CEPILLADO Y LAVADO BRONQUIAL: PATOLOGÍA INFLAMATORIA, INFECCIOSA, NO NEOPLÁSICA Y NEOPLÁSICA.

CITOLOGIA EXFOLIATIVA II
Tecnología Medica ² Laboratorio Clínico

INTRODUCCION

Indicado si hay esputo positivo para malignidad, pero no se ha localizado la lesión por endoscopia. Lo que se hace es estudiar el pulmón segmento a segmento, para localizar la región del cáncer oculto. ASPIRADO BRONQUIAL Simultáneamente a la observación de árbol bronquial, se aspira material, que está constituido por una mezcla de moco espeso, elementos celulares y acelulares. Las secreciones obtenidas suelen ser escasas y la mayoría de las veces van destinadas al microbiólogo. (Los patólogos muchas veces reciben material etiquetado como aspirado, que en general corresponde a lavado) La muestra se procesa por centrifugación y el sedimento se extiende sobre un porta, se fija inmediatamente en alcohol de 96º y se tiñe con Papanicolau.

LAVADO BRANQUIOALVEOLAR (LBA) consiste en la instilacion y posterior aspiracion de solucion salina en las vias aereas distales, lográndose la obtencion de componentes celulares y no celulares supuestamente representativos de los fenomenos inflamatorios e inmunologicos que estan teniendo lugar en todo el parenquima pulmonar Técnica: 1.- Después de la inspección del árbol traqueo bronquial y antes de realizar la biopsia o el cepillado, se procede a acunar el fibrobroncoscopio (FBC) en un bronquio subsegmentario, preferiblemente del lóbulo medio o de la lingual si la lesión es difusa, pero puede escogerse el lóbulo que parezca estar mas comprometido radiológicamente; en lo posible debe evitarse el lóbulo superior ya que su disposición anatómica dificulta mucho la recuperación del liquido.

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. Una vez acunado el FBC. El volumen instilado varia entre 100-300 cc. para enfermedades tales como sarcoidosis. a menos que exista secreción bronquial purulenta. pudiendo interferir con el recuento celular. se procede a instilar solución salina estéril a 37°C en cantidades de 20-50cc. mientras que para otros dicha diferencia no es importante. Algunos autores encuentran diferencias en la concentración y en el recuento diferencial de células. aspirando seguidamente (con una presión negativa de 5080mm Hg) hasta recoger por lo menos la mitad del material instilado. deben lavarse múltiples sitios incluyendo el área enferma. Algunos autores recomiendan desechar los primeros 20cc instilados o destinarlos como "lavado bronquial" arguyendo que esa primera muestra recupera células y proteínas del bronquio distal y no del alveolo. 2. por lo que recomiendan lavados bilaterales. fibrosis pulmonar idiopática o fibrosis pulmonar asociada con enfermedades del colágeno.Cuando la enfermedad sea localizada. entre el lóbulo medio y la lingula. teniendo en cuenta que volúmenes menores alteran el recuento celular total y volúmenes mayores aumentan la morbilidad. Otros prefieren incluir los primeros 20cc en el total de la muestra. pareciendo lo ideal 100-150 cc. (se recomiendan 5 instilaciones de 20cc cada una).

De la anterior solución se obtienen alícuotas de 150 microlitros que son centrifugadas a 400-600 rpm durante 5-1 0 minutos. El resto de alícuotas no fijadas y lavadas se pueden utilizar para estudios inmunocitoquimicos. se centrifuga y se substituye el sobrenadante por medio de cultivo.3. El sobrenadante de la primera centrifugación permite el estudio de diversos componentes bioquímicos como determinación de albumina y proteínas totales. agregar ningún medio de cultivo o antibiótico. se retiran los restos de moco visible y se centrifuga a 800. Procesar el liquido entre 30-90 minutos después de recolectado.173 1000rpm. Acto seguido. En caso de procesamiento inmediato. guardándolo a4°C hasta su procesamiento. se realiza el recuento celular total en una cámara de Neubauer. posteriormente se lavan las células en PBS y se resuspenden en medio de cultivo. de lo contrario. Una preparación no fijada se tiñe con Giemsa y se utiliza para el recuento diferencial. . inmunoglobulinas. 4. 5. a 25°C. Para algunos autores las células del lavado se mantienen viables si el LBA se guarda por 4 horas. haptoglobulina. surfactante y trasferrina..

se toman 100 micras y se centrifugan 5-10 minutos. eosinófilos. Se centrifuga a baja velocidad y con el sobrenadante se hace estudio químico. basófilos. linfocitos y macrófagos. evitando en ocasiones la realización de procedimientos invasivos. Se hace recuento de células sobre 300 como mínimo. Se constituye también en una herramienta de investigación de primera mano en algunas entidades como el asma . Cada reaspiración se procesa individualmente anotando la zona de procedencia. Patologías relacionadas El lavado encuentra hasta el momento su mayor utilidad en el diagnostico de las infecciones oportunistas y de algunas neuropatías intersticiales.Lavado broncoalveolar Es la técnica de elección para el estudio de las enfermedades intersticiales del pulmón. controlando las células mencionadas anteriormente. Se tiñe con May Grunwald-Giemsa o Papanicolau. Se seca al aire o se fija. Se realiza un recuento de PMN neutrófilos. Al concentrado celular se le añaden 1-2 ml de suero fisiológico.

Lavado bronquial: se observan macrófagos alveolares (MA). Aumento fotográfico 400x. eosinófilos (E) y leucocitos neutrófilos (N). Coloración HematoxilinaEosina. .

CEPILLADO BRONQUIAL Se utiliza esta técnica. El cepillo sale y se dirige hacia la lesión. También se puede realizar bajo monitorización radiológica. . quedando entre las cerdas abundante material celular. Una vez localizada. Se impacta la punta del broncoscopio en un punto determinado y. El cepillado al final de la sesión endoscópica. Se impacta la punta del broncoscopio. en la que se frota varias veces y. para lesiones no visibles directamente a la endoscopía. se retrae al interior de su funda. controlamos la zona a estudiar y la colocación del broncoscopio. mediante rayos X. Se saca a través del canal del instrumento y se procesa. a continuación. cuando mediante el fibrobroncoscopio es posible observar una lesión dentro de la luz bronquial. se introduce un cepillo a través de aquel. con el que se raspa la lesión directamente.

Existe una modalidad que es el cepillado con catéter protegido en el que el cepillo viene incluido en una doble funda con un tapón distal reabsorbible y se utiliza para estudio microbiológico con recuento de colonias bacterianas .

Empuje la brocha fuera de su protector y realice el cepillado. Inserte la brocha citológica dentro del canal abierto del broncoscopio y avance. . Recuerde que la brocha se seca al aire rápidamente. lo cual es negativo para el cultivo Envíe al laboratorio inmediatamente.Técnica: Utilice un broncoscopio de doble lumen. Si desea estudio por micobacterias. Jale la brocha hacia dentro de su protector y remueva la unidad de brocha completa. puede colocar la brocha dentro de un tubo conteniendo 10 ml de caldo de Middlebrook 7H9. Coloque la brocha dentro del tubo de transporte conteniendo solución salina o Ringer·s lactato.

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Aspectos básicos sobre la interpretación de las extensiones citológicas Se debe valorar lo siguiente: >Aspecto general del extendido incluyendo sustancia de fondo y disposición de las células. situación. >Aspecto de células en su conjunto. >Núcleo: Número. >Cantidad de citoplasma y relación n/c. membrana. forma y coloración. >Nucléolo: Número. forma. . tamaño. coloración. forma. tamaño. tinción. es decir. etc. tamaño. picnosis.

Atipias benignas del AR . broncoscopio o radioterapia. Las más frecuentes son: a) A nivel citoplasmático: ‡ Aumento de tamaño ‡Variación del tamaño adquiriendo una forma más poligonal ‡Pueden desaparecer los cilios. b) A nivel del núcleo: ‡Aumento de tamaño ‡Aumento de número ‡Picnosis . Pueden ser debidas a diferentes mecanismos como exposición a agentes físicos y químicos. Alteraciones degenerativas No son específicas de ninguna patología concreta. En general se conserva la placa terminal ‡Vacuolas citoplasmáticas ‡Inclusiones citoplasmáticas eosinófilas debidos a la degeneración de orgánulos citoplasmáticos.

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La alteración no es específica del AR. Suele haber picnosis y fragmentación de núcleos (cariorrexis). . por infecciones o por obstrucción por cuerpo extraño). en la que la célula queda reducida a un penacho o manojo de cilios que emerge de un anillo estrecho de citoplasma sin núcleo. En otras ocasiones. solo hay disminución de la zona citoplasmática subnuclear. congénita. . . ‡Carcinomas ‡Puede no asociarse a nada de lo anterior. pudiendo aparecer en otros epitelios columnares. Forma peculiar de degeneración de las células cilíndricas descrita por Papanicolau. Las causas pueden ser: ‡Infecciones virales ‡Bronquiectasias (Dilataciones irreversibles de los bronquios y destrucción de la pared bronquial.c) Ciliocitoftoria: . como el de endocérvix o útero.

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Los criterios para diferenciarlas son: Buena cohesión celular. los días transcurridos desde la misma y las condiciones locales. que suele respetar a las basales. . por estudio endoscópico. por ejemplo. se producen cambios regenerativos en los días posteriores a la misma. Los 2 o 3 primeros días aparecen células inmaduras que pueden confundirse con neoplásicas indiferenciadas. Los cambios dependen de la intensidad de la agresión. . a pesar del agrandamiento del núcleo. Cuando el epitelio respiratorio sufre una agresión. se ven células intermedias entre las típicas . que puede tener algún nucléolo prominente.Fenómenos reparativos . Los cambios consisten en descamación de células cilíndricas. Además. distribución uniforme de la cromatina. si no es excesivamente intensa.

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y otras veces. multinucleación. infecciones respiratorias repetidas«). Se encuentran hasta en el 42% de pacientes bronquíticos asmáticos.Hiperplasia del epitelio respiratorio Alteración que aparece rapidamente. . hasta en dos días. Para diferenciarlos de células malignas. que reciben el nombre de Cuerpos de Creolá. núcleo y nucléolo. Además. conducen a hiperplasia continuada que se manifiesta en el esputo. recordando un gusanoµ. la relación n/c es correcta y la cromatina uniforme. como ´grupos de células hiperplásicas exfoliadas en forma enrollada. buscamos en su superficie la presencia de cilios. por aumento de la actividad. y se manifiesta por la presencia de células agrandadas en todo: Aumenta tamaño celular. Los irritantes crónicos (tabaco.

Lavado bronquio-alveolar: hiperplasia bronquial .

aparición en la periferia de estas placas de células cilíndricas diferenciadas maduras . Los datos a favor de benignidad son: Grupos cohesivos. especialmente el de células pequeñas. hay que diferenciarlos de algunos tipos de carcinoma. muy cohesivos. N pequeños y homogéneos y. Debido a este aspecto . con C de pequeñas magnitud y N intensamente basófilos.(Entre las cilíndricas en el epitelio bronquial) Aparecen como grupos de células cuboideas pequeñas.

Si afecta a los tipo II. pueden aparecer como células sueltas o en pequeños grupos. Se relaciona su aparición con procesos irritativos. .Hiperplasia de células alveolares Aparecen como células cuboideas. N grandes con nucléolo prominente. C hiperdistendido con grandes vacuolas (DD con carcinoma adenoescamoso bronquioalveolar). . especialmente en enfermedades intersticiales o inflamatorias crónicas del pulmón. semejantes a las basales del epitelio escamoso.

a veces. El nucléolo es pequeño. El C es cianófilo. bronquiectasias. tabaquismo. neumonías. algo menores que las correspondientes escamosas. exposición a radioterapia. destacando los signos de amoldamiento del C. tamaño uniforme y de cromatina finamente granular. exposición a humos. etc. Los N centrales. . Parasitosis. . con vacuolas. siendo las células metaplásicas muy parecidas a las del epitelio genital femenino: Poligonales. por escamoso.Metaplasia escamosa En el epitelio respiratorio se reemplaza el epitelio cilíndrico ciliado pseudoestratificado. Causa: irritación crónica del epitelio original debido a distintas circunstancias como. Se disponen a modo de mosaico. bronquitis. ovales. La metaplasia se origina a partir de las células basales.

disqueratosis. hipercromatosis.Podemos clasificar la metaplasia en: >Benigna: Uniformidad celular y relación n/c normal >Atípica: Anisocariosis. Las células son más redondeadas descamando normalmente aisladas Se asocia en un 40% a carcinoma epidermoide .

. engrosamiento de la membrana nuclear y granulacion de la cromatina. Si estos detalles se observan hablamos de metaplasia escamosa con displasia o metaplasia atipica.Pueden verse alteraciones en la relacion N/C.

lo que condiciona un bloqueo del intercambio gaseoso en el alvéolo. . . En la actualidad se usa el lavado broncoalveolar. después de heridas o úlceras). . . Veremos más adelante. técnica de elección y seguimiento de estas patologías.Respuesta a algunos fármacos.Reacciones alérgicas al polvo u otros alérgenos.Sarcoidosis (Enfermedad sistémica crónica con reacción inflamatoria granulomatosa en distintas localizaciones. Tejido de granulación es un conjuntivo joven. -Idiomática El diagnóstico antiguamente se basaba en la biopsia pulmonar.Neumoconiosis. Esta situación puede aparecer en: .Citología de los procesos inflamatorios no infecciosos Enfermedad intersticial del pulmón Proceso que consiste en una fibrosis progresiva de los tabiques alveolares y del intersticio pulmonar. Da lugar a IR crónica. cuya manifestación clínica más frecuente es la disnea progresiva. muy vascularizado. .

Citología: Su interpretación es complicada. La celularidad normal del lavado broncoalveolar es: ‡Macrófagos: 80 a 90 % ‡Linfocitos: 5 a 20 % ‡Neutrófilos: 4 % ‡Eosinófilos: Menos del 4% ‡Basófilos: Menos del 1% ‡Otras (epiteliales): Menos del 3% . Básicamente consiste en realizar un recuento diferencial entre macrófagos. leucocitos PMN y linfocitos.

Lavado Broncoalveolar de paciente expuesto a Asbesto. Coloración de Azul de Prusia 40X .

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. Las cándidas en marrón. Con Papanicolau se ven de color rosado o violeta. negro sobre fondo verde. Algunos hongos presentan una morfología característica y pueden ser identificados correctamente. Con tinciones de plata.Citología de los procesos infecciosos Micosis pulmonares Son infecciones pulmonares por hongos. rojos. Con el PAS. muchas de las cuales pueden detectarse en muestras de citología teñidas de forma rutinaria con la técnica de Papanicolau. La incidencia de micosis ha aumentado con la aparición del SIDA y con las migraciones.

es generalmente indicativa de infección activa. Su presencia debe informarse siempre. a veces aparece como unas pequeñas esporas de morfología oval entre 2 y 4 micras de diámetro. las esporas se encadenan unas a otras. .Candida: En las muestra citológicas. dando una imagen de pseudohifas o pseudofilamentos. La presencia de contexto inflamatorio y de pseudohifas. En otras ocasiones. Las cándidas se tiñen bien con Pas y técnicas de plata. correspondiendo al clínico la responsabilidad de su evaluación.

Esta técnica tiñe hongos. en localización intracelular.) . pero en realidad. membranas basales. Histoplasma Capsulatum. (Hongo se tiñe de de negro. ya que su tamaño es pequeño y se sitúa. De forma ocasional se observan gemaciones únicas. dentro de macrófagos y PMN. muestran un halo claro periférico interpretado como una cápsula. fibras de reticulina y elásticas. sobre todo. Su identificación es difícil si técnicas complementarias. Su identificación es más sencilla con técnicas de metenamina argéntica. es un artefacto. Existe una variedad en Europa y otra en África.Histoplasmosis: La Histoplasmosis es una enfermedad infecciosa producida por un hongo llamado. mucinas. A gran aumento. glucógeno.

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‡En ocasiones. neutrófilos y detritus celulares. que ocupan todo el núcleo. inclusiones eosinófilas en ´ojo de búhoµ. ‡Células gigantes multinucleadas de distintas formas y tamaños. Alteraciones citológicas en conjunto: ‡Fondo inflamatorio con presencia de macrófagos. ‡Cuerpos de inclusión intranucleares en vidrio esmerilado. próximo a la membrana nuclear . dejando un pequeño halo alrededor de las mismas.Herpes Zoster: Causado por el mismo virus de la varicela. con amoldamiento nuclear.

Caseosis: Necrosis en la que el tejido tiene una mezcla de proteínas y grasa. mediano tamaño. es decir. Células de Langhans: Célula gigante multinucleada. en la que se observa lo siguiente: Células epitelioides: Se originan a partir de histiocitos. C cianófilo con bordes mal definidos.Tuberculosis En la citología se observa una reacción tisular característica. elementos de morfología alargada. Aparece como un material amorfo granular que se tiñe de forma eosinófila. constituida por granulomas tuberculoides. cianófila o anfófila . Son iguales que las que aparecen en la Sarcoidosis. y disposición en grupos irregulares. N en periferia en forma de herradura. que se absorbe lentamente. N alargado con cromatina suave y reforzamiento de membrana. aunque es más frecuente que haya múltiples núcleos sin distribución característica.

Las muestras se pueden obtener por esputo inducido. y de 90 a 95 % para la segunda. . broncoscopio con lavado broncoalveolar. No obstante. Desde un punto de vista morfológico. frente a la luz ultravioleta. en las muestras citológicas se identifican masas o conglomerados de aspecto espumoso. La sensibilidad media es de 60 % para la primera prueba.Pneumocistis Carnii El diagnóstico requiere la demostración histopatológica del microorganismo mediante tinciones de metenamina argéntica o Giemsa. eosinófila o anfófila con Papanicolau. cuando se dispone de experiencia o. que se tiñen de forma cianófila. los quistes presentan una intensa tonalidad amarillenta en las muestras teñidas con el método anterior.

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Lavado roncoalveolar de aciente con I y eumonía or . oloraci n de iff ui . .Lavado roncoalveolar de aciente con I Y eumonía or . arini. arini. oloraci n de Grocott .

las procedentes de cepillados bronquiales.Citología de los tumores pulmonares El estudio citológico se emplea fundamentalmente. lo cual dificulta en gran medida el diagnóstico. en el estudio de pacientes sintomáticos o con anormalidades radiográficas. . Las muestras obtenidas en los esputos y lavados bronquiales muestran cambios degenerativos de variable intensidad. como ocurre en carcinoma de cuello uterino. no soliendo utilizarse como método de screening. debe esperarse mayor número de positividades. en menor medida. Por esta razón. exudado inflamatorio y abundantes células normales del TR. y suelen estar entremezcladas con moco. las muestras obtenidas por Paaf y. contienen un número mayor de células viables con utilidad diagnóstica y suelen disponerse en patrones característicos.

Carcinoma escamoso o epidermoide Constituyen más de la mitad de los carcinomas broncogénicos. Fondo: Sucio con restos necróticos celulares y reacción inflamatoria. Disposición celular: Grupos cohesivos. Anomalías características. cuando los cambios degenerativos o inflamatorios son de tal calibre. laxos. con formas en fibra. en cuya porción final se encuentran los desmosomas Citología Se recomienda la máxima cautela con muestras en las que no se observan células viables íntegras o. Morfología celular: Pleomorfismo. diagnosticándose en estadios avanzados con RX positiva. . de aspecto arremolinado. con formas redondeadas o poligonales semejantes a escamosas. Presentando: Puentes intercelulares. que ocultan el detalle nuclear. que no son más que pequeñas prolongaciones citoplasmáticas. fragmentados o células aisladas. perlas malignas epiteliales (globos córneos). renacuajo. aunque se podrían identificar situaciones preinvasivas.

en ausencia de queratinización evidente. En ocasiones. apareciendo las células más o menos redondeadas. . Se llaman en ´ojo de pájaroµ o ´canibalismoµ. de coloración orangófila siendo. se ve azul verdoso. la queratinización tan intensa que oculta el núcleo. También es frecuente pequeños grupos de células que dan imagen de falsa fagocitosis. Núcleo: Suele estar aumentado. orangófilas y sin núcleo visible.Citoplasma: Normalmente abundante. Muchas veces. indicando áreas menos diferenciadas del tumor. no pasa desapercibido. en ocasiones. no se ve nucléolo Tendencia a picnosis nuclear con núcleos en tinta china. Se ve un anillo citoplasmático interno denso por la presencia y acúmulo de filamentos intermedios. y otro periférico más claro. por lo que se llaman células ´fantasmaµ. En estos casos la presencia de un doble anillo es indicador de células escamosa. La membrana nuclear es irregular con alguna indentación Muy hipercromáticos. de bordes definidos y densos.

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salvo atipia. Normal .Carcinoma epidermoide Disposición mosaico Células renacuajo Células fibra Células fantasma Canibalismo Núcleos homogéneos Si Hipercromatosis Relación n/c Alterada No Si Si Si Si No Metaplasia escamosa Si No No No No Si. salvo atipia. No.