Almacenar para

crioproteccin a
-80 C

DIAGRAMA DE FLUJO
Fermentacin por 48 horas
de los cultivos lcticos.

Centrifugar cultivos
de 48 horas de
crecimiento 10,000
rpm x 10 min
Sobrenadant
e

Tratamie
nto
trmico a
110C
por 10

Monitorear
nuevamente.
Preparar dos geles
para inocular uno
con Escherichia
coli y ver si
encontramos
actividad
antimicrobiana en
el gel de
electroforesis.
(siguiendo la
metodologa
descrita por el
artculo que
adjuntar).
Batdorf y cols
2005

Monitorear cada
paso de
purificacin
mediante :

Ajustar
pH a 6.5
con
NaOH

Cuantificaci
n de
protenas
por el
mtodo BCA
Electroforesi
s TRICINA
SDS-PAGE
16.5%
ENSAYO DE
DIFUSIN E
POZO
(ACTIVIDAD

ULTRAFILTRACION
con membranas
de 30 kDa, y 10
KDa

Saturar con
sulfato de

Seleccionar las
Fracciones que
presenten actividad

Colectar
fracciones de
ambas
cromatografas

Pellet celular

Dializar con
membrana de 1
KDa

Cromatografa
Exclusin
molecular

Intercambio
Inico