XVII Congreso Nacional de Ingeniera Bioqumica VI Congreso Internacional de Ingeniera Bioqumica VIII Jornadas Cientficas de Biomedicina y Biotecnologa Molecular

Anlisis de la sacarificacin in vitro de quitosana comercial y quitina desacetilada, usando la quitosanasa de la cepa BT-132 de Bacillus thuringiensis.
AUTORES Daro Rafael, Olicn-Hernndez; Ramn, Cruz-Camarillo; Luz Irene, Rojas-Avelizapa. DIRECCIN: ENCB Carpio y Plan de Ayala S/N. Col. Santo Tomas, C.P. 11340 Mxico, D.F. Email: dario_rafael_olicon_hernandez@yahoo.com.mx GA/mg de protena, mientras que para Q2 fue de INTRODUCCIN 0.69mmoldeGA/mg de protena. Dichos mximos La quitina es un polmero lineal formado por Nse obtuvieron a las 3 y 4h de reaccin, acetil-glucosaminas(NAG), unidas por enlace 1,4. respectivamente, bajo las condiciones antes La quitosana es un polisacrido que se obtiene por mencionadas. Despus de este tiempo se mantuvo desacetilacin de la quitina, formado por NAG y Dun comportamiento constante para la actividad glucosamina(GA), las cuales se unen por enlaces enzimtica. La TCL muestra que los productos de glicosdicos 1,4. Est, es un excelente formador hidrlisis no corresponden a los estndares de NAG de fibras, pelculas y membranas. Para su hidrlisis y GA, ya que poseen Rf diferentes y sugiere que se requiere la participacin de enzimas que, de son una mezcla de oligmeros de mayor peso acuerdo a su especificidad convierten el polmero molecular. Se aprecia que el tipo de producto son en una mezcla de quitooligosacridos. stos similares para Q1 y Q2, no as la concentracin en compuestos tienen inters biotecnolgico por sus donde Q1 muestra una mayor cantidad. propiedades como: potenciador inmunolgico, antimicrobiano, anticancergeno, etc. Por otra parte, DISCUSIN El sustrato Q1 muestra ventajas con respecto a Q2 la cepa de Bt-132 de Bacillus thuringiensis produce al no requerir un tratamiento qumico para su uso y una endoquitosanasa extracelular, que transforma el medir la eficiencia del proceso de retirar los la quitosana en una mezcla de oligosacridos. El grupos acetilo, como Q2. La quitosanasa mostro objetivo de este trabajo es analizar la cintica de una actividad especfica mayor utilizando el sustrato hidrlisis y los productos de la degradacin de la Q1, en un menor tiempo de reaccin. Sin embargo quitosana comercial y de la quitina desacetilada. se muestra que los productos de hidrolisis son MATERIALES Y MTODOS similares en ambos casos en cuanto a tipo de La cepa Bt-132 de Bacillus thuringiensis, as como oligmero, no as en la concentracin. En este reactivos y materiales de laboratorio, fueron sentido, los productos de reaccin provenientes de provistos por el laboratorio de enzimas microbianas Q2 pueden estar total o parcialmente acetilados lo de la ENCB-IPN. Se utilizaron dos sustratos para la cual reduce su capacidad benfica. Para confirmar hidrlisis y produccin de enzima: quitosana es necesario realizar teidos diferenciales que sean comercial(Q1) y quitina comercial. A esta ltima se especficos para el grupo amino y el acetamida. le dio un tratamiento trmico-alcalino para su desacetilacin (Q2). La quitosana y quitina utilizada CONCLUSIONES La actividad quitosanolitica de Bt-132 es dele tipo se obtuvieron de Sigma-Aldrich. La Coloidizacin endo, debido a que los productos de hidrlisis es de los sustratos fue siguiendo el protocolo descrito una mezcla de oligosacridos. La quitosana por Pacheco en 2008. La produccin de la enzima comercial usada como sustrato para la produccin fue en medio sumergido con quitosana coloidal al de quitosanasas muestra un mejor rendimiento que 2% a 28C/180rpm/80h. El extracto crudo fue la quitina tratada qumicamente. Los productos de esterilizado por filtracin y se hicieron reaccionar hidrlisis de ambos sustratos muestran similitudes volmenes iguales de extracto y de quitosana en cuanto a tipo. Sin embargo es posible que para coloidal al 15% a 50C y se monitoreo la actividad el caso de la quitina desacetilada, los oligmeros no volumtrica y la cantidad de protena presente cada hayan perdido el grupo acetato. hora hasta 9h. La actividad volumtrica fue medida por el ensayo del DNS. La actividad especfica se REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 1. Nam, K. S., and Y. H. Shon, 2009, Suppression of midi utilizando la actividad volumtrica y la metastasis of human breast cancer cells by chitosan cantidad de protena cuantificada por el mtodo de oligosaccharides: J Microbiol Biotechnol, v. 19, p. Bradford. Los hidrolizados fueron concentrados por 629-33 liofilizacin y valorados por TCL. 2. Pacheco Hernndez, M.A. 2008. Purificacin y RESULTADOS caracterizacin de la quitosanasa de la cepa Bt-132 La mxima activad especifica para la quitosana de Bacillus thuringiensis. Tesis de maestra en CQB, usando a Q1 como sustrato fue de 2.58mmol ENCB.

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