CEPILLADO Y LAVADO BRONQUIAL: PATOLOGÍA INFLAMATORIA, INFECCIOSA, NO NEOPLÁSICA Y NEOPLÁSICA.

CITOLOGIA EXFOLIATIVA II
Tecnología Medica ² Laboratorio Clínico

INTRODUCCION

Indicado si hay esputo positivo para malignidad, pero no se ha localizado la lesión por endoscopia. Lo que se hace es estudiar el pulmón segmento a segmento, para localizar la región del cáncer oculto. ASPIRADO BRONQUIAL Simultáneamente a la observación de árbol bronquial, se aspira material, que está constituido por una mezcla de moco espeso, elementos celulares y acelulares. Las secreciones obtenidas suelen ser escasas y la mayoría de las veces van destinadas al microbiólogo. (Los patólogos muchas veces reciben material etiquetado como aspirado, que en general corresponde a lavado) La muestra se procesa por centrifugación y el sedimento se extiende sobre un porta, se fija inmediatamente en alcohol de 96º y se tiñe con Papanicolau.

LAVADO BRANQUIOALVEOLAR (LBA) consiste en la instilacion y posterior aspiracion de solucion salina en las vias aereas distales, lográndose la obtencion de componentes celulares y no celulares supuestamente representativos de los fenomenos inflamatorios e inmunologicos que estan teniendo lugar en todo el parenquima pulmonar Técnica: 1.- Después de la inspección del árbol traqueo bronquial y antes de realizar la biopsia o el cepillado, se procede a acunar el fibrobroncoscopio (FBC) en un bronquio subsegmentario, preferiblemente del lóbulo medio o de la lingual si la lesión es difusa, pero puede escogerse el lóbulo que parezca estar mas comprometido radiológicamente; en lo posible debe evitarse el lóbulo superior ya que su disposición anatómica dificulta mucho la recuperación del liquido.

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se procede a instilar solución salina estéril a 37°C en cantidades de 20-50cc. por lo que recomiendan lavados bilaterales. fibrosis pulmonar idiopática o fibrosis pulmonar asociada con enfermedades del colágeno. El volumen instilado varia entre 100-300 cc. Algunos autores encuentran diferencias en la concentración y en el recuento diferencial de células. . aspirando seguidamente (con una presión negativa de 5080mm Hg) hasta recoger por lo menos la mitad del material instilado. mientras que para otros dicha diferencia no es importante. Algunos autores recomiendan desechar los primeros 20cc instilados o destinarlos como "lavado bronquial" arguyendo que esa primera muestra recupera células y proteínas del bronquio distal y no del alveolo. deben lavarse múltiples sitios incluyendo el área enferma. Otros prefieren incluir los primeros 20cc en el total de la muestra. 2. pudiendo interferir con el recuento celular.Cuando la enfermedad sea localizada. teniendo en cuenta que volúmenes menores alteran el recuento celular total y volúmenes mayores aumentan la morbilidad. (se recomiendan 5 instilaciones de 20cc cada una). a menos que exista secreción bronquial purulenta. pareciendo lo ideal 100-150 cc. para enfermedades tales como sarcoidosis. entre el lóbulo medio y la lingula. Una vez acunado el FBC.

Procesar el liquido entre 30-90 minutos después de recolectado. se centrifuga y se substituye el sobrenadante por medio de cultivo. 5. posteriormente se lavan las células en PBS y se resuspenden en medio de cultivo.3.173 1000rpm. Acto seguido. Para algunos autores las células del lavado se mantienen viables si el LBA se guarda por 4 horas.. surfactante y trasferrina. haptoglobulina. El sobrenadante de la primera centrifugación permite el estudio de diversos componentes bioquímicos como determinación de albumina y proteínas totales. guardándolo a4°C hasta su procesamiento. se realiza el recuento celular total en una cámara de Neubauer. En caso de procesamiento inmediato. El resto de alícuotas no fijadas y lavadas se pueden utilizar para estudios inmunocitoquimicos. se retiran los restos de moco visible y se centrifuga a 800. . agregar ningún medio de cultivo o antibiótico. a 25°C. inmunoglobulinas. De la anterior solución se obtienen alícuotas de 150 microlitros que son centrifugadas a 400-600 rpm durante 5-1 0 minutos. de lo contrario. 4. Una preparación no fijada se tiñe con Giemsa y se utiliza para el recuento diferencial.

basófilos. Se seca al aire o se fija. Se constituye también en una herramienta de investigación de primera mano en algunas entidades como el asma . eosinófilos. se toman 100 micras y se centrifugan 5-10 minutos. evitando en ocasiones la realización de procedimientos invasivos. Cada reaspiración se procesa individualmente anotando la zona de procedencia. Se realiza un recuento de PMN neutrófilos. Se centrifuga a baja velocidad y con el sobrenadante se hace estudio químico. controlando las células mencionadas anteriormente.Lavado broncoalveolar Es la técnica de elección para el estudio de las enfermedades intersticiales del pulmón. Se hace recuento de células sobre 300 como mínimo. Se tiñe con May Grunwald-Giemsa o Papanicolau. linfocitos y macrófagos. Patologías relacionadas El lavado encuentra hasta el momento su mayor utilidad en el diagnostico de las infecciones oportunistas y de algunas neuropatías intersticiales. Al concentrado celular se le añaden 1-2 ml de suero fisiológico.

. Coloración HematoxilinaEosina.Lavado bronquial: se observan macrófagos alveolares (MA). Aumento fotográfico 400x. eosinófilos (E) y leucocitos neutrófilos (N).

con el que se raspa la lesión directamente. para lesiones no visibles directamente a la endoscopía. en la que se frota varias veces y. Una vez localizada. se retrae al interior de su funda. También se puede realizar bajo monitorización radiológica. cuando mediante el fibrobroncoscopio es posible observar una lesión dentro de la luz bronquial. El cepillo sale y se dirige hacia la lesión.CEPILLADO BRONQUIAL Se utiliza esta técnica. se introduce un cepillo a través de aquel. quedando entre las cerdas abundante material celular. mediante rayos X. El cepillado al final de la sesión endoscópica. Se saca a través del canal del instrumento y se procesa. a continuación. controlamos la zona a estudiar y la colocación del broncoscopio. Se impacta la punta del broncoscopio. Se impacta la punta del broncoscopio en un punto determinado y. .

Existe una modalidad que es el cepillado con catéter protegido en el que el cepillo viene incluido en una doble funda con un tapón distal reabsorbible y se utiliza para estudio microbiológico con recuento de colonias bacterianas .

lo cual es negativo para el cultivo Envíe al laboratorio inmediatamente. puede colocar la brocha dentro de un tubo conteniendo 10 ml de caldo de Middlebrook 7H9. Si desea estudio por micobacterias. . Empuje la brocha fuera de su protector y realice el cepillado.Técnica: Utilice un broncoscopio de doble lumen. Jale la brocha hacia dentro de su protector y remueva la unidad de brocha completa. Inserte la brocha citológica dentro del canal abierto del broncoscopio y avance. Coloque la brocha dentro del tubo de transporte conteniendo solución salina o Ringer·s lactato. Recuerde que la brocha se seca al aire rápidamente.

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>Núcleo: Número. tamaño. tamaño.Aspectos básicos sobre la interpretación de las extensiones citológicas Se debe valorar lo siguiente: >Aspecto general del extendido incluyendo sustancia de fondo y disposición de las células. forma y coloración. tinción. >Aspecto de células en su conjunto. forma. coloración. tamaño. . es decir. picnosis. etc. forma. situación. >Cantidad de citoplasma y relación n/c. >Nucléolo: Número. membrana.

En general se conserva la placa terminal ‡Vacuolas citoplasmáticas ‡Inclusiones citoplasmáticas eosinófilas debidos a la degeneración de orgánulos citoplasmáticos.Atipias benignas del AR . b) A nivel del núcleo: ‡Aumento de tamaño ‡Aumento de número ‡Picnosis . Las más frecuentes son: a) A nivel citoplasmático: ‡ Aumento de tamaño ‡Variación del tamaño adquiriendo una forma más poligonal ‡Pueden desaparecer los cilios. Pueden ser debidas a diferentes mecanismos como exposición a agentes físicos y químicos. broncoscopio o radioterapia. Alteraciones degenerativas No son específicas de ninguna patología concreta.

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Suele haber picnosis y fragmentación de núcleos (cariorrexis). . pudiendo aparecer en otros epitelios columnares. Las causas pueden ser: ‡Infecciones virales ‡Bronquiectasias (Dilataciones irreversibles de los bronquios y destrucción de la pared bronquial. congénita. Forma peculiar de degeneración de las células cilíndricas descrita por Papanicolau. en la que la célula queda reducida a un penacho o manojo de cilios que emerge de un anillo estrecho de citoplasma sin núcleo. En otras ocasiones. como el de endocérvix o útero. ‡Carcinomas ‡Puede no asociarse a nada de lo anterior. La alteración no es específica del AR. .c) Ciliocitoftoria: . por infecciones o por obstrucción por cuerpo extraño). . solo hay disminución de la zona citoplasmática subnuclear.

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se ven células intermedias entre las típicas . Cuando el epitelio respiratorio sufre una agresión. por ejemplo. si no es excesivamente intensa. a pesar del agrandamiento del núcleo. . distribución uniforme de la cromatina. que suele respetar a las basales. . los días transcurridos desde la misma y las condiciones locales. Los cambios dependen de la intensidad de la agresión. Los 2 o 3 primeros días aparecen células inmaduras que pueden confundirse con neoplásicas indiferenciadas. Los cambios consisten en descamación de células cilíndricas. que puede tener algún nucléolo prominente. Además.Fenómenos reparativos . Los criterios para diferenciarlas son: Buena cohesión celular. por estudio endoscópico. se producen cambios regenerativos en los días posteriores a la misma.

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Los irritantes crónicos (tabaco. Además. que reciben el nombre de Cuerpos de Creolá. como ´grupos de células hiperplásicas exfoliadas en forma enrollada. . multinucleación. Se encuentran hasta en el 42% de pacientes bronquíticos asmáticos. Para diferenciarlos de células malignas. recordando un gusanoµ. y se manifiesta por la presencia de células agrandadas en todo: Aumenta tamaño celular. buscamos en su superficie la presencia de cilios. por aumento de la actividad. la relación n/c es correcta y la cromatina uniforme. infecciones respiratorias repetidas«). núcleo y nucléolo. hasta en dos días. y otras veces.Hiperplasia del epitelio respiratorio Alteración que aparece rapidamente. conducen a hiperplasia continuada que se manifiesta en el esputo.

Lavado bronquio-alveolar: hiperplasia bronquial .

Debido a este aspecto . especialmente el de células pequeñas. N pequeños y homogéneos y. aparición en la periferia de estas placas de células cilíndricas diferenciadas maduras . muy cohesivos.(Entre las cilíndricas en el epitelio bronquial) Aparecen como grupos de células cuboideas pequeñas. hay que diferenciarlos de algunos tipos de carcinoma. Los datos a favor de benignidad son: Grupos cohesivos. con C de pequeñas magnitud y N intensamente basófilos.

N grandes con nucléolo prominente. . pueden aparecer como células sueltas o en pequeños grupos.Hiperplasia de células alveolares Aparecen como células cuboideas. C hiperdistendido con grandes vacuolas (DD con carcinoma adenoescamoso bronquioalveolar). Si afecta a los tipo II. especialmente en enfermedades intersticiales o inflamatorias crónicas del pulmón. . Se relaciona su aparición con procesos irritativos. semejantes a las basales del epitelio escamoso.

Se disponen a modo de mosaico. . Causa: irritación crónica del epitelio original debido a distintas circunstancias como. bronquiectasias. La metaplasia se origina a partir de las células basales. Los N centrales. siendo las células metaplásicas muy parecidas a las del epitelio genital femenino: Poligonales.Metaplasia escamosa En el epitelio respiratorio se reemplaza el epitelio cilíndrico ciliado pseudoestratificado. neumonías. etc. El C es cianófilo. tabaquismo. bronquitis. Parasitosis. ovales. El nucléolo es pequeño. a veces. exposición a humos. tamaño uniforme y de cromatina finamente granular. exposición a radioterapia. . destacando los signos de amoldamiento del C. con vacuolas. algo menores que las correspondientes escamosas. por escamoso.

disqueratosis. hipercromatosis.Podemos clasificar la metaplasia en: >Benigna: Uniformidad celular y relación n/c normal >Atípica: Anisocariosis. Las células son más redondeadas descamando normalmente aisladas Se asocia en un 40% a carcinoma epidermoide .

. Si estos detalles se observan hablamos de metaplasia escamosa con displasia o metaplasia atipica. engrosamiento de la membrana nuclear y granulacion de la cromatina.Pueden verse alteraciones en la relacion N/C.

lo que condiciona un bloqueo del intercambio gaseoso en el alvéolo. Tejido de granulación es un conjuntivo joven.Respuesta a algunos fármacos. . Esta situación puede aparecer en: . Veremos más adelante.Citología de los procesos inflamatorios no infecciosos Enfermedad intersticial del pulmón Proceso que consiste en una fibrosis progresiva de los tabiques alveolares y del intersticio pulmonar. cuya manifestación clínica más frecuente es la disnea progresiva. . técnica de elección y seguimiento de estas patologías.Neumoconiosis. después de heridas o úlceras). . -Idiomática El diagnóstico antiguamente se basaba en la biopsia pulmonar. Da lugar a IR crónica. muy vascularizado. En la actualidad se usa el lavado broncoalveolar.Reacciones alérgicas al polvo u otros alérgenos. . .Sarcoidosis (Enfermedad sistémica crónica con reacción inflamatoria granulomatosa en distintas localizaciones.

Básicamente consiste en realizar un recuento diferencial entre macrófagos.Citología: Su interpretación es complicada. La celularidad normal del lavado broncoalveolar es: ‡Macrófagos: 80 a 90 % ‡Linfocitos: 5 a 20 % ‡Neutrófilos: 4 % ‡Eosinófilos: Menos del 4% ‡Basófilos: Menos del 1% ‡Otras (epiteliales): Menos del 3% . leucocitos PMN y linfocitos.

Coloración de Azul de Prusia 40X .Lavado Broncoalveolar de paciente expuesto a Asbesto.

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Citología de los procesos infecciosos Micosis pulmonares Son infecciones pulmonares por hongos. negro sobre fondo verde. Algunos hongos presentan una morfología característica y pueden ser identificados correctamente. Las cándidas en marrón. Con tinciones de plata. Con el PAS. Con Papanicolau se ven de color rosado o violeta. La incidencia de micosis ha aumentado con la aparición del SIDA y con las migraciones. muchas de las cuales pueden detectarse en muestras de citología teñidas de forma rutinaria con la técnica de Papanicolau. . rojos.

Las cándidas se tiñen bien con Pas y técnicas de plata. La presencia de contexto inflamatorio y de pseudohifas. a veces aparece como unas pequeñas esporas de morfología oval entre 2 y 4 micras de diámetro. dando una imagen de pseudohifas o pseudofilamentos. . Su presencia debe informarse siempre. En otras ocasiones. las esporas se encadenan unas a otras. correspondiendo al clínico la responsabilidad de su evaluación. es generalmente indicativa de infección activa.Candida: En las muestra citológicas.

muestran un halo claro periférico interpretado como una cápsula. Su identificación es difícil si técnicas complementarias. A gran aumento. De forma ocasional se observan gemaciones únicas. Histoplasma Capsulatum. dentro de macrófagos y PMN. (Hongo se tiñe de de negro. ya que su tamaño es pequeño y se sitúa. en localización intracelular. sobre todo. Existe una variedad en Europa y otra en África.Histoplasmosis: La Histoplasmosis es una enfermedad infecciosa producida por un hongo llamado. pero en realidad. mucinas.) . fibras de reticulina y elásticas. es un artefacto. membranas basales. Esta técnica tiñe hongos. glucógeno. Su identificación es más sencilla con técnicas de metenamina argéntica.

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próximo a la membrana nuclear . ‡Células gigantes multinucleadas de distintas formas y tamaños.Herpes Zoster: Causado por el mismo virus de la varicela. ‡Cuerpos de inclusión intranucleares en vidrio esmerilado. Alteraciones citológicas en conjunto: ‡Fondo inflamatorio con presencia de macrófagos. dejando un pequeño halo alrededor de las mismas. inclusiones eosinófilas en ´ojo de búhoµ. ‡En ocasiones. que ocupan todo el núcleo. con amoldamiento nuclear. neutrófilos y detritus celulares.

constituida por granulomas tuberculoides. aunque es más frecuente que haya múltiples núcleos sin distribución característica. en la que se observa lo siguiente: Células epitelioides: Se originan a partir de histiocitos. elementos de morfología alargada. Caseosis: Necrosis en la que el tejido tiene una mezcla de proteínas y grasa.Tuberculosis En la citología se observa una reacción tisular característica. mediano tamaño. Aparece como un material amorfo granular que se tiñe de forma eosinófila. Son iguales que las que aparecen en la Sarcoidosis. C cianófilo con bordes mal definidos. es decir. N alargado con cromatina suave y reforzamiento de membrana. Células de Langhans: Célula gigante multinucleada. N en periferia en forma de herradura. cianófila o anfófila . y disposición en grupos irregulares. que se absorbe lentamente.

. los quistes presentan una intensa tonalidad amarillenta en las muestras teñidas con el método anterior. en las muestras citológicas se identifican masas o conglomerados de aspecto espumoso. Las muestras se pueden obtener por esputo inducido. que se tiñen de forma cianófila. La sensibilidad media es de 60 % para la primera prueba. eosinófila o anfófila con Papanicolau. No obstante. broncoscopio con lavado broncoalveolar. frente a la luz ultravioleta. cuando se dispone de experiencia o.Pneumocistis Carnii El diagnóstico requiere la demostración histopatológica del microorganismo mediante tinciones de metenamina argéntica o Giemsa. Desde un punto de vista morfológico. y de 90 a 95 % para la segunda.

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arini.Lavado roncoalveolar de aciente con I Y eumonía or . Lavado roncoalveolar de aciente con I y eumonía or . . arini. oloraci n de iff ui . oloraci n de Grocott .

exudado inflamatorio y abundantes células normales del TR. las procedentes de cepillados bronquiales. y suelen estar entremezcladas con moco. las muestras obtenidas por Paaf y. en el estudio de pacientes sintomáticos o con anormalidades radiográficas. como ocurre en carcinoma de cuello uterino. en menor medida. contienen un número mayor de células viables con utilidad diagnóstica y suelen disponerse en patrones característicos.Citología de los tumores pulmonares El estudio citológico se emplea fundamentalmente. . lo cual dificulta en gran medida el diagnóstico. no soliendo utilizarse como método de screening. debe esperarse mayor número de positividades. Por esta razón. Las muestras obtenidas en los esputos y lavados bronquiales muestran cambios degenerativos de variable intensidad.

Morfología celular: Pleomorfismo. Disposición celular: Grupos cohesivos. de aspecto arremolinado. Anomalías características. .Carcinoma escamoso o epidermoide Constituyen más de la mitad de los carcinomas broncogénicos. cuando los cambios degenerativos o inflamatorios son de tal calibre. con formas redondeadas o poligonales semejantes a escamosas. diagnosticándose en estadios avanzados con RX positiva. aunque se podrían identificar situaciones preinvasivas. en cuya porción final se encuentran los desmosomas Citología Se recomienda la máxima cautela con muestras en las que no se observan células viables íntegras o. laxos. fragmentados o células aisladas. perlas malignas epiteliales (globos córneos). renacuajo. que ocultan el detalle nuclear. Presentando: Puentes intercelulares. Fondo: Sucio con restos necróticos celulares y reacción inflamatoria. que no son más que pequeñas prolongaciones citoplasmáticas. con formas en fibra.

Muchas veces. en ocasiones. . orangófilas y sin núcleo visible. de bordes definidos y densos. la queratinización tan intensa que oculta el núcleo. Se llaman en ´ojo de pájaroµ o ´canibalismoµ. por lo que se llaman células ´fantasmaµ. en ausencia de queratinización evidente. En ocasiones.Citoplasma: Normalmente abundante. apareciendo las células más o menos redondeadas. También es frecuente pequeños grupos de células que dan imagen de falsa fagocitosis. y otro periférico más claro. Se ve un anillo citoplasmático interno denso por la presencia y acúmulo de filamentos intermedios. no pasa desapercibido. no se ve nucléolo Tendencia a picnosis nuclear con núcleos en tinta china. Núcleo: Suele estar aumentado. de coloración orangófila siendo. En estos casos la presencia de un doble anillo es indicador de células escamosa. se ve azul verdoso. indicando áreas menos diferenciadas del tumor. La membrana nuclear es irregular con alguna indentación Muy hipercromáticos.

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salvo atipia. salvo atipia. No. Normal .Carcinoma epidermoide Disposición mosaico Células renacuajo Células fibra Células fantasma Canibalismo Núcleos homogéneos Si Hipercromatosis Relación n/c Alterada No Si Si Si Si No Metaplasia escamosa Si No No No No Si.

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