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Contribución de los autores: SAE, CACS, CFCB y HSD participaron en la concepción y diseño del estudio; HSD
realizó el análisis e interpretación de datos; SAE, CACS y HSD redactaron el artículo. SAE, CACS, CFCB
y HSD participaron en la recolección de resultados. Todos los autores participaron en la revisión crítica del
artículo y probación de la versión final.
Financiamiento: Autofinanciado.
Conflictos de interés: Los autores declaran no tener conflictos de interés.
Correspondencia: Heber Silva-Díaz, Av. Dirección: Los eucaliptos Nº 300-304, Urb. La Pradera, distrito de Pimentel, Chi-
clayo. Perú. Secretaría de la Facultad de Medicina Humana de la Universidad San Martín de Porres-filial norte.
Teléfono: 051 965 902 275. Correo electrónico: h.silvadiaz185@gmail.com. Código postal 14000.
RESUMEN
Introducción. La resistencia a múltiples antimicrobianos es un problema de salud pública mundial, por lo que es necesa-
rio el desarrollo de nuevas altenativas terapéuticas. Objetivo. Evaluar el efecto antibacteriano in vitro del extracto acuoso
de Equisetum giganteum (cola de caballo), frente a Escherichia coli productor de betalactamasas de espectro extendido
(BLEE) y E. coli ATCC. Material y métodos. Este estudio experimental y controlado. Muestra no probabilística de tres
cepas de E. coli ATCC y 12 cepas de E. coli BLEE fueron enfrentadas a seis concentraciones porcentuales del extracto
acuoso de E. giganteum (100, 50, 25, 12,5, 6,25 y 3,13); y tres repeticiones. Resultados. La concentración mínima del
extracto acuoso de E. giganteum que inhibió el 50 y 90 % de observaciones (CMI 50 y CMI 90), frente a E. coli ATCC,
fue de 34 y 70 %; y frente E. coli BLEE fue de 78 y 115%, respectivamente. De nueve observaciones sobre E. coli ATCC,
seis fueron inhibidos a una concentración de 25 %; y de las 36 observaciones sobre las cepas de E. coli BLEE, 13 fue-
ron inhibidas a una concentración de 50%. Las cepas tuvieron un comportamiento inhibitorio no diferenciado (p<0,05),
frente extracto acuoso de E. giganteum. Conclusiones. El extracto acuoso de E. giganteum tuvo efecto antibacteriano
frente a cepas de E. coli ATCC y BLEE, por lo que constituye una posibilidad futura de principios activos antimicrobianos
para el tratamiento de infecciones por bacterias resistentes. Se recomienda continuar con estudios preclínicos de efica-
cia y seguridad in vitro e in vivo.
Palabras clave: Equisetum, Cola de caballo, Escherichia coli, Betalactamasas (Fuente: DeCS-BIREME).
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Algarate-Espinoza S, Cieza-Salas CA, Cadenillas-Barturén CF, Silva-Díaz H. Efecto antibacteriano de Equisetum giganteum (cola de caballo),
frente a Escherichia coli productora de betalactamasas de espectro extendido y Escherichia coli ATCC
fotaxime (96%), cotrimoxazol (70%), aztreonam (75%) y En Perú, se reportó que el aceite esencial y el extracto
tobramicina (85%) (5). etanólico de Equisetum arvense “cola de caballo”, pre-
En consecuencia, las clínicas y hospitales cuentan cada sentaron actividad antimicrobiana frente a E. coli ATCC
vez con menos cantidad de antibacterianos disponibles 25922, con CMI de 1% y 2,5%, respectivamente. A su vez
para tratar las infecciones causadas por bacterias con cre- E. coli ATCC 25922 es susceptible a las dosis de aceite
ciente capacidad de resistencia, como lo es la E. coli. Esta esencial y extracto etanólico aplicadas en este estudio,
realidad plantea la imperante necesidad de buscar princi- comparando con el fármaco gentamicina, el aceite esen-
pios activos para desarrollar nuevos antimicrobianos. Es cial y extracto etanólico a dosis similares con el fármaco,
en este contexto que las plantas son una fuente importan- poseen susceptibilidad antibacteriana similar (14). Asimis-
te ya que contienen moléculas antimicrobianas, toda vez mo, también se ha reportado que el extracto de E. arven-
que ancestralmente han sido usadas por la medicina po- se mayor al 50% presenta efecto antibacteriano sobre las
pular y costumbrista y han dado resultados positivos (6,7). cepas de Streptococcus mutans (15).
Equisetum giganteum; comúnmente denominada cola El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto an-
de caballo, es una planta gimnosperma ancestralmen- tibacteriano in vitro del extracto acuoso de E. giganteum
te usada en infusiones para tratar la inflamación de las (cola de caballo), frente a E. coli productor de betalacta-
vías urinarias y otros fines, ya que estudios recientes han masas de espectro extendido y E. coli ATCC.
comprobado sus efectos bioactivos (8,11)antigen-induced
arthritis (AIA y la ausencia de toxicidad de los extractos
contra células humanas (12,13). MATERIAL Y MÉTODOS
El extracto de etanólico al 70% de E. giganteum presenta
compuestos fenólicos derivados de los ácidos cafeico y Tipo y diseño de investigación
ferúlico y de los heteroides flavonoides derivados de la Experimento controlado y aleatorizado. Diseño completa-
quercitina y el kaempferol, además de las estirilpirona. mente al azar, con arreglo factorial de 2A (tipo de E. coli:
Las concentraciones más altas de E. giganteum tienen BLEE y ATCC) y 6B (concentraciones de extracto acuoso
actividad antimicrobiana contra los microorganismos de E. giganteum). Se consideraron tres repeticiones por
relevantes probados: E. coli, Staphylococcus aureus y unidad experimental. (Ver figura1).
Candida albicans, así mismo actividad antiadherente en
biopelículas de C. albicans en un modelo experimental Población y muestra
similar a las dentaduras. Todas las concentraciones ana-
lizadas mostraron actividad antiinflamatoria y el extracto La población estuvo constituida por cepas de E coli BLEE
no mostró citotoxicidad en contacto con células humanas aisladas previamente desde muestras de orina de pa-
(12). Asimismo, otro estudio, también en Brasil, evaluó la cientes con infecciones del tracto urinario, atendidos en
actividad antimicrobiana de fracciones enriquecidas de E. el Hospital Regional Lambayeque. Así mismo las cepas
giganteum y Punica granatum incorporadas a una prótesis ATCC (American Type Culture Collection), fueron adquiri-
adhesiva contra biofilm de C.albicans; encontrando que das comercialmente con una identidad definida.
ambos extractos de hierbas amplificaron la acción an- La muestra fue no probabilística, a criterio de los inves-
ti-biofilm del adhesivo sobre la resina acrílica hasta 12 h; tigadores. De modo tal que para el experimento se se-
y, cuando se combinaron con COREGA colaboraron en el leccionaron 12 cepas de E. coli BLEE y tres cepas de E.
control de la biopelícula (10). coli ATCC.
Recolección e identificación de Equisetum inoculado con 0,5 ml de una suspensión bacteriana a una
giganteum (cola de caballo) turbidez equivalente al tubo Nº 0,5 de Mc Farland, según
se ha descrito previamente (21). El volumen final obtenido
El material botánico del E. giganteum se recolectó en
fue de 1 ml. Este mismo procedimiento se realizó en tres
áreas boscosas del distrito de Jaén, provincia de Jaén,
oportunidades para cada una de las cepas consideradas
departamento de Cajamarca, Perú. La ubicación geográ-
en el experimento. Se diseñaron tres controles: a) de es-
fica UTM fue -5.677153, -78.791838, a una altitud de 729
terilidad, que no contuvo inóculo ni extracto, b) negativo,
msnm. Se recolectaron dos kilogramos del material botá-
que no contenía extracto y c) positivo, que contenía 32
nico entre las 6 a 8 horas del día, que fueron almacenados
ug/ml de cloranfenicol. Los cultivos se incubaron a 37 ºC
y conservados a temperatura ambiente para su identifica-
durante 18 horas, después de lo cual se revisó el creci-
ción taxonómica por un Biólogo Botánico de la Facultad
miento. La CMI fue aquella mayor dilución en la que el
de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional Pedro
crecimiento fue inhibido.
Ruiz Gallo, Lambayeque, Perú.
Análisis estadístico
Preparación del extracto acuoso de E. giganteum
Los datos recolectados de las variables fueron registra-
En el Laboratorio de Investigación del Hospital Regional
dos en una base de datos usando Microsoft Excel 2013.
Lambayeque, el material botánico fue secado a tempera-
tura ambiente durante 24 horas y luego a 80 ºC durante Se realizó el análisis de diferencia de muestras indepen-
4 horas, usando una estufa (Memmert ®). Posteriormente dientes no paramétrico U Mann Whitney y Kruskal Wallis.
se molió y, usando un matraz herméticamente cerrado, se Para determinar la concentración inhibitoria mínima 90
coció a 95 ºC durante 15 minutos en una proporción plan- (CIM 90) y 50 (CIM 50), se realizó análisis de regresión
ta: agua destilada de 1:10. Luego, el extracto fue filtrado y logística tipo Probit. La CIM 90 y CIM 50 será mínima con-
almacenado en otro frasco de vidrio para su esterilización centración de extracto necesaria para inhibir el 90 y 50%
por autoclavado. El extracto esterilizado fue conservado de las cepas de E. coli BLEE y ATCC respectivamente.
en refrigeración a 2 a 8 ºC en un frasco de vidrio de color En ambos casos se considerará significativo un valor de
ámbar hasta su uso en los ensayos. Se obtuvo el extracto p<0,05. El análisis de datos fue realizado con ayuda del
a una concentración inicial de 100 mg/ml (100%). software estadístico SPSS versión 24.
Tabla 1. Frecuencia de la inhibición del crecimiento bacteriano de E. coli, enfrentadas a distintas concentraciones
del extracto acuoso de E. giganteum.
Figura 2. Concentración mínima inhibitoria 50 y 90 del extracto acuoso de E. giganteum frente a cepas de E. coli ATCC
(total de observaciones).
Figura 3. Concentración mínima inhibitoria 50 y 90 del extracto acuoso de E. giganteum frente a aislamientos de E. coli BLEE
(total de observaciones).
Tabla 3. Comparación de la frecuencia de inhibición del crecimiento bacteriano de E. coli expuestos al extracto acuosos
del E. giganteum, según tipo de cepa.
les y levaduriformes de importancia clínica. Asimismo, es- the antioxidant, anti-inflammatory and antitumor potential
tudiar la seguridad del extracto acuoso de E. giganteum, of Equisetum giganteum L. and Tilia platyphyllos Scop.
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