Tema 10.

Regulacin de la actividad enzimtica

Control de la actividad enzimtica
Regulacin por cambios en la concentracin de enzima
Regulacin alostrica
Modificaciones covalentes reversibles
Activacin de zimgenos
Isoenzimas
Complejos multienzimticos

Regulacin enzimtica
Las reacciones enzimticas estn organizadas en rutas bioqumicas o metablicas

Y
Z
En cada ruta el producto de una reaccin es el sustrato de la siguiente

Las rutas deben estar reguladas para:

Conservar la energa
Mantener un estado celular ordenado
Responder a variaciones ambientales

Las enzimas reguladoras catalizan las reacciones ms lentas y fijan la

velocidad de la ruta

Control de la enzima reguladora

Producto

1.- A nivel de sustrato

[S]

Velocidad
(hasta saturacin)

[P]

Formacin producto
(Inhibicin competitiva)

Tiempo

Hexoquinasa

X
Glucosa

Glucosa 6-fosfato

Control de la enzima reguladora

2.- Retroinhibicin o inhibicin feed-back

X
Inhibicin del enzima regulador por el producto final
Se impide:
Utilizacin innecesaria del primer sustrato
Acumulacin del producto final
Acumulacin de intermediarios

3.- Regulacin cruzada

Un producto de una va activa o inhibe un enzima de los primeros pasos de otra ruta

Mecanismos de regulacin enzimtica

Regulacin por cambios en la cantidad de enzima
Sntesis
Degradacin

Regulacin de la eficacia cataltica

no covalente: Enzimas alostricas
Unin de ligandos

covalente:

Fosforilacin
ADP-ribosilacin,
Metilacin y Acetilacin

Rupturas proteolticas: zimgenos

Mltiples formas de la enzima: Isoenzimas, complejos multienzimticos

Cambios en la cantidad de la enzima

Muchos enzimas reguladores tienen vida media corta y se hayan en
concentraciones muy bajas
Aumento o represin de la sntesis a travs de regulacin gnica
Permite control a largo plazo
Carboxiquinasa

Piruvato

Oxalacetato

Fosfoenolpiruvato

X
promotor
Carboxiquinasa

Degradacin controlada por proteasas citoslicas; ubiquitina

Glucosa

Regulacin de la eficacia cataltica: control alostrico

Unin no covalente a ligandos: ENZIMAS ALOSTRICAS
Control alostrico

Alostrico = otro sitio

Enzimas alostricas:
Protenas con estructura 4aria
Ms de un centro activo y cataltico
Actividad regulada por moduladores alostricos, unin no covalente

Cooperatividad

velocidad

Cinticas sigmoidea

[ sustrato ]

Regulacin de la eficacia cataltica: control alostrico

Control alostrico: ENZIMAS ALOSTRICAS
Regulador alostrico: pequeos metabolitos o cofactores que se unen a
sitios distintos del centro activo y modifican la actividad enzimtica
Modulador propio sustrato: homoalosterismo

Enzimas homotrpicos el sitio modulador y el sitio activo son el mismo

Modulador molcula distinta a sustrato: heteroalosterismo

Enzimas heterotrpicos el sitio modulador y el sitio activo distintos

Centro
alostrico

Centro
activo

Centro
alostrico

Centro
activo

Regulacin de la eficacia cataltica: control alostrico

Control alostrico: ENZIMAS ALOSTRICAS
Enzimas homotrpicos
Un pequeo incremento de la [S] provoca un gran aumento de Vo

velocidad

Vmx

E poco
eficiente

E muy
eficiente
[Sustrato]

[ sustrato ]c
Permiten mantener valores constantes de sus sustratos

Regulacin de la eficacia cataltica: control alostrico

Control alostrico
Enzimas heterotrpicos

Al no ser cintica micheliana no se puede usar el trmino Km, sino K0,5

Modulador alostrico positivo:
aumenta actividad

La unin y transformacin
del sustrato es cooperativa

Modulador alostrico negativo:

disminuye actividad

Regulacin de la eficacia cataltica: control alostrico

Control alostrico
Enzimas heterotrpicos

Modulador alostrico positivo:

favorece forma R

Modulador alostrico negativo:

favorece forma T

Modelos de cooperatividad
Simtrico o concertado

Conformacin T (tensa)

Conformacin R (relajada)

Asimtrico o secuencial

Conformacin T (tensa)

Conformacin R (relajada)
Conformacin intermedia

Regulacin de la eficacia cataltica: modificacin covalente

Unin covalente de ligandos
Ligando aporta grupo funcional que modifica las propiedades de la enzima
Modificacin reversible
Metilacin

Enzima

S-Adenosil-metionina

Enzima-CH3

ADP-ribosilacin
NAD

Enzima

CTX o PTX

Acetilacin
Modificaciones lipdicas

Enzima-ADP-ribosa

Regulacin de la eficacia cataltica: modificacin covalente

Unin covalente de ligandos
Fosforilacin/desfosforilacin

ATP

ADP

Quinasa

Enzima

Serina

Treonina

Enzima- P
Fosfatasa
Pi

Tirosina

glucgeno (n residuos) + Pi

glucgeno (n-1 residuos) + glucosa-1-fosfato

Glucgeno fosforilasa

Fosforilasa quinasa

Glucgeno fosforilasa b
(poco activa)

Glucgeno fosforilasa-a P
(ms activa)
Fosforilasa fosfatasa

Ejemplo de regulacin mltiple: glucgeno fosforilasa

Control covalente

Fosforilasa quinasa

Fosfoprotena fosfatasa I
Fosforilasa b
Inactiva
(estado T)

Fosforilasa b
Activa
(estado R)

Control no covalente

Glucosa-6P
Glucosa
Cafeina

Fosforilasa a
Activa
(estado T)

Glucosa
Cafeina

Fosforilasa a
Activa
(estado R)

Activacin por ruptura proteoltica

Zimgenos o proenzimas (inactivos)
Ruptura enlaces peptdicos (cambio conformacional)

Inactiva

ruptura

Enzima activa

Activa

No requiere ATP
Irreversible

sustrato

Enzimas proteolticas (proteasas) del estmago y pncreas

Sistema de coagulacin de la sangre

Activacin por ruptura proteoltica

Sistema de coagulacin sanguneo
Estructura del fibringeno

Sitio de corte

Unidad globular

Zimgenos
Enzimas activas

Activacin por ruptura proteoltica

Enzimas proteolticas (proteasas) del estmago y pncreas
Estmago:

Pepsingeno

Pncreas:
Se sintetizan en pncreas (inactivas)
Se rompen en intestino (activas)
Despus de actuar se degradan

Zimgenos
Enzimas activas

H+

Pepsina

Activacin por ruptura proteoltica

Activacin quimiotripsingeno

Quimotripsingeno
(inactivo)

Tripsina

p-quimiotripsina
(activa)

Quimiotripsina

a-quimiotripsina
(activa)

Isoenzimas o isozimas
Diferentes formas estructurales de una enzima que catalizan la misma reaccin
Difieren en sus secuencias de aa, en sus parmetros cinticos y/o propiedades reguladoras
Juegan un papel importante en la regulacin de procesos metablicos
Codificados por diferentes loci
Ejemplo: Lactato deshidrogenasa

Dos cadenas H y M

Piruvato

Corazn

H4
H3M
H2M2
HM3
M4

Lactato (en ausencia de O2)

Rin

Cel. rojas

Cerebro

Leucocitos Msculo

Hgado

Isoenzimas o isozimas
Aunque catalizan la misma reaccin difieren en sus valores de Km para el piruvato
El piruvato inhibe alostricamente H4 pero no M4

Corazn

Msculo
Glucosa

Piruvato

Glucosa
LDH (H4)

LDH (M4)

Lctico

Piruvato

Km

C02 + H20
Trabajo anaerobio

Lctico
Km

C02 + H20
Trabajo aerobio