Universidad Nacional Mayor de San Marcos

METODO PARA
EVALUAR LA
TOXICIDAD DE UN
XENOBIOTICO
LABORATORIO N3
Mesa N5

2014
Integrantes:

Lpez Garca, Rorman E.

Pereda Paredes, Christopher F.
Rondn Llacma, Laura M.
Rubio Guzmn, Jhoselyn N.

Profesor:

Q.F. Oscar Santisteban Rojas

Horario:

Jueves 6-8 pm
Toxicologa de los alimentos

INFORME N3
TABLA DE CONTENIDO

RESUMEN .................................................................................... Error! Bookmark not defined.

PRINCIPIOS TERICOS ............................................................. Error! Bookmark not defined.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL ....................................... Error! Bookmark not defined.
RESULTADOS ........................................................................... Error! Bookmark not defined.1
DISCUSIN DE RESULTADOS............................................... Error! Bookmark not defined.6
CONCLUSIONES ......................................................................... Error! Bookmark not defined.
RECOMENDACIONES ............................................................... Error! Bookmark not defined.
BIBLIOGRAFA ........................................................................... Error! Bookmark not defined.
ANEXO ......................................................................................... Error! Bookmark not defined.

INFORME N3
RESUMEN

INFORME N3
PRINCIPIOS TERICOS

TOXICIDAD AGUDA
Capacidad de una sustancia para producir efectos adversos dentro de un corto plazo de
tiempo (usualmente dentro de las 24 horas, pero se admite hasta 14 das) despus de la
administracin de una dosis nica (o una exposicin dada) o tras dosis o exposiciones
mltiples en 24 horas.
INTERS TOXICOLGICO DEL FACTOR TIEMPO
El tiempo es un parmetro fundamental en la toxicologa. Desde que se absorbe un
txico hasta que se manifiestan los efectos, puede transcurrir un plazo que se denomina
tiempo de latencia, que, en cada caso, es funcin de la va de administracin, del
individuo, de que necesite o no su transformacin en un metabolito activo, etctera, y,
evidentemente, del tipo de efecto que utilicemos como signo, pues no debemos olvidar
que cada xenobitico puede desencadenar diferentes efectos. Por otra parte, los efectos
pueden permanecer ms o menos tiempo, lo cual se denomina tiempo de evolucin,
durante el cual se pueden producir lesiones o la muerte o, finalmente la recuperacin del
sujeto. Cuando nos interesa registrar la produccin de la muerte, manejamos el llamado
tiempo letal y tiempo letal medio (TL), promedio del transcurrido en los diferentes
individuos, desde la aplicacin del txico hasta su muerte; mayor exactitud posee el
TL50, referido al 50 por 100 de los individuos experimentados.

De acuerdo a la ley de Habers (1924), el efecto de un txico es funcin de la

concentracin (c) del txico en el ambiente o en el medio interno, y del tiempo (t) de
exposicin o contacto: E=f(c x t).
En trminos de contaminacin ambiental, al considerar las concentraciones de los
txicos en el medio ambiente (sea aire o agua), es preciso tener en cuenta, tambin, el
tiempo de permanencia en el ambiente, porque la dosis recibida ser funcin tanto de la
concentracin como del tiempo (tiempo de exposicin).
CLASIFICACIONES POR TOXICIDAD
La toxicidad es una cualidad a la vez intrnseca y relativa de todas las sustancias que,
como iremos viendo, depende de un conjunto de condiciones y circunstancias, como

INFORME N3
son los procesos de biotransformacin (los que aumentan la toxicidad del compuesto y
los que la disminuyen), as como los mecanismos de defensa del individuo, todo lo cual
est determinado por las caractersticas genticas de cada uno: tambin influyen otros
factores internos y externos, como las circunstancias fisiolgicas del individuo (a su vez
muy influenciables) y la participacin concomitante de otros compuestos qumicos.
EI manejo y consumo de stos supone un riesgo que es funcin de:
a) Las caractersticas fisicoqumicas de las sustancias.
b) Su potencialidad txica (pT), o toxicidad intrnseca que est en razn inversa a las
cantidades precisas para provocar dao a los seres vivos.
c) La probabilidad de que sea absorbida por el hombre, y la frecuencia con que esto
pueda ocurrir. De estos dos factores (probabilidad de exposicin y frecuencia) depende.
En definitiva, el riesgo, o probabilidad de que se produzca un efecto txico.
Aunque incluso las sustancias que son constituyentes normales de nuestro organismo
(como las hormonas o los neurotransmisores), cuando estn en concentraciones
superiores a las fisiolgicas, pueden originar patologas, solemos referirnos a los txicos
como xenobiticos o compuestos extraos, o que vienen de fuera de los seres vivos.
La potencialidad txica de una sustancia es tanto mayor cuanto menor sea Ia dosis
precisa para producir un efecto nocivo.
Hasta hace poco se hablaba de dosis sin efecto pero la experiencia ha enseado que es
preciso ser prudentes y slo admitir que hay dosis o niveles sin efecto observable
(NISEO. en ingls NOEL), ya que muchas veces las consecuencias de una o repetidas
exposiciones no se manifiestan exteriormente o slo lo hacen despus de cierto tiempo.
Cuando un organismo recibe pequeas dosis de una sustancia procura adaptarse a ella,
bien incrementando su propia capacidad de biotransformacin (metabolismo) y
excrecin o incluso elevando, dentro de unos mrgenes, su umbral de sensibilidad para
soportar el txico. En el caso de que la dosis supere estas capacidades fisiolgicas de
adaptacin, aparecern modificaciones en los parmetros biolgicos.
Para aludir a la toxicidad de las sustancias era clsico referirse a las dosis precisas para
producir la muerte tras una sola absorcin, es decir, para originar una intoxicacin
aguda letal.
Esta dosis letal (DL) se calcula por experimentacin con suficiente nmero de animales
para obtener valores de significacin estadstica; as se calculan la DL mnima, que mata
a un solo individuo, la DL-50, o media letal para el 50 por 100 de los ejemplares, la DL100, que intoxica mortalmente a todos los individuos, y dosis intermedias como DL-25,
DL-75, etc.
Sin embargo, se ha visto que este parmetro es insuficiente para calificar la toxicidad de
las sustancias, porque productos de escasa toxicidad aguda, con altas DL-50, resultan

INFORME N3
muy peligrosos cuando se absorben de forma crnica. Por ello Ia DL-50 ha quedado
reducida a un mero valor de referencia, que debe determinarse para a partir de l
investigar otros parmetros toxicomtricos.
En cuanto a los humanos, como obviamente no se debe experimentar con ellos, se
recogen datos retrospectivos epidemiolgicos de donde, con grandes posibilidades de
error como apuntarnos antes, se deducen las exposiciones o dosis mnimas que se sepan
hayan producido efectos txicos o muertes, y unas hipotticas dosis txicas o letales
medias estimadas, que se simbolizan por DTEm y DLEm.
Por otra parte, la correlacin dosis-efecto presenta en los humanos mucha mayor
dispersin que en la experimentacin animal. Las razones de esta discordancia se
encuentran bsicamente en que los animales de experimentacin se seleccionan entre
razas puras de estabilidad muy controlada, criados en bioterios estandarizados, que
aseguren la perfecta salud, y con alimentacin homognea, mientras que los humanos
somos producto de mltiples cruces entre pueblos y razas, con grandes variaciones en
los hbitos de vida en general y alimentarios en particular, lo cual, unido al empleo de
medicamentos, tabaco, alcohol y otras drogas y plaguicidas, y al efecto de los
contaminantes ambientales ms relevantes de cada localidad, nos hace cada vez ms
diferentes desde el punto de vista bioqumico.

INFORME N3

PROCESOS DE TRNSITO
El trnsito por el organismo de un producto capaz de originar intoxicaciones sistmicas
incluye la concatenacin de una serie de procesos, como son los siguientes: absorcin,
distribucin, fijacin y excrecin, a lo largo de todos los cuales, la molcula txica
experimenta numerosas transformaciones bioqumicas. Todo este ciclo se estudia bajo
el nombre de Toxicocintica, denominndose Toxicodinmica a la propia accin txica,
que se valora por la Toxicometra.
MECANISMOS DE ABSORCION
La absorcin consiste en el paso de un xenobitico desde el exterior a los fluidos
biolgicos (sangre, linfa, lquido cefalorraqudeo o LCR); para ello el producto en
disolucin ha de atravesar una serie de membranas como en la (Fig. 3) a partir de las
vas de absorcin que limitan el medio externo (TABLA 3.1).

INFORME N3

FIG. 3.1. Pasos de la absorcin.

INFORME N3
LOCALIZACIN, ACUMULACIN O FIJACIN
La sangre distribuye a los xenobiticos por todos los tejidos del organismo, que, de
acuerdo con sus afinidades fisicoqumicas, los retienen en mayor o menor grado. Esta
retencin puede ser de dos tipos:
a) En los tejidos sensibles al frmaco, o lugares de accin (localizacin).
b) En tejidos de acumulacin o almacenamiento, lo que supone una retencin que
impide ejercer la accin principal del frmaco; por ejemplo, el flor acumulado
en los huesos no acta como txico enzimtico o cardaco, pero provoca
fragilidad sea.
La irrigacin es fundamental para la recepcin de los frmacos por un rgano. As, la
sustancia blanca cerebral recibe menos sangre que el crtex; por autorradiografa se ve
que a ste llega ms frmaco que a aqulla.
Hay algunos capilares (los del glomrulo renal o del hgado) que son ms permeables
que los musculares. Pero en el cerebro los capilares son mucho menos permeables para
las sustancias hidrosolubles.
Un efecto de esto, por ejemplo, es la rpida penetracin en el cerebro de los anestsicos
(liposolubles) como el ciclopropano o el xido nitroso.
La sangre arterial aporta al xenobitico a los rganos, y la venosa lo extrae, aunque cada
tejido puede retener determinadas cantidades, y se alcanza un estado estacionario o de
meseta.
Los pulmones acumulan numerosas sustancias, particularmente las bases dbiles
lipfilas con valores de pKa superiores a 8, tales como anfetaminas, amitriptilina,
imipramina, cloropromazina, metadona, morfina, etc.
Se ha sugerido que los tejidos funcionan como reservorio, que acumulan el xenobitico
tras dosis repetidas y realizan un sistema de equilibrio entre la sustancia fijada y la
circulante.
ELIMINACION
La excrecin de los txicos se efecta por medio de la orina, bilis, heces y, una
proporcin de los compuestos voltiles, por el aire espirado. Menores cantidades se
eliminan por la leche, el sudor y la saliva, que, aunque cuantitativamente no sean
relevantes, en algunos casos, como en el de la leche, tienen importancia y peligro para
quienes ingieran esta ltima como alimento. Este es el caso de leche de madres
fumadoras, bebedoras o drogadictas, o de vacas que se alimentan con pastos
contaminados.
Ejemplos de excrecin por las distintas vas:
Pulmones:
Txicos gaseosos y voltiles: hidrocarburos de bajo punto de ebullicin,
alcoholes, cetonas, CO, CNH, aminas y algunas grasas (colesterol. etc.).
Jugo gstrico:
Bases, alcaloides (nicotina, estricnina, etc.).

INFORME N3

Bilis:
Compuestos de alto peso molecular, generalmente como conjugados de sus
metabolitos.
Sustancias liposolubles:
Emulsionadas, conjugadas: glucuronatos, sulfatos
Compuestos policclicos: benzopireno
Colorantes: aminas aromticas
Leche:
Sustancias liposolubles e hidrosolubles.
Alcohol.
Nicotina.
Aflatoxinas.
Plaguicidas orgnicos.

INFORME N3
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Materiales y Reactivos
Materias

Reactivos

Pipetas de 5 y 10 mL
Beaker de 100, 250 y 500
mL
Gasa esteril
Espaladrapo
Cuba de vidrio 30x30x40
cm

Extracto de aji (capsaicina)

Salicinato de metilo
ter de metilo
Clroroformo
Formaldehido (formol)
Ratoncito blanco

Equipos
Balanza granataria

Experiencia N1

Toxicidad aguda por va inhalatoria

Pese al reactivo biolgico y colquele una marca en el dorso o a la altura del cuello.
Sobre un algodn coloque 0.5 mL del reactivo asignado, e introduzca un total de 4
tornadas de algodn. Tape la caja de vidrio.
Calcule la concentracin en mg/m3 de xenobitico en el recipiente. Deje que transcurra
al menos dos minutos para que se homogenice al aire.
Introduzca de 2 a 4 reactivos biolgicos, anote el tiempo y monitoree los cambios de
conducta durante cinco minutos.
Cuando el animal empiece a perder el conocimiento o similar, retrelo que respire aire
fresco y se recupere.
Establezca las correlaciones correspondientes.

Experiencia N2

Evaluacin de la toxicidad aguda por va cutnea

Seleccione o separe la muestra de aj, disprsela homogneamente sobre una gasa con la
ayuda de una esptula.
Adhiralas al dorso de la mano con la ayuda de un esparadrapo, reporte el conjunto de
sensaciones percibidas por la persona que est ensayando.

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INFORME N3
RESULTADOS
ter Etlico
Calculo de concentracin del xenobitico
Datos:
Caja de vidrio: 30 x 20 x 35 = 0.021m3
LC50: 1 210 mg/m3
= 0.8g/mL

0.021m3 1210 mg

1g

1000mg

0.0254g

0.0254 g
0.031mL
0.8 g
ml
TABLA N1. Peso de los reactivos biolgicos.
Reactivo
Ratn 1 (marcado)
Ratn 2

Peso (g)
33.23
32.48

TABLA N2. Evaluacin de la toxicidad aguda por va inhalatoria.

Ratn 1 (marcado)
Concentracin de
xenobitico
Tiempo de exposicin (min)
Comportamiento

1mL

Ratn 2
1mL

10
10
1 min: presentaron una conducta hiperactiva.
2 min: intentos de fuga de la piscina de vidrio.
3 min: desesperacin en las dos muestras biolgicas.
24 min: comienzan a realizar saltos altos intentando salir de
la piscina de vidrio.
40 min: desesperacin total por parte de las dos muestras,
mediante saltos y correteos por toda el rea de la piscina.
48 min: las dos muestras biolgicas se frotan la nariz y ojos,
acicalndose.
10 min: actitud sumisa.

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INFORME N3
TABLA N3. Evaluacin de toxicidad aguda por va cutnea.
Aj panca
Al inicio no se presenta ninguna sensacin de
molestia. Pasado unos minutos se presenta
una sensacin de escozor en la parte
expuesta a la muestra.

Salicilato de metilo
No surge ninguna sensacin de calor en la
zona expuesta pero a las 2 min se presenta
una sensacin de fro bastante persistente,
terminado el experimento y sacado el
esparadrapo la sensacin persiste.

Formaldehido (formol)
Datos
Caja de vidrio: 30 x 20 x 35 = 0.011m3
LC50 (ratn) = 400 mg/m3 (2 hrs)
= 1.07g/mL

0.011m3 400 mg

m3

1g

1000mg

0.0044 g

0.0044 g
0.004mL
1.07 g
ml
TABLA N5. Peso de los reactivos biolgicos.
Reactivo
Ratn 1 (marcado)
Ratn 2

Peso (g)
27.57
26.67

TABLA N6. Evaluacin de la toxicidad aguda por va inhalatoria.

Ratn 1 (marcado)
Concentracin de
xenobitico
Tiempo de exposicin (min)
Comportamiento

2 gotas
34min : hiperactividad
50 min : ojos notablemente
cerrados

12

Ratn 2
2 gotas
20 min: respiracin agitada
43 min : desmayo

INFORME N3
TABLA N7. Evaluacin de toxicidad aguda por va cutnea.
rocoto

Salicilato de metilo
No surge ninguna sensacin de calor en la
zona expuesta pero al minuto se presenta
una sensacin de fro persistente, terminado
el experimento y retirado el esparadrapo la
sensacin se torna caliente.

15 min: ardor leve.

30 min: ardor intenso, enrojecimiento de la
piel.

Cloroformo
Datos
Caja de vidrio: 30 x 30 x 40 = 0.036m3
LC50 (inhalado en ratas): 47.7 mg/m3/4 h
= 1.48g/mL

0.036m3 47.7 mg

m3

1g

1000mg

0.0017 g

0.0017 g
0.001mL
1.48 g
ml
TABLA N8. Peso de los reactivos biolgicos.
Reactivo
Ratn 1
Ratn 2

Peso (g)
25.42
25.83

TABLA N9. Evaluacin de la toxicidad aguda por va inhalatoria.

Ratn 1
Concentracin de
xenobitico
Tiempo de exposicin (min)
Comportamiento

Ratn 2
2 gotas

1:14 el de menor peso

falleci

13

2 gotas
Hiperactividad e inquietud
Desmayo

INFORME N3
TABLA N10. Evaluacin de toxicidad aguda por va cutnea.
Aj amarillo
No se presenta sensacin alguna hasta aprox
los 10 min, luego de los 15 min se siente un
ligero escozor. Al terminar la experiencia a
los 30 min la piel se ve un poco irritada.

Salicilato de metilo
Se presenta una ligera molestia durante la
experiencia, entre sensaciones de frio y calor.

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INFORME N3
DISCUCIN DE RESULTADOS:
Revisando la bibliografa de las hojas de seguridad de los distintos reactivos usados en la
prctica de laboratorio se observa que, la LC50 (inhalacin en ratones) de ter Etlico es 73000
ppm/2h esto en contraste con lo realizado se aprecia la gran diferencia entre las
concentraciones aplicadas a los reactivos biolgicos en prctica, solo se aplic 2 mL en algodn
vio olfatoria. Se pudo observar con claridad las reacciones de los roedores al reactivo,
irritabilidad, fatiga, agitacin y finalmente adormecimiento, sin embargo si se aplicaba en
mayor concentracin en muy probable que el proceso ulterior seria la muerte del animal.
El CL50 del Formaldehdo en roedores se encuentra entre 414 ppm (ratones por 4 horas) y 820
ppm (ratas por 30 minutos). En comparacin con lo realizado en laboratorio solo se aplic de
2 a 4 gotas en algodn y se observaron las distintas reacciones de los roedores evitndose que
mueran en su mayora.
El cloroformo es el reactivo con el que ms cuidado se debe tener en la prctica ya que el
roedor es ms sensible a tu toxicidad, esto se observ en por como pereci un ratn al minuto
de la aplicacin del cloroformo.

CONCLUSIONES:
El ter no se usa mientras haya otro anestsico disponible, por su inflamabilidad y porque es
irritante para algunos pacientes. Debido a esas razones, junto con su alta inflamabilidad y
su bajo punto de ignicin, el ter etlico es considerado como uno de los factores de riesgo de
los laboratorios.
NIOSH (United States National Institute for Occupational Safety and Health) considera que una
concentracin en el aire de Formaldehdo a partir de 20 ppm es peligrosa de forma inmediata
para la salud humana, no obstante en casos extremos esta concentracin se puede sobrepasar
por mucho.
El CL50 del Formaldehdo en roedores se encuentra entre 414 ppm (ratones por 4 horas) y 820
ppm (ratas por 30 minutos
En concentraciones de entre 10 y 20 ppm se presenta dificultad en la respiracin debida a la
inflamacin de vas respiratorias, tos, y quemaduras de nariz y garganta. A 10 ppm el
Formaldehdo provoca lagrimeo profuso pero se puede soportar por algunos minutos. A 4 o 5
ppm se genera irritacin leve da las mucosas nasales y bucales, lo cual se observ por como los
roedores cerraban sus ojos y se rascaban la nariz. Los efectos de exposicin a Formaldehdo
pueden ser retardados y presentarse luego de periodos de entre 3 y 6 horas

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INFORME N3
BIBLIOGRAFA
Manuel Repetto Jimnez & Guillermo Repetto Kuhn. TOXICOLOGIA FUNDAMENTAL. 4ta
edicin. Editorial Daz de Santos. Espaa. 2009.
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/TextosOnline/Valores_Limite/Doc
_Toxicologica/FicherosSerie2/DLEP%2029.pdf
http://portales.puj.edu.co/doc-quimica/fds-labqca-dianahermith/Eter%20diet%C3%ADlico.pdf
http://www.anla.gov.co/documentos/Guia15.pdf
http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/11eteretilico.pdf
http://wgbis.ces.iisc.ernet.in/energy/HC270799/HDL/ENV/envsp/Vol315.htm

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