CEPILLADO Y LAVADO BRONQUIAL: PATOLOGÍA INFLAMATORIA, INFECCIOSA, NO NEOPLÁSICA Y NEOPLÁSICA.

CITOLOGIA EXFOLIATIVA II
Tecnología Medica ² Laboratorio Clínico

INTRODUCCION

Indicado si hay esputo positivo para malignidad, pero no se ha localizado la lesión por endoscopia. Lo que se hace es estudiar el pulmón segmento a segmento, para localizar la región del cáncer oculto. ASPIRADO BRONQUIAL Simultáneamente a la observación de árbol bronquial, se aspira material, que está constituido por una mezcla de moco espeso, elementos celulares y acelulares. Las secreciones obtenidas suelen ser escasas y la mayoría de las veces van destinadas al microbiólogo. (Los patólogos muchas veces reciben material etiquetado como aspirado, que en general corresponde a lavado) La muestra se procesa por centrifugación y el sedimento se extiende sobre un porta, se fija inmediatamente en alcohol de 96º y se tiñe con Papanicolau.

LAVADO BRANQUIOALVEOLAR (LBA) consiste en la instilacion y posterior aspiracion de solucion salina en las vias aereas distales, lográndose la obtencion de componentes celulares y no celulares supuestamente representativos de los fenomenos inflamatorios e inmunologicos que estan teniendo lugar en todo el parenquima pulmonar Técnica: 1.- Después de la inspección del árbol traqueo bronquial y antes de realizar la biopsia o el cepillado, se procede a acunar el fibrobroncoscopio (FBC) en un bronquio subsegmentario, preferiblemente del lóbulo medio o de la lingual si la lesión es difusa, pero puede escogerse el lóbulo que parezca estar mas comprometido radiológicamente; en lo posible debe evitarse el lóbulo superior ya que su disposición anatómica dificulta mucho la recuperación del liquido.

.

2. (se recomiendan 5 instilaciones de 20cc cada una). Una vez acunado el FBC. fibrosis pulmonar idiopática o fibrosis pulmonar asociada con enfermedades del colágeno. se procede a instilar solución salina estéril a 37°C en cantidades de 20-50cc. por lo que recomiendan lavados bilaterales. El volumen instilado varia entre 100-300 cc. mientras que para otros dicha diferencia no es importante. Algunos autores recomiendan desechar los primeros 20cc instilados o destinarlos como "lavado bronquial" arguyendo que esa primera muestra recupera células y proteínas del bronquio distal y no del alveolo. para enfermedades tales como sarcoidosis. pudiendo interferir con el recuento celular. Otros prefieren incluir los primeros 20cc en el total de la muestra. entre el lóbulo medio y la lingula. a menos que exista secreción bronquial purulenta.Cuando la enfermedad sea localizada. deben lavarse múltiples sitios incluyendo el área enferma. pareciendo lo ideal 100-150 cc. Algunos autores encuentran diferencias en la concentración y en el recuento diferencial de células. aspirando seguidamente (con una presión negativa de 5080mm Hg) hasta recoger por lo menos la mitad del material instilado. . teniendo en cuenta que volúmenes menores alteran el recuento celular total y volúmenes mayores aumentan la morbilidad.

173 1000rpm. 5. inmunoglobulinas. agregar ningún medio de cultivo o antibiótico. posteriormente se lavan las células en PBS y se resuspenden en medio de cultivo. Una preparación no fijada se tiñe con Giemsa y se utiliza para el recuento diferencial. En caso de procesamiento inmediato. a 25°C. El resto de alícuotas no fijadas y lavadas se pueden utilizar para estudios inmunocitoquimicos. haptoglobulina.. Procesar el liquido entre 30-90 minutos después de recolectado. Para algunos autores las células del lavado se mantienen viables si el LBA se guarda por 4 horas. 4. guardándolo a4°C hasta su procesamiento. . De la anterior solución se obtienen alícuotas de 150 microlitros que son centrifugadas a 400-600 rpm durante 5-1 0 minutos. El sobrenadante de la primera centrifugación permite el estudio de diversos componentes bioquímicos como determinación de albumina y proteínas totales. surfactante y trasferrina. se realiza el recuento celular total en una cámara de Neubauer.3. se retiran los restos de moco visible y se centrifuga a 800. se centrifuga y se substituye el sobrenadante por medio de cultivo. de lo contrario. Acto seguido.

Se constituye también en una herramienta de investigación de primera mano en algunas entidades como el asma . se toman 100 micras y se centrifugan 5-10 minutos. Se seca al aire o se fija. eosinófilos. linfocitos y macrófagos. Se tiñe con May Grunwald-Giemsa o Papanicolau. Se hace recuento de células sobre 300 como mínimo.Lavado broncoalveolar Es la técnica de elección para el estudio de las enfermedades intersticiales del pulmón. Cada reaspiración se procesa individualmente anotando la zona de procedencia. Patologías relacionadas El lavado encuentra hasta el momento su mayor utilidad en el diagnostico de las infecciones oportunistas y de algunas neuropatías intersticiales. evitando en ocasiones la realización de procedimientos invasivos. basófilos. Se centrifuga a baja velocidad y con el sobrenadante se hace estudio químico. Al concentrado celular se le añaden 1-2 ml de suero fisiológico. Se realiza un recuento de PMN neutrófilos. controlando las células mencionadas anteriormente.

eosinófilos (E) y leucocitos neutrófilos (N).Lavado bronquial: se observan macrófagos alveolares (MA). Aumento fotográfico 400x. Coloración HematoxilinaEosina. .

con el que se raspa la lesión directamente. El cepillo sale y se dirige hacia la lesión. controlamos la zona a estudiar y la colocación del broncoscopio. . se introduce un cepillo a través de aquel. quedando entre las cerdas abundante material celular. mediante rayos X. También se puede realizar bajo monitorización radiológica. Una vez localizada. a continuación. El cepillado al final de la sesión endoscópica. Se saca a través del canal del instrumento y se procesa.CEPILLADO BRONQUIAL Se utiliza esta técnica. cuando mediante el fibrobroncoscopio es posible observar una lesión dentro de la luz bronquial. se retrae al interior de su funda. Se impacta la punta del broncoscopio. en la que se frota varias veces y. Se impacta la punta del broncoscopio en un punto determinado y. para lesiones no visibles directamente a la endoscopía.

Existe una modalidad que es el cepillado con catéter protegido en el que el cepillo viene incluido en una doble funda con un tapón distal reabsorbible y se utiliza para estudio microbiológico con recuento de colonias bacterianas .

Si desea estudio por micobacterias. Recuerde que la brocha se seca al aire rápidamente. Jale la brocha hacia dentro de su protector y remueva la unidad de brocha completa. Empuje la brocha fuera de su protector y realice el cepillado. puede colocar la brocha dentro de un tubo conteniendo 10 ml de caldo de Middlebrook 7H9. . Inserte la brocha citológica dentro del canal abierto del broncoscopio y avance.Técnica: Utilice un broncoscopio de doble lumen. Coloque la brocha dentro del tubo de transporte conteniendo solución salina o Ringer·s lactato. lo cual es negativo para el cultivo Envíe al laboratorio inmediatamente.

.

.

es decir. >Nucléolo: Número. tinción. forma y coloración.Aspectos básicos sobre la interpretación de las extensiones citológicas Se debe valorar lo siguiente: >Aspecto general del extendido incluyendo sustancia de fondo y disposición de las células. >Núcleo: Número. . picnosis. forma. forma. tamaño. tamaño. etc. situación. coloración. >Aspecto de células en su conjunto. membrana. tamaño. >Cantidad de citoplasma y relación n/c.

Atipias benignas del AR . Alteraciones degenerativas No son específicas de ninguna patología concreta. En general se conserva la placa terminal ‡Vacuolas citoplasmáticas ‡Inclusiones citoplasmáticas eosinófilas debidos a la degeneración de orgánulos citoplasmáticos. broncoscopio o radioterapia. Pueden ser debidas a diferentes mecanismos como exposición a agentes físicos y químicos. Las más frecuentes son: a) A nivel citoplasmático: ‡ Aumento de tamaño ‡Variación del tamaño adquiriendo una forma más poligonal ‡Pueden desaparecer los cilios. b) A nivel del núcleo: ‡Aumento de tamaño ‡Aumento de número ‡Picnosis .

.

. . La alteración no es específica del AR. Forma peculiar de degeneración de las células cilíndricas descrita por Papanicolau. Las causas pueden ser: ‡Infecciones virales ‡Bronquiectasias (Dilataciones irreversibles de los bronquios y destrucción de la pared bronquial. como el de endocérvix o útero. Suele haber picnosis y fragmentación de núcleos (cariorrexis). . solo hay disminución de la zona citoplasmática subnuclear. En otras ocasiones.c) Ciliocitoftoria: . congénita. por infecciones o por obstrucción por cuerpo extraño). en la que la célula queda reducida a un penacho o manojo de cilios que emerge de un anillo estrecho de citoplasma sin núcleo. ‡Carcinomas ‡Puede no asociarse a nada de lo anterior. pudiendo aparecer en otros epitelios columnares.

.

.

distribución uniforme de la cromatina. . Los cambios dependen de la intensidad de la agresión. si no es excesivamente intensa. que suele respetar a las basales. Los criterios para diferenciarlas son: Buena cohesión celular. por ejemplo. se ven células intermedias entre las típicas .Fenómenos reparativos . se producen cambios regenerativos en los días posteriores a la misma. a pesar del agrandamiento del núcleo. Cuando el epitelio respiratorio sufre una agresión. Los cambios consisten en descamación de células cilíndricas. que puede tener algún nucléolo prominente. por estudio endoscópico. los días transcurridos desde la misma y las condiciones locales. . Además. Los 2 o 3 primeros días aparecen células inmaduras que pueden confundirse con neoplásicas indiferenciadas.

.

que reciben el nombre de Cuerpos de Creolá. infecciones respiratorias repetidas«). buscamos en su superficie la presencia de cilios. multinucleación. y se manifiesta por la presencia de células agrandadas en todo: Aumenta tamaño celular. Además. la relación n/c es correcta y la cromatina uniforme. Para diferenciarlos de células malignas. conducen a hiperplasia continuada que se manifiesta en el esputo. . Se encuentran hasta en el 42% de pacientes bronquíticos asmáticos. hasta en dos días. por aumento de la actividad. Los irritantes crónicos (tabaco. recordando un gusanoµ. núcleo y nucléolo.Hiperplasia del epitelio respiratorio Alteración que aparece rapidamente. y otras veces. como ´grupos de células hiperplásicas exfoliadas en forma enrollada.

Lavado bronquio-alveolar: hiperplasia bronquial .

muy cohesivos. N pequeños y homogéneos y. aparición en la periferia de estas placas de células cilíndricas diferenciadas maduras . especialmente el de células pequeñas. con C de pequeñas magnitud y N intensamente basófilos. Debido a este aspecto . Los datos a favor de benignidad son: Grupos cohesivos.(Entre las cilíndricas en el epitelio bronquial) Aparecen como grupos de células cuboideas pequeñas. hay que diferenciarlos de algunos tipos de carcinoma.

.Hiperplasia de células alveolares Aparecen como células cuboideas. semejantes a las basales del epitelio escamoso. C hiperdistendido con grandes vacuolas (DD con carcinoma adenoescamoso bronquioalveolar). Si afecta a los tipo II. N grandes con nucléolo prominente. pueden aparecer como células sueltas o en pequeños grupos. . especialmente en enfermedades intersticiales o inflamatorias crónicas del pulmón. Se relaciona su aparición con procesos irritativos.

El C es cianófilo. por escamoso. tamaño uniforme y de cromatina finamente granular. a veces. exposición a radioterapia. . El nucléolo es pequeño. Los N centrales. destacando los signos de amoldamiento del C. bronquiectasias. algo menores que las correspondientes escamosas. exposición a humos. bronquitis. etc. Causa: irritación crónica del epitelio original debido a distintas circunstancias como. La metaplasia se origina a partir de las células basales. Parasitosis. con vacuolas. siendo las células metaplásicas muy parecidas a las del epitelio genital femenino: Poligonales. ovales. tabaquismo. Se disponen a modo de mosaico. neumonías. .Metaplasia escamosa En el epitelio respiratorio se reemplaza el epitelio cilíndrico ciliado pseudoestratificado.

Podemos clasificar la metaplasia en: >Benigna: Uniformidad celular y relación n/c normal >Atípica: Anisocariosis. hipercromatosis. Las células son más redondeadas descamando normalmente aisladas Se asocia en un 40% a carcinoma epidermoide . disqueratosis.

engrosamiento de la membrana nuclear y granulacion de la cromatina. . Si estos detalles se observan hablamos de metaplasia escamosa con displasia o metaplasia atipica.Pueden verse alteraciones en la relacion N/C.

Veremos más adelante. muy vascularizado. . . Tejido de granulación es un conjuntivo joven. Da lugar a IR crónica. Esta situación puede aparecer en: . -Idiomática El diagnóstico antiguamente se basaba en la biopsia pulmonar.Neumoconiosis. cuya manifestación clínica más frecuente es la disnea progresiva. . lo que condiciona un bloqueo del intercambio gaseoso en el alvéolo. . técnica de elección y seguimiento de estas patologías.Respuesta a algunos fármacos.Sarcoidosis (Enfermedad sistémica crónica con reacción inflamatoria granulomatosa en distintas localizaciones.Citología de los procesos inflamatorios no infecciosos Enfermedad intersticial del pulmón Proceso que consiste en una fibrosis progresiva de los tabiques alveolares y del intersticio pulmonar. En la actualidad se usa el lavado broncoalveolar. . después de heridas o úlceras).Reacciones alérgicas al polvo u otros alérgenos.

leucocitos PMN y linfocitos. Básicamente consiste en realizar un recuento diferencial entre macrófagos. La celularidad normal del lavado broncoalveolar es: ‡Macrófagos: 80 a 90 % ‡Linfocitos: 5 a 20 % ‡Neutrófilos: 4 % ‡Eosinófilos: Menos del 4% ‡Basófilos: Menos del 1% ‡Otras (epiteliales): Menos del 3% .Citología: Su interpretación es complicada.

Lavado Broncoalveolar de paciente expuesto a Asbesto. Coloración de Azul de Prusia 40X .

.

.

.

.

Con tinciones de plata. . Algunos hongos presentan una morfología característica y pueden ser identificados correctamente. rojos. negro sobre fondo verde. Las cándidas en marrón.Citología de los procesos infecciosos Micosis pulmonares Son infecciones pulmonares por hongos. Con Papanicolau se ven de color rosado o violeta. Con el PAS. muchas de las cuales pueden detectarse en muestras de citología teñidas de forma rutinaria con la técnica de Papanicolau. La incidencia de micosis ha aumentado con la aparición del SIDA y con las migraciones.

es generalmente indicativa de infección activa. La presencia de contexto inflamatorio y de pseudohifas. Las cándidas se tiñen bien con Pas y técnicas de plata. Su presencia debe informarse siempre. dando una imagen de pseudohifas o pseudofilamentos. En otras ocasiones.Candida: En las muestra citológicas. . las esporas se encadenan unas a otras. correspondiendo al clínico la responsabilidad de su evaluación. a veces aparece como unas pequeñas esporas de morfología oval entre 2 y 4 micras de diámetro.

mucinas. De forma ocasional se observan gemaciones únicas. Su identificación es difícil si técnicas complementarias. dentro de macrófagos y PMN. Existe una variedad en Europa y otra en África. es un artefacto. fibras de reticulina y elásticas. A gran aumento. muestran un halo claro periférico interpretado como una cápsula. Histoplasma Capsulatum.) .Histoplasmosis: La Histoplasmosis es una enfermedad infecciosa producida por un hongo llamado. (Hongo se tiñe de de negro. membranas basales. Su identificación es más sencilla con técnicas de metenamina argéntica. ya que su tamaño es pequeño y se sitúa. en localización intracelular. sobre todo. pero en realidad. glucógeno. Esta técnica tiñe hongos.

.

con amoldamiento nuclear. neutrófilos y detritus celulares. que ocupan todo el núcleo. Alteraciones citológicas en conjunto: ‡Fondo inflamatorio con presencia de macrófagos. inclusiones eosinófilas en ´ojo de búhoµ.Herpes Zoster: Causado por el mismo virus de la varicela. ‡Cuerpos de inclusión intranucleares en vidrio esmerilado. dejando un pequeño halo alrededor de las mismas. ‡Células gigantes multinucleadas de distintas formas y tamaños. ‡En ocasiones. próximo a la membrana nuclear .

Tuberculosis En la citología se observa una reacción tisular característica. Son iguales que las que aparecen en la Sarcoidosis. N alargado con cromatina suave y reforzamiento de membrana. Células de Langhans: Célula gigante multinucleada. cianófila o anfófila . en la que se observa lo siguiente: Células epitelioides: Se originan a partir de histiocitos. Caseosis: Necrosis en la que el tejido tiene una mezcla de proteínas y grasa. N en periferia en forma de herradura. es decir. que se absorbe lentamente. mediano tamaño. C cianófilo con bordes mal definidos. aunque es más frecuente que haya múltiples núcleos sin distribución característica. y disposición en grupos irregulares. constituida por granulomas tuberculoides. Aparece como un material amorfo granular que se tiñe de forma eosinófila. elementos de morfología alargada.

Desde un punto de vista morfológico. frente a la luz ultravioleta. broncoscopio con lavado broncoalveolar. No obstante. en las muestras citológicas se identifican masas o conglomerados de aspecto espumoso.Pneumocistis Carnii El diagnóstico requiere la demostración histopatológica del microorganismo mediante tinciones de metenamina argéntica o Giemsa. . que se tiñen de forma cianófila. eosinófila o anfófila con Papanicolau. Las muestras se pueden obtener por esputo inducido. y de 90 a 95 % para la segunda. La sensibilidad media es de 60 % para la primera prueba. cuando se dispone de experiencia o. los quistes presentan una intensa tonalidad amarillenta en las muestras teñidas con el método anterior.

.

arini. . oloraci n de Grocott . arini. oloraci n de iff ui .Lavado roncoalveolar de aciente con I Y eumonía or . Lavado roncoalveolar de aciente con I y eumonía or .

. debe esperarse mayor número de positividades. Por esta razón. las procedentes de cepillados bronquiales. exudado inflamatorio y abundantes células normales del TR. contienen un número mayor de células viables con utilidad diagnóstica y suelen disponerse en patrones característicos. como ocurre en carcinoma de cuello uterino. lo cual dificulta en gran medida el diagnóstico.Citología de los tumores pulmonares El estudio citológico se emplea fundamentalmente. Las muestras obtenidas en los esputos y lavados bronquiales muestran cambios degenerativos de variable intensidad. y suelen estar entremezcladas con moco. las muestras obtenidas por Paaf y. en el estudio de pacientes sintomáticos o con anormalidades radiográficas. en menor medida. no soliendo utilizarse como método de screening.

con formas en fibra. . Disposición celular: Grupos cohesivos. fragmentados o células aisladas. Presentando: Puentes intercelulares. perlas malignas epiteliales (globos córneos). renacuajo. laxos. de aspecto arremolinado. cuando los cambios degenerativos o inflamatorios son de tal calibre. diagnosticándose en estadios avanzados con RX positiva. que ocultan el detalle nuclear. Morfología celular: Pleomorfismo.Carcinoma escamoso o epidermoide Constituyen más de la mitad de los carcinomas broncogénicos. Fondo: Sucio con restos necróticos celulares y reacción inflamatoria. que no son más que pequeñas prolongaciones citoplasmáticas. con formas redondeadas o poligonales semejantes a escamosas. Anomalías características. aunque se podrían identificar situaciones preinvasivas. en cuya porción final se encuentran los desmosomas Citología Se recomienda la máxima cautela con muestras en las que no se observan células viables íntegras o.

no se ve nucléolo Tendencia a picnosis nuclear con núcleos en tinta china. En estos casos la presencia de un doble anillo es indicador de células escamosa. y otro periférico más claro. Muchas veces. la queratinización tan intensa que oculta el núcleo. no pasa desapercibido. en ocasiones. La membrana nuclear es irregular con alguna indentación Muy hipercromáticos. de coloración orangófila siendo. se ve azul verdoso. Se ve un anillo citoplasmático interno denso por la presencia y acúmulo de filamentos intermedios. También es frecuente pequeños grupos de células que dan imagen de falsa fagocitosis. por lo que se llaman células ´fantasmaµ. . Se llaman en ´ojo de pájaroµ o ´canibalismoµ. de bordes definidos y densos. En ocasiones.Citoplasma: Normalmente abundante. indicando áreas menos diferenciadas del tumor. Núcleo: Suele estar aumentado. apareciendo las células más o menos redondeadas. orangófilas y sin núcleo visible. en ausencia de queratinización evidente.

.

Normal . salvo atipia. salvo atipia.Carcinoma epidermoide Disposición mosaico Células renacuajo Células fibra Células fantasma Canibalismo Núcleos homogéneos Si Hipercromatosis Relación n/c Alterada No Si Si Si Si No Metaplasia escamosa Si No No No No Si. No.