Universidad de Panam

Facultad de Medicina
Departamento de Microbiologa
Centro de Documentacin e Informacin Mdica
Club de Informtica Mdica y Telemedicina
Editora del atlas: Carla Donado Stefani

Este atlas ha sido creado basado en el plan de estudio del curso de Microbiologa Mdica de la carrera de Dr. en
Medicina de la Facultad de Medicina de la Universidad de Panam. El mismo pretende llevar al estudiante, mdico u
otro profesional de la salud, las tcnicas bsicas microbiolgicas utilizadas en el diagnstico clnico.

Contenido por temas:

TCNICAS BACTERIOLGICAS:
Morfologa bacteriana usando tinciones especiales
Efectos de los agentes qumicos sobre las bacterias

BACTERIAS DE IMPORTANCIA MDICA:

Flora normal del cuerpo humano
Cocos Gram positivos (pigenos)
Bacilos Gram positivos aerobios
Microorganismos transmitidos sexualmente
Bacilos gram negativos fermentadores y no fermentadores (temporalmente inhabilitado)*
Microbiologa de agua y alimentos (temporalmente inhabilitado)*
Microorganismos anaerobios
Mycobacterias

DIAGNSTICO VIROLGICO

MORFOLOGA Atlas Virtual de Microbiologa

Mdica
BACTERIANA
Universidad de Panam
USANDO
Facultad de Medicina
TINCIONES
ESPECIALES
Morfologa Bacteriana

Tinciones especiales
Tincin de Gram: bacterias Gram positivas de color prpura, y bacterias Gram negativas de color rojo.
Qu ocurre en la tincin de Gram?

Gram positivos

Gram negativos

Diferencias estructurales entre la pared celular

bacteriana gram positiva y la gram negativa

Tincin de Moeller para esporas: resalta de color rojo la espora

bacteriana, y de color morado el bacilo.

Bacillus subtilis
Tincin de Anthony para cpsulas: la leche litmus acta como
contraste para crear un fondo rosa oscuro y la cpsula blanca.

Klebsiella pneumoniae

EFECTOS DE Atlas Virtual de Microbiologa

LOS
Mdica
AGENTES
QUMICOS
SOBRE LAS
BACTERIAS

Prueba de difusin en plato: en un agar Mller-Hinton, se siembra la

muestra bacteriana y luego se proceden a colocar discos antibiticos
para observar el efecto de los mismos sobre las colonias.
E - TEST: es una tcnica que combina las tcnicas de dilucin y de
difusin. Se trata de una tira plastificada que por una de sus superficies
contiene un gradiente determinado de concentracin de un
antimicrobiano, el cual al ponerse en contacto con el agar difunde de
igual manera, formando un halo de inhibicin tipo elipse que converge
en un ngulo que determina la Concentracin Inhibitoria mnima (CIM).

FLORA
NORMAL DEL
CUERPO
HUMANO

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Mdica
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Significado de la flora normal

Sitios anatmicos con flora normal presente

MICROORGANISMOS
TRANSMITIDOS
SEXUALMENTE

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Microbiologa Mdica

Agente etiolgico de la gonorrea: se trata de un diplococo,

denominado "gonococo", que es la Neisseria gonorrhoeae.

Medio de cultivo agar "chocolate", ideal para cultivar N.

gonorrhoeae

Agente etiolgico de la sfilis: se trata de una bacteria de

morfologa "espirilada", en forma de tirabuzn, la cual es el Treponema
pallidum.
Agente etiolgico de la candidiasis: en este caso quien acta no
es una bacteria, es una levadura denominada Candida albicans.

MICROORGANISMOS
ANAEROBIOS

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Microbiologa Mdica

Gas Pack: crea un microambiente anaerobio

para el crecimiento de estas bacterias.

API para anaerobios: se observa el sistema

API para las diferentes pruebas bioqumicas
propias de los anaerobios, junto con el manual
que indica la positividad de las mismas.

Clostridium en agar sangre

MYCOBACTERIUM

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Microbiologa Mdica
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CULTIVO DE MYCOBACTERIUM EN LOWENSTEN-JENSEN:

Hecho a base de huevo y posee como inhibidor para bacterias gram positivas el
verde malaquita. En la fotografa se aprecia crecimiento de M. tuberculosis.

Otros Mycobacterium en cultivo:

TINCIN DE ZIEL-NEELSEN:

El azul de metileno sirve de contraste para la tincin rosada fuscia del Bacilo Alcohol
cido Resistente (BAAR), como lo es M. tuberculosis.

DIAGNSTICO
VIROLGICO

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Microbiologa Mdica

Fotos por: Carla Donado Stefani

Editado por: Carla Donado Stefani
Colaboracin: Demetrio Serracn C.

DIAGNSTICO PRESUNTIVO EN EXAMEN DIRECTO DE MUESTRAS

CLNICAS

Efecto citoptico del CitoMegaloVirus: en infeccin

por CMV se observan clulas ms grandes que las normales,
con inclusiones intranucleares basoflicas. Dicha inclusin
tiene apariencia de un "ojo de bho". El CMV es un virus de
ADN, por ello su dao es a nivel nuclear.

Virus de la Rabia (Rabdovirus): en esta muestra de

tejido cerebral se observa la formacin de inclusiones
intracitoplasmticas conocidas como "cuerpos de Negri".

DIAGNSTICO ANALIZANDO CULTIVOS DE CLULAS

FIBROBLASTOS NORMALES
EN CULTIVO DE CLULAS

EFECTO CITOPTICO DEL CMV EN

FIBROBLASTOS: se ven redondeados, parecen grumos.

CLULAS VERO NORMALES

EFECTO CITOPTICO DE CMV EN CULTIVO

DIAGNSTICO SEROLGICO VIRAL

Prueba de ELISA para diagnosticar

Rubeola y Sarampin: se observan como
positivos el color amarillo, amarillo claro. Se
observa transparente como negativo. (El color lo
determina el cromgeno que se utilice).

Prueba de ELISA para diagnosticar Virus

Dengue y Virus del Oeste del Nilo: se
observa como positivo el color verde, negativo
transparente.
*Nota: lo que dice normal debera ser transparente, pero
producto de un "accidente" qued verde.

DIAGNSTICO EN BASE A DILUCIONES

Dilucin del suero del paciente: se colocan

microplatos con cultivo de clulas, se les aade a
cada uno una cantidad constante del virus y luego
el suero del paciente. Si el paciente tiene
anticuerpos para el virus se evitar la formacin de
Placas lticas (se observan como manchas
transparentes en el medio azul). A mayor
concentracin de suero del paciente, mayor
cantidad de anticuerpos y menor formacin de
Placas lticas.

Dilucin del virus: en este caso se toma la

muestra al paciente, se hace una suspensin del
virus de la muestra y luego se hacen varias
diluciones las cuales se aaden a este medio
clulas cultivadas. En este caso, a mayor dilucin
de la suspensin viral, menor ser la formacin de
las Placas lticas (recuerda que las placas lticas
son producto del efecto del virus sobre las clulas).

COCOS GRAM
POSITIVOS
(PIGENOS)
DE
IMPORTANCIA
MDICA

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Los cocos Gram positivos pueden ser:

Staphylococcus o Streptococcus
La principal forma de diferenciarlos es haciendo la prueba de la catalasa,
para la cual, los Staphylococcus son positivos y los Streptococcus son
negativos.
Staphylococcus aureus

Morfologas de cocos gram positivos

Pruebas realizadas

Cultivo en Manitol Sal: se basa en observar quin ferment el manitol sal.

1 = Enterococcus faecalis (Streptococcus) /No ferment.
2 = Staphylococcus aureus /S ferment.
Prueba de hemlisis: detecta la presencia de hemolisina, enzima que
permite la clasificacin de los Streptococcus en alfa, beta y gamma hemolticos.
Es importante aclarar, que muchas otras bacterias, aparte de los Streptococcus
pueden tener esta enzima.
En este caso, tenemos sembrado un B. megaterium, pero se usa el cultivo para
demostrar el grado de hemlisis, en este caso, una hemlisis beta, en la cual se
puede observar claramente por detrs de la siembra.

Prueba de bilis esculina: la prueba positiva es de color negro,

caracterstico de la desnaturalizacin de la bilis esculina.
Enterococcus faecalis

BACILOS
GRAM
POSITIVOS
AEROBIOS

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Bacillus megaterium

Pruebas realizadas
Prueba de amilasa: utilizando agar almidn, se siembra el B.
megaterium en cuatro puntos equidistantes. Se deja incubar, y
luego para definir si hubo o no consumo de almidn, y por ende
presencia de amilasa en la bacteria, se aade yodo de Gram. La
prueba positiva muestra un halo incoloro en donde hubo
crecimiento.

Prueba de gelatina: permite medir la presencia de gelatinasa. Si

luego de cierto tiempo de refrigeracin, la gelatina sigue en estado
lquido, es indicativo de que la prueba result positiva, y que la
bacteria posee la enzima gelatinasa.
En este caso, el B. subtilis no posee la enzima gelatinasa, y por
ende, el medio se solidific en refrigeracin.