UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE COAHUILA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

Lic. Químico Farmacobiólogo.

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Dr. Sendar Daniel Nery Flores.

Reporte No. 8
Ensayo de toxicidad aguda sobre Eisenia foetida

Equipo:
López Zuñiga Jenifer Lizeth.
Vazquez Alvarado Brenda Guadalupe.
Oliveira Silva Isabella Carolina.

Fecha de realización: 25/10/2023

Fecha de entrega: 01/11/2023

 Reporte No. 8

Ensayo de toxicidad aguda sobre Eisenia foetida

OBJETIVOS

1) Analizar el efecto tóxico de diferentes xenobióticos sobre lombrices de tierra

empleando el ensayo sobre papel filtro.

INTRODUCCIÓN

La importancia de los estudios toxicológicos sobre suelos es evidente, y el

desarrollo y uso de los ensayos estandarizados para llevarlos a cabo es un campo
en constante crecimiento. (1)

Eisenia foetida o lombriz roja es la especie más utilizada en el reciclaje de residuos

orgánicos mediante el proceso de vermicompostaje y es ampliamente usada en
estudios de ecotoxicología, debido a que tiene una distribución cosmopolita, ciclos
de vida cortos, rango amplio de tolerancia a la temperatura y a la humedad y manejo
relativamente sencillo. (1)

La prueba de contacto en papel de filtro es una prueba de detección inicial opcional

que sirve para identificar sustancias químicas potencialmente tóxicas para las
lombrices de tierra en el suelo, que deben complementarse con ensayos más
detallados en tierra artificial. Esta prueba implica exponer a las lombrices de tierra a
las sustancias evaluadas en papeles de filtro humedecidos colocados en viales
donde se introduce una lombriz por vial. (2)

Los ensayos de toxicidad son bioensayos empleados para reconocer y evaluar los
efectos de los contaminantes sobre la biota. En los bioensayos se usa un tejido vivo,
organismo, o grupo de organismos, como reactivo para evaluar los efectos de
cualquier sustancia fisiológicamente activa. Los bioensayos consisten en la
exposición de grupos de organismos, a concentraciones conocidas del tóxico por un
tiempo determinado. Los organismos deben estar en buenas condiciones de salud,
previamente aclimatados a las condiciones del ensayo y deben mantenerse en
condiciones ambientales constantes. Además de disponerse de grupos de control
(que no se exponen al tóxico). Luego se miden y registran los efectos biológicos
observados en cada uno de los grupos control y tratados y, posteriormente, se
efectúa un análisis estadístico de la información. (3)

Los efectos tóxicos a evaluar pueden ser: mortalidad, inmovilidad, inhibición del
crecimiento de la población, alteración del comportamiento y peso, entre otros. Se
determinan distintas variables como, por ejemplo, la concentración letal 50 (CL50),
que es la concentración letal para el 50% de los individuos expuestos. (3)
DIAGRAMA DE FLUJO

RESULTADOS Y OBSERVACIONES
En esta práctica, no se realizó el pesaje en triplicado; por lo tanto, se tomó
únicamente el promedio en una única medición, como se muestra en la tabla
siguiente:

- Cálculos para las cantidades de reactivos

 𝐶1 𝑥 𝑉1 = 𝐶2 𝑥 𝑉2
(0.2) . (10) = (10 mL) . (x)
x = 0.2 mL

Concentracción requirida: 40mg/Kg

40 X 0.000405 Kg = 0.0162 mg = 16.2 µm/kg

0.2 mg — 10 mL
0.0162 mg — x
x = 0.810 mL = 810 µL requeridos de reactivo

Lombrices Peso

1 0.369

2 0.424

3 0.364

4 0.395

5 0.501

6 0.384

7 0.413

8 0.395

9 0.394

PROMEDIO 0.4045 = 0.405

Lombrices en agua destilada, en dicromato de potasio y

en glifosato (de la izquierda a la derecha
respectivamente)

.
 Todas las lombrices vivas después de 24 horas

Con eso, se pudo comprobar que todas las lombrices permanecieron vivas después
de las primeras 24 horas. Por lo tanto, el porcentaje de mortalidad es 0.

DISCUSIÓN

Durante la práctica de laboratorio, se realizó el análisis del efecto tóxico de

diferentes xenobióticos sobre lombrices de tierra empleando el ensayo sobre papel
filtro. Como xenobióticos se emplearon el glifosato y el dicromato de potasio, como
matriz biológica se usó lombrices Eisenia foetida.

Se realizaron tres pruebas, las cuales fueron control negativo, control positivo
(dicromato de potasio) y el experimental (glifosato), cada uno por triplicado, la dosis
aplicada fue la misma, esta fue determinada a partir del promedio del peso de las
nueve lombrices.

La prueba de control negativo se llevó a cabo en 3 lombrices a las cuales se les

aplicó agua destilada, la cual no tuvo efecto adverso en la especie. El grupo control
se refiere al grupo de sujetos que recibe una intervención para contrastar los
resultados con el grupo experimental, se trata de una sustancia inerte (4). La prueba
de control positivo fue la especie a la cual se le administró dicromato de potasio a
810 µm/kg por triplicado y finalmente al grupo experimental se le administró glifosato
a la misma concentración que el dicromato de potasio. En esta práctica, se
desarrolló a pequeña escala lo que se conoce como estudios de toxicidad o ensayos
de toxicología reguladora que se realizan con animales siguen unos protocolos bien
definidos para proteger a los trabajadores durante la producción del producto y
durante su transporte y para resguardar al consumidor y al medio ambiente (5).

En la práctica se realizó el análisis de modelo de toxicidad in vivo con el uso de

lombrices Eisenia foetida como objeto de experimentación, las cuales son una
especie con la cual se puede experimentar de una manera bastante eficaz y la cual
tiene muchos pro, tanto a la hora de manipular como el cuidado y permisos
necesarios. Además de que las cantidades de xenobióticos necesarias para la
experimentación es relativamente mínima, disminuyendo así costos y posiblemente
contaminación. En la última década, se han incorporado algunos ensayos de gran
utilidad y eficacia que requieren pequeñas cantidades de muestras y permiten la
evaluación rápida de extractos crudos y fracciones, conduciendo con seguridad a
los principios activos y descartando todo lo que no sea de interés (5).El minimizar
gastos y contaminación es un punto importante en un laboratorio, además de que el
trabajar con este tipo de especies permite obtener buenos resultados y el tiempo de
realización es menor.

En esta práctica se empleó como sustancia xenobiótica del grupo de control positivo
al dicromato de potasio, según fuentes bibliográficas los dicromatos sódico y
potásico son usados con frecuencia en la industria como fuente de otros
compuestos del cromo, particularmente del óxido de cromo VI, y estos procesos
son lamayor fuente de contaminación por cromo hexavalente. En general, los
efluentes industriales contienen cromo(5), causando elevados niveles de
contaminación y siendo un tóxico que comúnmente puede entrar en contacto con los
humanos y otras especies.

De acuerdo a los datos obtenidos, se pudo observar que en dicha concentración no

se presentó la muerte de ninguna de las lombrices, ni en el grupo de control, ni en el
grupo experimental.

Según lo reportado en una hoja de seguridad de la empresa Carl Roth, la DL(50)

cutánea es <2.000 mg/kg en conejo, la cual es una dosis mucho más elevada a la
que usamos, aún así la matriz biológica es distinta, por lo que no iba a interactuar de
la misma manera.

Como prueba experimental, se analizó la toxicidad aguda (DL50) para el glifosato

comercial por vía oral y cutánea es mayor de 5.000 mg/kg, (6). Es por eso, que al
comparar la información descrita anteriormente, se observa que la DL(50) es mucho
más elevada en comparación a la que empleamos, por tal motivo no se presentó el
descenso de ninguna de las lombrices de este grupo. Asimismo, según la literatura,
el glifosato no presenta toxicidad aguda, pero sí crónica, por lo que el contacto con
este compuesto en un periodo de tiempo extenso si causa daños a la salud.

CONCLUSIÓN

Posteriormente a la realización de la práctica, consideramos dos aspectos

importantes.

Primeramente, la gran importancia que conlleva saber realizar cálculos básicos de

laboratorio como lo son disoluciones o cálculos para conocer las dosis que se
emplearán en la práctica, ya que en la parte de investigación es de suma
importancia conocer este tipo de cálculos, ya que se realizan comúnmente. Por otra
lado, es importante que se tenga conocimiento sobre cómo el tóxico interactúa en el
organismo o especie que se está usando como matriz biológica, y bajo qué
condiciones (ya sea concentración o tiempo de exposición) puede ser
completamente letal.

Como punto número dos, consideramos que es de gran importancia el conocer más
sobre ensayos de toxicidad, como funcionan, bajo que NOM o reglamentos se
deben basar para cumplir con lo establecido por la ley o entidades reguladoras, qué
especies se pueden utilizar y cómo se ejecutan de manera correcta, ya que el uso
de ellos es importante para analizar prácticamente todos los productos que salen al
mercado o para conocer los posibles riesgos que se pueden producir por los
desechos liberados por la industrias.

BIBLIOGRAFÍA
4.- Zurita-Cruz Jessie Nallely; Márquez-Gonzáles Horacio; Miranda-Novales
Guadalupe; Villasís-Keever Miguel Ángel. Estudios experimentales: diseño de
investigación para la evaluación de intervenciones en la clínica. Revista Alergia
México, 65 (2) (2018)
https://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2448-9190201800020
0178

5.- Pino Pérez, Oriela, & Jorge Lazo, Fanny. (2010). ENSAYO DE ARTEMIA: ÚTIL
HERRAMIENTA DE TRABAJO PARA ECOTOXICÓLOGOS Y QUÍMICOS DE
PRODUCTOS NATURALES. Revista de Protección Vegetal, 25(1), 34-43.
Recuperado en 12 de septiembre de 2023, de
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1010-27522010000100008&ln
g=es&tlng=es.

6.- González Ortega, E., & Fuentes Ponce, M. H. (2022). DINÁMICA DEL
GLIFOSATO EN EL SUELO Y SUS EFECTOS EN LA MICROBIOTA. Revista
Internacional de Contaminación Ambiental, 38, 127–144.
https://doi.org/10.20937/rica.54197

7.- SECCIÓN 1: Identificación de la sustancia o la mezcla y de la sociedad o la

empresa 1.1 Identificador del producto. (n.d.).
https://www.carlroth.com/medias/SDB-7953-ES-ES.pdf?context=bWFzdGVyfHNlY3V
yaXR5RGF0YXNoZWV0c3wzOTQzMzJ8YXBwbGljYXRpb24vcGRmfHNlY3VyaXR5
RGF0YXNoZWV0cy9oNWIvaDRlLzkwNTUxMTQzMzAxNDIucGRmfDQ0ZjA5ZGRiM
Dc3ZDVjOGY0NTgzOGZlYTJlODg1NTA5Mzg5YWE2Zjg0NmJjMWUxMTIwMzVmZ
TRhYWRjNGUwY2Q
‌