CEPILLADO Y LAVADO BRONQUIAL: PATOLOGÍA INFLAMATORIA, INFECCIOSA, NO NEOPLÁSICA Y NEOPLÁSICA.

CITOLOGIA EXFOLIATIVA II
Tecnología Medica ² Laboratorio Clínico

INTRODUCCION

Indicado si hay esputo positivo para malignidad, pero no se ha localizado la lesión por endoscopia. Lo que se hace es estudiar el pulmón segmento a segmento, para localizar la región del cáncer oculto. ASPIRADO BRONQUIAL Simultáneamente a la observación de árbol bronquial, se aspira material, que está constituido por una mezcla de moco espeso, elementos celulares y acelulares. Las secreciones obtenidas suelen ser escasas y la mayoría de las veces van destinadas al microbiólogo. (Los patólogos muchas veces reciben material etiquetado como aspirado, que en general corresponde a lavado) La muestra se procesa por centrifugación y el sedimento se extiende sobre un porta, se fija inmediatamente en alcohol de 96º y se tiñe con Papanicolau.

LAVADO BRANQUIOALVEOLAR (LBA) consiste en la instilacion y posterior aspiracion de solucion salina en las vias aereas distales, lográndose la obtencion de componentes celulares y no celulares supuestamente representativos de los fenomenos inflamatorios e inmunologicos que estan teniendo lugar en todo el parenquima pulmonar Técnica: 1.- Después de la inspección del árbol traqueo bronquial y antes de realizar la biopsia o el cepillado, se procede a acunar el fibrobroncoscopio (FBC) en un bronquio subsegmentario, preferiblemente del lóbulo medio o de la lingual si la lesión es difusa, pero puede escogerse el lóbulo que parezca estar mas comprometido radiológicamente; en lo posible debe evitarse el lóbulo superior ya que su disposición anatómica dificulta mucho la recuperación del liquido.

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a menos que exista secreción bronquial purulenta. (se recomiendan 5 instilaciones de 20cc cada una). aspirando seguidamente (con una presión negativa de 5080mm Hg) hasta recoger por lo menos la mitad del material instilado. Algunos autores recomiendan desechar los primeros 20cc instilados o destinarlos como "lavado bronquial" arguyendo que esa primera muestra recupera células y proteínas del bronquio distal y no del alveolo.Cuando la enfermedad sea localizada. se procede a instilar solución salina estéril a 37°C en cantidades de 20-50cc. El volumen instilado varia entre 100-300 cc. . fibrosis pulmonar idiopática o fibrosis pulmonar asociada con enfermedades del colágeno. entre el lóbulo medio y la lingula. Otros prefieren incluir los primeros 20cc en el total de la muestra. por lo que recomiendan lavados bilaterales. teniendo en cuenta que volúmenes menores alteran el recuento celular total y volúmenes mayores aumentan la morbilidad. Algunos autores encuentran diferencias en la concentración y en el recuento diferencial de células. deben lavarse múltiples sitios incluyendo el área enferma. Una vez acunado el FBC. para enfermedades tales como sarcoidosis. mientras que para otros dicha diferencia no es importante. pareciendo lo ideal 100-150 cc. pudiendo interferir con el recuento celular. 2.

El resto de alícuotas no fijadas y lavadas se pueden utilizar para estudios inmunocitoquimicos. se realiza el recuento celular total en una cámara de Neubauer. Para algunos autores las células del lavado se mantienen viables si el LBA se guarda por 4 horas. Acto seguido. 5. a 25°C.173 1000rpm. inmunoglobulinas.. se centrifuga y se substituye el sobrenadante por medio de cultivo. 4. De la anterior solución se obtienen alícuotas de 150 microlitros que son centrifugadas a 400-600 rpm durante 5-1 0 minutos. de lo contrario. se retiran los restos de moco visible y se centrifuga a 800. . posteriormente se lavan las células en PBS y se resuspenden en medio de cultivo. surfactante y trasferrina. Una preparación no fijada se tiñe con Giemsa y se utiliza para el recuento diferencial. guardándolo a4°C hasta su procesamiento. El sobrenadante de la primera centrifugación permite el estudio de diversos componentes bioquímicos como determinación de albumina y proteínas totales. Procesar el liquido entre 30-90 minutos después de recolectado.3. En caso de procesamiento inmediato. haptoglobulina. agregar ningún medio de cultivo o antibiótico.

Cada reaspiración se procesa individualmente anotando la zona de procedencia. Se centrifuga a baja velocidad y con el sobrenadante se hace estudio químico. Se hace recuento de células sobre 300 como mínimo.Lavado broncoalveolar Es la técnica de elección para el estudio de las enfermedades intersticiales del pulmón. linfocitos y macrófagos. Se realiza un recuento de PMN neutrófilos. evitando en ocasiones la realización de procedimientos invasivos. controlando las células mencionadas anteriormente. Al concentrado celular se le añaden 1-2 ml de suero fisiológico. Patologías relacionadas El lavado encuentra hasta el momento su mayor utilidad en el diagnostico de las infecciones oportunistas y de algunas neuropatías intersticiales. Se tiñe con May Grunwald-Giemsa o Papanicolau. basófilos. eosinófilos. Se seca al aire o se fija. se toman 100 micras y se centrifugan 5-10 minutos. Se constituye también en una herramienta de investigación de primera mano en algunas entidades como el asma .

Coloración HematoxilinaEosina. . eosinófilos (E) y leucocitos neutrófilos (N).Lavado bronquial: se observan macrófagos alveolares (MA). Aumento fotográfico 400x.

se introduce un cepillo a través de aquel. También se puede realizar bajo monitorización radiológica. mediante rayos X. El cepillo sale y se dirige hacia la lesión. . quedando entre las cerdas abundante material celular. Se saca a través del canal del instrumento y se procesa.CEPILLADO BRONQUIAL Se utiliza esta técnica. se retrae al interior de su funda. en la que se frota varias veces y. con el que se raspa la lesión directamente. controlamos la zona a estudiar y la colocación del broncoscopio. Se impacta la punta del broncoscopio. Una vez localizada. Se impacta la punta del broncoscopio en un punto determinado y. a continuación. El cepillado al final de la sesión endoscópica. para lesiones no visibles directamente a la endoscopía. cuando mediante el fibrobroncoscopio es posible observar una lesión dentro de la luz bronquial.

Existe una modalidad que es el cepillado con catéter protegido en el que el cepillo viene incluido en una doble funda con un tapón distal reabsorbible y se utiliza para estudio microbiológico con recuento de colonias bacterianas .

lo cual es negativo para el cultivo Envíe al laboratorio inmediatamente. Empuje la brocha fuera de su protector y realice el cepillado. Coloque la brocha dentro del tubo de transporte conteniendo solución salina o Ringer·s lactato. .Técnica: Utilice un broncoscopio de doble lumen. Jale la brocha hacia dentro de su protector y remueva la unidad de brocha completa. Recuerde que la brocha se seca al aire rápidamente. Si desea estudio por micobacterias. puede colocar la brocha dentro de un tubo conteniendo 10 ml de caldo de Middlebrook 7H9. Inserte la brocha citológica dentro del canal abierto del broncoscopio y avance.

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forma. picnosis. tamaño. tinción. forma. >Cantidad de citoplasma y relación n/c.Aspectos básicos sobre la interpretación de las extensiones citológicas Se debe valorar lo siguiente: >Aspecto general del extendido incluyendo sustancia de fondo y disposición de las células. tamaño. >Núcleo: Número. . >Nucléolo: Número. tamaño. >Aspecto de células en su conjunto. membrana. forma y coloración. etc. situación. es decir. coloración.

b) A nivel del núcleo: ‡Aumento de tamaño ‡Aumento de número ‡Picnosis . En general se conserva la placa terminal ‡Vacuolas citoplasmáticas ‡Inclusiones citoplasmáticas eosinófilas debidos a la degeneración de orgánulos citoplasmáticos. Las más frecuentes son: a) A nivel citoplasmático: ‡ Aumento de tamaño ‡Variación del tamaño adquiriendo una forma más poligonal ‡Pueden desaparecer los cilios. Pueden ser debidas a diferentes mecanismos como exposición a agentes físicos y químicos.Atipias benignas del AR . broncoscopio o radioterapia. Alteraciones degenerativas No son específicas de ninguna patología concreta.

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solo hay disminución de la zona citoplasmática subnuclear. Forma peculiar de degeneración de las células cilíndricas descrita por Papanicolau. en la que la célula queda reducida a un penacho o manojo de cilios que emerge de un anillo estrecho de citoplasma sin núcleo. . por infecciones o por obstrucción por cuerpo extraño). como el de endocérvix o útero. Suele haber picnosis y fragmentación de núcleos (cariorrexis). Las causas pueden ser: ‡Infecciones virales ‡Bronquiectasias (Dilataciones irreversibles de los bronquios y destrucción de la pared bronquial. La alteración no es específica del AR.c) Ciliocitoftoria: . . congénita. pudiendo aparecer en otros epitelios columnares. ‡Carcinomas ‡Puede no asociarse a nada de lo anterior. En otras ocasiones. .

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se ven células intermedias entre las típicas . si no es excesivamente intensa. Los 2 o 3 primeros días aparecen células inmaduras que pueden confundirse con neoplásicas indiferenciadas. . . los días transcurridos desde la misma y las condiciones locales. se producen cambios regenerativos en los días posteriores a la misma. por estudio endoscópico. a pesar del agrandamiento del núcleo. Cuando el epitelio respiratorio sufre una agresión. Los cambios dependen de la intensidad de la agresión. Además. que suele respetar a las basales.Fenómenos reparativos . que puede tener algún nucléolo prominente. distribución uniforme de la cromatina. Los cambios consisten en descamación de células cilíndricas. Los criterios para diferenciarlas son: Buena cohesión celular. por ejemplo.

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Los irritantes crónicos (tabaco. la relación n/c es correcta y la cromatina uniforme. como ´grupos de células hiperplásicas exfoliadas en forma enrollada. multinucleación. y otras veces. Se encuentran hasta en el 42% de pacientes bronquíticos asmáticos. Además. recordando un gusanoµ. núcleo y nucléolo. por aumento de la actividad. buscamos en su superficie la presencia de cilios. Para diferenciarlos de células malignas. infecciones respiratorias repetidas«).Hiperplasia del epitelio respiratorio Alteración que aparece rapidamente. . que reciben el nombre de Cuerpos de Creolá. conducen a hiperplasia continuada que se manifiesta en el esputo. y se manifiesta por la presencia de células agrandadas en todo: Aumenta tamaño celular. hasta en dos días.

Lavado bronquio-alveolar: hiperplasia bronquial .

aparición en la periferia de estas placas de células cilíndricas diferenciadas maduras . especialmente el de células pequeñas. N pequeños y homogéneos y. muy cohesivos. Los datos a favor de benignidad son: Grupos cohesivos. con C de pequeñas magnitud y N intensamente basófilos. Debido a este aspecto . hay que diferenciarlos de algunos tipos de carcinoma.(Entre las cilíndricas en el epitelio bronquial) Aparecen como grupos de células cuboideas pequeñas.

Se relaciona su aparición con procesos irritativos. Si afecta a los tipo II.Hiperplasia de células alveolares Aparecen como células cuboideas. . . semejantes a las basales del epitelio escamoso. especialmente en enfermedades intersticiales o inflamatorias crónicas del pulmón. C hiperdistendido con grandes vacuolas (DD con carcinoma adenoescamoso bronquioalveolar). N grandes con nucléolo prominente. pueden aparecer como células sueltas o en pequeños grupos.

algo menores que las correspondientes escamosas. ovales. exposición a radioterapia. destacando los signos de amoldamiento del C. . etc. Parasitosis. Causa: irritación crónica del epitelio original debido a distintas circunstancias como. Los N centrales.Metaplasia escamosa En el epitelio respiratorio se reemplaza el epitelio cilíndrico ciliado pseudoestratificado. bronquitis. por escamoso. siendo las células metaplásicas muy parecidas a las del epitelio genital femenino: Poligonales. La metaplasia se origina a partir de las células basales. El C es cianófilo. a veces. . neumonías. tamaño uniforme y de cromatina finamente granular. con vacuolas. exposición a humos. bronquiectasias. El nucléolo es pequeño. Se disponen a modo de mosaico. tabaquismo.

Las células son más redondeadas descamando normalmente aisladas Se asocia en un 40% a carcinoma epidermoide . disqueratosis. hipercromatosis.Podemos clasificar la metaplasia en: >Benigna: Uniformidad celular y relación n/c normal >Atípica: Anisocariosis.

Si estos detalles se observan hablamos de metaplasia escamosa con displasia o metaplasia atipica. engrosamiento de la membrana nuclear y granulacion de la cromatina.Pueden verse alteraciones en la relacion N/C. .

-Idiomática El diagnóstico antiguamente se basaba en la biopsia pulmonar. . cuya manifestación clínica más frecuente es la disnea progresiva.Neumoconiosis.Respuesta a algunos fármacos. lo que condiciona un bloqueo del intercambio gaseoso en el alvéolo. Tejido de granulación es un conjuntivo joven. . Da lugar a IR crónica. . después de heridas o úlceras). . . Veremos más adelante. Esta situación puede aparecer en: . muy vascularizado.Sarcoidosis (Enfermedad sistémica crónica con reacción inflamatoria granulomatosa en distintas localizaciones.Citología de los procesos inflamatorios no infecciosos Enfermedad intersticial del pulmón Proceso que consiste en una fibrosis progresiva de los tabiques alveolares y del intersticio pulmonar.Reacciones alérgicas al polvo u otros alérgenos. En la actualidad se usa el lavado broncoalveolar. técnica de elección y seguimiento de estas patologías.

Citología: Su interpretación es complicada. Básicamente consiste en realizar un recuento diferencial entre macrófagos. leucocitos PMN y linfocitos. La celularidad normal del lavado broncoalveolar es: ‡Macrófagos: 80 a 90 % ‡Linfocitos: 5 a 20 % ‡Neutrófilos: 4 % ‡Eosinófilos: Menos del 4% ‡Basófilos: Menos del 1% ‡Otras (epiteliales): Menos del 3% .

Coloración de Azul de Prusia 40X .Lavado Broncoalveolar de paciente expuesto a Asbesto.

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La incidencia de micosis ha aumentado con la aparición del SIDA y con las migraciones. negro sobre fondo verde. muchas de las cuales pueden detectarse en muestras de citología teñidas de forma rutinaria con la técnica de Papanicolau.Citología de los procesos infecciosos Micosis pulmonares Son infecciones pulmonares por hongos. Con tinciones de plata. Con el PAS. Las cándidas en marrón. Algunos hongos presentan una morfología característica y pueden ser identificados correctamente. Con Papanicolau se ven de color rosado o violeta. . rojos.

. Su presencia debe informarse siempre. Las cándidas se tiñen bien con Pas y técnicas de plata. las esporas se encadenan unas a otras. En otras ocasiones. a veces aparece como unas pequeñas esporas de morfología oval entre 2 y 4 micras de diámetro.Candida: En las muestra citológicas. La presencia de contexto inflamatorio y de pseudohifas. correspondiendo al clínico la responsabilidad de su evaluación. es generalmente indicativa de infección activa. dando una imagen de pseudohifas o pseudofilamentos.

sobre todo. Su identificación es difícil si técnicas complementarias. en localización intracelular. dentro de macrófagos y PMN. Su identificación es más sencilla con técnicas de metenamina argéntica.) . pero en realidad. muestran un halo claro periférico interpretado como una cápsula. (Hongo se tiñe de de negro. Histoplasma Capsulatum. glucógeno. mucinas. membranas basales.Histoplasmosis: La Histoplasmosis es una enfermedad infecciosa producida por un hongo llamado. fibras de reticulina y elásticas. ya que su tamaño es pequeño y se sitúa. Esta técnica tiñe hongos. es un artefacto. A gran aumento. Existe una variedad en Europa y otra en África. De forma ocasional se observan gemaciones únicas.

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‡Células gigantes multinucleadas de distintas formas y tamaños. dejando un pequeño halo alrededor de las mismas. próximo a la membrana nuclear . ‡Cuerpos de inclusión intranucleares en vidrio esmerilado. Alteraciones citológicas en conjunto: ‡Fondo inflamatorio con presencia de macrófagos. ‡En ocasiones. inclusiones eosinófilas en ´ojo de búhoµ. que ocupan todo el núcleo. con amoldamiento nuclear.Herpes Zoster: Causado por el mismo virus de la varicela. neutrófilos y detritus celulares.

en la que se observa lo siguiente: Células epitelioides: Se originan a partir de histiocitos. Aparece como un material amorfo granular que se tiñe de forma eosinófila. cianófila o anfófila . N alargado con cromatina suave y reforzamiento de membrana. es decir. N en periferia en forma de herradura. mediano tamaño. Son iguales que las que aparecen en la Sarcoidosis. aunque es más frecuente que haya múltiples núcleos sin distribución característica. y disposición en grupos irregulares. C cianófilo con bordes mal definidos. constituida por granulomas tuberculoides. que se absorbe lentamente. Células de Langhans: Célula gigante multinucleada.Tuberculosis En la citología se observa una reacción tisular característica. Caseosis: Necrosis en la que el tejido tiene una mezcla de proteínas y grasa. elementos de morfología alargada.

frente a la luz ultravioleta. que se tiñen de forma cianófila. Las muestras se pueden obtener por esputo inducido. Desde un punto de vista morfológico. en las muestras citológicas se identifican masas o conglomerados de aspecto espumoso.Pneumocistis Carnii El diagnóstico requiere la demostración histopatológica del microorganismo mediante tinciones de metenamina argéntica o Giemsa. los quistes presentan una intensa tonalidad amarillenta en las muestras teñidas con el método anterior. No obstante. eosinófila o anfófila con Papanicolau. y de 90 a 95 % para la segunda. . La sensibilidad media es de 60 % para la primera prueba. cuando se dispone de experiencia o. broncoscopio con lavado broncoalveolar.

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Lavado roncoalveolar de aciente con I Y eumonía or . arini. . Lavado roncoalveolar de aciente con I y eumonía or . oloraci n de iff ui . arini. oloraci n de Grocott .

lo cual dificulta en gran medida el diagnóstico. debe esperarse mayor número de positividades. Las muestras obtenidas en los esputos y lavados bronquiales muestran cambios degenerativos de variable intensidad. como ocurre en carcinoma de cuello uterino. Por esta razón.Citología de los tumores pulmonares El estudio citológico se emplea fundamentalmente. en el estudio de pacientes sintomáticos o con anormalidades radiográficas. las procedentes de cepillados bronquiales. las muestras obtenidas por Paaf y. exudado inflamatorio y abundantes células normales del TR. . contienen un número mayor de células viables con utilidad diagnóstica y suelen disponerse en patrones característicos. y suelen estar entremezcladas con moco. no soliendo utilizarse como método de screening. en menor medida.

aunque se podrían identificar situaciones preinvasivas. . fragmentados o células aisladas. con formas en fibra. diagnosticándose en estadios avanzados con RX positiva. en cuya porción final se encuentran los desmosomas Citología Se recomienda la máxima cautela con muestras en las que no se observan células viables íntegras o. laxos. que ocultan el detalle nuclear. Disposición celular: Grupos cohesivos. de aspecto arremolinado. Fondo: Sucio con restos necróticos celulares y reacción inflamatoria. Anomalías características. renacuajo. Morfología celular: Pleomorfismo. perlas malignas epiteliales (globos córneos). cuando los cambios degenerativos o inflamatorios son de tal calibre. Presentando: Puentes intercelulares. con formas redondeadas o poligonales semejantes a escamosas.Carcinoma escamoso o epidermoide Constituyen más de la mitad de los carcinomas broncogénicos. que no son más que pequeñas prolongaciones citoplasmáticas.

Núcleo: Suele estar aumentado. de bordes definidos y densos. La membrana nuclear es irregular con alguna indentación Muy hipercromáticos. de coloración orangófila siendo. en ausencia de queratinización evidente. en ocasiones. y otro periférico más claro. no se ve nucléolo Tendencia a picnosis nuclear con núcleos en tinta china. no pasa desapercibido. Muchas veces. se ve azul verdoso. También es frecuente pequeños grupos de células que dan imagen de falsa fagocitosis. apareciendo las células más o menos redondeadas. indicando áreas menos diferenciadas del tumor.Citoplasma: Normalmente abundante. En ocasiones. Se ve un anillo citoplasmático interno denso por la presencia y acúmulo de filamentos intermedios. . la queratinización tan intensa que oculta el núcleo. por lo que se llaman células ´fantasmaµ. En estos casos la presencia de un doble anillo es indicador de células escamosa. Se llaman en ´ojo de pájaroµ o ´canibalismoµ. orangófilas y sin núcleo visible.

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salvo atipia. No.Carcinoma epidermoide Disposición mosaico Células renacuajo Células fibra Células fantasma Canibalismo Núcleos homogéneos Si Hipercromatosis Relación n/c Alterada No Si Si Si Si No Metaplasia escamosa Si No No No No Si. Normal . salvo atipia.

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