantes biofarmaceuticos han demostrado mejoras

importantes en la produccion del anticuerpo monoclonal (Mab), obteniendo
productos con concentraciones entre 5-10 g/l empleando la tecnica de
alimentacion por fed-batch para cultivos celulares mamiferos.

Con bioreactores de 2.000 L ya disponibles en el mercado se hace cada vez

ms posible la produccion de estas biomoleculas.
Otros acontecimientos recientes en la industria biofarmacutica - por ejemplo,
medicamentos para indicaciones ms pequeas y frmacos ms potentes que permiten
dosis ms bajas - estimularn an ms la demanda de instalaciones de
fabricacin ms pequeos y ms flexibles.

A pesar que el uso de la tecnologa en general ha madurado

considerablemente a lo largo de los ltimos aos, algunas operaciones de
unidad (p. ej., extracion de clulas) an necesitan ms atencin para hacerse ms
econmicas y robustas.

Cuerpo de filtracin para fraccionamiento de plasma

Cuando miramos a otras industrias que tienen similares necesidades de proceso
- como el fraccionamiento de plasma industria - nos encontramos con que
suelen utilizar cuerpo de filtracin para la clarificacin de soluciones con alto
contenido en slidos. El primer uso de tierra de diatomeas (DE) como una ayuda de
filtro en el fraccionamiento de plasma humano se inform hace ms de cinco dcadas
( 3 ). Desde entonces, un nmero de procesos de fabricacin para la produccin de
inmunoglobulina intravenosa (IVIG), albmina y factores de coagulacin se han
desarrollado sobre la base de que la tecnologa ( 4-6 ). Fraccionamiento utiliza los
principios de la precipitacin selectiva por el ajuste del pH, la fuerza inica, la adicin de
alcohol, y los cambios de temperatura. Los precipitados se separan por filtracin en
profundidad a menudo en combinacin con tierra de diatomeas, que se aade como una
ayuda para aumentar rendimientos de filtro.
Recientemente, los principios de filtracin por cuerpo de alimentacin se han probado para
la cosecha de cultivos de clulas, con resultados prometedores ( 7 ). Nuestro objetivo fue
evaluar la tecnologa como un potencial de uso nico alternativa a las centrifugadoras y
filtros de profundidad. Aqu se describen los hallazgos ms interesantes que hemos
obtenido usando un nmero de lneas celulares y medios de cultivo, que fueron
amablemente proporcionados por diferentes empresas de biotecnologa. Junto con
Rentschler Biotechnologie GmbH, Sartorius Stedim Biotech se prob las condiciones
optimizadas en un proceso de produccin de cultivo de clulas 600-L para evaluar la
escalabilidad de la tecnologa de filtracin del cuerpo de alimentacin.

FUNCIONAMIENTO DE LA FILTRACION POR CUERPO DE ALIMENTACION

Cuando la concentracin de slidos o coloides es demasiado alta en lquidos
biolgicos trbidos de proceso que necesitan clarificacin, la torta con filtro que se
forma sobre la superficie de un filtro se hace impermeable y bloquea el filtro (la Figura(el
Nmero) 1, el derecho). Adicin de tierras diatomeas DE altamente poroso crea una

torta de filtro ms permeable, lo que impide el bloqueo u obstruccion (Figura 1,

izquierda).
El importe mnimo de la DE para garantizar la filtracin suave depende de la concentracin
de partculas.Experimentos a escala de laboratorio con muchos diferentes lneas celulares
de mamferos, medios de cultivo, y viabilidades revel una correlacin entre el peso celular
hmedo (WCW) y la cantidad requerida de DE a pH constante (datos no mostrados). Para
todos los cultivos probados, la concentracin ptima DE estaba en el intervalo de 40-50%
de WCW. En todos los casos, la relacin de coadyuvante de filtracin podra reducirse de
manera significativa a una gama de 20-30% cuando el pH se redujo a pH 5.

La precipitacin de pH baja mejora resultados de clarificacin.

Diferencias de rendimiento entre acidificada (pH 4.3 a 5.5) y fluidos de cultivo de clulas
neutrales para otras tecnologas de eliminacin de clulas, tales como microfiltracin ( 4 ) y
la filtracin de profundidad ( 5 ) pueden explicarse por la precipitacin de partculas ms
pequeas a niveles de pH ms bajos. La solubilidad de los desechos celulares y las
impurezas cargadas negativamente tales como el ADN y las protenas de la clula
husped ( 6 ) disminuyen a lo largo con el pH. La figura 2 muestra la media de distribucin
de tamao de partcula por tres sobrenadantes de cultivo celular libre de clulas diferentes
a pH neutro (lnea verde) y despus de que el pH de esas culturas se redujo a pH 5 (lnea
roja). La reduccin del pH conduce a la formacin de partculas ms grandes y hace que
las partculas submicrnicas tpica (<1 m) presentes a pH 7,0 desaparecen por
completo. Por lo tanto, la filtracin del cuerpo de alimentacin se beneficiara claramente
de pH baja.