CEPILLADO Y LAVADO BRONQUIAL: PATOLOGÍA INFLAMATORIA, INFECCIOSA, NO NEOPLÁSICA Y NEOPLÁSICA.

CITOLOGIA EXFOLIATIVA II
Tecnología Medica ² Laboratorio Clínico

INTRODUCCION

Indicado si hay esputo positivo para malignidad, pero no se ha localizado la lesión por endoscopia. Lo que se hace es estudiar el pulmón segmento a segmento, para localizar la región del cáncer oculto. ASPIRADO BRONQUIAL Simultáneamente a la observación de árbol bronquial, se aspira material, que está constituido por una mezcla de moco espeso, elementos celulares y acelulares. Las secreciones obtenidas suelen ser escasas y la mayoría de las veces van destinadas al microbiólogo. (Los patólogos muchas veces reciben material etiquetado como aspirado, que en general corresponde a lavado) La muestra se procesa por centrifugación y el sedimento se extiende sobre un porta, se fija inmediatamente en alcohol de 96º y se tiñe con Papanicolau.

LAVADO BRANQUIOALVEOLAR (LBA) consiste en la instilacion y posterior aspiracion de solucion salina en las vias aereas distales, lográndose la obtencion de componentes celulares y no celulares supuestamente representativos de los fenomenos inflamatorios e inmunologicos que estan teniendo lugar en todo el parenquima pulmonar Técnica: 1.- Después de la inspección del árbol traqueo bronquial y antes de realizar la biopsia o el cepillado, se procede a acunar el fibrobroncoscopio (FBC) en un bronquio subsegmentario, preferiblemente del lóbulo medio o de la lingual si la lesión es difusa, pero puede escogerse el lóbulo que parezca estar mas comprometido radiológicamente; en lo posible debe evitarse el lóbulo superior ya que su disposición anatómica dificulta mucho la recuperación del liquido.

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aspirando seguidamente (con una presión negativa de 5080mm Hg) hasta recoger por lo menos la mitad del material instilado. Otros prefieren incluir los primeros 20cc en el total de la muestra. entre el lóbulo medio y la lingula. Una vez acunado el FBC. fibrosis pulmonar idiopática o fibrosis pulmonar asociada con enfermedades del colágeno.Cuando la enfermedad sea localizada. Algunos autores recomiendan desechar los primeros 20cc instilados o destinarlos como "lavado bronquial" arguyendo que esa primera muestra recupera células y proteínas del bronquio distal y no del alveolo. deben lavarse múltiples sitios incluyendo el área enferma. a menos que exista secreción bronquial purulenta. mientras que para otros dicha diferencia no es importante. pareciendo lo ideal 100-150 cc. teniendo en cuenta que volúmenes menores alteran el recuento celular total y volúmenes mayores aumentan la morbilidad. para enfermedades tales como sarcoidosis. por lo que recomiendan lavados bilaterales. 2. . se procede a instilar solución salina estéril a 37°C en cantidades de 20-50cc. pudiendo interferir con el recuento celular. El volumen instilado varia entre 100-300 cc. Algunos autores encuentran diferencias en la concentración y en el recuento diferencial de células. (se recomiendan 5 instilaciones de 20cc cada una).

posteriormente se lavan las células en PBS y se resuspenden en medio de cultivo. De la anterior solución se obtienen alícuotas de 150 microlitros que son centrifugadas a 400-600 rpm durante 5-1 0 minutos. haptoglobulina.3. El resto de alícuotas no fijadas y lavadas se pueden utilizar para estudios inmunocitoquimicos. . Procesar el liquido entre 30-90 minutos después de recolectado.. guardándolo a4°C hasta su procesamiento. 4.173 1000rpm. En caso de procesamiento inmediato. a 25°C. Una preparación no fijada se tiñe con Giemsa y se utiliza para el recuento diferencial. Para algunos autores las células del lavado se mantienen viables si el LBA se guarda por 4 horas. surfactante y trasferrina. se realiza el recuento celular total en una cámara de Neubauer. Acto seguido. se centrifuga y se substituye el sobrenadante por medio de cultivo. 5. agregar ningún medio de cultivo o antibiótico. El sobrenadante de la primera centrifugación permite el estudio de diversos componentes bioquímicos como determinación de albumina y proteínas totales. inmunoglobulinas. se retiran los restos de moco visible y se centrifuga a 800. de lo contrario.

Se hace recuento de células sobre 300 como mínimo. Se seca al aire o se fija. controlando las células mencionadas anteriormente. Se centrifuga a baja velocidad y con el sobrenadante se hace estudio químico. Se tiñe con May Grunwald-Giemsa o Papanicolau. Se realiza un recuento de PMN neutrófilos. Al concentrado celular se le añaden 1-2 ml de suero fisiológico. evitando en ocasiones la realización de procedimientos invasivos.Lavado broncoalveolar Es la técnica de elección para el estudio de las enfermedades intersticiales del pulmón. Se constituye también en una herramienta de investigación de primera mano en algunas entidades como el asma . linfocitos y macrófagos. se toman 100 micras y se centrifugan 5-10 minutos. Cada reaspiración se procesa individualmente anotando la zona de procedencia. eosinófilos. basófilos. Patologías relacionadas El lavado encuentra hasta el momento su mayor utilidad en el diagnostico de las infecciones oportunistas y de algunas neuropatías intersticiales.

Coloración HematoxilinaEosina. eosinófilos (E) y leucocitos neutrófilos (N). Aumento fotográfico 400x.Lavado bronquial: se observan macrófagos alveolares (MA). .

mediante rayos X. quedando entre las cerdas abundante material celular. controlamos la zona a estudiar y la colocación del broncoscopio. Se saca a través del canal del instrumento y se procesa. . El cepillado al final de la sesión endoscópica. Se impacta la punta del broncoscopio en un punto determinado y. para lesiones no visibles directamente a la endoscopía.CEPILLADO BRONQUIAL Se utiliza esta técnica. en la que se frota varias veces y. se introduce un cepillo a través de aquel. Una vez localizada. con el que se raspa la lesión directamente. También se puede realizar bajo monitorización radiológica. a continuación. cuando mediante el fibrobroncoscopio es posible observar una lesión dentro de la luz bronquial. El cepillo sale y se dirige hacia la lesión. Se impacta la punta del broncoscopio. se retrae al interior de su funda.

Existe una modalidad que es el cepillado con catéter protegido en el que el cepillo viene incluido en una doble funda con un tapón distal reabsorbible y se utiliza para estudio microbiológico con recuento de colonias bacterianas .

Coloque la brocha dentro del tubo de transporte conteniendo solución salina o Ringer·s lactato. Inserte la brocha citológica dentro del canal abierto del broncoscopio y avance. Recuerde que la brocha se seca al aire rápidamente.Técnica: Utilice un broncoscopio de doble lumen. lo cual es negativo para el cultivo Envíe al laboratorio inmediatamente. . Si desea estudio por micobacterias. puede colocar la brocha dentro de un tubo conteniendo 10 ml de caldo de Middlebrook 7H9. Empuje la brocha fuera de su protector y realice el cepillado. Jale la brocha hacia dentro de su protector y remueva la unidad de brocha completa.

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forma. tinción.Aspectos básicos sobre la interpretación de las extensiones citológicas Se debe valorar lo siguiente: >Aspecto general del extendido incluyendo sustancia de fondo y disposición de las células. tamaño. . etc. es decir. >Cantidad de citoplasma y relación n/c. >Núcleo: Número. >Nucléolo: Número. >Aspecto de células en su conjunto. tamaño. coloración. membrana. forma. tamaño. situación. forma y coloración. picnosis.

Las más frecuentes son: a) A nivel citoplasmático: ‡ Aumento de tamaño ‡Variación del tamaño adquiriendo una forma más poligonal ‡Pueden desaparecer los cilios.Atipias benignas del AR . Pueden ser debidas a diferentes mecanismos como exposición a agentes físicos y químicos. broncoscopio o radioterapia. En general se conserva la placa terminal ‡Vacuolas citoplasmáticas ‡Inclusiones citoplasmáticas eosinófilas debidos a la degeneración de orgánulos citoplasmáticos. b) A nivel del núcleo: ‡Aumento de tamaño ‡Aumento de número ‡Picnosis . Alteraciones degenerativas No son específicas de ninguna patología concreta.

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congénita. Suele haber picnosis y fragmentación de núcleos (cariorrexis). Las causas pueden ser: ‡Infecciones virales ‡Bronquiectasias (Dilataciones irreversibles de los bronquios y destrucción de la pared bronquial. en la que la célula queda reducida a un penacho o manojo de cilios que emerge de un anillo estrecho de citoplasma sin núcleo. pudiendo aparecer en otros epitelios columnares. . En otras ocasiones. Forma peculiar de degeneración de las células cilíndricas descrita por Papanicolau. como el de endocérvix o útero. . ‡Carcinomas ‡Puede no asociarse a nada de lo anterior. La alteración no es específica del AR. . solo hay disminución de la zona citoplasmática subnuclear. por infecciones o por obstrucción por cuerpo extraño).c) Ciliocitoftoria: .

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por ejemplo. distribución uniforme de la cromatina. . Además. por estudio endoscópico. si no es excesivamente intensa. Los cambios dependen de la intensidad de la agresión. se ven células intermedias entre las típicas . Los criterios para diferenciarlas son: Buena cohesión celular. se producen cambios regenerativos en los días posteriores a la misma. que puede tener algún nucléolo prominente. que suele respetar a las basales. . Los cambios consisten en descamación de células cilíndricas. Los 2 o 3 primeros días aparecen células inmaduras que pueden confundirse con neoplásicas indiferenciadas. a pesar del agrandamiento del núcleo. los días transcurridos desde la misma y las condiciones locales.Fenómenos reparativos . Cuando el epitelio respiratorio sufre una agresión.

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buscamos en su superficie la presencia de cilios. Los irritantes crónicos (tabaco. y se manifiesta por la presencia de células agrandadas en todo: Aumenta tamaño celular. conducen a hiperplasia continuada que se manifiesta en el esputo. como ´grupos de células hiperplásicas exfoliadas en forma enrollada. Se encuentran hasta en el 42% de pacientes bronquíticos asmáticos. multinucleación. hasta en dos días. Para diferenciarlos de células malignas. Además.Hiperplasia del epitelio respiratorio Alteración que aparece rapidamente. y otras veces. la relación n/c es correcta y la cromatina uniforme. núcleo y nucléolo. que reciben el nombre de Cuerpos de Creolá. por aumento de la actividad. recordando un gusanoµ. infecciones respiratorias repetidas«). .

Lavado bronquio-alveolar: hiperplasia bronquial .

(Entre las cilíndricas en el epitelio bronquial) Aparecen como grupos de células cuboideas pequeñas. Debido a este aspecto . especialmente el de células pequeñas. Los datos a favor de benignidad son: Grupos cohesivos. con C de pequeñas magnitud y N intensamente basófilos. aparición en la periferia de estas placas de células cilíndricas diferenciadas maduras . hay que diferenciarlos de algunos tipos de carcinoma. N pequeños y homogéneos y. muy cohesivos.

pueden aparecer como células sueltas o en pequeños grupos. Se relaciona su aparición con procesos irritativos. semejantes a las basales del epitelio escamoso. Si afecta a los tipo II. N grandes con nucléolo prominente. . C hiperdistendido con grandes vacuolas (DD con carcinoma adenoescamoso bronquioalveolar). especialmente en enfermedades intersticiales o inflamatorias crónicas del pulmón. .Hiperplasia de células alveolares Aparecen como células cuboideas.

neumonías. etc. siendo las células metaplásicas muy parecidas a las del epitelio genital femenino: Poligonales. con vacuolas. La metaplasia se origina a partir de las células basales. por escamoso. Se disponen a modo de mosaico. bronquitis. . destacando los signos de amoldamiento del C. . El nucléolo es pequeño. exposición a humos. Los N centrales.Metaplasia escamosa En el epitelio respiratorio se reemplaza el epitelio cilíndrico ciliado pseudoestratificado. a veces. bronquiectasias. ovales. exposición a radioterapia. El C es cianófilo. Parasitosis. Causa: irritación crónica del epitelio original debido a distintas circunstancias como. tabaquismo. algo menores que las correspondientes escamosas. tamaño uniforme y de cromatina finamente granular.

Las células son más redondeadas descamando normalmente aisladas Se asocia en un 40% a carcinoma epidermoide .Podemos clasificar la metaplasia en: >Benigna: Uniformidad celular y relación n/c normal >Atípica: Anisocariosis. hipercromatosis. disqueratosis.

Si estos detalles se observan hablamos de metaplasia escamosa con displasia o metaplasia atipica. engrosamiento de la membrana nuclear y granulacion de la cromatina.Pueden verse alteraciones en la relacion N/C. .

Da lugar a IR crónica.Citología de los procesos inflamatorios no infecciosos Enfermedad intersticial del pulmón Proceso que consiste en una fibrosis progresiva de los tabiques alveolares y del intersticio pulmonar. lo que condiciona un bloqueo del intercambio gaseoso en el alvéolo. después de heridas o úlceras).Neumoconiosis. técnica de elección y seguimiento de estas patologías. . En la actualidad se usa el lavado broncoalveolar. . Tejido de granulación es un conjuntivo joven. muy vascularizado. cuya manifestación clínica más frecuente es la disnea progresiva.Reacciones alérgicas al polvo u otros alérgenos. Esta situación puede aparecer en: .Sarcoidosis (Enfermedad sistémica crónica con reacción inflamatoria granulomatosa en distintas localizaciones. . . . Veremos más adelante.Respuesta a algunos fármacos. -Idiomática El diagnóstico antiguamente se basaba en la biopsia pulmonar.

leucocitos PMN y linfocitos.Citología: Su interpretación es complicada. La celularidad normal del lavado broncoalveolar es: ‡Macrófagos: 80 a 90 % ‡Linfocitos: 5 a 20 % ‡Neutrófilos: 4 % ‡Eosinófilos: Menos del 4% ‡Basófilos: Menos del 1% ‡Otras (epiteliales): Menos del 3% . Básicamente consiste en realizar un recuento diferencial entre macrófagos.

Lavado Broncoalveolar de paciente expuesto a Asbesto. Coloración de Azul de Prusia 40X .

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Con el PAS. Con tinciones de plata. La incidencia de micosis ha aumentado con la aparición del SIDA y con las migraciones. Algunos hongos presentan una morfología característica y pueden ser identificados correctamente. Con Papanicolau se ven de color rosado o violeta. Las cándidas en marrón. rojos. muchas de las cuales pueden detectarse en muestras de citología teñidas de forma rutinaria con la técnica de Papanicolau.Citología de los procesos infecciosos Micosis pulmonares Son infecciones pulmonares por hongos. negro sobre fondo verde. .

Las cándidas se tiñen bien con Pas y técnicas de plata. La presencia de contexto inflamatorio y de pseudohifas. a veces aparece como unas pequeñas esporas de morfología oval entre 2 y 4 micras de diámetro. las esporas se encadenan unas a otras. En otras ocasiones.Candida: En las muestra citológicas. correspondiendo al clínico la responsabilidad de su evaluación. es generalmente indicativa de infección activa. dando una imagen de pseudohifas o pseudofilamentos. . Su presencia debe informarse siempre.

(Hongo se tiñe de de negro. fibras de reticulina y elásticas. Histoplasma Capsulatum. A gran aumento. pero en realidad. Esta técnica tiñe hongos.Histoplasmosis: La Histoplasmosis es una enfermedad infecciosa producida por un hongo llamado.) . Existe una variedad en Europa y otra en África. es un artefacto. glucógeno. Su identificación es más sencilla con técnicas de metenamina argéntica. muestran un halo claro periférico interpretado como una cápsula. ya que su tamaño es pequeño y se sitúa. en localización intracelular. De forma ocasional se observan gemaciones únicas. mucinas. membranas basales. Su identificación es difícil si técnicas complementarias. sobre todo. dentro de macrófagos y PMN.

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‡Células gigantes multinucleadas de distintas formas y tamaños.Herpes Zoster: Causado por el mismo virus de la varicela. inclusiones eosinófilas en ´ojo de búhoµ. dejando un pequeño halo alrededor de las mismas. ‡En ocasiones. con amoldamiento nuclear. que ocupan todo el núcleo. ‡Cuerpos de inclusión intranucleares en vidrio esmerilado. neutrófilos y detritus celulares. próximo a la membrana nuclear . Alteraciones citológicas en conjunto: ‡Fondo inflamatorio con presencia de macrófagos.

en la que se observa lo siguiente: Células epitelioides: Se originan a partir de histiocitos. Aparece como un material amorfo granular que se tiñe de forma eosinófila. mediano tamaño. Células de Langhans: Célula gigante multinucleada. Son iguales que las que aparecen en la Sarcoidosis. es decir. constituida por granulomas tuberculoides. elementos de morfología alargada. que se absorbe lentamente. cianófila o anfófila . N alargado con cromatina suave y reforzamiento de membrana.Tuberculosis En la citología se observa una reacción tisular característica. aunque es más frecuente que haya múltiples núcleos sin distribución característica. y disposición en grupos irregulares. N en periferia en forma de herradura. C cianófilo con bordes mal definidos. Caseosis: Necrosis en la que el tejido tiene una mezcla de proteínas y grasa.

No obstante. La sensibilidad media es de 60 % para la primera prueba. que se tiñen de forma cianófila. . frente a la luz ultravioleta. eosinófila o anfófila con Papanicolau. Las muestras se pueden obtener por esputo inducido. y de 90 a 95 % para la segunda. broncoscopio con lavado broncoalveolar. los quistes presentan una intensa tonalidad amarillenta en las muestras teñidas con el método anterior.Pneumocistis Carnii El diagnóstico requiere la demostración histopatológica del microorganismo mediante tinciones de metenamina argéntica o Giemsa. Desde un punto de vista morfológico. en las muestras citológicas se identifican masas o conglomerados de aspecto espumoso. cuando se dispone de experiencia o.

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.Lavado roncoalveolar de aciente con I Y eumonía or . oloraci n de Grocott . arini. oloraci n de iff ui . Lavado roncoalveolar de aciente con I y eumonía or . arini.

Las muestras obtenidas en los esputos y lavados bronquiales muestran cambios degenerativos de variable intensidad. . y suelen estar entremezcladas con moco. lo cual dificulta en gran medida el diagnóstico. Por esta razón. las procedentes de cepillados bronquiales. contienen un número mayor de células viables con utilidad diagnóstica y suelen disponerse en patrones característicos. en el estudio de pacientes sintomáticos o con anormalidades radiográficas. no soliendo utilizarse como método de screening. en menor medida.Citología de los tumores pulmonares El estudio citológico se emplea fundamentalmente. exudado inflamatorio y abundantes células normales del TR. como ocurre en carcinoma de cuello uterino. las muestras obtenidas por Paaf y. debe esperarse mayor número de positividades.

con formas redondeadas o poligonales semejantes a escamosas. perlas malignas epiteliales (globos córneos). cuando los cambios degenerativos o inflamatorios son de tal calibre. fragmentados o células aisladas. aunque se podrían identificar situaciones preinvasivas. laxos. . con formas en fibra. Fondo: Sucio con restos necróticos celulares y reacción inflamatoria. renacuajo. que no son más que pequeñas prolongaciones citoplasmáticas. Anomalías características. Disposición celular: Grupos cohesivos. Morfología celular: Pleomorfismo. que ocultan el detalle nuclear. en cuya porción final se encuentran los desmosomas Citología Se recomienda la máxima cautela con muestras en las que no se observan células viables íntegras o. Presentando: Puentes intercelulares.Carcinoma escamoso o epidermoide Constituyen más de la mitad de los carcinomas broncogénicos. de aspecto arremolinado. diagnosticándose en estadios avanzados con RX positiva.

Muchas veces. la queratinización tan intensa que oculta el núcleo. se ve azul verdoso. También es frecuente pequeños grupos de células que dan imagen de falsa fagocitosis. orangófilas y sin núcleo visible. de coloración orangófila siendo. en ausencia de queratinización evidente. Se llaman en ´ojo de pájaroµ o ´canibalismoµ. La membrana nuclear es irregular con alguna indentación Muy hipercromáticos. en ocasiones. de bordes definidos y densos. no pasa desapercibido.Citoplasma: Normalmente abundante. y otro periférico más claro. En estos casos la presencia de un doble anillo es indicador de células escamosa. indicando áreas menos diferenciadas del tumor. no se ve nucléolo Tendencia a picnosis nuclear con núcleos en tinta china. Núcleo: Suele estar aumentado. En ocasiones. por lo que se llaman células ´fantasmaµ. . Se ve un anillo citoplasmático interno denso por la presencia y acúmulo de filamentos intermedios. apareciendo las células más o menos redondeadas.

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salvo atipia. No. Normal .Carcinoma epidermoide Disposición mosaico Células renacuajo Células fibra Células fantasma Canibalismo Núcleos homogéneos Si Hipercromatosis Relación n/c Alterada No Si Si Si Si No Metaplasia escamosa Si No No No No Si. salvo atipia.

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