CEPILLADO Y LAVADO BRONQUIAL: PATOLOGÍA INFLAMATORIA, INFECCIOSA, NO NEOPLÁSICA Y NEOPLÁSICA.

CITOLOGIA EXFOLIATIVA II
Tecnología Medica ² Laboratorio Clínico

INTRODUCCION

Indicado si hay esputo positivo para malignidad, pero no se ha localizado la lesión por endoscopia. Lo que se hace es estudiar el pulmón segmento a segmento, para localizar la región del cáncer oculto. ASPIRADO BRONQUIAL Simultáneamente a la observación de árbol bronquial, se aspira material, que está constituido por una mezcla de moco espeso, elementos celulares y acelulares. Las secreciones obtenidas suelen ser escasas y la mayoría de las veces van destinadas al microbiólogo. (Los patólogos muchas veces reciben material etiquetado como aspirado, que en general corresponde a lavado) La muestra se procesa por centrifugación y el sedimento se extiende sobre un porta, se fija inmediatamente en alcohol de 96º y se tiñe con Papanicolau.

LAVADO BRANQUIOALVEOLAR (LBA) consiste en la instilacion y posterior aspiracion de solucion salina en las vias aereas distales, lográndose la obtencion de componentes celulares y no celulares supuestamente representativos de los fenomenos inflamatorios e inmunologicos que estan teniendo lugar en todo el parenquima pulmonar Técnica: 1.- Después de la inspección del árbol traqueo bronquial y antes de realizar la biopsia o el cepillado, se procede a acunar el fibrobroncoscopio (FBC) en un bronquio subsegmentario, preferiblemente del lóbulo medio o de la lingual si la lesión es difusa, pero puede escogerse el lóbulo que parezca estar mas comprometido radiológicamente; en lo posible debe evitarse el lóbulo superior ya que su disposición anatómica dificulta mucho la recuperación del liquido.

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por lo que recomiendan lavados bilaterales. Otros prefieren incluir los primeros 20cc en el total de la muestra. aspirando seguidamente (con una presión negativa de 5080mm Hg) hasta recoger por lo menos la mitad del material instilado.Cuando la enfermedad sea localizada. pareciendo lo ideal 100-150 cc. . para enfermedades tales como sarcoidosis. Una vez acunado el FBC. Algunos autores recomiendan desechar los primeros 20cc instilados o destinarlos como "lavado bronquial" arguyendo que esa primera muestra recupera células y proteínas del bronquio distal y no del alveolo. entre el lóbulo medio y la lingula. a menos que exista secreción bronquial purulenta. (se recomiendan 5 instilaciones de 20cc cada una). Algunos autores encuentran diferencias en la concentración y en el recuento diferencial de células. mientras que para otros dicha diferencia no es importante. se procede a instilar solución salina estéril a 37°C en cantidades de 20-50cc. El volumen instilado varia entre 100-300 cc. deben lavarse múltiples sitios incluyendo el área enferma. pudiendo interferir con el recuento celular. fibrosis pulmonar idiopática o fibrosis pulmonar asociada con enfermedades del colágeno. teniendo en cuenta que volúmenes menores alteran el recuento celular total y volúmenes mayores aumentan la morbilidad. 2.

guardándolo a4°C hasta su procesamiento. .173 1000rpm. se centrifuga y se substituye el sobrenadante por medio de cultivo. se retiran los restos de moco visible y se centrifuga a 800. El sobrenadante de la primera centrifugación permite el estudio de diversos componentes bioquímicos como determinación de albumina y proteínas totales. En caso de procesamiento inmediato. 5. a 25°C. de lo contrario.. se realiza el recuento celular total en una cámara de Neubauer. surfactante y trasferrina. Acto seguido. posteriormente se lavan las células en PBS y se resuspenden en medio de cultivo. agregar ningún medio de cultivo o antibiótico.3. Una preparación no fijada se tiñe con Giemsa y se utiliza para el recuento diferencial. inmunoglobulinas. De la anterior solución se obtienen alícuotas de 150 microlitros que son centrifugadas a 400-600 rpm durante 5-1 0 minutos. haptoglobulina. 4. Para algunos autores las células del lavado se mantienen viables si el LBA se guarda por 4 horas. El resto de alícuotas no fijadas y lavadas se pueden utilizar para estudios inmunocitoquimicos. Procesar el liquido entre 30-90 minutos después de recolectado.

Patologías relacionadas El lavado encuentra hasta el momento su mayor utilidad en el diagnostico de las infecciones oportunistas y de algunas neuropatías intersticiales.Lavado broncoalveolar Es la técnica de elección para el estudio de las enfermedades intersticiales del pulmón. Se tiñe con May Grunwald-Giemsa o Papanicolau. Cada reaspiración se procesa individualmente anotando la zona de procedencia. basófilos. Se centrifuga a baja velocidad y con el sobrenadante se hace estudio químico. Se realiza un recuento de PMN neutrófilos. Se constituye también en una herramienta de investigación de primera mano en algunas entidades como el asma . eosinófilos. evitando en ocasiones la realización de procedimientos invasivos. Se seca al aire o se fija. controlando las células mencionadas anteriormente. se toman 100 micras y se centrifugan 5-10 minutos. linfocitos y macrófagos. Al concentrado celular se le añaden 1-2 ml de suero fisiológico. Se hace recuento de células sobre 300 como mínimo.

Aumento fotográfico 400x. Coloración HematoxilinaEosina. eosinófilos (E) y leucocitos neutrófilos (N). .Lavado bronquial: se observan macrófagos alveolares (MA).

Se impacta la punta del broncoscopio en un punto determinado y. quedando entre las cerdas abundante material celular. Una vez localizada. con el que se raspa la lesión directamente.CEPILLADO BRONQUIAL Se utiliza esta técnica. para lesiones no visibles directamente a la endoscopía. en la que se frota varias veces y. Se saca a través del canal del instrumento y se procesa. . controlamos la zona a estudiar y la colocación del broncoscopio. cuando mediante el fibrobroncoscopio es posible observar una lesión dentro de la luz bronquial. mediante rayos X. El cepillo sale y se dirige hacia la lesión. El cepillado al final de la sesión endoscópica. a continuación. se retrae al interior de su funda. También se puede realizar bajo monitorización radiológica. se introduce un cepillo a través de aquel. Se impacta la punta del broncoscopio.

Existe una modalidad que es el cepillado con catéter protegido en el que el cepillo viene incluido en una doble funda con un tapón distal reabsorbible y se utiliza para estudio microbiológico con recuento de colonias bacterianas .

Si desea estudio por micobacterias. Inserte la brocha citológica dentro del canal abierto del broncoscopio y avance. Jale la brocha hacia dentro de su protector y remueva la unidad de brocha completa. puede colocar la brocha dentro de un tubo conteniendo 10 ml de caldo de Middlebrook 7H9.Técnica: Utilice un broncoscopio de doble lumen. Recuerde que la brocha se seca al aire rápidamente. lo cual es negativo para el cultivo Envíe al laboratorio inmediatamente. Coloque la brocha dentro del tubo de transporte conteniendo solución salina o Ringer·s lactato. Empuje la brocha fuera de su protector y realice el cepillado. .

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tamaño. forma y coloración. membrana. tinción.Aspectos básicos sobre la interpretación de las extensiones citológicas Se debe valorar lo siguiente: >Aspecto general del extendido incluyendo sustancia de fondo y disposición de las células. etc. tamaño. es decir. . >Núcleo: Número. >Cantidad de citoplasma y relación n/c. picnosis. >Aspecto de células en su conjunto. forma. coloración. >Nucléolo: Número. situación. tamaño. forma.

En general se conserva la placa terminal ‡Vacuolas citoplasmáticas ‡Inclusiones citoplasmáticas eosinófilas debidos a la degeneración de orgánulos citoplasmáticos. Pueden ser debidas a diferentes mecanismos como exposición a agentes físicos y químicos. broncoscopio o radioterapia. b) A nivel del núcleo: ‡Aumento de tamaño ‡Aumento de número ‡Picnosis . Alteraciones degenerativas No son específicas de ninguna patología concreta.Atipias benignas del AR . Las más frecuentes son: a) A nivel citoplasmático: ‡ Aumento de tamaño ‡Variación del tamaño adquiriendo una forma más poligonal ‡Pueden desaparecer los cilios.

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Forma peculiar de degeneración de las células cilíndricas descrita por Papanicolau. ‡Carcinomas ‡Puede no asociarse a nada de lo anterior. . como el de endocérvix o útero. Suele haber picnosis y fragmentación de núcleos (cariorrexis). La alteración no es específica del AR. Las causas pueden ser: ‡Infecciones virales ‡Bronquiectasias (Dilataciones irreversibles de los bronquios y destrucción de la pared bronquial. . En otras ocasiones. congénita. . por infecciones o por obstrucción por cuerpo extraño). solo hay disminución de la zona citoplasmática subnuclear.c) Ciliocitoftoria: . pudiendo aparecer en otros epitelios columnares. en la que la célula queda reducida a un penacho o manojo de cilios que emerge de un anillo estrecho de citoplasma sin núcleo.

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se producen cambios regenerativos en los días posteriores a la misma. Además. que puede tener algún nucléolo prominente. Los 2 o 3 primeros días aparecen células inmaduras que pueden confundirse con neoplásicas indiferenciadas. Los cambios dependen de la intensidad de la agresión. Los criterios para diferenciarlas son: Buena cohesión celular. Los cambios consisten en descamación de células cilíndricas. que suele respetar a las basales. se ven células intermedias entre las típicas . por estudio endoscópico. . a pesar del agrandamiento del núcleo. distribución uniforme de la cromatina. . por ejemplo.Fenómenos reparativos . si no es excesivamente intensa. Cuando el epitelio respiratorio sufre una agresión. los días transcurridos desde la misma y las condiciones locales.

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Además. buscamos en su superficie la presencia de cilios. núcleo y nucléolo. Se encuentran hasta en el 42% de pacientes bronquíticos asmáticos.Hiperplasia del epitelio respiratorio Alteración que aparece rapidamente. y se manifiesta por la presencia de células agrandadas en todo: Aumenta tamaño celular. la relación n/c es correcta y la cromatina uniforme. multinucleación. Los irritantes crónicos (tabaco. . conducen a hiperplasia continuada que se manifiesta en el esputo. infecciones respiratorias repetidas«). y otras veces. como ´grupos de células hiperplásicas exfoliadas en forma enrollada. recordando un gusanoµ. que reciben el nombre de Cuerpos de Creolá. hasta en dos días. Para diferenciarlos de células malignas. por aumento de la actividad.

Lavado bronquio-alveolar: hiperplasia bronquial .

muy cohesivos.(Entre las cilíndricas en el epitelio bronquial) Aparecen como grupos de células cuboideas pequeñas. N pequeños y homogéneos y. aparición en la periferia de estas placas de células cilíndricas diferenciadas maduras . con C de pequeñas magnitud y N intensamente basófilos. Debido a este aspecto . Los datos a favor de benignidad son: Grupos cohesivos. especialmente el de células pequeñas. hay que diferenciarlos de algunos tipos de carcinoma.

Si afecta a los tipo II. .Hiperplasia de células alveolares Aparecen como células cuboideas. . C hiperdistendido con grandes vacuolas (DD con carcinoma adenoescamoso bronquioalveolar). Se relaciona su aparición con procesos irritativos. pueden aparecer como células sueltas o en pequeños grupos. N grandes con nucléolo prominente. semejantes a las basales del epitelio escamoso. especialmente en enfermedades intersticiales o inflamatorias crónicas del pulmón.

siendo las células metaplásicas muy parecidas a las del epitelio genital femenino: Poligonales. . Se disponen a modo de mosaico.Metaplasia escamosa En el epitelio respiratorio se reemplaza el epitelio cilíndrico ciliado pseudoestratificado. a veces. por escamoso. El C es cianófilo. bronquiectasias. tamaño uniforme y de cromatina finamente granular. La metaplasia se origina a partir de las células basales. destacando los signos de amoldamiento del C. bronquitis. El nucléolo es pequeño. Los N centrales. exposición a radioterapia. . tabaquismo. algo menores que las correspondientes escamosas. Causa: irritación crónica del epitelio original debido a distintas circunstancias como. exposición a humos. con vacuolas. ovales. neumonías. etc. Parasitosis.

Las células son más redondeadas descamando normalmente aisladas Se asocia en un 40% a carcinoma epidermoide . disqueratosis.Podemos clasificar la metaplasia en: >Benigna: Uniformidad celular y relación n/c normal >Atípica: Anisocariosis. hipercromatosis.

Si estos detalles se observan hablamos de metaplasia escamosa con displasia o metaplasia atipica.Pueden verse alteraciones en la relacion N/C. engrosamiento de la membrana nuclear y granulacion de la cromatina. .

técnica de elección y seguimiento de estas patologías. . . muy vascularizado. .Reacciones alérgicas al polvo u otros alérgenos.Citología de los procesos inflamatorios no infecciosos Enfermedad intersticial del pulmón Proceso que consiste en una fibrosis progresiva de los tabiques alveolares y del intersticio pulmonar. Tejido de granulación es un conjuntivo joven. . Esta situación puede aparecer en: . Da lugar a IR crónica.Sarcoidosis (Enfermedad sistémica crónica con reacción inflamatoria granulomatosa en distintas localizaciones. -Idiomática El diagnóstico antiguamente se basaba en la biopsia pulmonar. lo que condiciona un bloqueo del intercambio gaseoso en el alvéolo. . después de heridas o úlceras). cuya manifestación clínica más frecuente es la disnea progresiva.Neumoconiosis. En la actualidad se usa el lavado broncoalveolar. Veremos más adelante.Respuesta a algunos fármacos.

Citología: Su interpretación es complicada. Básicamente consiste en realizar un recuento diferencial entre macrófagos. La celularidad normal del lavado broncoalveolar es: ‡Macrófagos: 80 a 90 % ‡Linfocitos: 5 a 20 % ‡Neutrófilos: 4 % ‡Eosinófilos: Menos del 4% ‡Basófilos: Menos del 1% ‡Otras (epiteliales): Menos del 3% . leucocitos PMN y linfocitos.

Coloración de Azul de Prusia 40X .Lavado Broncoalveolar de paciente expuesto a Asbesto.

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Algunos hongos presentan una morfología característica y pueden ser identificados correctamente. muchas de las cuales pueden detectarse en muestras de citología teñidas de forma rutinaria con la técnica de Papanicolau. Con tinciones de plata.Citología de los procesos infecciosos Micosis pulmonares Son infecciones pulmonares por hongos. negro sobre fondo verde. Las cándidas en marrón. . La incidencia de micosis ha aumentado con la aparición del SIDA y con las migraciones. Con Papanicolau se ven de color rosado o violeta. rojos. Con el PAS.

La presencia de contexto inflamatorio y de pseudohifas. es generalmente indicativa de infección activa. En otras ocasiones. dando una imagen de pseudohifas o pseudofilamentos. las esporas se encadenan unas a otras. correspondiendo al clínico la responsabilidad de su evaluación. a veces aparece como unas pequeñas esporas de morfología oval entre 2 y 4 micras de diámetro. .Candida: En las muestra citológicas. Las cándidas se tiñen bien con Pas y técnicas de plata. Su presencia debe informarse siempre.

en localización intracelular. membranas basales. muestran un halo claro periférico interpretado como una cápsula. Su identificación es más sencilla con técnicas de metenamina argéntica. ya que su tamaño es pequeño y se sitúa.Histoplasmosis: La Histoplasmosis es una enfermedad infecciosa producida por un hongo llamado.) . Existe una variedad en Europa y otra en África. pero en realidad. De forma ocasional se observan gemaciones únicas. A gran aumento. Esta técnica tiñe hongos. es un artefacto. Su identificación es difícil si técnicas complementarias. sobre todo. fibras de reticulina y elásticas. dentro de macrófagos y PMN. (Hongo se tiñe de de negro. glucógeno. Histoplasma Capsulatum. mucinas.

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‡En ocasiones. Alteraciones citológicas en conjunto: ‡Fondo inflamatorio con presencia de macrófagos. inclusiones eosinófilas en ´ojo de búhoµ. próximo a la membrana nuclear . ‡Cuerpos de inclusión intranucleares en vidrio esmerilado. dejando un pequeño halo alrededor de las mismas. que ocupan todo el núcleo. neutrófilos y detritus celulares. con amoldamiento nuclear.Herpes Zoster: Causado por el mismo virus de la varicela. ‡Células gigantes multinucleadas de distintas formas y tamaños.

C cianófilo con bordes mal definidos. que se absorbe lentamente. Aparece como un material amorfo granular que se tiñe de forma eosinófila. Células de Langhans: Célula gigante multinucleada.Tuberculosis En la citología se observa una reacción tisular característica. mediano tamaño. Son iguales que las que aparecen en la Sarcoidosis. constituida por granulomas tuberculoides. cianófila o anfófila . elementos de morfología alargada. N alargado con cromatina suave y reforzamiento de membrana. N en periferia en forma de herradura. Caseosis: Necrosis en la que el tejido tiene una mezcla de proteínas y grasa. en la que se observa lo siguiente: Células epitelioides: Se originan a partir de histiocitos. aunque es más frecuente que haya múltiples núcleos sin distribución característica. y disposición en grupos irregulares. es decir.

los quistes presentan una intensa tonalidad amarillenta en las muestras teñidas con el método anterior. eosinófila o anfófila con Papanicolau. y de 90 a 95 % para la segunda. frente a la luz ultravioleta. . en las muestras citológicas se identifican masas o conglomerados de aspecto espumoso.Pneumocistis Carnii El diagnóstico requiere la demostración histopatológica del microorganismo mediante tinciones de metenamina argéntica o Giemsa. Desde un punto de vista morfológico. broncoscopio con lavado broncoalveolar. que se tiñen de forma cianófila. cuando se dispone de experiencia o. Las muestras se pueden obtener por esputo inducido. La sensibilidad media es de 60 % para la primera prueba. No obstante.

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oloraci n de iff ui . oloraci n de Grocott .Lavado roncoalveolar de aciente con I Y eumonía or . Lavado roncoalveolar de aciente con I y eumonía or . arini. . arini.

como ocurre en carcinoma de cuello uterino. Por esta razón. y suelen estar entremezcladas con moco.Citología de los tumores pulmonares El estudio citológico se emplea fundamentalmente. en menor medida. las muestras obtenidas por Paaf y. exudado inflamatorio y abundantes células normales del TR. debe esperarse mayor número de positividades. no soliendo utilizarse como método de screening. lo cual dificulta en gran medida el diagnóstico. las procedentes de cepillados bronquiales. Las muestras obtenidas en los esputos y lavados bronquiales muestran cambios degenerativos de variable intensidad. contienen un número mayor de células viables con utilidad diagnóstica y suelen disponerse en patrones característicos. en el estudio de pacientes sintomáticos o con anormalidades radiográficas. .

laxos. Anomalías características. aunque se podrían identificar situaciones preinvasivas. de aspecto arremolinado. Fondo: Sucio con restos necróticos celulares y reacción inflamatoria. Presentando: Puentes intercelulares. perlas malignas epiteliales (globos córneos). que no son más que pequeñas prolongaciones citoplasmáticas. cuando los cambios degenerativos o inflamatorios son de tal calibre. con formas redondeadas o poligonales semejantes a escamosas. Morfología celular: Pleomorfismo. en cuya porción final se encuentran los desmosomas Citología Se recomienda la máxima cautela con muestras en las que no se observan células viables íntegras o. con formas en fibra.Carcinoma escamoso o epidermoide Constituyen más de la mitad de los carcinomas broncogénicos. fragmentados o células aisladas. Disposición celular: Grupos cohesivos. renacuajo. que ocultan el detalle nuclear. . diagnosticándose en estadios avanzados con RX positiva.

en ausencia de queratinización evidente. En ocasiones. de bordes definidos y densos. la queratinización tan intensa que oculta el núcleo. de coloración orangófila siendo. apareciendo las células más o menos redondeadas. se ve azul verdoso. no se ve nucléolo Tendencia a picnosis nuclear con núcleos en tinta china. . Se llaman en ´ojo de pájaroµ o ´canibalismoµ. indicando áreas menos diferenciadas del tumor. Muchas veces. Se ve un anillo citoplasmático interno denso por la presencia y acúmulo de filamentos intermedios. en ocasiones. También es frecuente pequeños grupos de células que dan imagen de falsa fagocitosis. En estos casos la presencia de un doble anillo es indicador de células escamosa. por lo que se llaman células ´fantasmaµ.Citoplasma: Normalmente abundante. no pasa desapercibido. orangófilas y sin núcleo visible. La membrana nuclear es irregular con alguna indentación Muy hipercromáticos. Núcleo: Suele estar aumentado. y otro periférico más claro.

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salvo atipia. No.Carcinoma epidermoide Disposición mosaico Células renacuajo Células fibra Células fantasma Canibalismo Núcleos homogéneos Si Hipercromatosis Relación n/c Alterada No Si Si Si Si No Metaplasia escamosa Si No No No No Si. salvo atipia. Normal .

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