medigraphic

Artemisa en lnea

Dermatologa Rev Mex 2005;49:12-27

Artculo de revisin Factores de virulencia en Candida sp

Laura Estela Castrilln Rivera,* Alejandro Palma Ramos,* Carmen Padilla Desgarennes** RESUMEN
La incidencia cada vez mayor de infecciones intrahospitalarias por Candida y su asociacin individuos susceptibles que cursan con pdf elaborado por en medigraphic ciertas inmunodeficiencias hacen posible que estos microorganismos, considerados comensales, se vuelvan patgenos. Conocer los factores de virulencia del microorganismo hace posible determinar, de manera ms precisa, cmo se modifica la relacin que establece con su husped una vez que los mecanismos de resistencia se han deteriorado. Los principales factores de virulencia asociados con Candida se relacionan con su dimorfismo, secrecin enzimtica, cambio de fenotipo, expresin diferencial de genes en respuesta al ambiente, sntesis de adhesinas y su capacidad para formar biopelculas. En este trabajo se presenta una revisin de la descripcin de estos factores y cmo stos se relacionan con el proceso infeccioso. Palabras clave:Candida, factores de virulencia, morfognesis, adhesinas, enzimas, biopelculas.

ABSTRACT
The higher incidence of intrahospitalary infections by Candida and its association in susceptible individuals that course with certain immunodeficiency states make possible that these microorganisms considered commensals become pathogens. To know the virulence factors of this microorganism allows to determine in a more precisely way how the relationship that it establishes with the host is modified once the resistance mechanisms have been deteriorated. The main virulence factors associated with Candida are related to dimorphism, enzymatic secretion, phenotype change, differential gene expression to environmental response, adhesions synthesis and their ability to form biofilms. In this work we present a review of the description of these factors and how they are related to the infection process. Key words: Candida, virulence factors, morphogenesis, adhesins, enzymes, biofilms.

C
*

andida sp son organismos comensales en el intestino de individuos sanos; se ha visto que estn presentes universalmente. La colonizacin por Candida albicans puede llevar a la infeccin sistmica cuando el husped tiene varios factores de riesgo, como el uso de antibiticos de amplio espectro, esteroides u otros agentes inmunosupresores, diabetes mellitus, SIDA, depresin de las funciones fagocticas o alteraciones locales del sistema gastrointestinal. Estas situaciones pueden
Departamento de sistemas biolgicos, Universidad Autnoma Metropolitana Xochimilco. ** Centro Dermatolgico Pascua. Correspondencia: Dra. Laura Estela Castrilln Rivera. Departamento de sistemas biolgicos, Universidad Autnoma Metropolitana Xochimilco. Calzada del Hueso 1100, colonia Villa Quietud, CP 04960, Mxico, DF. E-mail: lcrivera@correo.xoc.uam.mx Recibido: noviembre, 2004. Aceptado: diciembre, 2004. La versin completa de este artculo tambin est disponible en internet: www.revistasmedicasmexicanas.com.mx

ocasionar candidiasis gastrointestinal o diseminacin hematgena.1 Candida albicans es un microorganismo muy verstil, por su capacidad para sobrevivir como comensal en varios sitios anatmicamente distintos (intestino, cavidad oral y vagina), y puede causar enfermedad cuando se le presenta la oportunidad. La limitacin por nutrientes y la competencia entre bacterias y hongos (microbiota) en las superficies mucosas proporcionan una presin selectiva que ocasiona la eliminacin de los microorganismos menos adaptados. Candida albicans tiene varios atributos de virulencia para colonizar el husped y ocasiona dao de forma directa, al activar, resistir o desviar los mecanismos de defensa del mismo. Los factores de virulencia expresados o requeridos por el microorganismo para causar infeccin pueden variar segn el tipo, el sitio y la naturaleza de las defensas del husped.2 El delicado equilibrio entre el husped y el hongo patgeno puede convertirse en una relacin parsita

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y resultar en enfermedad grave. Los hongos no son participantes pasivos en el proceso infeccioso. La interaccin entre el hongo y el medio ambiente est afectada por su variabilidad antignica, el cambio fenotpico y la transicin dimrfica. Existen diversos factores potenciales de virulencia, como la morfologa celular, la actividad enzimtica extracelular, el cambio fenotpico y los factores de adhesin, que favorecen la formacin de biopelculas. A continuacin se describen, de manera independiente, cada uno de estos factores.
MORFOGNESIS

Candida albicans es polimrfica, ya que existe en forma de levadura (blastosporas) o como filamentos (pseudohifa o hifa). La morfognesis se refiere a la transicin entre las levaduras (unicelulares) y la forma de crecimiento filamentosa del microorganismo, que puede convertirse de forma reversible a clulas de levadura, con crecimiento de hifa o pseudohifa. La conversin la forma unicelular de levadura pdf elaborado porde medigraphic al crecimiento filamentoso es esencial para la virulencia de Candida albicans. La morfognesis, por s misma, est bajo mltiples controles y rutas de transduccin de seales. La transicin de levadura a

hifa es uno de los atributos de virulencia que capacitan a Candida albicans para invadir los tejidos. Se ha comprobado que el crecimiento de forma filamentosa tiene ventajas sobre la levadura en la penetracin de la clula o tejido, y aunque la hifa puede ser idnea para abrir la brecha entre las barreras tisulares, gracias a que su punta es el sitio de secrecin de enzimas capaces de degradar protenas, lpidos y otros componentes celulares, sta facilita su infiltracin en sustratos slidos y tejidos.3 En general, las levaduras predominan durante la colonizacin de la mucosa en el husped sano, pero la hifa emerge cuando las defensas de ste declinan. Por lo tanto, ambas formas de crecimiento podran desempear un papel importante en la patognesis y encontrarse en muchos microambientes diferentes en el husped.4 La hifa se produce en el estado temprano de la colonizacin, mientras que las levaduras se observan comnmente durante la enfermedad o en el tejido necrtico, justo cuando el crecimiento de la hifa se revierte por el suero a la forma de levadura y las protenas se degradan por proteinasas in vivo e infiltran tejidos hacindolos necrticos. En otras palabras, la morfognesis de levadura a hifa se revierte conforme avanza la infeccin y quiz sea el resultado de cambios temporales en seales que el hongo recibe de su medio ambiente (figura 1).

Episodios tempranos Activacin de genes de polimorfismo y sealizacin celular

Episodios tardos

Levadura

Tubo germinativo

Levaduras gemantes Hifa

Reconocimiento por receptores de manosa de clulas dendrticas. Activacin Respuesta TH 1 = Proteccin

Reconocimiento por receptores Penetracin a tejidos C3 o FcR de clulas dendrticas. Activacin Respuesta TH 2 = Produccin de anticuerpos

Figura 1. Morfognesis en Candida sp durante la infeccin.

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Tambin se ha propuesto que existe asociacin entre la morfognesis y la virulencia en los hongos dimrficos, ya que un morfotipo existe en el medio ambiente o durante el comensalismo y el otro, en el husped durante el proceso de la enfermedad.5 Sin embargo, se ha sugerido que es el cambio de la forma de levadura a hifa (morfognesis) y no la forma del hongo lo que es importante para la virulencia.6 Otro tipo de pruebas que apoyan a la morfognesis como factor de virulencia es que las lesiones clnicas a menudo se marcan por la existencia de clulas de varias morfologas, por lo que es legtimo asumir que todas las formas del hongo son necesarias para mantener la infeccin por Candida albicans. Existen tres hallazgos que sustentan la hiptesis de que la filamentacin se requiere para la virulencia por este hongo:7 1. La formacin de filamentos se estimula a 37 C en presencia de suero, con pH neutro. 2. Los filamentos recin formados (llamados tubos germinativos) son ms adherentes a las clulas mamferas que las levaduras y la adherencia es el requisito para la penetracin tisular. 3. Las levaduras capturadas por macrfagos producen filamentos y son capaces de lisar a stos, por lo tanto, la formacin de filamentos es una forma de evadir los mecanismos de defensa del husped.8,9 Se han realizado varios intentos para demostrar la relacin que existe entre la forma filamentosa de Candida albicans con su virulencia, pero hasta ahora no hay una demostracin inequvoca acerca de este punto, aunque hay datos de que la virulencia se atena cuando se obtienen mutantes que se confinan a la forma de levadura o filamentosa. Por ejemplo, cepas mutantes de Candida albicans incapaces de formar hifas son generalmente avirulentas en modelos de ratn con candidiasis diseminada. Por lo tanto, se sugiere que los defectos de la cepa, para formar hifas, podran reducir la virulencia del hongo.7-10 La correlacin de la morfognesis del hongo con la virulencia se basa en los estudios realizados en animales; no obstante, el anlisis de la virulencia fngica se limita por los modelos inadecuados comparados con la enfermedad en humanos. Una limitante importante para poder llegar a estas conclusiones es que an no existen los modelos de

infeccin crnica que semejen la enfermedad en humanos y por ello es importante reconocer que un modelo experimental inapropiado puede llevar a conclusiones errneas, en relacin con los factores de virulencia de los hongos.11 La morfognesis de levadura a hifa es reversible in vivo y se controla por redes reguladoras que modifican otros aspectos de la biologa de Candida albicans. Durante la infeccin evolucionan distintas fases morfogenticas que pueden ser influidas por microampdf elaborado por medigraphic bientes locales en el husped, stas son:4 1) Episodios tempranos en la colonizacin por clulas de levadura que pueden afectar su decisin de generar un tubo germinativo hasta la formacin de la hifa. 2) Episodios subsecuentes que promueven el crecimiento de la hifa extendida. 3) En las fases tardas de la infeccin, las clulas necrticas a menudo se acompaan de la transicin de hifa a levadura y generan clulas en gemacin. Estas fases implican cambios sutiles en el ciclo celular, cambios importantes en la polaridad de crecimiento, alteraciones en la composicin de la pared celular y modulacin de factores de virulencia. De ah que las rutas morfogenticas se integran con rutas de sealizacin que controlan otros procesos. Por lo que se refiere a la respuesta del husped ante el dimorfismo de Candida, se ha observado que la capacidad de Candida albicans para cambiar entre la forma de levadura saprofita y la forma filamentosa patognica del hongo permite a las clulas dendrticas (responsables de la inmunidad innata) detectar una forma especfica, al ocasionar respuestas dependientes de clulas T cooperadoras, protectoras o no protectoras. Lo anterior, en virtud de que dichas clulas poseen distintos tipos de receptores y a que contribuyen a disparar patrones diferentes de reactividad, observados de forma local en respuesta al desafo por Candida albicans.12 Estos hallazgos ofrecen nuevas claves para interpretar los mecanismos de virulencia de los hongos: ms que el dimorfismo, la inclusin de diferentes tipos de receptores en las clulas dendrticas puede seleccionar el modo de internalizacin del hongo y de la presentacin antignica, lo que condiciona las respuestas de las clulas T cooperadoras y favorece el saprofitismo o la infeccin 2 (figura 1).

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Gentica molecular del polimorfismo de Candida

Candida albicans crece como levaduras o como hifas. La hifa es la forma de adaptacin para la adherencia y penetracin de los epitelios y clulas endoteliales. Se identific que el gen EFG1 en Candida albicans codifica para un regulador transcripcional que tiene homologacin con las protenas PHD1 y StuA, que son las protenas que controlan la morfognesis en Saccharomyces cerevisiae y Aspergillus nidulans, respectivamente. Los estudios del EFG1 sugieren que es un activador transcripcional y un represor esencial para la morfognesis de la levadura, hifa y pseudohifa.1 Los estudios bioqumicos que establecen las rutas de transduccin de seales, que activan la filamentacin de Candida albicans, concluyen que existen dos rutas principales, una es la cascada de cinasas MAPK y la segunda est representada por el factor transcripcional EFG1p. Las mutantes que les faltan a ambas rutas no son filamentosas y son avirulentas.13
ENZIMAS

SAP en Candida albicans proporciona al hongo un sistema proteoltico eficiente y flexible que puede garantizar su xito como patgeno oportunista.3 Se ha sugerido que las aspartil proteasas secretadas desempean un papel importante en la patognesis de C. albicans, ya que se han obtenido mutantes con varios genes SAP alterados y se ha demostrado que SAP1-3 y SAP6 son importantes en la infeccin oral, mientras que SAP1 y SAP2 lo son en la candidiasis vaginal. El papel de dichas enzimas es esencial en las infecciones de mucosas en las fases iniciales, pero no cuando el hongo se ha infiltrado en los vasos sanguneos. Asimismo, hay pruebas clnicas que correlacionan la secrecin de estas enzimas con la candidiasis vaginal.1
Caracterizacin de las aspartil proteinasas de Candida albicans

Las pueden proponerse como determinantes pdf enzimas elaborado por medigraphic de virulencia en Candida, ya que tienen la capacidad de romper polmeros que proporcionan nutrientes accesibles para el crecimiento de los hongos, as como de inactivar las molculas tiles en la defensa del organismo. Las principales enzimas extracelulares relacionadas con la patognesis de Candida son las proteasas, fosfolipasas y lipasas.
Proteasas

En Candida albicans se han descrito varios miembros de una gran familia de enzimas de secrecin asprtico proteinasas (SAP), que han sido bastante estudiadas en estos hongos. En particular, las aspartil proteinasas secretadas (Saps) son codificadas por los genes de la familia SAP, que cuenta con diez miembros y que est regulada diferencialmente; adems, sus distintos miembros se expresan bajo una variedad de condiciones de crecimiento de laboratorio y durante las infecciones experimentales in vivo e in vitro. La contribucin de las aspartil proteinasas secretadas a la patognesis de Candida albicans se ha demostrado con el uso de mutantes deficientes en SAP e inhibidores de proteasas. La presencia de los genes de la familia

Los diez genes SAP codifican pre y proenzimas de aproximadamente 60 a 200 aminocidos, mayor que la protena madura. El segmento seal N-terminal es fragmentado por una seal peptidasa en el retculo endoplsmico. El propptido se remueve para activar la enzima por una proteinasa semejante a subtilisina Kex-2 en el aparato de Golgi, antes de que sea transportada, va vesculas, hacia la superficie de la clula para la secrecin o glucosilacin. Se sabe que existen otros procesos alternativos para la activacin de las SAP de C. albicans, como la autoactivacin que ocurre extracelularmente para SAP1, SAP2, SAP3 y SAP6 a ciertos valores de pH.14 Las protenas maduras contienen una secuencia de motivos tpicos de todas las aspartil proteasas, que incluyen los dos residuos aspartato conservados en el sitio activo. Es posible que los residuos cistena conservados mantengan la estructura tridimensional de las enzimas.15 Las protenas que comprenden la familia SAP no se limitan slo a Candida albicans, ya que se ha demostrado su presencia en C. dubliniensis, C. tropicalis y C. parapsilosis.16,17,18 La presencia de los genes de la familia SAP es nica en las especies patgenas de Candida y estn ausentes en la levadura no patgena S. cerevisiae, lo cual apoya que estas proteinasas estn implicadas en su virulencia. Aunque las consecuencias de la secrecin de estas enzimas durante las infecciones en humanos an no

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se conocen con precisin, los estudios in vitro, en animales y en humanos, han implicado a las proteinasas de C. albicans en una de las siguientes formas:1 9 1. Correlacin entre la produccin de SAP in vitro y la virulencia. 2. Degradacin de protenas humanas y anlisis estructural al determinar la especificidad del sustrato de SAP. 3. Asociacin de la produccin de SAP con otros procesos de virulencia de C. albicans. 4. Produccin de la protena SAP y reaccin inmunitaria en infecciones animales y humanas. 5. Expresin de genes SAP durante las infecciones por Candida. 6. Modulacin de la virulencia de C. albicans por inhibidores de aspartil proteinasas. 7. Uso de mutantes de SAP para analizar la virulencia de C. albicans. Las protenas SAP tienen funciones especializadas durante el proceso infeccioso e incluyen la digestin de molculas protenicas para adquirir nutrientes, digerir o distorsionar las membranas del husped y facilitar la adhesin, la invasin a tejidos y la digestin de molculas del sistema inmunitario del husped para evitar o resistir el ataque antimicrobiano de ste. Aunque la actividad proteoltica extracelular se descubri a mediados de la dcada de 1960,20 no fue sino hasta el inicio de 1990 cuando los mtodos moleculares se introdujeron al campo de Candida y los cientficos comenzaron a comprender la complejidad gentica de este hongo, demostrando diez genes SAP que codifican para estas enzimas. Mientras se hacan esfuerzos por recolectar datos de los genes SAP se despert el inters hacia su papel y funcin durante el proceso infeccioso. Es claro que hay diferencias temporales y espaciales en la expresin de los genes SAP, cada uno de los cuales desempea diferente papel en el establecimiento de la enfermedad y en la invasin de los tejidos.21 Se investig el papel de las aspartil proteinasas secretadas durante la invasin de tejidos y su asociacin con las diferentes morfologas de C. albicans. Se demostr que dentro de las primeras 72 horas postinfeccin, las proteinasas SAP1, SAP2, SAP4, SAP5 y SAP9 fueron los principales genes expresados.

Los antgenos SAP1 a SAP3 se encontraron en las clulas de levadura e hifa, mientras que los antgenos SAP4 a SAP6 se apreciaron sobre todo en las clulas de hifa que estn en contacto muy estrecho con las clulas del husped, en particular con leucocitos y eosinfilos.22 La presencia de los genes SAP indica que diferentes proteinasas pueden tener distintas acciones en las clulas del husped y en los tejidos durante el proceso infeccioso, lo cual que su expresin puede ser pdf elaborado por sugiere medigraphic regulada de manera diferencial bajo diversas condiciones de laboratorio y durante el proceso infeccioso. En este sentido, se ha demostrado que bajo condiciones de laboratorio la principal enzima proteoltica expresada por C. albicans es SAP2, que est regulada por un mecanismo de retroalimentacin positiva donde los pptidos resultantes de su accin inducen su sntesis.23 En cambio, los genes de SAP1 y SAP3 se expresan diferencialmente durante el cambio de fenotipo en ciertas cepas, 24 mientras que la expresin de SAP8 est regulada por la temperatura.25 Se ha demostrado que las diferentes Saps tienen un valor de pH ptimo para su actividad. La SAP2 acta sobre todo en valores de pH cidos (cercanos a 4.0), las Saps 4 a 6 son activas al pH fisiolgico y la SAP3 al pH de 2.0. Esta caracterstica proporciona a C. albicans un rango muy amplio de actividad proteoltica, que va de 2.0 a 7.0, lo que es esencial para la adaptacin especfica hacia diferentes condiciones ambientales del husped.26 La contribucin de los genes de la familia SAP en la manifestacin de la enfermedad se ha estudiado por RT-PCR, cepas mutantes y por mtodos inmunoqumicos. Con estos estudios se ha demostrado que las Saps 1 a 6 se requieren para la enfermedad invasiva, mientras que en modelos experimentales de vaginitis la SAP2 se necesita para el desencadenamiento de la enfermedad. En modelos in vitro de epidermis humana se midi la expresin temporal de Saps por la tcnica de RTPCR. El orden de expresin fue SAP1, SAP2, seguido, de forma secuencial, por SAP8, SAP6 y SAP3. La expresin tuvo correlacin con la invasin del tejido, es decir, invasin temprana (SAP1 y 2), penetracin extensiva (SAP8) y crecimiento extensivo de la hifa (SAP6).

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Correlacin entre morfognesis y secrecin enzimtica

La pared celular es el punto de contacto entre Candida albicans y su husped. Durante la morfognesis de levadura a hifa ocurren cambios distintos en la arquitectura de la pared, como resultado de la regulacin de las enzimas biosintticas de la pared celular. En resumen, los genes que codifican a las enzimas de secrecin aspartil proteinasas se regulan diferencialmente durante el desarrollo de la hifa: los genes SAP4 a 6 se activan cuando la formacin de la hifa se induce en un medio que contiene polipptidos como nica fuente de nitrgeno. Tambin la hifa de C. albicans es capaz de producir rompimientos en las superficies, lo que quizs promueva la penetracin del hongo en clulas y membranas endoteliales del husped. Esta propiedad (conocida como tigmotropismo) depende del crecimiento de la hifa. La morfognesis de levadura a hifa est muy relacionada con otros factores de virulencia, que incluyen la biosntesis de la pared celular, la adhesin, la produccin de enzimas hidrolticas extracelulares y el tigmotropismo. La demostracin de los diferentes patrones de pdf elaborado por medigraphic expresin de las distintas Saps en la levadura e hifa, as como en clulas que han cambiado su fenotipo indican que dicha expresin es un proceso altamente regulado; sin embargo, no aseguran si este proceso contribuye a la patogenicidad de C. albicans in vivo. Por tal motivo, es decisivo saber si la expresin diferencial tambin ocurre durante el proceso infeccioso, para lo cual se han utilizado modelos de infeccin in vitro e infecciones experimentales en animales. Con estos estudios se demostr que las SAP1 a SAP3 son las proteinasas principales expresadas durante las infecciones superficiales,27 en contraste con las SAP1 a SAP4, que se expresan sobre todo en la enfermedad sistmica.28 Estos hallazgos se apoyan en el uso de cepas mutantes de enzimas especficas en diferentes modelos de infeccin. Las mutantes de EFG1 (gen del factor transcripcional Efg1) tienen capacidad reducida para formar hifas. Tambin se asocian con la capacidad limitada de sintetizar las enzimas SAP4 a SAP6, y se ha demostrado que las mutantes que carecen de SAP1 a SAP3 tienen propiedades invasivas comparables con las cepas silvestres. En cambio, las mutantes de SAP4

a SAP6 reducen su capacidad invasiva, aunque puedan lograr la transicin a hifa. Por lo tanto, las cepas que producen hifas pero que carecen de las proteinasas asociadas con este morfotipo son menos invasivas. Esto se demostr con mutantes deficientes de uno o de ambos genes y de su interaccin con el epitelio oral y con neutrfilos polimorfonucleares, que en comparacin con la cepa silvestre, las mutantes cph, efg1 y las cph/efg1 fueron incapaces de producir hifas, de daar a las clulas, de expresar los genes SAP1 y SAP3 y de disminuir la expresin de SAP4, que es un gen asociado con la morfologa de hifa. Con estos resultados se concluye que la virulencia reducida de mutantes deficientes en la formacin de hifa no slo se debe a esta propiedad, sino a la expresin modificada de los genes SAP, que por lo general se asocia con esta morfologa. Por lo tanto, estos estudios ofrecen una prueba de la regulacin combinada de factores de virulencia, como el polimorfismo y la expresin de genes SAP.29 Las principales caractersticas de estas enzimas se presentan en el cuadro 1.
Posibles blancos de las proteinasas de Candida

A nivel ms bsico, un papel de las Saps de Candida es la digestin de protenas para proporcionar nitrgeno a las clulas; sin embargo, las Saps tambin pueden haberse adaptado y participar en funciones de virulencia. Por ejemplo, podran contribuir a la adhesin en tejidos del husped y a la invasin por degradacin o distorsin de las estructuras en la superficie de las clulas del husped o por destruccin de molculas del sistema inmunitario del husped para evitar o resistir el ataque antimicrobiano. La matriz extracelular y las protenas de superficie del husped, como queratina, colgena, laminina, fibronectina y mucina, son degradadas de manera eficaz por SAP2. Varias protenas de defensa tambin son susceptibles de la hidrlisis por SAP, como la lactoferrina salival, el inhibidor de proteinasa macroglobulina, las enzimas del estallido respiratorio del macrfago y casi todas las inmunoglobulinas, que incluyen la IgA de secrecin, la cual es resistente a muchas proteinasas bacterianas.30 La SAP2 de Candida tambin puede actuar en las cascadas proteolticas del husped, como los

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Cuadro 1. Principales propiedades de las enzimas aspartil-proteasas de Candida (Sap) Caracterstica Presentes en infecciones orales Presentes en infecciones vaginales Presentes a las 72 h de infeccin Presentes en la superficie de levadura e hifa Presentes en hifa Importantes en enfermedad invasiva Regulada por retroalimentacin positiva Regulada por temperatura pH ptimo (2 a 5) pH ptimo (3 a 7) Protena anclada en la membrana o pared celular Protena anclada en la pared celular Expresadas durante el cambio de fenotipo Activas en infecciones sistmicas Se expresan en hifa con polipptidos como fuente de N Las mutantes de esta enzima son invasoras Las mutantes de esta enzima reducen su invasividad Referencias: 1,3,14-17,19, 21-30. Sap1 Sap2 X X X X X X X X X X X Sap3 X X X X X X X X X X X X Sap4 Sap5 Sap6 X X Sap7 Sap8 Sap9

pdf X elaborado X por medigraphic

X X X X

X X X X X X X X X X

X X

X X

precursores de la cascada de coagulacin sangunea 31 que hidrolizan al precursor del endotelio-1 (pptido vasoconstrictor), al alterar la homeostasia vascular32 y activar la citocina proinflamatoria IL-1 . Por lo tanto, esta enzima participa en la activacin y mantenimiento de la respuesta inflamatoria en las superficies epiteliales in vivo.33
Fosfolipasas

transacilasa. Se secreta y detecta en la punta de las hifas durante la invasin a los tejidos.36
Lipasas

Otras enzimas hidrolticas secretadas, en particular las fosfolipasas, se han relacionado con la patobiologa de Candida albicans. 34 Las mutantes deficientes en fosfolipasa B1 han demostrado ser menos virulentas en modelos de infeccin en ratn.35 En la produccin extracelular de fosfolipasas, demostrada por el aclaramiento de la yema de huevo en C. glabrata, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. lusitaniae y C. krusei y por anlisis de Southern blot, se ha demostrado la presencia de homlogos de fosfolipasa intracelular (CAPLC1) en C. dubliniensis, C. glabrata, C. parapsilosis y C. tropicalis.34 Se han identificado cuatro fosfolipasas (PLA, PLB, PLC y PLD), de las cuales slo la PLB1 ha demostrado ser necesaria para la virulencia en modelo animal de candidiasis. Una cepa con la delecin de este gen (con menor produccin de esta enzima) reduce su virulencia hasta en 60%, comparada con la cepa silvestre. La PLB1A es una glucoprotena de 84 kDa, que tiene actividad de hidrolasa y lisofosfolipasa-

Las lipasas secretadas por Candida albicans s e codifican por una familia de genes con, al menos, 10 miembros (LIP1-LIP10). El patrn de expresin se ha investigado en infecciones experimentales y en pacientes que sufren candidiasis oral. Se ha demostrado que la expresin de esos genes depende del estado de infeccin, ms que de la localizacin del rgano.37
EXPRESIN DIFERENCIAL DE GENES EN REACCIN AL MEDIO AMBIENTE

Candida albicans es capaz de sobrevivir y proliferar en un amplio rango de tejidos, ya sea como comensal o como patgeno. Durante los diferentes estados y tipos de infeccin las clulas del hongo necesitan amplia flexibilidad, ya que cada sitio anatmico tiene sus propias presiones ambientales. El que Candida albicans tenga genes que codifiquen para factores de virulencia puede reflejar la adaptacin a un amplio rango de condiciones ambientales, en las que el hongo se encuentra durante su crecimiento in vivo. Por ejemplo, el pH sanguneo es casi neutro, mientras que el de la vagina es cido. Esta versatilidad puede sostenerse Dermatologa Rev Mex Volumen 49, Nm. 1, enero-febrero, 2005

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por un repertorio de genes que se expresan permitiendo su proliferacin bajo diferentes condiciones.10 Lo anterior se explica porque Candida albicans muestra expresin diferencial de genes en respuesta al pH del medio, lo que puede ser importante para su patognesis. El gen PHR1 codifica para una glucoprotena de superficie anclada en su membrana por el glucosilfosfatidilinositol y se expresa fuertemente cuando el pH del medio de crecimiento es mayor a 5.5, pero es indetectable por valores menores a este pH. El gen PHR2 (gen homlogo de PHR1) se identific tiempo despus y se expres de forma complementaria al pH de 4.0, pero no al pH mayor de 6.0. Ambos genes estn implicados en la morfognesis in vitro de C. albicans. La delecin de cualquiera de estos genes causa crecimientos alterados en los pH restrictivos. La principal funcin del gen PHR1 se asocia con la sntesis de la pared celular, cuya expresin es ptima en pH cercanos a la neutralidad, como el que existe en el torrente circulatorio o en los tejidos, mientras que en el canal vaginal su expresin se apaga favoreciendo la funcin del PHR2, que es similar pero con cido.38,39,40 ste es un ejemplo pdf elaborado porpH medigraphic de cmo Candida albicans se adapta a condiciones fisiolgicas extremas dentro del husped. Se han clonado genes de respuesta al pH en C . dubliniensis, llamados CdPHR1 y CdPHR2,10 los cuales son homlogos a los genes de C. albicans y se requieren para la virulencia en las infecciones superficiales (vaginales) y sistmicas. Puesto que Candida albicans, que por lo general causa infecciones en la superficie de las mucosas en pacientes inmunocomprometidos, puede penetrar a tejidos profundos, entrar al torrente circulatorio y diseminarse en todo el husped causando infecciones sistmicas, se evalu el perfil de transcripcin de genes de la misma especie expuesta a la sangre humana. Se demostr que la expresin de genes es diferente, incluyendo los que dependen de la respuesta al estrs, de la respuesta antioxidativa, del ciclo del glioxilato y de los atributos especficos de virulencia.41 Con esta informacin se demostr que C. albicans asegura su supervivencia en el medio ambiente hostil de la sangre y cmo el hongo escapa del torrente circulatorio como paso esencial en su diseminacin sistmica.

ADHESINAS

Un atributo de Candida albicans es que correlaciona de forma positiva su patogenicidad con la capacidad adherente a las clulas del husped. Las cepas adherentes de C. albicans son ms patgenas que las que tienen fenotipo menos adherente. Una adhesina se define como una biomolcula que promueve la adherencia de C. albicans a las clulas del husped o a sus ligandos especficos. Se han descrito protenas de C. albicans que se unen a varias protenas de la matriz extracelular de las clulas de mamfero, como fibronectina, laminina, fibringeno y colgeno tipo I y IV.42,43,44 Existen diferentes tipos de adhesinas en Candida, como Als, Hwp1p, Int1p y Mnt1p.
Als

Los genes de la familia Als de Candida albicans codifican glucoprotenas grandes de la superficie celular que estn relacionadas con el proceso de adhesin a las clulas del husped. Los genes Als tambin se encuentran en otras especies de Candida que han sido aisladas de muestras clnicas. Desde su caracterizacin inicial se not que el producto traducido del gen Als1 comparte una secuencia con la glucoprotena de adhesin a superficies celulares llamada -aglutinina, codificada por Saccharomyces cerevisiae (AG1).45 Esta molcula se requiere para el reconocimiento clula-clula. La familia Als tiene caractersticas tpicas de protenas de secrecin y un residuo hidrofbico carboxilo terminal que sugiere un ancla glucosilfosfatidilinositol. El ligando de unin se asocia con el residuo amino terminal de la protena.46,47 Las protenas Als estn densamente N- y O-glucosiladas, sobre todo en la regin de repeticin variable rica en serina/ treonina y en los dominios carboxilo terminal.48 Los genes Als se describieron primero en C. albicans49 y esta familia incluye, al menos, nueve genes. Cada gen Als tiene una estructura similar de tres dominios, que incluyen un dominio 5 de 1299 a 1308 pb, que es similar en 55 a 90% entre los componentes de la familia, un dominio central con un nmero variable de secuencias repetidas de 108 pb y un dominio 3 que tiene una longitud relativamente variable entre los

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genes de esta familia. El dominio de repeticin variable incluye una secuencia interna de cinco aminocidos: Val-Ala-Ser-Glu-Ser (VASES). Los genes Als estn regulados diferencialmente en C. albicans por condiciones fisiolgicas relevantes, como cambios en el medio de cultivo (Als1), morfologa (Als3/Als8) y fase de crecimiento.46,49 La expresin de los genes Als se ha realizado por deteccin inmunohistoqumica in vivo de las protenas en la superficie de Candida albicans en tejidos de enfermedad diseminada en ratn. Con esta metodologa se demostr que las protenas Als se distribuyen en la superficie celular, ms que en sitios especficos.
Hwp1p

tanto O- y N- en el hongo. La manana es el principal constituyente de la pared celular.

FORMACIN DE BIOPELCULAS

El gen Hwp1 codifica una manoprotena de la superficie externa que se cree se orienta por su dominio amino terminal expuesto hacia fuera. El carboxilo terminal se integra de manera covalente con el -glucano de la pared celular. La protena codificada por este gen (o Hwp1) sirve como sustrato de las transglutaminasas y, por lo tanto, la unin de la hifa de C. albicans a las clulas epiteliales de la boca debera ser estable y covalente y no revertirse por el uso de agentes que interrumpen la unin no covalente.
Int1p

Candida albicans se une a varios ligandos de las protenas de la matriz extracelular, que incluyen fibronectina, laminina y colgenas tipo I y IV. Las cepas que tienen delecin en los genes Int1 son menos virulentas o se adhieren con ms lentitud a las lneas celulares epiteliales. Tambin tienen deficiencias en la filamentacin en su crecimiento en leche-tween y agar Spider, por lo tanto, el gen Int1 juega un papel importante en la adherencia y filamentacin de C . albicans.50
Mnt1p

Las cepas de C. albicans que tienen delecin en el gen -1,2 manosil tranferasa (Mnt1) son menos capaces de adherirse in vitro y son avirulentas.51 La protena que codifica a este gen o Mnt1p es una protena de membrana tipo II que se requiere para la manosilacin

Las especies de Candida se reconocen como los principales agentes de infecciones adquiridas en el hospital. Son el tercer o cuarto patgeno aislado de sangre que sobrepasa la frecuencia de los bacilos 52 Su aparicin como patgeno gramnegativos. pdf elaborado por medigraphic nosocomial es importante, ya que es un factor de riesgo asociado con los procedimientos mdicos modernos, sobre todo con el uso de frmacos inmunosupresores o citotxicos, de antibiticos potentes que suprimen la flora bacteriana normal y de los dispositivos implantados de varias clases. Casi siempre, los dispositivos, como catteres intravasculares o urinarios y tubos endotraqueales, se asocian con infecciones y se detecta la formacin de biopelculas en su superficie.53 Otros dispositivos, como vlvulas cardiacas, marcapasos y reemplazos de articulaciones (cadera o rodilla), son susceptibles de infeccin por Candida, generalmente durante el tiempo de su colocacin. La mayor capacidad de C. albicans para formar biopelculas en estas superficies es la razn por la que esta especie es ms patognica que las que son menos capaces de formar estas estructuras, como C. glabrata, C. tropicalis, C. parapsilosis y C. keyfr.54 La percepcin de los microorganismos como formas unicelulares de vida se basa en el modo de crecimiento como cultivo puro; sin embargo, la mayor parte de los microbios persisten unidos a las superficies dentro de un ecosistema estructurado, como biopelculas y no como organismos libres en flotacin (planctnico). Una biopelcula es una comunidad de microorganismos unidos irreversiblemente a una superficie que contiene matriz exopolimrica y que muestra propiedades fenotpicas distintivas.55 En las biopelculas, las clulas desarrollan caractersticas fenotpicas que son diferentes de sus contrapartes planctnicas, como el incremento en la resistencia a los agentes antimicrobianos y la proteccin de las defensas del husped.56 Las biopelculas formadas por C. albicans estn compuestas por una capa de clulas en forma de levadura que se adhieren a la superficie en la parte de arriba. Esta capa la forman las clulas filamentosas en

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forma de hifa, rodeadas por una matriz extensiva exopolimrica.57,58 El material extracelular producido por C. albicans en esta biopelcula contiene carbohidratos, protenas y otros componentes desconocidos y difiere en la composicin del material extracelular producido por las clulas planctnicas (de flotacin libre). 59 Se han distinguido diversos sistemas para estudiar las propiedades de la formacin de biopelculas en Candida, como los modelos de crecimiento en discos de catter, tiras de acrlico, placas de microtitulacin y filtros de celulosa.60-64 El crecimiento se monitorea por ensayos colorimtricos, que dependen de la reduccin de la sal de tetrazolio (tcnica XTTx) o de la incorporacin de 3H-leucina. Todos estos sistemas se realizan en condiciones estticas de incubacin; sin embargo, el mtodo de biopelculas perfundidas en fermentador permite el control preciso de la velocidad de crecimiento.64 La formacin de biopelculas de C. albicans s e distingue por la adhesin inicial de las clulas de levadura, seguida por la germinacin y formacin de microcolonias, filamentacin, desarrollo de monocapa, proliferacin ypor maduracin. Con el uso de microscopa pdf elaborado medigraphic electrnica de barrido y confocal se han visualizado las biopelculas de C. albicans, que consisten en una

densa red de clulas de levadura e hifas embebidas dentro de un material extracelular que demuestra heterogeneidad espacial y la arquitectura tpica de microcolonias, con ramales de canalizaciones de agua.65 La formacin de biopelculas se manifiesta en tres fases: temprana (0 a 11 horas), intermedia (12 a 30 horas) y madura (38 a 72 horas) (figura 2). La estructura detallada de las biopelculas, despus de 48 horas de incubacin, consiste en una densa red de levaduras, hifas y pseudohifas. La mezcla de levaduras, hifas y material de matriz no se ha visto cuando el organismo crece en medio lquido o en una superficie de agar, lo que sugiere que la morfognesis se dispara cuando un organismo hace contacto con la superficie y que las clulas de la capa basal pueden tener un papel importante en el anclaje de la biopelcula a la superficie.66,67 Las cepas mutantes de C. albicans, con defectos en las rutas de filamentacin, son incapaces de formar biopelculas tridimensionales, lo que indica que la formacin de hifa es importante para la formacin, desarrollo y mantenimiento de biopelculas. Hay dos consecuencias importantes y con profundas implicaciones clnicas en la formacin de biopelculas: el marcado aumento en la resistencia a

Figura 2. Fases de formacin de biopelculas de Candida sp in vitro.74 La morfognesis se activa cuando la levadura entra en contacto con la superficie y la capa de las clulas basales. Tiene un papel importante de anclaje de la biopelcula a la superficie, siguiendo el orden: adhesin temprana, crecimiento, proliferacin y maduracin.75

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los agentes antimicrobianos y la proteccin contra las defensas del husped. La resistencia clnica se define como la persistencia o progresin de una infeccin, a pesar del tratamiento antimicrobiano apropiado. La resistencia a antifngicos por biopelculas de Candida se demostr por primera vez en 1995, en ensayos de catteres en disco.68 Tambin se ha estudiado en biopelculas en celulosa, poliestireno, elastmero de silicn, poliuretano y acrlicos de dentadura. Aunque las biopelculas de C. albicans y C. parapsilosis son claramente resistentes a los nuevos triazoles (voriconazol y ravuconazol), hay reportes de actividad antibiopelculas de formulaciones con lpidos de anfotericina B y dos equinocandinas, la micafungina y la caspofungina (inhibe la sntesis de 1,3 glucano, principal componente estructural de las paredes celulares de Candida). Se han propuesto tres posibles mecanismos de resistencia de las biopelculas a los frmacos y son: 1) Penetracin restringida a travs de la matriz de la biopelcula. 2) Cambios de fenotipo que ocasionan disminucin del crecimiento o limitacin de los nutrientes. 3) Expresin de genes de resistencia inducidos por el contacto con la superficie. Por lo que se refiere a la penetracin restringida, se ha sugerido que la matriz extracelular excluye o limita el acceso de los medicamentos a los organismos profundos de la biopelcula. Muchos estudios indican que la matriz no forma una barrera para la difusin, aunque para ciertos compuestos se retrasa la penetracin.69 Se ha propuesto que el glicocalix causa la disminucin de la difusin o secuestro de los antimicrobianos. Sin embargo, al disgregar las biopelculas, ajustar a una densidad celular y realizar la prueba de susceptibilidad en las biopelculas preformadas, utilizando el ensayo XTTk, los resultados demostraron que las biopelculas preformadas fueron intrnsecamente resistentes a los antifngicos y que las clulas mviles mantenan su fenotipo de resistencia despus de la resuspensin. Lo anterior sugiere que la integridad de la estructura de la biopelcula y el glicocalix confieren efecto mnimo en la resistencia de las clulas mviles.

Las biopelculas crecen poco a poco porque los nutrientes estn limitados, lo que ocasiona disminucin del metabolismo de los microorganismos. Con frecuencia, la lenta velocidad de crecimiento se asocia con la adopcin de diferentes fenotipos por los microorganismos, como cambios en la cubierta celular, con lo cual se afecta la susceptibilidad del microorganismo a los agentes antimicrobianos. Para comprobar si la velocidad de crecimiento es un parmetro importante en la adquisicin de resistencia pdf elaborado por medigraphic a los antifngicos, se generaron biopelculas con diferentes velocidades de crecimiento y se compar la susceptibilidad a la anfotericina B de las clulas de la biopelcula contra la de las clulas planctnicas que crecan a la misma velocidad. Se encontr que las clulas de la biopelcula fueron resistentes al frmaco a todas las velocidades de crecimiento probadas, mientras que las planctnicas fueron resistentes slo a bajas velocidades de crecimiento.64,70 Por lo tanto, la resistencia depende de otros factores, adems de la forma de crecimiento. Dado que la resistencia a los antibiticos en las biopelculas de C. albicans no puede atribuirse a la exclusin por la matriz o a la lenta velocidad de crecimiento, quiz exista un mecanismo adicional, como la expresin de genes inducidos por contacto, para adquirir otras propiedades y mediante el cual se adquiera la resistencia a los antibiticos.71 Los principales genes que contribuyen a la resistencia de los medicamentos son los que codifican a las bombas de eflujo multifrmacos; su regulacin resulta en un fenotipo resistente a varios agentes.72 Se determin que cuando un microorganismo se une a la superficie y forma una biopelcula expresa un fenotipo alterado . C. albicans y C. dubliniensis poseen dos diferentes tipos de bombas de eflujo: unin adenosin trifosfato cassette (ABC), transportadores que codifican los genes CDR (CDR1 y CDR2), y los facilitadores codificados por los genes MDR. Ambos tipos de genes se regulan durante la formacin y desarrollo de las biopelculas.65,73 Sin embargo, las cepas mutantes que llevan delecin simple o doble de estos genes son susceptibles al fluconazol cuando crecen de forma planctnica, pero retienen su fenotipo de resistencia cuando crecen en biopelculas.74 Por lo tanto, el mecanismo de resistencia es un proceso que

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no puede explicarse por un solo tipo de mecanismo molecular.

CONCLUSIN

7. 8. 9. 10. 11.

Los factores que contribuyen a la patognesis de C . albicans incluyen la morfognesis (transicin entre las clulas de levadura unicelulares y las formas de crecimiento filamentosas), las enzimas secretadas aspartil proteasas (SAP) y fosfolipasas y las biomolculas de reconocimiento del husped (adhesinas), que le permiten iniciar el proceso de formacin de biopelculas. Asimismo, el cambio de fenotipo se acompaa por alteraciones en la expresin de antgenos, morfologa colonial y afinidades de C. albicans a los tejidos. La informacin experimental de la contribucin de estos factores de virulencia ha determinado que su participacin individual no es suficiente para explicar los mecanismos de dao en el husped, sino que existe una regulacin combinada entre ellos. Esto se demostr con el polimorfismo y la expresin gentica para las aspartil proteasas. Los estudios que se realizan hoy en da en relacin pdf elaborado por medigraphic con la expresin gentica de los factores de virulencia, en funcin de diferentes condiciones ambientales, permitirn entender con mayor precisin cmo se va modificando la actividad biolgica de Candida para favorecer la adhesin o penetracin y, en consecuencia, modificar su papel como comensal para transformarse en microorganismo patgeno.
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EVALUACIN

1. Se consideran factores de virulencia en Candida, excepto: a) Sntesis de adhesinas b) Formacin de biopelculas c) Dimorfismo d) Secrecin de enzimas hidrolticas e) Formacin de cpsula 2. La penetracin de tejidos por la hifa: a) Ocurre durante fases tempranas de la infeccin b) Depende de la presencia de matriz exopolimrica c) Depende de la secrecin de enzimas hidrolticas d) Requiere seales morfogenticas pdf elaborado por medigraphic e) Es caracterstico de cepas mutantes de Candida 3. a) b) c) d) e) La filamentacin de Candida se produce: En estados tardos de colonizacin En presencia de suero a pH alcalino Slo en infecciones sistmicas En cepas de Candida no patgenas En estados tempranos de la colonizacin

a) b) c) d) e)

Alteraciones en la pared celular Modulacin de factores de virulencia Cambios en la polaridad de crecimiento Cambios en el ciclo celular Sus mecanismos de transduccin de seales no se modifican

6. En relacin con el reconocimiento diferencial de las clulas dendrticas hacia Candida cul aseveracin es incorrecta? a) Las clulas dendrticas pueden reconocer las diferentes formas del hongo b) El reconocimiento de la forma de levadura induce respuestas TH1, por lo tanto protectoras c) El reconocimiento del hongo por estas clulas induce respuestas apoptticas d) El reconocimiento de la forma de hifa induce respuestas TH2, por lo tanto no protectoras e) Las clulas dendrticas cuentan con diferentes receptores que le permiten reconocer a los diferentes morfotipos de Candida 7. El gen EFG1 de Candida: a) Codifica para las enzimas proteolticas (Sap) b) Codifica para un regulador transcripcional que participa en la morfognesis c) Es el principal componente de virulencia de Aspergillus nidulans d) Se expresa nicamente en infecciones orales e) Codifica para las adhesinas que participan en la formacin de biopelculas 8. Las enzimas aspartil- proteasas (o Saps) de Candida : a) Son reguladas por cinco genes b) Se expresan de forma secuencial en infecciones gastrointestinales c) Las mutantes de estos genes han demostrado que

4. Cul de los siguientes hallazgos que apoyan que la filamentacin es un factor de virulencia es incorrecto? a) La virulencia se incrementa con mutantes que no forman hifa b) Los tubos germinativos son ms adherentes c) La fagocitosis de hifas induce la muerte de los macrfagos d) La presencia de suero induce la formacin de filamentos e) La virulencia se atena con mutantes que no forman hifas 5. Las diferentes fases de la morfognesis de Candida implican los siguientes episodios, excepto: Dermatologa Rev Mex Volumen 49, Nm. 1, enero-febrero, 2005

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disminuyen su capacidad de virulencia d) Su participacin como factores de virulencia se debe a su capacidad de adherirse a la superficie de las clulas del husped e) Estn presentes en levaduras patgenas y no patgenas 9. La asociacin de las Saps como factores de virulencia en Candida se ha confirmado por los siguientes hechos, excepto: a) Hay modulacin de la virulencia con el uso de inhibidores especficos de estas enzimas b) Hay expresin simultnea de estas enzimas con la de las fosfolipasas c) Las mutantes deficientes de estas enzimas son menos virulentas d) Hay correlacin de su virulencia con la morfognesis e) Se observa la expresin de estas enzimas durante el proceso infeccioso 10. Los datos que demuestran la regulacin combinada entre el polimorfismo de Candida y los genes SAP se observan con las siguientes aseveraciones, excepto: a) Las mutantes del gen EFG1 tienen capacidad disminuida para formar hifas y secretar enzimas Saps b) Las cepas mutantes de SAP pueden modificar su capacidad invasiva c) El tigmotropismo est relacionado con la produccin de enzimas Saps d) Las cepas que producen hifa y tienen deficiencias en su produccin de Saps son menos invasivas e) Las Saps se expresan indistintamente del morfotipo de Candida 11. En relacin con las caractersticas de las aspartilproteasas, cul aseveracin es incorrecta? a) Saps 1, 2 y 3 tienen valor de pH ptimo de 2 a 5 b) Saps 2, 4, 6 y 7 se expresan principalmente en infecciones sistmicas c) Las Sap 1 a 6 tienen un papel decisivo en enfermedades invasivas d) Las Sap 4 a 6 son caractersticas del morfotipo de hifa e) La Sap 8 est regulada por accin de la temperatura

12. La Sap2: a) Tiene capacidad hidroltica en las protenas de la matriz extracelular b) Tiene capacidad de hidrolizar protenas del sistema inmunitario, como las IgM c) Su valor de pH ptimo es 7.0 d) Su naturaleza qumica permite anclarse en la pared celular del hongo e) Est ausente durante las fases iniciales de la infeccin pdf elaborado por medigraphic 13. Son caractersticas de la expresin del gen PH1, excepto: a) Es un gen que se expresa diferencialmente segn las condiciones del ambiente b) Codifica para una glucoprotena de superficie c) Se expresa a valores de pH de 4.0 d) Su principal funcin se asocia con la sntesis de pared celular e) En la vagina este gen no es activo 14. Qu informacin de las adhesinas de Candida es incorrecta? a) Son capaces de unirse a fibringeno, fibronectina y colgeno b) Son biomolculas que permiten su unin a las clulas del husped c) Als, Intp y Mnt1 son ejemplos de estas molculas d) Pueden ser reguladas diferencialmente por distintas condiciones del medio de cultivo e) Son glucoprotenas de secrecin 15. La Als de Candida albicans: a) Incluye una familia de quince genes para su expresin b) Los genes ALS comparten una secuencia con la aglutinina de Aspergillus nidulans c) Son protenas altamente glucosiladas d) Por estudios de ubicacin de estas molculas se demuestra que se encuentran en el citoplasma e) Tienen secuencias internas de repeticin de tres aminocidos 16. La adhesina Hwp de Candida albicans: a) Se codifica por un gen expresado por la familia ASP b) Esta molcula sirve como sustrato de las transglutaminasas

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Factores de virulencia en Candida sp

c) Es una protena de membrana tipo II que se requiere para la manosilacin d) Las cepas que tienen delecin de este gen tienen deficiencias en filamentacin y crecimiento en lechetween e) Codifica para una manoprotena de secrecin 17. La descripcin de una biopelcula es: a) Comunidad de microorganismos unidos irreversiblemente a una superficie formada por levaduras e hifas embebidas por una matriz exopolimrica b) Comunidad de microorganismos compuesta de clulas de levadura que se adhieren a la superficie y que estn rodeadas por una matriz c) Comunidad de microorganismos unidos a una superficie y cuyos integrantes mantienen sus caractersticas fenotpicas idnticas d) Comunidad de microorganismos unidos reversiblemente a una superficie y que est formada por hifas y levaduras embebidas por una matriz exopolimrica e) compuesta por clulas filamentosas pdf Comunidad elaborado por medigraphic que se adhieren a una superficie y que se rodea por una matriz 18. En relacin con las fases de formacin de biopelculas de Candida, cual aseveracin es la correcta? a) El orden de aparicin de las fases es: adhesin, crecimiento, maduracin y proliferacin b) En estudios in vitro se aprecia la estructura completa de 38 a 72 horas

c) Consta de cuatro fases: temprana, intermedia, madura y tarda d) La presencia de la matriz exopolimrica se aprecia hasta la fase madura e) El anclaje de la forma filamentosa a la superficie inicia el proceso 19. La morfognesis en las biopelculas se dispara cuando: a) Los filamentos sintetizan adhesinas que permiten la unin a la superficie b) Cuando se inicia la sntesis de matriz exopolimrica c) La levadura hace contacto con la superficie y hace el anclaje en la base d) Cuando se alcanza el mximo nivel de expresin de proteasas e) Cuando la hifa expresa el gen EFG1 20. Los mecanismos de resistencia a los antimicrobianos inducidos en la formacin de biopelculas pueden explicarse por los siguientes hechos, excepto: a ) Se producen cambios en el fenotipo de las clulas b) Hay diferencias en la velocidad de crecimiento c) Hay expresin de genes de resistencia por las clulas que hacen contacto en la superficie d) Hay penetracin restringida a travs de la matriz de la biopelcula e) Las clulas filamentosas inducen genes de resistencia (bombas de eflujo)

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