HEMATOLOGIA Y BIOQUMICA SANGUNEA.

HEMATOLOGA
Tcnicas hematolgicas
Volumen de muestra mximo 1% del peso corporal (expresado en ml )
Puntos de extraccin
Vena yugular derecha, vena cutnea cubital (a nivel del codo),
vena braquial (cara ventral del hmero), vena medial metatarsal
(por encima de la articulacin metatarsal), corte de ua
Anticoagulantes
Heparina : 25 UI por ml de sangre.
Suele provocar artefactos de tincin. Ideal si se desea obtener
plasma.
EDTA : 1-2 mg de EDTA por ml de sangre.
Anticoagulante de eleccin en hematologa si el almacenamiento
de la muestra no es prolongado
Extensin
Tcnica de portaobjetos-portaobjetos, portaobjetos-cubreobjetos o
cubreobjetos-cubreobjetos ( minimiza el dao celular).
Tincin
Tipo Romanowsky para hematologa

Parmetros hematolgicos
Serie roja: Valor Hematocrito, Slidos Totales, Recuento Total de
Eritrocitos, Concentracin de Hemoglobina, ndices Eritrocitarios y
Recuento de Reticulocitos e ndice de eritrocitos policromticos.
Serie Blanca: Recuento Total de Leucocitos y Recuento Diferencial de
Leucocitos.
Dado que todas las clulas sanguneas de las aves son nucleadas, los
contadores electrnicos de clulas sanguneas no pueden emplearse en para
el estudio del leucograma es hematologa aviar. En la prctica clnica se usan
mtodos hemacitomtricos para realizar los recuentos celulares. El mtodo de
Natt y Herrick permite el recuento de eritrocitos y leucocitos simultneamente.
El procedimiento y caractersticas se especifican en la tabla siguiente:
Mtodo de Natt y Herrick para recuento de eritrocitos y leucocitos
Se trata de un mtodo directo. El violeta de metilo 2B tie todas las clulas con diferentes tonos de azul
Material: Camara de Neubauer modificada
Pipeta hemacitomtrica de bola roja
Aspirar sangre hasta la marca 0.5 y limpiar la parte exterior de la pipeta
Aspirar solucin de Natt y Herrick hasta la marca 101 (Dilucin 1 : 200)
Mezclar durante 1-2 minutos. Desechar las primeras gotas, llenar la cmara de recuento y esperar 3 minutos
Contar el nmero total de eritrocitos en cinco cuadros ( cuadros de las esquinas y el cuadro central) del retculo
central de un lado de la cmara de recuento
Multiplicar el nmero de eritrocitos por 10.000 ( Expresado en eritrocitos/ul)
Contar el nmero total de leucocitos en los nueve cuadros grandes de un lado de la cmara y aplicar la frmula :
Recuento Total de Leucocitos (clulas/ul) = Leucocitos contados x 1.1x 200
Los leucocitos se tien de color azul oscuro

Composicin de la Solucin de Natt y Herrick

NaCl
Na2 SO4

3.88 g
2.5 g

Hematologa y bioqumica sangunea

Rafael Molina Lpez. Centre de Fauna de Torreferrussa
E mail: molinalopezz_rafael@yahoo.es

Na2HPO4 x 12 H2O

2.91 g

KH2PO4
0.25 g
Formalina 37%
7.5 ml
Metil Violeta B
0.10 g
Disolver en el orden indicado y disolver en agua destilada hasta un volumen total de 1000 ml.
Se deja 12 horas en reposo y posteriormente se filtra (paper Whatman n 2). El pH final ha de
ser de 7.3

Otro mtodo hemacitomtrico frecuentemente empleado es el sistema

Unopette 5877 de eosinfilos (Becton-Dickinson, Rutherford, NJ 07070). En al
tabla siguiente se resume el procedimiento:
Mtodo Unoppette para recuento de leucocitos
Se trata de un mtodo indirecto. La floxina B tie especificamente heterfillos y eosinfilos.
Llenar la pipeta Unopette con sangre (25ul)
Mezclar durante menos de 5 minutos, desechar las primeras gotas, cargar la cmara de recuento y esperar 5
minutos.
Contar los leucocitos granulocitos en todo el retculo a ambos lados de la cmara de recuento
Los heterfilos, eosinfilos se tien de color rojo-anaranjado y aparecen redondos y refrctiles
Realizar el Recuento diferencial a partir de la extensin
Calcular el recuento total de leucocitos aplicando la frmula:
Recuento Total de Leucocitos (por ul) = Nmero de clulas teidas contadas x 1.1x 16x 100
% Heterfilos + % Eosinfilos

Mtodo estimativo: Aunque se trata de un mtodo menos preciso, el recuento

estimativo de leucocitos a partir de la extensin de sangre es fcil de realizar y
posee un gran valor diagnstico. Se cuentan los leucocitos en 10 campos de
40x, se calcula la media y se multiplica por 2000.
Estudio de trombocitos:
Mtodo estimativo : Consiste en contar el nmero de trombocitos en
cinco campos de immersin y aplicar la Frmula :
Recuento estimado de trombocitos (trombocitos/ul) =
Media de trombocitos en cinco campos x 3.500.000
1.000
Si el valor hematocrito no se encuentra en el rango normal (35-55%) se realiza una
correccin del recuento mediante la Frmula :
Recuento estimado x Hematocrito observado
Hematocrito normal

Estudio del frotis sanguneo: Se basa en la evaluacin de las clulas

sanguneas y la valoracin de la morfologa, abundancia relativa de
cada tipo celular y presencia de hemoparsitos.

Hematologa y bioqumica sangunea

Rafael Molina Lpez. Centre de Fauna de Torreferrussa
E mail: molinalopezz_rafael@yahoo.es

Morfologa de las clulas sanguneas de las aves

La clula madura es oval o elptica, con citoplasma anaranjado, ncleo oval de color
prpura situado centralmente. Las formas inmaduras son ms redondeadas y con
citoplasma azulado (basfilo). En aves sanas son frecuentes formas juveniles

Eritrocitos
Leucocitos
Heterfilos
Eosinfilos

Grnulos alargados o redondeados eosinfilos. Citoplasma incoloro

Grnulos redondos, eosinfilos y refrctiles. Citoplasma azulado, ligeramente
granulado. Las rapaces sanas poseen un nmero elevado de eosinfilos
Clula de pequeo tamao con grnulos intensamente basfilos.
Forma irregular. Ncleo redondo, bilobulado, normalmente excntrico; citoplasma azulgris, finamente granulado o vacuolado
Ncleo normalmente redondo y central, con cromatina condensada. Alto ratio
ncleo/citoplasma (escaso citoplasma) Citoplasma basfilo. Se diferencian tres
poblaciones celulares (medianos, pequeos y grandes).
Citoplasma claro o ligeramente azulado. Ncleo oscuro. Pueden observarse grnulos
de color magenta. Menor tamao que el eritrocito.

Basfilos
Monocitos
Linfocitos
Trombocitos

Hemoparsitos
Gnero
Caractersticas
en
Haemoproteus Gametocito
eritrocitos;
esquizogonia
en
clulas
endoteliales
(pulmn, hgado, rin)
en
Leucocytozoon Gametocito
eritrocitos y leucocitos
;esquizogonia
en
clulas
endoteliales
(pulmn, hgado, rin)
Gametocitos
i
Plasmodium
esquizontes
en
eritrocitos

Vector
Culicoides,
moscas
hipoboscidas
Simulium,
Culicoides

Mosquitos
(Aedes,
Culex)

Cuadro clnico
Anemia en casos
de
infeccin
masiva

Aves afectadas
Palomas
Anseriformes,
rapaces,
Passeriformes,
Psitaciformes
Anemia, disnea, Anseriformes,
muerte sbita
Galliformes,
Passeriformes,
Psitcides y rapaces
Anemia,
Pinginos, rapaces,
debilidad, muerte Passeriformes,
sbita
Galliformes,
Anseriformes

BIOQUMICA SANGUNEA:
Tcnica: Las determinaciones se realizan a partir de suero o plasma
heparinizado.
Parmetros recomendados : AST, cidos biliares, Glucosa, Calcio,
Creatnfosfoquinasa, cido rico, Protenas totales Plasmticas, Fibringeno y
Cociente albmina/globulinas.
Parmetro

Indicacin

Interpretacin

Protenas totales

Enfermedad gastrointestinal,
heptica o renal.

Durante la puesta, deshidratacin,

enfermedades infecciosas crnicas.
Malnutricin, parasitismo, enteropata,

Hematologa y bioqumica sangunea

Rafael Molina Lpez. Centre de Fauna de Torreferrussa
E mail: molinalopezz_rafael@yahoo.es

comentario
Se aconseja el empleo
de tcnicas
colorimtricas
(Biuret/Lowry) ya que el

Cociente
Albmina : Globulinas
Glucosa

Procesos inflamatorios,
enfermedad heptica,
gastrointestinal y renal
Convulsiones, glucosuria

enfermedad renal, estrs y enfermedad

heptica crnica
Enfermedad infecciosas crnicas
(Tuberculosis, Clamidiosis, Aspergilosis),
hipoalbuminemia (hepatopata, nefropata).
Estrs, diabetes mellitus e hipertermia
Inanicin , malnutricin, septicemia y
enfermedad heptica

Colesterol

Lipidosis heptica

Hipotiroidismo, enfermedad heptica, dieta

rica en grasas, obstruccin de conductos
biliares
Enfermedad heptica , aflatoxicosis, dieta
baja en grasa
Fallo renal, ayuno, trauma tisular,
contaminacin de la muestra con uratos.

Acido rico

Enfermedad renal

Urea

Deshidratacin

Deshidratacin, obstruccin ureteral.

Creatinina

Deshidratacin,

Deshidratacin, fallo renal

cidos biliares
Aspartato
Aminotransferasa
Creatn fosfoquinasa
(CK)

Enfermedad heptica
Lesin heptica o muscular

Sodio

Colapso circulatorio, diarrea,

vmito, quemaduras

Enfermedad heptica
Enfermedad de Pacheco, Clamidiosis,
intoxicaciones, necrosis muscular.
Necrosis muscular, inyecciones
intramusculares, deficiencia de Vitamina E y
Selenio , clamidiasis, septicemia, neuropatas e
intoxicacin por plomo
Deshidratacin, intoxicacin por sal

Potasio

Lesin muscular

Diarrea, vmito, parlisis,

arritmias, debilidad, tratamientos
con diurticos

Diarrea, enfermedad renal, insuficiencia

adrenocortical
Enfermedad renal, insuficiencia
adrenocortical, deshidratacin, acidosis,
ingestat excesiva de potasio
Diarrea crnica, dieta deficitaria, anorexia,
vmito, alcalosis

Calcio

Temblores, ataques, poliuria

polidipsia, arritmias

Hipervitaminosis D3 , durante la puesta

Hipoalbuminemia, hiperparatiroidismo
nutricional avanzado

mtodo refractomtrico
es inexacto
Permite evaluar la
respuesta al
tratamiento
Si se realiza la
determinacin en
menos de dos horas no
es necesario emplear
floururo sdico para
prevenir gluclisis
Escaso valor diagnstico

Representa el 60-80 %
del total del nitrgeno
excretado
La reabsorcin en
tbulos renales
depende del grado de
hidratacin.
Elevacin artefactual
debido a cromgenos
No especfica de
enfermedad heptica
Permite diferenciar
lesin heptica de
lesin muscular
Los valores son
falsamente bajos si
existe hiperlipemia o
hiperproteinemia
En muestras de suero,
el tiempo de
almacenamiento
provoca un descenso
en la concentracin de
potasio. Los valores
son falsamente bajos
si existe hiperlipemia o
hiperproteinemia
Debe medirse la
concentracin de
albmina.

Tabla: Parmetros de bioqumica sangunea en aves y su aplicacin en el diagnstico

BIBLIOGRAFIA SELECCIONADA
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1988.
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Hematologa y bioqumica sangunea
Rafael Molina Lpez. Centre de Fauna de Torreferrussa
E mail: molinalopezz_rafael@yahoo.es

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Hematologa y bioqumica sangunea

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